五味子糖漿中防腐劑的防腐效力測(cè)定

1、五味子糖漿中防腐劑的防腐效力測(cè)定吳 瀟 (廣西桂林食品藥品檢驗(yàn)所, 桂林 541002)摘要:目的 測(cè)定五味子糖漿中防腐劑對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌, 白色念珠菌和黑曲霉的抑菌作用。方法 將5種微生物接種在五味子糖漿中,經(jīng)不同時(shí)間，用微生物限度檢查測(cè)定其防腐效力。結(jié)果 對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌, 白色念珠菌有較強(qiáng)的抑菌作用. 結(jié)論 五味子糖漿中防腐劑的防腐效力符合美國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞: 五味子糖漿; 防腐劑; 防腐效力Test on the Antiseptic Effects of Preservative in Wuweizi syrup.Wu xiao（

2、Guangxi Zhuangzu Autonomous Region Guilin Institute For Drug Control，Guilin 541002. ）Verify the anti sep sis result of different anti sep tic to a few in common use liquid products,ABSTRACT Objective The antiseptic effects of preservatives in Wu weizi syrup on Escherichia coli ,staphylococcus aureus

3、 , pseudomonas aeruginosa , Candida albicans and aspergillus niger were tested. MethodsInoculate 5 kinds of microorganisms in Wu weizi syrup, the ability of preservation from decay was test by microbial limit in different times. Result That has stronger inhibition effect for Escherichia coli , staph

4、ylococcus aureus , pseudomonas aeruginosa , Candida albicans Conclusions The antiseptic effects of preservatives in Wuweizi syrup met requirement in the USP version.KEY WORDS Wuweizi syrup；Preservative；Antiseptic effects.為了控制藥品質(zhì)量，在一些制劑中加入一定量的防腐劑是常用的方法之一, 中國(guó)藥典2005年版對(duì)糖漿劑中防腐劑山梨酸的用量規(guī)定不得超過(guò)0.3%,山梨酸鉀的殺菌抑菌性

5、能與山梨酸相同,許多糖漿劑中用山梨酸鉀, 其用量按山梨酸計(jì),為了考察在這一濃度下是否有防腐效力，筆者參考文獻(xiàn)1，對(duì)五味子糖漿中的防腐劑山梨酸鉀進(jìn)行了防腐效力測(cè)定，現(xiàn)介紹如下:1、實(shí)驗(yàn)材料營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，改良馬丁培養(yǎng)基，改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基（培養(yǎng)基均為北京三藥科技有限公司生產(chǎn)）；銅綠假單胞桿菌 CMCC (B) 10104 ，金黃色葡萄球菌CMCC(B)26 003，大腸埃希菌CMCC(B)44 102，白色念珠菌CMCC(F)98 001，黑曲霉菌CMCC(F)98 003（菌種均為中國(guó)醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心提供）；五味子糖漿（批號(hào)：070401、0704

6、02、070501，生產(chǎn)單位為桂林裕民藥業(yè)）。 2、實(shí)驗(yàn)方法2.1菌液的制備2 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物接種至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，經(jīng)37培養(yǎng)18-24小時(shí)，備用。取白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁培養(yǎng)基，經(jīng)25 培養(yǎng)2448小時(shí)，備用。取經(jīng)25 培養(yǎng)57天的黑曲霉菌改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)物，用無(wú)菌0.9氯化鈉溶液洗下霉菌孢子，備用。2.2 菌液濃度的測(cè)定分別取上述菌液適量，用無(wú)菌0.9氯化鈉溶液按十倍系列稀釋到適宜的稀釋度, 取稀釋液1ml加入平皿中，平行制備兩個(gè)平皿，立即傾注45約15ml相應(yīng)的瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，細(xì)菌置3035培養(yǎng)2448h，真菌置2328培養(yǎng)

7、4872h，逐日點(diǎn)計(jì)結(jié)果。按測(cè)定的菌數(shù)結(jié)果計(jì)算出各菌液的濃度。2.3 防腐效力測(cè)定方法及結(jié)果 取20ml五味子糖漿5份, 分別加入上述已備妥的菌懸液各適量 (接種菌液的體積不超過(guò)供試液體積的1%,使相加后的最終含菌濃度為10-6 cfu / ml)，作為供試液，在2025 避光密閉保存。分別經(jīng)0、6、24、48 h及7、14、28d等規(guī)定時(shí)間，按2.2項(xiàng)方法測(cè)定各供試液的活菌濃度，結(jié)果見(jiàn)表1。表1 接種不同時(shí)間段各菌存活濃度試驗(yàn)菌樣品批號(hào)活菌計(jì)數(shù)（cfu/ ml）0h6h24h48h7d14d28d大腸埃希菌07040121×1034×10/07040227×10

8、37×10/07050141×1039×10/金黃色葡萄球菌070401107×10427×10338×10242/07040276×10425×10350×10258/07050188×10423×10334×10266/銅綠假單胞菌07040118×10370×1028/07040219×10379×1022/07050121×10367×1026/白色念珠菌07040116×10444×10

9、3200/07040216×10461×103260/07050117×10441×103140/黑曲霉菌07040111×10482×10355×10338×103410220/07040211×10473×10360×10337×103670340/07050112×10487×10370×10339×103530400/注：“/”表示未檢出。由表1可知，供試品保存7天時(shí)，大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌已未檢出；保存14天

10、時(shí)，黑曲霉菌雖能檢出，數(shù)量已大大降低，28天時(shí)已未檢出。3 討論3.1 因目前我國(guó)藥典未收載防腐劑效力測(cè)定法，亦無(wú)判斷標(biāo)準(zhǔn)，本文參照美國(guó)藥典對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作判斷，即在下列情況供試液中的防腐劑是有效的：在14d，存活細(xì)菌濃度減少到不多于最初活菌濃度的0.1%；在14d，活霉菌及酵母濃度保持或低于最初活霉菌及酵母濃度；在28d檢查周期內(nèi)的其余時(shí)間，每一種供試液的微生物濃度仍保持或低于指定水平。由上述測(cè)定結(jié)果可知，五味子糖漿中的防腐劑山梨酸鉀在處方中的濃度下是有防腐效力的。3.2 山梨酸鉀主要在酸性溶液中形成分子態(tài)的山梨酸才能進(jìn)入細(xì)胞而起抑菌作用,pH值低于4時(shí), 山梨酸抑菌活性高,當(dāng)pH值高于6時(shí),

11、抑菌活性低3。五味子糖漿pH值為5左右，理論上山梨酸鉀在其中亦是有效的。筆者根據(jù)中國(guó)藥典2005年版對(duì)五味子糖漿建立微生物限度檢查法時(shí)，直接取原液為供試液，5種試驗(yàn)菌用常規(guī)法即可達(dá)90%以上，因此在本實(shí)驗(yàn)中所采用的測(cè)定供試液的活菌濃度方法（常規(guī)法）是可行的，也說(shuō)明使山梨酸鉀抑菌活性可忽略不計(jì)，其原因主要有兩個(gè)：一是所用培養(yǎng)基pH值為7，山梨酸鉀抑菌活性低；二是山梨酸鉀在培養(yǎng)基中的濃度已非常低，不足以抑菌。3.3 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，五味子糖漿如污染了以大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌及白色念珠菌為代表的幾類(lèi)微生物，存放48h后，已檢測(cè)不出；如污染了以黑曲霉為代表的霉菌，存放28天后，也檢測(cè)不出。這樣的檢測(cè)結(jié)果雖然是樣品符合規(guī)定，但并不能真實(shí)地反