梅毒患者不同血清學(xué)檢測方法對比分析

1、梅毒患者不同血清學(xué)檢測方法對比分析     作者：梁榮偉，蘇國生，農(nóng)建宏 【摘要】  目的 比較常用三種梅毒血清學(xué)試驗(yàn)方法，觀察各種方法診斷符合率，為檢驗(yàn)與臨床提供參考。方法 采用目前臨床實(shí)驗(yàn)室檢測梅毒最常用的血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（RPR）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHA）3種方法對 74例住院及門診梅毒患者及50例健康體檢者分別進(jìn)行檢查。結(jié)果一期梅毒組和二期梅毒組3種試驗(yàn)方法陽性率差異無顯著性，三期梅毒組和臨床治愈后復(fù)查組TP-ELISA法與TPHA法檢測結(jié)果差異無顯著性，與RPR法檢測

2、結(jié)果比較差異有高度顯著性(P均<0.01)。結(jié)論實(shí)驗(yàn)室合理選用3種不同方法平行進(jìn)行梅毒檢測，將減少漏診、誤診率，為梅毒的確診提供參考依據(jù)，并且在判定梅毒的發(fā)展、痊愈及藥物療效方面都具有十分重要的意義。 【關(guān)鍵詞】  梅毒 血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn) 梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn) 梅毒是一種性傳播疾病，近年來發(fā)病率有上升趨勢，由于其具有傳染性并危害性大，因此梅毒的早期診斷和及時治療已成為當(dāng)前重要問題。機(jī)體感染梅毒螺旋體后可產(chǎn)生非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體，實(shí)驗(yàn)室檢測梅毒抗體陽性是診斷梅毒的重要依據(jù)之一。目前用于梅毒血清學(xué)檢驗(yàn)方法較多，主要包括非梅毒螺旋體血

3、清試驗(yàn)和梅毒螺旋體血清試驗(yàn)。不同的檢測方法都有其特殊的臨床診斷價值，實(shí)驗(yàn)室如何更合理地選用檢測方法，避免誤診、漏診而產(chǎn)生醫(yī)患糾紛等問題是非常必要的。為此，我們就如何更合理地利用快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（RPR）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHA）3種最常用的不同檢測方法對梅毒輔助診斷符合率進(jìn)行比較分析。 1  對象與方法 1.1  對象 選用20042007年期間我院住院及門診梅毒陽性74例（病例組）與50例正常對照組(健康體檢者)。根據(jù)梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)確定一期梅毒組18例，二期梅毒組25例，三期梅毒組16例，臨床治愈后梅毒復(fù)查組15

4、例。其中妊娠期有13例。 1.2  試劑與儀器 RPR試劑為上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供的梅毒快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試劑盒；TP-ELISA為廈門新創(chuàng)科技有限公司提供的梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒；TPHA為日本東亞株式會社提供的梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)試劑盒。TP-ELISA使用儀器：奧地利生產(chǎn)的Biocell-2010型自動酶免分析儀和AW1洗板機(jī)；RPR使用儀器：江蘇省姜堰市天力醫(yī)療器械廠生產(chǎn)的MM-1型微量振蕩器。 1.3  方法 采用目前檢測梅毒最常用的RPR、TP-ELISA和TPHA 3種方法，分別對124份標(biāo)本嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作步驟進(jìn)行平行檢測。

5、2  結(jié)果 2.1  RPR、TP-ELISA、TPHA檢測結(jié)果 74例梅毒陽性患者與50例正常對照組檢測結(jié)果分布情況，見表1。表1  124份血清標(biāo)本3種方法檢測結(jié)果分布情況（略） 2.2  RPR、TP-ELISA、TPHA檢測梅毒陽性率比較 由表2可見，一期梅毒組和二期梅毒組3種試驗(yàn)方法陽性率無明顯差異，三期梅毒組和臨床治愈后復(fù)查組TP-ELISA法與TPHA法檢測結(jié)果差異無顯著性，與RPR法檢測結(jié)果比較差異有高度顯著性(P 均<0.01)，表明此兩階段梅毒患者，RPR法檢出率較低。正常對照組有1例RPR法試驗(yàn)陽性，提示RPR法試驗(yàn)

6、存在干擾因素，其結(jié)果應(yīng)加以綜合分析。表2  3種方法梅毒檢測結(jié)果陽性率比較(略)注：正常對照組有1例RPR假陽性。與RPR比較，a：P=0.0001,b：P=0.0001,c：P=0.0001,d：P=0.0000 3  討論 3.1  梅毒是由梅毒蒼白螺旋體引起，主要通過性行為在人群中相互傳播，并可以通過胎盤傳染給胎兒，危及下一代，極少數(shù)患者通過其他途徑傳染，如接吻、哺乳、接觸梅毒患者的日常用品而感染。機(jī)體感染梅毒螺旋體后可產(chǎn)生非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體1。依據(jù)感染梅毒螺旋體后機(jī)體產(chǎn)生抗體的不同，一期梅毒抗體主要是IgM型；二期梅毒抗體主要有IgM

7、 、IgG型；三期梅毒抗體主要是IgG型。    3.2  RPR試驗(yàn)檢查的是人體內(nèi)的反應(yīng)素，目前對反應(yīng)素的來源尚有爭議。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為2人體感染梅毒螺旋體后組織受到破壞裂解出來一種類脂成分，這種成分與梅毒螺旋體的蛋白質(zhì)結(jié)合，成為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗類脂質(zhì)抗體即反應(yīng)素。梅毒螺旋體破壞組織可使機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素，而其他破壞機(jī)體的過程也可產(chǎn)生反應(yīng)素，所以梅毒患者RPR試驗(yàn)陽性者并不一定感染梅毒螺旋體，如生理狀態(tài)妊娠、病毒性肝炎、上呼吸道感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎炎等RPR可以呈假陽性。因此，不能單獨(dú)根據(jù)RPR陽性診斷梅毒，其結(jié)果應(yīng)加以綜

8、合分析。 3.3  TP-ELISA是利用基因重組工程合成梅毒特異性抗原包被在微孔滴定板上，檢測血清中的梅毒特異性抗體是診斷梅毒螺旋體感染的依據(jù)之一。但其檢測的是梅毒IgM和IgG的混合抗體，梅毒IgG抗體治愈后相當(dāng)長的時間內(nèi)仍然存在較高的陽性率，甚至終生陽性。因此，TP-ELISA陽性只能說明正處于感染期或曾經(jīng)感染過，不能判斷梅毒疾病活動與否，所以不能作為療效監(jiān)測手段3。 3.4  TPHA主要是確認(rèn)試驗(yàn)，但是它不能判定治療效果，因?yàn)橐坏┗加忻范?，即便?jīng)過正規(guī)抗梅毒治療，仍可檢出其特異性抗體，甚至可終生檢出陽性4。( ) 3.5  目前已知，梅毒血清學(xué)檢測一般在

9、硬下疳出現(xiàn)最初幾天內(nèi)RPR試驗(yàn)會是陰性，這主要是血清內(nèi)抗體的量還不夠多。感染時間不長的一期梅毒患者體內(nèi)還未來得及產(chǎn)生這兩類抗體，血清學(xué)檢查則可能為陰性。硬下疳出現(xiàn)l2周后，RPR試驗(yàn)才轉(zhuǎn)為陽性。RPR試驗(yàn)與TPHA試驗(yàn)相比，前者陰轉(zhuǎn)陽的時間約晚1周左右。對 RPR陽性者應(yīng)加做TPHA，才能確定是否感染梅毒。TPHA陰性者表示無梅毒感染，TPHA陽性者表示有梅毒感染。感染梅毒經(jīng)治療后RPR可能轉(zhuǎn)變?yōu)殛幮?，但TPHA仍會維持陽性。梅毒晚期會造成骨、眼、心血管、神經(jīng)等梅毒感染，但RPR陰性且無傳染性，故臨床對多器官表現(xiàn)也需注意，及時排除梅毒感染情況。本組74例陽性血清標(biāo)本檢測結(jié)果可表明：RPR（-）

10、、TP-ELISA（-）、TPHA（-）提示排除梅毒或初期感染潛伏期；RPR（+）、TP- ELISA（-）、TPHA（-）提示假陽性或初期感染；RPR（+）、TP-ELISA（+）、TPHA（+）提示梅毒感染；RPR（-）、TP- ELISA（+）、TPHA（+）提示晚期梅毒或梅毒既往感染。 3.6  梅毒血清學(xué)檢查是診斷梅毒的重要依據(jù)，但并非唯一依據(jù)，臨床應(yīng)該同時檢測非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體進(jìn)行確診。近年來梅毒發(fā)病率呈直線上升趨勢，梅毒的癥狀和體征復(fù)雜多變，臨床表現(xiàn)多種多樣，醫(yī)生應(yīng)在掌握患者的個人生活史及體查的基礎(chǔ)上，綜合分析梅毒化驗(yàn)結(jié)果，排除假陽性、假陰性情況，才能作出正確診斷。本組實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計數(shù)據(jù)及結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)室合理選用3種不同方法平行進(jìn)行梅毒檢測，將減少漏診、誤診率，為梅毒的確診提供參考依據(jù)，并且在判定梅毒的發(fā)展、痊愈及藥物療效方面都具有十分重要的意義。 【參考文獻(xiàn)】  1鄒黎.梅毒血清學(xué)試驗(yàn)幾種檢測方法比較J.實(shí)用醫(yī)技雜志，2006,13（21）：37