滋養(yǎng)細(xì)胞與妊高征

1、    滋養(yǎng)細(xì)胞與妊高征            作者：時間：2007-11-22 12:13:00                     關(guān)鍵詞： 妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞胎盤  妊高征的病因目前仍未明了，但胎盤與妊高征的發(fā)病密

2、切相關(guān)。滋養(yǎng)細(xì)胞是胎盤組織中的主要細(xì)胞類型，由于它與母體接觸最為緊密，在妊高征的研究中受到重視。胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞分為細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞，具有多種生物學(xué)活性。本文就滋養(yǎng)細(xì)胞與妊高征的發(fā)病關(guān)系作一綜述。 滋養(yǎng)細(xì)胞與正常妊娠 滋養(yǎng)細(xì)胞約在受精后第4天出現(xiàn)，為一層扁平細(xì)胞構(gòu)成胚胞壁，至孕中期胎盤形成時可分為兩種類型：合體滋養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞。前者與母血直接接觸，后者又分為絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞和血管內(nèi)滋養(yǎng)細(xì)胞。 胚胞植入后至孕10周前，胎盤細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞仍以內(nèi)膜基質(zhì)浸潤為主，很少侵及間質(zhì)血管。孕12周后，滋養(yǎng)細(xì)胞加快侵蝕子宮蛻膜和臨近三分之一肌層及其螺旋動脈，破壞管壁經(jīng)構(gòu)而代之以纖維素

3、樣組織，將狹窄的彈性血管變?yōu)榈妥?、無彈性且血管擴張的子宮胎盤血管，并失去對血管活性物質(zhì)的敏感性，從而使流入絨毛間隙的血量迅速增加。用氧電極直接導(dǎo)入法測得在孕810周絨毛間隙氧壓為2.4±0.9kPa，子宮內(nèi)膜為5.3±1.6kPa；在孕1213周絨毛間隙氧壓增至8.1±1.6kPa。 近年來研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞在侵蝕子宮組織并最終取代血管壁的過程中，其表面粘附分子表型發(fā)生改變，模擬血管內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原1。例如，絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞表達55，但合體滋養(yǎng)細(xì)胞、胎盤床及錨狀細(xì)胞柱中的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞均不表達55。相反，55在絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)胞柱淺層中的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞呈弱

4、或不表達，而子宮壁組織和侵入血管壁中的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞高度表達。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕模型中，用抗-53抗體封閉53后使細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力降低75%。另一種粘附分子 e-cadherin在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞分布與55相似，而 vE-cadherin的表達類似53。由于正常血管內(nèi)皮細(xì)胞表達53和 vE-cadherin，因此認(rèn)為在侵蝕子宮壁和螺旋動脈并取代血管內(nèi)皮細(xì)胞之前，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞必須調(diào)整表面粘附分子的表達，出現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原2。 滋養(yǎng)細(xì)胞與妊高征 一、滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力改變 妊高征患者滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕功能受損，從而導(dǎo)致胎盤種植較淺，這一觀點在組織學(xué)上已被廣泛證實

5、，并公認(rèn)為是觸發(fā)妊高征病理生理改變的直接原因。最近有人提出了妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕功能降低的生化方面的證據(jù)。 de groot等3前瞻性地檢測了妊高征孕婦血中胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1（ iGFBP-1）的含量，發(fā)現(xiàn)在孕中期（19±1周）為115.2±19.2nmol/L，較正常孕婦252.8±48.0nmol/L為低，距發(fā)生臨床癥狀的時間為20±1周。由于 iGFBP-1在孕期主要來源于子宮內(nèi)膜間質(zhì)，他們認(rèn)為，妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力下降，子宮內(nèi)膜破壞較小，因此其從子宮血管滲入母血就相應(yīng)減少，和滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕行為相一

6、致。 妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力低下的原因目前仍不清楚，但最終有兩種可能性：滋養(yǎng)細(xì)胞本身缺陷或細(xì)胞周圍環(huán)境的作用。 zhou等4用免疫組化方法觀察了妊高征患者絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞粘附分子的表達，發(fā)現(xiàn)與正常妊娠不同，這些具有侵蝕能力的細(xì)胞仍表達粘合素55，但53呈弱表達。另外，3、5、和1亞單位的水平與正常妊娠無差別，但6、5和51表達增強，11無或弱表達。提示妊高征細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞表型發(fā)生改變，不利于細(xì)胞侵蝕作用。鑒于妊高征患者均有子宮胎盤血管供血不足， genbacev等5研究了缺氧對滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕行為的影響。在氧飽和度分別為2%、20%的條件下，用提純的絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞（1012周）

7、與子宮蛻膜（1012周，不含滋養(yǎng)細(xì)胞）在體外共同培養(yǎng)，72h后發(fā)現(xiàn)在2%O2濃度下滋養(yǎng)細(xì)胞大部分已侵入蛻膜深層，而2%O2濃度下滋養(yǎng)細(xì)胞甚至在96h仍只聚集在蛻膜表面，侵入量很少。用分離的細(xì)胞外基質(zhì)（ eCMs）替代蛻膜組織，結(jié)果相似。后一種情況下滋養(yǎng)細(xì)胞無需蛻膜組織共同培養(yǎng)，表明缺氧本身對滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力有損傷作用。值得注意的是在2%O2條件下培養(yǎng)6天，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞仍多貼附于 eMCs表面，若3天后 o2濃度改為20%再培養(yǎng)3天，細(xì)胞侵蝕能力恢復(fù)正常。 genbacev等所用蛻膜均取自正常妊娠子宮。而妊高征具有一定的遺傳傾向，因此母體子宮內(nèi)膜也可能與妊高征胎盤滋

8、養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力低下有關(guān)。在體外實驗發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕能力受多種細(xì)胞因子調(diào)控6。例如，激活素 a、白血病抑制因子、 iL-1等都能刺激細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕活性，而 tGF-、糖皮激素、缺氧等對此起抑制作用。子宮蛻膜中含有豐富的免疫細(xì)胞，分泌細(xì)胞因子構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)系統(tǒng)，妊娠后胎盤細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕活動即受這些免疫細(xì)胞及細(xì)胞因子的精細(xì)調(diào)節(jié)。 giudice等7研究發(fā)現(xiàn) iGFBP-1在體外有抑制細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕子宮蛻膜基質(zhì)作用，在妊高征患者（2134孕周）胎盤床母兒交界處 iGFBP-1表達較對照組明顯增高。 二、滋養(yǎng)細(xì)胞增殖與分化

9、異常 絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞脫離基底膜后有兩條分化途徑：融合成合體滋養(yǎng)細(xì)胞或侵入蛻膜成為絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞。在體外缺氧條件下培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖能力與其分化呈反向關(guān)系。在2%O2濃度下，其侵蝕能力是20%O2的十分之一，而其結(jié)合3H胸苷和5-溴脫氧尿核苷的量是后者的23倍5。 alsat等8研究了缺氧對正常妊娠晚期細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞體外分化成合體滋養(yǎng)細(xì)胞的影響，觀察到在19%O2下培養(yǎng)3天，幾乎全部單核細(xì)胞經(jīng)過聚集和融合為合體滋養(yǎng)細(xì)胞，免疫印跡發(fā)現(xiàn)粘附分子 e-cadherin表達轉(zhuǎn)陰。而9%O2濃度下，單核細(xì)胞仍呈聚集狀，合胞體少見， e-cadherin持續(xù)陽性

10、。同時激素分泌水平下降， hCG平均為289±26IU/L，而19%O2下為1100±155IU/L。但缺氧組70%細(xì)胞表達增殖細(xì)胞核抗原（ pCNA），而19%O2組無 pCNA表達。若將缺氧狀態(tài)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞改為20%O2濃度下培養(yǎng)，3天后所有細(xì)胞恢復(fù)正常。 妊高征胎盤病理特點是合體滋養(yǎng)層發(fā)育不良，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞增生， pCNA陽性細(xì)胞增多9。這些病變的發(fā)生機理可以通過缺氧來解釋，但滋養(yǎng)細(xì)胞的接觸和融合也與其侵蝕過程一樣，是復(fù)雜的細(xì)胞間粘附分子作用的結(jié)果，受多數(shù)因子調(diào)控，值得繼續(xù)深入研究。 三、滋養(yǎng)細(xì)胞分泌血管活性物質(zhì)失衡 胎盤是一

11、個內(nèi)分泌器官，分泌多種甾體和蛋白質(zhì)激素，其中滋養(yǎng)細(xì)胞還能合成和產(chǎn)生前列腺素等血管活性物質(zhì)。妊高征患者滋養(yǎng)細(xì)胞分泌血管活性物質(zhì)與正常孕婦不同。 cervar等10在體外分離培養(yǎng)妊高征（3140孕周）胎盤中的滋養(yǎng)細(xì)胞，培養(yǎng)5天后，測到內(nèi)皮素-1、2產(chǎn)量較對照組減少，而 tXB2濃度增高， tXB2/6-keto-PGF1比例上調(diào)，血管緊張素、6-keto-PGF1和白三烯 b4濃度二組相似。 ding等11更進一步分離純化出孕晚期妊高征胎盤中細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞進行培養(yǎng)，一周后 tXB2濃度較對照組升高34倍，而6-keto-PGF1與 

12、;pGE2濃度兩組間無差異。另外有作者12證實血管緊張素肽酶 a定位于絨毛內(nèi)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞，其活性在妊高征胎盤增高，并與血壓、蛋白尿程度呈正相關(guān)。 這些資料提示，妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞分泌血管活性物質(zhì)比例失衡，進一步加重了血管功能損害，激活凝血系統(tǒng)。前列腺素的產(chǎn)生與前列腺素合成酶的活性相關(guān)，已證實缺氧能使體外培養(yǎng)的滋養(yǎng)細(xì)胞中前列腺素 h合成酶-2表達增高， tXB2產(chǎn)生增多13。 johnson等14在體外培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞揭示，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生 tXB2，合體滋養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生 pGE2，不產(chǎn)生或很少產(chǎn)生 tXB2；滋養(yǎng)細(xì)胞與纖維蛋白基質(zhì)共同培

13、養(yǎng)時 tXB2產(chǎn)生增加；滋養(yǎng)細(xì)胞在分化過程中可以調(diào)節(jié)環(huán)氧化酶的表達，并受纖維蛋白基質(zhì)的調(diào)控。此結(jié)果模擬了妊高征胎盤纖維蛋白嚴(yán)重沉積而產(chǎn)生的病理生理過程。 四、滋養(yǎng)細(xì)胞對血管內(nèi)皮損傷作用 血管內(nèi)皮損傷在妊高    征發(fā)病中的作用近年來得到廣泛的研究。血管內(nèi)皮細(xì)胞直接暴露于血液循環(huán)，對它的損害作用最可能是血液中含有某種“毒性”成分。鑒于胎盤在妊高征發(fā)病中的作用，人們自然設(shè)想到血清中活性因子很可能是胎盤釋放入血的。事實上，最早將滋養(yǎng)細(xì)胞與妊高征聯(lián)系在一起是在1893年，當(dāng)時 schmorl首次報道了在1例死于子癇的婦女雙肺中發(fā)現(xiàn)了滋養(yǎng)細(xì)胞。

14、后來認(rèn)識到妊娠時滋養(yǎng)細(xì)胞進入母血循環(huán)是正常生理現(xiàn)象，但妊高征孕婦胎盤微絨毛呈棒狀改變，局部有壞死和脫落，有更多的滋養(yǎng)細(xì)胞進入母血。因此，人們想象滋養(yǎng)細(xì)胞損傷血管內(nèi)皮。 smarason等15從正常妊娠和妊高征孕婦胎盤分離出合體滋養(yǎng)細(xì)胞微絨毛膜（ sTBM），發(fā)現(xiàn)二者均能抑制體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，而且抑制程度相同，對內(nèi)皮細(xì)胞單層結(jié)構(gòu)改變的形態(tài)相似。據(jù)此，他們假設(shè)是因為母血中混入的合體滋養(yǎng)細(xì)胞成分損傷了全身血管內(nèi)皮。盡管正常孕婦胎盤也有這種作用，但妊高征患者血中滋養(yǎng)細(xì)胞成分增多。后來，他們又發(fā)現(xiàn)16妊高征孕婦外周血漿具有抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的能力，但血清卻失去這種作用。將 

15、;sTBM加入男子外周血中，也出現(xiàn)類似結(jié)果。 cockell等17用制備的 sTBM囊泡灌注去甲腎上腺素預(yù)先處理過的皮下小動脈，觀察對乙酰膽堿舒血管作用的影響，同時用生理鹽水和紅細(xì)胞膜灌注作對照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)灌注2h后，對照組不影響小動脈對乙酰膽堿的反應(yīng)，而 sTBM組對其反應(yīng)明顯降低。電鏡證實，反應(yīng)組小動脈內(nèi)皮中斷，細(xì)胞器扭曲，內(nèi)皮下平滑肌細(xì)胞正常。新近，有學(xué)者采用多種抗滋養(yǎng)細(xì)胞膜抗體，通過免疫熒光和流式細(xì)胞技術(shù)來檢測妊高征患者血漿中 sTBM濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊高征婦女外周及子宮靜脈血漿中的 sTBM水平均高于正常妊娠婦女（外周血漿：29.12n

16、mol/L對7.36nmol/L；子宮靜脈血漿：91.84nmol/L對32nmol/L），并且子宮靜脈血漿中濃度高于外周血漿，證實了胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞脫落 sTBM進入母血循環(huán)。他們還發(fā)現(xiàn)，妊高征患者血漿抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖活性與血漿中 sTBM濃度呈相關(guān)性18。 五、滋養(yǎng)細(xì)胞表達 hLA抗原 胎兒作為半個異體移植物而不被母體排斥，其原因之一被認(rèn)為與滋養(yǎng)細(xì)胞不表達 hLA抗原有關(guān)。資料表明，合體滋養(yǎng)細(xì)胞無 hLA抗原表達，但絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞表達此類抗原，后來確定為 hLA-G，屬于 hLA-I類抗原。對 hLA-G的

17、表達調(diào)節(jié)及其功能知之甚少，由于其主要出現(xiàn)于絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞，推測它的表達是滋養(yǎng)細(xì)胞侵入母體所必需，具有抑制母體局部免疫反應(yīng)作用19。 colbern等20研究了妊高征胎盤組織 hLA-G抗原的表達情況，發(fā)現(xiàn)在孕晚期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞與蛻膜交界處 hLA-G表達水平較正常孕婦降低。但他們同時注意到妊高征組絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞數(shù)目也較正常組減少，而每個細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達水平兩組間無差異性。 hLA-G在正常妊娠和病理妊娠中的作用有待于更深入地研究。 結(jié)語 綜上所述，妊高征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞的病理改變是復(fù)雜多樣的，牽涉到多方面的細(xì)胞生物學(xué)特性。在胎盤發(fā)生過程中，滋養(yǎng)細(xì)胞的

18、作用十分復(fù)雜并受到精細(xì)調(diào)節(jié)。一方面它侵入母體子宮組織特別是螺旋動脈，另一方面它表現(xiàn)出良性的生物學(xué)行為。目前已知滋養(yǎng)細(xì)胞植入較淺而致胎盤缺血缺氧啟動了疾病的發(fā)生過程。但妊高征滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕能力受阻的起因不明，繼續(xù)加快這方面的研究，將有助于最終揭示妊高征的發(fā)病機理。參考文獻 1 Zhou Y et al.J Clin Invest,1997;99:2139-2151 2 Zhou Y et al.J Reprod Immunol,1998;39:197-213 3 De&

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