碘-淀粉比色法測定淀粉酶課件

1、1實驗119 碘-淀粉比色法測定淀粉酶董雷鳴2一、概述（一）淀粉酶的分類（一）淀粉酶的分類-淀粉酶（人體）-淀粉酶（植物、微生物）3（二）含淀粉酶的人體組織（二）含淀粉酶的人體組織胰腺唾液腺（腮腺）胃、膽囊、輸卵管、子宮、脾、空腸、回腸、骨骼肌等 4（三）淀粉的分類（三）淀粉的分類直鏈淀粉（糖淀粉）支鏈淀粉（膠淀粉）5直鏈淀粉(糖淀粉)的結(jié)構(gòu)6碘淀粉包合物碘淀粉包合物結(jié)構(gòu)7支鏈淀粉(膠淀粉)的結(jié)構(gòu)8葡萄糖單位連接鍵分子量自然界中的比例直鏈50-250個-1，4糖苷鍵150000 -60000010-20%支鏈250-500個-1，4糖苷鍵-1，6糖苷鍵1000000 -600000080-90

2、%9( (一一) )原理原理二、實驗-淀粉酶淀粉 葡萄糖 + 麥芽糖 + 糊精+碘液蘭色包合物蘭色包合物10( (二二) )試劑試劑 淀粉溶液（0.4g/L） 碘應(yīng)用液11( (三三) )操作操作加入物空白管測定管緩沖淀粉溶液(37預(yù)溫)0.50.5稀釋血清0.1 混勻，置37水浴準(zhǔn)確15min碘應(yīng)用液0.50.5蒸餾水3.13.0混勻，蒸餾水調(diào)零，波長660nm，比色。12( (四四) )單位定義單位定義 100ml血清中的淀粉酶，在37,15min水解淀粉5mg為1個單位。13( (五五) )計算計算空白管吸光度測定管吸光度 100 15 0.40.5 空白管吸光度 0.01 15 5淀粉

3、酶（U） =100ml血清中的淀粉酶，在37,15min水解淀粉5mg為1個單位。（ ）400=（ml）（min）（mg）14( (六六) )參考值參考值 血清 80-180U 尿液 100-1200U15( (七七) )臨床意義臨床意義 升高 急性胰腺炎、流行性腮腺炎； 急性膽囊炎、腸梗阻、胰腺癌、膽石癥、潰瘍病穿孔及嗎啡注射后。 降低 肝炎、肝硬化、肝癌； 腎功能障礙。16急性胰腺炎時血、尿淀粉酶升高的不同表現(xiàn)開始升高時間高峰時間恢復(fù)時間血清8-12h12-24h2-5d尿液12-24h5-7d1-2w17( (八八) )注意事項注意事項 草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA-Na2及氟化鈉對淀粉酶

4、有抑制作用，肝素?zé)o抑制作用。 唾液含高濃度淀粉酶，須防止帶入。 緩沖淀粉溶液若出現(xiàn)渾濁或絮狀物，應(yīng)重新配制。18實驗115 比色法測定血清堿性磷酸酶董雷鳴19一、概述含堿性磷酸酶酶的人體組織含堿性磷酸酶酶的人體組織骨骼肝臟腸黏膜細(xì)胞胎盤等20( (一一) )原理原理二、實驗堿性磷酸酶磷酸苯二鈉 磷酸 + 酚酚+4-氨基氨替比林鐵氰化鉀醌類化合物醌類化合物21( (二二) )試劑試劑 碳酸鹽緩沖液(pH 10) 磷酸苯二鈉底物溶液 鐵氰化鉀溶液 酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液 酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液22(三三)操作操作(Beckman CX7全自動生化分析全自動生化分析系統(tǒng)系統(tǒng))23Beckman CX7的規(guī)格的規(guī)格 檢測

5、量 900個檢驗結(jié)果/小時 檢測項目及種類（共33項） 電解質(zhì)、急診項目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、藥物檢測、毒品檢測 檢測樣品種類 血清、血漿、尿液、腦脊液24( (四四) )單位定義單位定義 100ml血清在37與底物作用15min,產(chǎn)生1mg酚為1個金氏單位。25( (五五) )參考值參考值 成人 3-13金氏單位 兒童 5-28金氏單位26( (六六) )臨床意義臨床意義 血清ALP活力測定常為肝膽疾病和骨骼疾病的臨床輔助診斷指標(biāo)。27 活性升高 骨paget病、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移或肝轉(zhuǎn)移、佝僂病、骨軟化、骨折愈合期、成骨細(xì)胞瘤； 膽道梗阻、甲旁亢等。 活性降低（少見） 呆小病、磷酸酶過少癥、維生素C缺乏癥等。28( (七七) )注意事項注意事項 底物溶液中不應(yīng)