思考復(fù)習(xí)題匯總

1、思考復(fù)習(xí)題一、總論部分（畢晟）1.請結(jié)合自己的專業(yè)，簡單設(shè)計(jì)一個(gè)免疫組織化學(xué)標(biāo)記的方案來研究一個(gè)課題.(一抗和二抗的名稱和來源、一抗的定位預(yù)測；實(shí)驗(yàn)方案、生物學(xué)意義和臨床意義、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（每個(gè)對照組的意義）、結(jié)果判斷。A.實(shí)驗(yàn)一：供傳染科醫(yī)生使用一抗：鼠抗人MMP-2單克隆抗體（鼠抗人VEGF單克隆抗體、鼠抗人MMP-9單克隆抗體各位可以選擇不同的抗體來答題，盡量讓我們的答案不重復(fù)。）二抗：羊抗小鼠Biotin標(biāo)記抗體一抗的定位預(yù)測：表達(dá)在肝組織的細(xì)胞漿中實(shí)驗(yàn)方案：選擇原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織、肝癌旁組織、正常肝組織三組石蠟標(biāo)本切片。通過抗體標(biāo)記MMP-2（VEGF、MMP-9），經(jīng)過免疫組化染色后判

2、定相關(guān)蛋白表達(dá)與肝細(xì)胞癌的臨床病理特征的關(guān)系。生物學(xué)意義：VEGF是腫瘤血管生成和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的關(guān)鍵因素，可以通過其相關(guān)的特異性受體選擇性作用于內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)揮作用（MMPs可以降解基底膜糖蛋白以及細(xì)胞外機(jī)制的大部分成分，細(xì)胞外機(jī)制和血管基膜的降解和腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)）。臨床意義：通過降低VEGF的RNA和其相關(guān)蛋白的表達(dá)，可能抑制原發(fā)性肝細(xì)胞癌的生長，降低腫瘤的轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)(MMP-2、MMP-9被稱為明膠酶A、B，其過度表達(dá)與肝細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可以作為預(yù)測肝癌預(yù)后的指標(biāo))。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：通過設(shè)立癌旁組織和正常肝細(xì)胞組織的對照組，對比各組所研究蛋白在不同組織中表達(dá)的差異，進(jìn)而得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。

3、結(jié)果判斷：采用S-P免疫組化染色后，利用電腦的病理圖文報(bào)告分析系統(tǒng)進(jìn)行結(jié)果判讀，對染色結(jié)果定量分析。2. 免疫組化的應(yīng)用范圍答：（1）提高病理診斷準(zhǔn)確性（2）對疾病的預(yù)后和治療的意義（3）癌基因蛋白的應(yīng)用（4）對腫瘤增生程度的評(píng)價(jià) ki67 PCNA（5）微小病灶的發(fā)現(xiàn) 微小癌 微小病灶（如羊水栓塞）（6）在腫瘤分期上的意義（7）指導(dǎo)腫瘤治療（8）免疫性疾病的輔助診斷（9）病原微生物的檢測3 何謂“套餐式”免疫標(biāo)記? 舉兩例說明免疫組織化學(xué)技術(shù)以抗原抗體反應(yīng)為其理論基礎(chǔ)，對腫瘤的診斷和鑒別診斷有重要作用。目前常用抗體分為上皮性、間葉組織、神經(jīng)及神經(jīng)內(nèi)分泌、淋巴細(xì)胞標(biāo)志物等四類。由于腫瘤類型極多

4、，部分腫瘤的診斷和分型又極其困難，因此診斷一些腫瘤的免疫組化方案必須是“套餐式”的，即每一種組織的標(biāo)記物必須用2種以上的抗體，除了能夠陽性正面證實(shí)的抗體，還要有能陰性反面證實(shí)的抗體。例如：a. Keratin,Vimentin,LCA,S100四種抗體組合，Keratin陽性且其它陰性的結(jié)果可以篩選出可疑癌或生殖細(xì)胞瘤；Vimentin和LCA陽性的結(jié)果可以篩選出可疑淋巴瘤；Vimentin和S100陽性的結(jié)果可以篩選出可疑神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤；Vimentin陽性的結(jié)果可以篩選出可疑肉瘤。b. 在Keratin陽性的腫瘤中，CK17和CK18陽性的結(jié)果提示移行細(xì)胞癌和某些管狀腺癌；CK17陽性和C

5、K18陰性的結(jié)果提示鱗癌、皮膚、鼻咽、食道癌等；CK17陰性和CK18陽性的結(jié)果提示腺癌。4. 研究型抗體選擇要素。研究性抗體需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)所檢測的抗原進(jìn)行選擇。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇單克隆或是多克隆抗體，確定抗體的不同種屬來源，不同的種類，如IgG或是IgM。根據(jù)質(zhì)量和價(jià)格選擇性價(jià)比最優(yōu)的抗體。a. 定義：實(shí)驗(yàn)?zāi)康目乖鞘裁?。b. 生化特點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)?zāi)康目乖姆肿咏Y(jié)構(gòu)如何，有哪些生物化學(xué)特性。c. 染色體定位：實(shí)驗(yàn)?zāi)康目乖娜旧w定位在哪里。d. 功能：實(shí)驗(yàn)?zāi)康目乖诩?xì)胞中有哪些作用，是否是細(xì)胞結(jié)構(gòu)中的重要成分，或是細(xì)胞中重要的信使分子。e. 表達(dá)：明確表達(dá)相關(guān)抗原的細(xì)胞和組織，以及不同的表達(dá)時(shí)期。f.

6、 在石蠟切片中的檢測：用于檢測石蠟切片還是冰凍切片，一般能做石蠟切片的抗體，可能都可以用來檢測冰凍切片，但能做冰凍切片的抗體，不一定能檢測石蠟切片中的抗原。5.何謂腫瘤分子標(biāo)記物?舉兩例說明答：是指伴隨腫瘤出現(xiàn)，在量上通常是增加的抗原，酶，受體，激素或代謝產(chǎn)物形式的蛋白質(zhì)，癌基因和抑癌基因及其相關(guān)產(chǎn)物等成分。這些成分是由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生和分泌，或是被釋放的腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)的一部分，它不僅僅存在于腫瘤細(xì)胞內(nèi)，而且還經(jīng)常釋放至血清或其他體液中，能在一定程度上反映體內(nèi)腫瘤的存在。比如肝癌中的甲胎蛋白以及前列腺癌中的PSA。6.何謂靶向治療? 舉兩例說明答：是指針對參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過程的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和其他生物

7、學(xué)途徑的治療手段。比如抗CD20抗體美羅華，可以治療淋巴瘤，抗EGFR的西妥昔單抗，可以治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。7. 免疫組化, CGH, LOH,MSI,克隆性重排等的應(yīng)用范圍及應(yīng)用“盲點(diǎn)”.A 免疫組化的應(yīng)用范圍同第2題應(yīng)用“盲點(diǎn)”：由于抗體稀釋度、多克隆抗體特異性問題、試劑盒選擇、操作中時(shí)間溫度染色過程等因素使其在結(jié)果判斷上存在“假陽性”和“假陰性”；影響因素很多，使結(jié)果判斷的標(biāo)準(zhǔn)化問題尚難統(tǒng)一；存在抗原抗體交叉反應(yīng)、抗原聯(lián)合表達(dá)等問題。B CGH：比較基因組雜交，一種分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，通過單一的一次雜交可對某整個(gè)基因組的染色體拷貝數(shù)量的變化進(jìn)行檢查。在染色體數(shù)目異常、染色體復(fù)雜結(jié)構(gòu)異常及

8、標(biāo)記染色體來源判定等方面均具有明顯的診斷優(yōu)勢，應(yīng)用：實(shí)體瘤；血液系統(tǒng)惡性疾病；遺傳性疾病的輔助核型分析、診斷預(yù)后判斷和發(fā)病機(jī)制研究；胚胎發(fā)育方面，可用于產(chǎn)前診斷；探索新的腫瘤相關(guān)基因及遺傳綜合征等領(lǐng)域。盲點(diǎn)： 只能檢測待測基因組基因相對于正常基因組平均拷貝數(shù)的變化，不能檢測平衡性易位、倒位、環(huán)狀染色體、部分嵌合體及其他拷貝數(shù)沒有變化的染色體畸變，基因重排和點(diǎn)突變；分辨率較低；圖像分析系統(tǒng)昂貴。C LOH 雜合性缺失：一個(gè)位點(diǎn)上兩個(gè)多態(tài)性的等位基因中的一個(gè)出現(xiàn)缺失。雜合性缺失在腫瘤細(xì)胞中是一種非常常見的DNA變異。抑癌基因的雜合性缺失會(huì)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。盲點(diǎn)：利用LOH的微衛(wèi)星標(biāo)記法無法準(zhǔn)確定位純

9、合缺失區(qū)域及存在假陽性等問題。目前需要采用DNA芯片等高分辨率技術(shù)來檢測出更小的缺失區(qū)域，并且提高純合缺失檢測準(zhǔn)確率。D MSI 微衛(wèi)星DNA不穩(wěn)定性：一個(gè)位點(diǎn)上兩個(gè)多態(tài)性的等位基因條帶增多和大小發(fā)生改變。應(yīng)用：可以反映腫瘤中錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)失活后細(xì)胞分裂的次數(shù)；在衰老機(jī)制研究中用于研究老年?。昏b定個(gè)體特異性。盲區(qū)：微衛(wèi)星技術(shù)引物的獲得較為繁瑣，需要構(gòu)建基因組文庫、篩選陽性克隆、DNA測序等一系列工作，費(fèi)用高，耗時(shí)長。而且該方法基于基因間只存在重復(fù)單位數(shù)目的差異的假設(shè)，不能真實(shí)地反映出微衛(wèi)星位點(diǎn)在全部DNA序列上的變異。在擴(kuò)增過程中，會(huì)產(chǎn)生誤差，引起結(jié)果錯(cuò)誤。E 克隆性重排檢測應(yīng)用：檢測腫瘤細(xì)胞的

10、克隆性存在，以判斷惡性腫瘤；臨床上IgH和TCR基因單克隆檢測在淋巴瘤的分子診斷中普遍應(yīng)用。作為淋巴細(xì)胞源性腫瘤的分子生物學(xué)標(biāo)記，是淋巴瘤早期診斷和療效評(píng)價(jià)的基本方法。盲點(diǎn)：主要應(yīng)用與淋巴細(xì)胞源性腫瘤的檢測，其它應(yīng)用尚少，存在假陽性。8. 當(dāng)代腫瘤分子發(fā)生機(jī)制進(jìn)展和模式答題要點(diǎn)：a. 細(xì)胞癌基因在正常細(xì)胞中未激活，又稱為原癌基因。原癌基因由于結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，而被激活成為癌基因。原癌基因可發(fā)生結(jié)構(gòu)改變（突變）而變?yōu)榘┗?；也可以是由于調(diào)節(jié)原癌基因表達(dá)的基因發(fā)生改變使原癌基因過度表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞生長刺激信號(hào)的過度或持續(xù)出現(xiàn)，使細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。原癌基因的結(jié)構(gòu)改變包括點(diǎn)突變（如90的胰腺癌有ras 基因

11、的點(diǎn)突變）、染色體易位（如伯基特淋巴瘤的t(8：14)，慢性粒細(xì)胞白血病的Phl染色體）、插入誘變、基因缺失和基因擴(kuò)增（如神經(jīng)母細(xì)胞瘤的Nmyc原癌基因可復(fù)制成多達(dá)幾百個(gè)拷貝，在細(xì)胞遺傳學(xué)上表現(xiàn)為染色體出現(xiàn)雙微小體和均染區(qū)）。癌基因編碼的蛋白質(zhì)（癌蛋白）與原癌基因的正常產(chǎn)物有質(zhì)或量的不同。癌蛋白調(diào)節(jié)其靶細(xì)胞的代謝、促使該細(xì)胞逐步轉(zhuǎn)化，成為腫瘤細(xì)胞。b. 與原癌基因編碼的蛋白質(zhì)促進(jìn)細(xì)胞生長相反，正常情況下細(xì)胞內(nèi)的腫瘤抑制基因的產(chǎn)物能抑制細(xì)胞的生長。若其功能喪失則可能促進(jìn)細(xì)胞的腫瘤性轉(zhuǎn)化。目前了解最多的兩種腫瘤抑制基因是Rb基因和P53基因。它們的產(chǎn)物都是以轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的方式控制細(xì)胞生長的核蛋白。

12、腫瘤的發(fā)生可能是癌基因的激活與腫瘤抑制基因的失活共同作用的結(jié)果。c. 惡性腫瘤的發(fā)生是一個(gè)長期的、多因素造成的分階段的過程，這已由流行病學(xué)、遺傳學(xué)和化學(xué)致癌的動(dòng)物模式所證明。單個(gè)基因的改變不能造成細(xì)胞的完全惡性轉(zhuǎn)化，而是需要多基因的改變。癌基因以及腫瘤抑制基因的喪失或突變，這些階段梯性積累起來的不同基因分子水平的改變，最終導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。目前對腫瘤的認(rèn)識(shí)：分子網(wǎng)絡(luò)病。惡性腫瘤細(xì)胞的一個(gè)重要特點(diǎn)就是由于其基因組的不穩(wěn)定性，造成細(xì)胞分裂延續(xù)過程中不斷產(chǎn)生新的變異細(xì)胞，在腫瘤細(xì)胞中出現(xiàn)具有不同生物特性的變異細(xì)胞群體。人們對多種腫瘤進(jìn)行了大規(guī)模的基因突變分析，發(fā)現(xiàn)患相同類型腫瘤的不同個(gè)體之間，其腫瘤組織

13、的基因突變譜差異很大。幾個(gè)基因異常的簡單疊加，難以解釋人類腫瘤發(fā)生、發(fā)展的個(gè)體差異性及其他復(fù)雜的臨床表現(xiàn)。腫瘤中的突變基因處在動(dòng)態(tài)的生物網(wǎng)絡(luò)之中。在細(xì)胞中，彼此相互聯(lián)系基因/蛋白構(gòu)成了復(fù)雜的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)，包括信號(hào)通路、基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和代謝網(wǎng)絡(luò)等。突變基因在細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)中所處地位不同，對網(wǎng)絡(luò)的影響可能會(huì)不同，而且不同的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，對于基因突變耐受能力也不同。從這個(gè)意義上講，腫瘤實(shí)際上是一種分子網(wǎng)絡(luò)病，脫離整體而孤立地強(qiáng)調(diào)單基因的作用是片面的。腫瘤研究要從著重考察單個(gè)癌基因/抑癌基因作用的“oncogene addiction”（原癌基因依賴）轉(zhuǎn)向基于網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)生物學(xué)的二，免疫病理學(xué)（陳佳佳）免疫病理的概念。研

14、究免疫系統(tǒng)功能異常和免疫應(yīng)答所引起的病理現(xiàn)象的科學(xué)。涉及范圍較廣，包括自身免疫病、超敏反應(yīng)、免疫缺陷、免疫增生等自身免疫病有哪些共同特征？為什么體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生自身抗原？自身免疫?。好庖哒{(diào)節(jié)功能紊亂，引起過度的自身免疫反應(yīng)，造成器質(zhì)性損害和功能障礙者 。1. 病程 反復(fù)發(fā)作、慢性遷延2. 血清 Ig升高 自身抗體、與自身成分 起反應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞3. 重疊 一個(gè)患者同時(shí)患兩種或更多的屬同 一類的自身免疫病4. 治療 皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑能緩解5. 與遺傳、性別和年齡有關(guān)6. 在動(dòng)物突驗(yàn)中可復(fù)制相似的病理模型，給正常 動(dòng)物注患病動(dòng)物血清或淋巴細(xì)胞可使疾病轉(zhuǎn)移。 (一) 抗原因素1. 自身Ag性質(zhì)的

15、改變(1) 物理( 化學(xué) 藥物甲基多巴改變RBC表面Rh系統(tǒng)的e抗原 肼苯達(dá)嗪能與細(xì)胞內(nèi)的組蛋白或 DNA結(jié)合， 形成核抗原。 (3) 生物 細(xì)菌感染、病毒感染2. 交叉抗原的作用 分子模擬molecular mimicry 乙型溶血性鏈球菌與人心肌Ag；致腎炎鏈球菌與腎小球基底膜； 機(jī)制：外來交叉Ag激活Th細(xì)胞旁路B細(xì)胞 自身抗體自身免疫病3. 隱蔽Ag的釋放 眼晶狀體蛋白，葡萄膜色素Ag，甲狀腺球蛋白，精子等。4. 表位擴(kuò)展 epitope spreading 抗原決定簇可分為優(yōu)勢決定簇和隱蔽決定簇。p 前者在接觸抗原初始階段誘發(fā)免疫應(yīng)答p 后者在后續(xù)階段誘發(fā)免疫應(yīng)答p 針對自身抗原隱蔽

16、決定簇的T細(xì)胞克隆可能逃避胸腺的陰性選擇，而成為自身反應(yīng)性T細(xì)胞。在自身免疫病的發(fā)生過程中，這種細(xì)胞會(huì)不斷識(shí)別自身抗原的隱蔽決定簇，這一現(xiàn)象稱為表位擴(kuò)展。p 表位擴(kuò)展參與SLE、RA、多發(fā)性硬化和胰島素依賴 性糖尿病的發(fā)生。(二) 機(jī)體免疫功能的異常1. MHC-類Ag表達(dá) 甲狀腺上皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腦細(xì)胞等在發(fā)生器官特異性自身免疫病時(shí)，常MHC-類Ag表達(dá)。 病毒感染細(xì)胞可因受CKs作用而表達(dá)MHC-類分子，這些細(xì)胞可成為自身Ag的遞呈細(xì)胞。2. 免疫調(diào)節(jié)異常 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群異常 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一具有免疫調(diào)節(jié)（或免疫抑制）作用的細(xì)胞群，能夠主動(dòng)抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞的活化，維持自身

17、免疫耐受，防止自身免疫病的發(fā)生。(1) CD4+ CD25+ 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常 占CD4+ T細(xì)胞的510，其數(shù)量及活性足以抑制自身免疫性疾病發(fā)生。 p 多數(shù)易感個(gè)體中，環(huán)境因素和基因異常會(huì)影響胸腺內(nèi)CD4+CD25+ T細(xì)胞的產(chǎn)生，抑制其發(fā)育，改變其調(diào)節(jié)活性，易引起自身免疫性疾病。 p 動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，化療藥物、病毒感染、電離輻射等破壞CD4+CD25+ T細(xì)胞，也可引起自身免疫性疾病。且CD4+CD25+ T細(xì)胞的數(shù)量減少和功能破壞愈嚴(yán)重、時(shí)間愈長，特異性自身免疫性疾病發(fā)病率就愈高 。(2) CD8+CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常p 在多發(fā)性硬化癥、局限性回腸炎、重癥肌無力復(fù)發(fā)病例及SLE

18、患者體內(nèi)的CD8+ CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量明顯下降或功能降低。p 基因敲除實(shí)驗(yàn)也證明， CD8基因敲除的小鼠發(fā)生自身免疫性腦髓炎的幾率顯著提高，給這種小鼠輸注CD8+ CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞將明顯抑制自身免疫性腦髓炎的發(fā)生和發(fā)展。 (3) Tr1、Th3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常Tr1、Th3是獲得性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。Trl的主要特征是：CD4+CD45RBlow 、低增殖能力、分泌高水平的IL-10、低水平的IL-2，正常水平的TGF-，不產(chǎn)生IL-4。Th3區(qū)別于Trl主要在于其分泌高水平的TGF-。Tr1、Th3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量減少或功能異常，可導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生。(4) NKT細(xì)胞異常NK

19、T細(xì)胞具有NK和T細(xì)胞的分子標(biāo)志，由CDld 限制性的糖脂激活；TCR激活后具有細(xì)胞毒性和免疫調(diào)節(jié)作用，分泌多種細(xì)胞因子，如：IL-4、IL-10、TGF-等。 實(shí)驗(yàn)證明，NKT細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)作用，能防止自身免疫病的發(fā)生。 3.協(xié)同刺激分子異常表達(dá) B7分子 高水平表達(dá)B7分子的胰島細(xì)胞可激活 T細(xì)胞 CTLA-4 不僅對T細(xì)胞活化起負(fù)向調(diào)節(jié)作用，還可介導(dǎo)自身免疫耐受，所以CTLA-4可能與T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病有關(guān)。如CILA-4基因多態(tài)性與Graves病、IDDM、自身免疫性甲狀腺炎、重癥肌無力、Addison綜合征等有關(guān)。 多發(fā)性肌炎、SLE患者CTLA4 表達(dá)明顯增多 。 4.

20、多克隆激活作用 某些病毒(EB病毒、HIV) 、細(xì)菌內(nèi)毒素、 sAg均可成為多克隆激活劑。 如EB病毒所致的傳染性單核細(xì)胞增多癥患者常伴自身免疫性溶血性貧血和血小板減少性紫癜；艾滋病患者早期出現(xiàn)抗血小板、抗紅細(xì)胞、抗心肌磷脂和抗核等自身抗體，晚期則出現(xiàn)針對T細(xì)胞的自身抗體。 5.細(xì)胞凋亡途徑異常 (1)線粒體通路異常 在線粒體通路中發(fā)揮作用的分子很多，如細(xì)胞色素C、凋亡蛋白酶活化因子（Apaf-1）、caspase、凋亡誘導(dǎo)因子、Bcl-2家族等。其中，Bcl-2家族介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡異?？赡茉谧陨砻庖卟〉陌l(fā)病中起一定的作用。Ø Bcl-2參與調(diào)控淋巴細(xì)胞的克隆選擇、免疫記憶和保持免疫系

21、統(tǒng)的自身穩(wěn)定。Ø 甲狀腺炎的甲狀腺細(xì)胞中Bcl-2 等抗凋亡基因受到損害 (2) 死亡受體通路異常Ø 主要的死亡受體有TNFR-1和Fas，其相應(yīng)的配體為TNF和FasL。在死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路中與自身免疫病關(guān)系最密切也最明確的是Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。Ø Fas和FasL結(jié)合，可直接使表達(dá)Fas抗原的細(xì)胞凋亡 Ø Fas/FasL 基因突變或缺陷的患者，由于激活誘導(dǎo)的自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞的凋亡受阻，易發(fā)生多種自身免疫病 (三)遺傳因素Ø 人類的自身免疫病常有家族遺傳傾向性，在有自身免疫病家族史的人群中自身免疫病的發(fā)病率較高，如Graves病

22、、自身免疫性甲狀腺炎、IDDM等都有家族遺傳傾向性。 原因：現(xiàn)認(rèn)為與某些個(gè)體的HLA分子適合遞呈某些自身抗原肽有關(guān) (四)其他因素1.生理性因素ü 年齡 自身免疫病的發(fā)病率隨年齡增長而增高，這可能是由于老年人胸腺功能低下引起免疫系統(tǒng)功能紊亂所致。ü 性別 女性發(fā)生多發(fā)性硬化癥和SLE的可能性比男性 大1020倍 。2.神經(jīng)內(nèi)分泌因素ü 免疫細(xì)胞表面有多種神經(jīng)遞質(zhì)和內(nèi)分泌激素的受體ü 多種神經(jīng)內(nèi)分泌激素如皮質(zhì)類固醇、性激素、催乳素、P物質(zhì)和-內(nèi)啡肽等可通過與免疫細(xì)胞表面相應(yīng)的受體結(jié)合而影響免疫細(xì)胞的生長發(fā)育和分化成熟。b 皮質(zhì)類固醇(CS) 抑制Th1，使

23、Th1和Th2的平衡失調(diào)。(2) 催乳素(PRL) PRL過高能抑制細(xì)胞免疫，而促進(jìn)體液免疫,故哺乳期婦女RA發(fā)病率提高5倍。(3) 性激素 雌激素：抑制細(xì)胞免疫，抑制循環(huán)IC的清除，刺激B細(xì)胞產(chǎn)生Ab。 雄激素：增強(qiáng)細(xì)胞免疫，加快循環(huán)IC的清除。(4) P物質(zhì)(SP) 和-內(nèi)啡肽 SP：刺激T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2 -內(nèi)啡肽：抑制免疫細(xì)胞釋放IL-2及IL-2R表達(dá)闡述自身免疫病的發(fā)病和組織損害的可能機(jī)制。(一)自身抗體對細(xì)胞的溶解作用 型 補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用、ADCC (二) IC對組織的損傷作用 型(三) 致敏T細(xì)胞對組織的損傷作用 型試述同種移植排斥反應(yīng)的機(jī)制。 同種異型抗原是激發(fā)移植排斥

24、的主要因素 同種異型抗原識(shí)別的抗原提呈細(xì)胞：移植物中殘留的過路細(xì)胞和受者APC T細(xì)胞識(shí)別同種異型抗原的機(jī)制 （一）直接識(shí)別 受者T細(xì)胞直接識(shí)別同種異體供者APC膜表面的MHC分子或抗原肽MHC分子復(fù)合物，不必經(jīng)過抗原加工和自身MHC提呈。 是誘發(fā)移植早期急性排斥反應(yīng)的主要因素。 1. TCR對肽-MHC分子復(fù)合物的識(shí)別具有兼并性（degenerary） 2. 具有直接識(shí)別能力的受者T細(xì)胞并非一個(gè)獨(dú)立 的亞群，是受者體內(nèi)與識(shí)別其他外源性抗原的T細(xì)胞存在交叉反應(yīng)性（cross-reactivity）的T 細(xì)胞 3. 抗原肽-供者M(jìn)HC分子復(fù)合物可模擬外來抗原肽-受者M(jìn)HC分子復(fù)合物 （二）間接識(shí)

25、別 供者移植物的脫落細(xì)胞或MHC抗原經(jīng)受者APC加工處理，以供者抗原肽受者M(jìn)HC II類分子復(fù)合物的形式提呈給受者CD4T細(xì)胞。 常引起較遲發(fā)生的排斥反應(yīng)（如急性排斥反應(yīng)的中晚期和慢性排斥反應(yīng)）。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的特點(diǎn)、功能及其與疾病的關(guān)系。 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群異常 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一具有免疫調(diào)節(jié)（或免疫抑制）作用的細(xì)胞群，能夠主動(dòng)抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞的活化，維持自身免疫耐受，防止自身免疫病的發(fā)生。(1) CD4+ CD25+ 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常 占CD4+ T細(xì)胞的510，其數(shù)量及活性足以抑制自身免疫性疾病發(fā)生。 p 多數(shù)易感個(gè)體中，環(huán)境因素和基因異常會(huì)影響胸腺內(nèi)CD4+CD25+ T細(xì)胞的產(chǎn)生，抑制

26、其發(fā)育，改變其調(diào)節(jié)活性，易引起自身免疫性疾病。 p 動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，化療藥物、病毒感染、電離輻射等破壞CD4+CD25+ T細(xì)胞，也可引起自身免疫性疾病。且CD4+CD25+ T細(xì)胞的數(shù)量減少和功能破壞愈嚴(yán)重、時(shí)間愈長，特異性自身免疫性疾病發(fā)病率就愈高 。(2) CD8+CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常p 在多發(fā)性硬化癥、局限性回腸炎、重癥肌無力復(fù)發(fā)病例及SLE患者體內(nèi)的CD8+ CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量明顯下降或功能降低。p 基因敲除實(shí)驗(yàn)也證明， CD8基因敲除的小鼠發(fā)生自身免疫性腦髓炎的幾率顯著提高，給這種小鼠輸注CD8+ CD28- 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞將明顯抑制自身免疫性腦髓炎的發(fā)生和發(fā)展。

27、 (3) Tr1、Th3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞異常Tr1、Th3是獲得性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。Trl的主要特征是：CD4+CD45RBlow 、低增殖能力、分泌高水平的IL-10、低水平的IL-2，正常水平的TGF-，不產(chǎn)生IL-4。Th3區(qū)別于Trl主要在于其分泌高水平的TGF-。Tr1、Th3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量減少或功能異常，可導(dǎo)致自身免疫病的發(fā)生。(4) NKT細(xì)胞異常NKT細(xì)胞具有NK和T細(xì)胞的分子標(biāo)志，由CDld 限制性的糖脂激活；TCR激活后具有細(xì)胞毒性和免疫調(diào)節(jié)作用，分泌多種細(xì)胞因子，如：IL-4、IL-10、TGF-等。 實(shí)驗(yàn)證明，NKT細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)作用，能防止自身免疫病的發(fā)生。 (5) Th

28、1/Th2細(xì)胞亞群平衡的異常Th1細(xì)胞因子主要參與器官特異性自身免疫病，如胰島素依賴型糖尿病(IDDM)、多發(fā)性硬化(MS)、甲狀腺疾病及葡萄膜炎等；Th2細(xì)胞因子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)和過敏性疾病中占優(yōu)勢。三，信號(hào)傳導(dǎo)和腫瘤分子病理學(xué)（俞海英）Reversible phosphorylation可逆磷酸化分子水平普遍存在的一種調(diào)控方式經(jīng)常出現(xiàn)于絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸可變的（交替的，二選一的）構(gòu)相開關(guān)在一分鐘內(nèi)或超過數(shù)小時(shí)起反應(yīng)放大活性（激活）差異性的調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白每個(gè)磷酸化事件意義不同Docking protein支架蛋白或腳手架蛋白在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中對于主要功能蛋白起輔助作用的一組蛋白，這

29、些蛋白本身缺乏酶活性，主要介導(dǎo)蛋白與蛋白間的相互作用（交聯(lián)，連接）從而形成蛋白復(fù)合物的結(jié)構(gòu)RTKsReceptor Tyrosine Kinases (受體型酪酸酸激酶是一種跨膜的受體，接收信號(hào)和轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)至細(xì)胞內(nèi)而產(chǎn)生特定的反應(yīng)是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體的主要機(jī)制介導(dǎo)細(xì)胞生長、分化、宿主防御和代謝調(diào)控在腫瘤發(fā)生過程中起到關(guān)鍵調(diào)控作用，例如ERb2受體酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase,TPK)是由50多種跨膜受體組成的超家族，其共同特征是受體胞內(nèi)區(qū)含有TPK，配體則以生長因子為代表。表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)、血小板源生長因子(pl

30、atelet-derived growth factor, PDGF)等與受體胞外區(qū)結(jié)合后，受體發(fā)生二聚化并催化胞內(nèi)區(qū)酪氨酸殘基自身磷酸化，進(jìn)而活化TPK。磷酸化的酪氨酸可被一類含有SH2區(qū)(Src homology 2 domain)的蛋白質(zhì)識(shí)別，通過級(jí)聯(lián)反應(yīng)向細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。由于大多數(shù)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及分化的因子都通過這條途徑發(fā)揮作用，故它與細(xì)胞增殖肥大和腫瘤發(fā)生的關(guān)系十分密切簡述 EGFR/erbB 受體家族構(gòu)成以及調(diào)控腫瘤發(fā)生意義表皮生長因子受體家族EGFR及其配體參與多種不同細(xì)胞功能過程中的分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)ErbB家族受體，包括四種緊密相關(guān)的酪氨酸激酶受體亞家族，分別是EGFR（ErbB

31、-1）、HER2/c-neu (ErbB-2), Her 3 (ErbB-3)，Her 4 (ErbB-4)突變導(dǎo)致EGFR表達(dá)或影響其活性可導(dǎo)致腫瘤發(fā)生過度的ErbB信號(hào)與這些腫瘤的惡性程度相關(guān)EGFR是原癌基因c-erbB1的表達(dá)產(chǎn)物，是表皮生長因子受體（HER）家族成員之一。該家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。HER家族在細(xì)胞生理過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。EGFR廣泛分布于哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞表面，EGFR信號(hào)通路對細(xì)胞的生長、增殖和分化等生理過程發(fā)揮重要的作用。EG

32、FR等蛋白酪氨酸激酶功能缺失或其相關(guān)信號(hào)通路中關(guān)鍵因子的活性或細(xì)胞定位異常，均會(huì)引起腫瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病的發(fā)生。研究表明在許多實(shí)體腫瘤中存在EGFR的高表達(dá)或異常表達(dá)。EGFR與腫瘤細(xì)胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及細(xì)胞凋亡的抑制有關(guān)。簡述FAK 信號(hào)調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移主要機(jī)制FAK 粘著斑激酶FAK被生長因子和整聯(lián)蛋白簇所激活，它在細(xì)胞運(yùn)動(dòng)中起到信號(hào)鄰近調(diào)節(jié)器的作用。在細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的接觸中，F(xiàn)AK起到調(diào)節(jié)蛋白的作用來補(bǔ)充其他的局部接觸蛋白或它們的調(diào)節(jié)器，從而影響局部接觸的形成或解離。FAK的激活以及下游信號(hào)能激活肌動(dòng)蛋白和微絲微管結(jié)構(gòu)，而且FAK信號(hào)能影響細(xì)胞-細(xì)胞間連接（以

33、粘附為基礎(chǔ)的）的形成及解離。在腫瘤的轉(zhuǎn)移中起到重要的調(diào)節(jié)作用如何理解細(xì)胞信號(hào)調(diào)控的基本特征及其研究腫瘤病理機(jī)制主要意義？1、 信號(hào)網(wǎng)絡(luò)在時(shí)間和空間方面的調(diào)控2、 細(xì)胞特定的病理和生理狀態(tài)間的聯(lián)系3、 是一個(gè)強(qiáng)有力的工具來研究人類疾?。ú±恚┤梭w細(xì)胞之間的信息轉(zhuǎn)導(dǎo)可通過相鄰細(xì)胞的直接接觸來實(shí)現(xiàn)，但更重要的也是更為普遍的則是通過細(xì)胞分泌各種化學(xué)物質(zhì)來調(diào)節(jié)自身和其他細(xì)胞的代謝和功能。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通常包括以下步驟：特定的細(xì)胞釋放信息物質(zhì)信息物質(zhì)經(jīng)擴(kuò)散或血循環(huán)到達(dá)靶細(xì)胞與靶細(xì)胞的受體特異性結(jié)合受體對信號(hào)進(jìn)行轉(zhuǎn)換并啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信使系統(tǒng)靶細(xì)胞產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。凡由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)統(tǒng)稱為細(xì)胞間信

34、息物質(zhì)，即第一信使在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息的小分子化合物稱為第二信使責(zé)細(xì)胞核內(nèi)外信息傳遞的物質(zhì)稱為第三信使，一般為轉(zhuǎn)錄因子受體是細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合的成分，他能把識(shí)別和接受的信號(hào)正確無誤地放大并傳遞到細(xì)胞內(nèi)部，進(jìn)而引起生物學(xué)效應(yīng)。 存在于細(xì)胞質(zhì)膜上的受體稱為膜受體，化學(xué)本質(zhì)絕大部分是糖鑲嵌蛋白；位于胞液和細(xì)胞核中的受體稱為胞內(nèi)受體，它們?nèi)繛镈NA結(jié)合蛋白最常見的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)有G蛋白偶聯(lián)系統(tǒng)（7次跨膜蛋白），受體酪氨酸激酶家族等在病理狀況下，由于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的單一或多個(gè)環(huán)節(jié)異常，可以導(dǎo)致細(xì)胞代謝及功能紊亂或生長發(fā)育異常。疾病時(shí)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異?？缮婕笆荏w、胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子及

35、轉(zhuǎn)錄因子等多個(gè)環(huán)節(jié)。在某些疾病，可因細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的某個(gè)環(huán)節(jié)原發(fā)性損傷引起疾病的發(fā)生；而細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的改變亦可以繼發(fā)于某種疾病或病理過程，其功能紊亂又促進(jìn)了疾病的進(jìn)一步發(fā)展。如因受體的數(shù)量、結(jié)構(gòu)或調(diào)節(jié)功能變化，使之不能介導(dǎo)配體在靶細(xì)胞中應(yīng)有的效應(yīng)所引起的疾病稱為受體病，如2型糖尿病，重癥肌無力等正常細(xì)胞的生長與分化受到精細(xì)的網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)，細(xì)胞癌變最基本的特征是生長失控及分化異常。近年來人們認(rèn)識(shí)到絕大多數(shù)的癌基因表達(dá)產(chǎn)物都是細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的組成成分，它們可以從多個(gè)環(huán)節(jié)干擾細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖與分化異常。某些癌基因可以表達(dá)生長因子受體的類似物，通過模擬生長因子的功能受體起到促增殖

36、的作用。例如，erb-B癌基因編碼的變異型EGF受體，缺乏與配體結(jié)合的膜外區(qū)，但在沒有EGF存在的條件下，就可持續(xù)激活下游的增殖信號(hào)。在人乳腺癌、肺癌、胰腺癌和卵巢腫瘤中已發(fā)現(xiàn)EGF受體的過度表達(dá)；在卵巢腫瘤亦可見PDGF受體高表達(dá)，且這些受體的表達(dá)與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)四，血液學(xué)分子病理學(xué)（高海女）名詞解釋1，初級(jí)止血Primary Hemostasis: Primary hemostasis is defined as the formation of the primary platelet plug and involves platelets, the blood vessel wall a

37、nd von Willebrand factor.在微血管和小血管發(fā)生破裂時(shí)立即發(fā)生的止血，包括血管的反應(yīng)性收縮，血小板在vwf存在下粘附于血管內(nèi)皮下暴露的膠原組織，形成白色血栓。2. 血小板ADP受體 (Platelet ADP receptor: There are two types ADP receptor P2Y1 and P2Y12, respectively. P2Y1 coupled(耦合) to Gq and activates PLC, P2Y12 coupled to Gi which inhibits adenylate cyclase mediated cAMP pr

38、oduction)血小板上有兩種ADP受體，分別為P2Y1和 P2Y12，P2Y1與Gq耦聯(lián)，激活PLC, P2Y12與Gi耦聯(lián)，抑制腺苷酸環(huán)化酶介導(dǎo)的cAMP產(chǎn)生.簡答題1.血小板激活相關(guān)的主要表面受體有哪些？What are the major platelet surface receptors involved in the platelet activation?GPIb is involved in the recognition of vWF and slow down platelet from rapid arterial circulation. GPVI and 21 r

39、ecognize subendothelial collagen exposed upon vascular injury. GPIIb/IIIa is involved in the recognition of vWF and fibrinogen, which cause stable platelet adhesion and subsequent aggregation. Thrombin receptor PAR1 and PAR4, ADP receptor P2Y1 and P2Y12, TXA2 receptor TP are all involved in the acti

40、vation of platelets.答：GPIb參與識(shí)別vWF,使動(dòng)脈循環(huán)中快速流動(dòng)的血小板流動(dòng)速度變慢，GPVI 和21識(shí)別受損的內(nèi)皮下暴露的膠原。GPIIb/IIIa參與識(shí)別vWF和纖維蛋白原，可以使血小板的粘附和之后的聚合更加穩(wěn)定，凝血酶受體PAR1 和PAR4,ADP受體P2Y1和 P2Y12,TXA2受體TP均參與血小板的活化。2.FDA批準(zhǔn)的抗血小板藥物根據(jù)其作用機(jī)理主要分哪幾類？Classify the major anti-platelet agents being approved by FDA according to their mechanism of antago

41、nizing. (see the following table, column I and II)答：不可逆抑制環(huán)氧化酶的阿司匹林，抑制ADP P2Y12受體的氯吡格雷，抑制GPIIb/IIIa受體的阿昔單抗，抑制磷酸二酯酶，從而抑制cAMP的降解以及腺苷攝取的雙嘧達(dá)莫，以及抑制磷酸二酯酶III的西洛他唑。問答題1. 血小板血栓形成過程的Initiation和extension中主要的刺激劑，受體和激活信號(hào)通路有那些？Describe the major agonist, receptor and signaling pathway in the stages of initiation a

42、nd extension during platelet plug formation.For platelet plug formation to occur, platelets must undergo activation as well as adhesion. Adhesion to VWF via GPIb/IX can itself initiate activation via signaling through interactions with FcR -chain, Fc RIIA, or 14-3-3. The contact between platelet GPV

43、I and subendothelial collagen will cause the activation of GPIIb/IIIa, which binds to vWF with high affinity and stabilize platelet adhesion. Collagen-GPVI interaction relies on FcR -chain and PLC2. For platelet extension, subsequently released ADP and TXA2 and activated thrombin will, via their rec

44、eptors, i.e., P2Y1, P2Y12, TP receptor, PAR1, PAR4, activate the circulating platelets and cause GPIIb/IIIa exhibits high affinity status, which subsequently binds fibrinogen and form extended platelet plug. P2Y1, P2Y12, TP receptor, PAR1, PAR4 are all G-protein coupled receptors which activate diff

45、erent signaling pathways via G subunit (Gi, Gz, G13, Gq etc.) and cause PLC, PKG activation and AC inhibition. Their G unit may cause PI3K pathway activation. 血小板血栓形成過程中，血小板在粘附的同時(shí)必須活化。血小板上的GPIb/IX與vWF粘附后，其復(fù)合物可以通過與血小板胞質(zhì)內(nèi)FcR 鏈, Fc RIIA, 或者 14-3-3的相互作用而啟動(dòng)血小板的活化。血小板上的膠原受體GPV1和內(nèi)皮下暴露的膠原之間的接觸可以激活GPIIb/IIIa

46、，后者與vWF有非常高的親和力，可以穩(wěn)定血小板的粘附。膠原-GPVI的相互作用依賴于FcR鏈和PLC2。隨著血小板的延伸，隨后釋放ADP和TXA2，激活凝血酶，通過各自的受體，如P2Y1, P2Y12, TP 受體, PAR1, PAR4，可以激活循環(huán)中的血小板，致GPIIb/IIIa處于高親和狀態(tài)，后者可以與纖維蛋白原結(jié)合，形成了延伸的血小板血栓。P2Y1, P2Y12, TP 受體, PAR1, PAR4均為與G蛋白耦聯(lián)的受體，可以通過G亞單位（Gi, Gz, G13, Gq等）激活不同的信號(hào)通路，激活PLC和PKG并抑制AC。他們的G單位可能激活PI3K途徑。五，遺傳病理進(jìn)展（朱）遺傳病

47、理學(xué)：通過檢測和鑒定特定疾病的基因進(jìn)行的遺傳學(xué)研究稱遺傳病理學(xué)，研究范圍包括單基因缺陷，多基因遺傳病與多因素（基因與環(huán)境的交互作用）的關(guān)系，不穩(wěn)定DNA的表觀遺傳學(xué)機(jī)制（如基因組印記）等。Genetic Pathology: the study of genetics that examines and identifies the gene (s) involved in specific diseases. The simple concept that genetic disorders involve single gene defects is changing, with more

48、 complex modes of genetic inheritance including polygenic, multifactorial (genes interacting with the environment), unstable DNA and epigenetic mechanisms (eg. imprinting), being described. GWAS: 全基因組學(xué)關(guān)聯(lián)分析，是一種對全基因組范圍內(nèi)常見的遺傳變異（單核苷酸多態(tài)性和拷貝數(shù)變異）進(jìn)行總體關(guān)聯(lián)分析的方法，即在全基因組范圍內(nèi)選擇遺傳變異進(jìn)行基因分型，比較病例和對照間每個(gè)變異頻率的差異，計(jì)算變異與疾病的關(guān)

49、聯(lián)強(qiáng)度，選出最有相關(guān)的變異進(jìn)行驗(yàn)證并最終確定與疾病相關(guān)Genome-wide association study (GWA study, or GWAS), also known as whole genome association study (WGA study, or WGAS), is an examination of all or most of the genes (the genome) of different individuals of a particular species to see how much the genes vary from individual

50、 to individual. Different variations are then associated with different traits, such as diseases. These studies normally compare the DNA of two groups of participants: people with the disease (cases) and similar people without (controls).If genetic variations are more frequent in people with the dis

51、ease, the variations are said to be "associated" with the disease.外顯子測序：Exome sequencing：利用序列捕獲技術(shù)將全基因組外顯子區(qū)域DNA捕獲并富集后進(jìn)行高通量測序的基因組分析方法，用于發(fā)現(xiàn)常見和罕見疾病的基因變異Exome sequencing (targeted exome capture) an efficient strategy to selectively sequence all the coding regions of the genome to identify novel

52、 genes associated with rare and common disorders. 六，泌尿系統(tǒng)分子病理學(xué)研究進(jìn)展（徐凱進(jìn)）1. 泌尿系統(tǒng)腫瘤浙一病理科 任國平1.1膀胱原位癌（重度異性增生）定義及臨床病理意義原位癌(高級(jí)別上皮內(nèi)瘤，CIS)一般指膀胱粘膜上皮層內(nèi)的非典型增生（重度）累及上皮的全層，但尚未侵破基底膜而向下浸潤生長者。CIS是一種平坦性(非乳頭)病變,常多個(gè)病灶,癌細(xì)胞易于脫落是尿檢陽性的重要來源,膀胱鏡檢黏膜糜爛性改變,相當(dāng)于過去所謂的”剝脫性膀胱炎”.容易漏檢。CIS與前列腺的PIN、宮頸的CIN等最大的不同，大多出現(xiàn)在侵潤尿路上皮癌的周邊，單獨(dú)原發(fā)的極少；C

53、IS不分級(jí)，按其定義是高級(jí)別的，過去常低診為中度異型增生，原因是認(rèn)為異型細(xì)胞未達(dá)全層。1.2前列腺上皮內(nèi)瘤的意義及鏡下主要特點(diǎn)前列腺上皮內(nèi)瘤變(PIN) ，為前列腺的癌前病變，發(fā)生并局限于前列腺導(dǎo)管或腺泡內(nèi)，非浸潤并且不形成腫塊，可以進(jìn)展成為前列腺腺癌，也可能不進(jìn)展 ，PIN常與前列腺癌并存 。低倍鏡下，和周圍正常腺體比有明顯深染，主要是由于核擁擠，但結(jié)構(gòu)是良性結(jié)構(gòu)； 高倍鏡下有明顯增大的核仁。PIN有幾種結(jié)構(gòu)上的變異形態(tài)，有時(shí)與大腺體癌很難鑒別，需要免疫組化看是否有基底細(xì)胞 。1.3 Describe the gross and histological characteristics of

54、 renal cell carcinoma, nephroblastoma and urothelial (transitional cell) tumorsRenal cell carcinoma腎細(xì)胞癌起源于腎小管上皮細(xì)胞，可發(fā)生于腎實(shí)質(zhì)的任何部位，但以上、下極為多見。分為：透明細(xì)胞腎癌為最常見的類型，占腎細(xì)胞癌的70%80%，顯微鏡下腫瘤細(xì)胞體積較大，圓形或多邊形，胞質(zhì)豐富，透明或顆粒狀，間質(zhì)富有毛細(xì)血管和血竇。本型病例大部分為散發(fā)性，少數(shù)為家族性并伴有VHL綜合征； 乳頭狀癌占腎細(xì)胞癌的10%15%，呈多囊性結(jié)構(gòu)，囊內(nèi)充滿細(xì)顆粒狀腫瘤組織，鏡下以復(fù)雜的乳頭狀結(jié)構(gòu)為主要特征，腫瘤細(xì)胞立方

55、或矮柱狀，呈乳頭狀排列。本型也包括家族性和散發(fā)性兩種； 嫌色細(xì)胞癌在腎細(xì)胞癌中約占5%，腎癌中預(yù)后最好，大體觀此病為實(shí)性均質(zhì)狀，境界清楚，瘤細(xì)胞有豐富的胞漿和非常清楚的細(xì)胞膜（類似植物細(xì)胞），多被誤認(rèn)為腎細(xì)胞癌的顆粒細(xì)胞型 Hales膠樣鐵染色+，電鏡下大量微泡；集合管癌此瘤起源于集合管上皮，肉眼觀位于腎髓質(zhì) ，屬高度惡性腫瘤，預(yù)后差 ；未分類腎癌：混合性腎細(xì)胞癌，“肉瘤樣癌”不含可辨認(rèn)的上皮成分，產(chǎn)粘液性癌，混合性上皮和間質(zhì)成分的癌，其它未知類型的腎癌 。Nephroblastoma腎母細(xì)胞瘤（Wilms'tumor）是最常見的腹部惡性腫瘤，其發(fā)病率在小兒腹部腫瘤中占首位。腫瘤主要發(fā)

56、生在生后最初5年內(nèi)，特別多見于24歲。腎母細(xì)胞瘤多表現(xiàn)為單個(gè)實(shí)性腫物，體積常較大，邊界清楚，可有假包膜形成。腫瘤質(zhì)軟，切面魚肉狀，灰白或灰紅色，可有灶狀出血、壞死或囊性變，有的可見少量骨或軟骨；組織學(xué)特征是具有幼稚的腎小球或腎小管樣結(jié)構(gòu)，切片中可見細(xì)胞成分包括間葉組織的細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞和幼稚細(xì)胞三種。Urothelial (transitional cell) tumors尿路上皮癌（腎移行細(xì)胞瘤）其生長表現(xiàn)為多樣性，包括乳頭狀，無蒂浸潤，結(jié)節(jié)狀以及上皮內(nèi)生長，它具有較大的間變潛能，因此移行細(xì)胞癌可含有梭狀細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞和腺上皮細(xì)胞成分。移行細(xì)胞癌好發(fā)于膀胱三角區(qū)基底部和側(cè)壁但膀胱任何部位均可發(fā)生移行細(xì)胞癌大約70%膀胱癌為乳頭狀，10%為結(jié)節(jié)狀，20%為混合型。根據(jù)腫瘤細(xì)胞分化程度腫瘤分為級(jí)級(jí)和級(jí)級(jí)癌指瘤細(xì)胞分化良好，核胞質(zhì)比例增大，從基底到表層細(xì)胞的成熟輕度紊亂，有絲分裂像偶見；級(jí)癌的瘤細(xì)胞從基底層到表層的成熟高度紊亂，極向喪失，核胞質(zhì)比例明顯增大伴核多形性，核仁粗大，有絲分裂像較常見；級(jí)癌為低分化型核多形性顯著，有絲分裂像多見，瘤細(xì)胞與正常移行上