核酸的理化性質(zhì)及其應(yīng)用_第1頁
核酸的理化性質(zhì)及其應(yīng)用_第2頁
核酸的理化性質(zhì)及其應(yīng)用_第3頁
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1、 第五節(jié)第五節(jié) 核酸的理化性質(zhì)及其應(yīng)用核酸的理化性質(zhì)及其應(yīng)用 一、一般理化性質(zhì)一、一般理化性質(zhì) 酸性酸性 DNADNA粘度極大，粘度極大，RNARNA粘度比粘度比DNADNA小小得多得多 在在260260nmnm波長有紫外吸收峰，是由波長有紫外吸收峰，是由堿基的共軛雙鍵堿基的共軛雙鍵決定的。這一特性常決定的。這一特性常用作核酸的定性、定量分析。用作核酸的定性、定量分析。 二、二、DNADNA的變性的變性 概念概念：在某些理化因：在某些理化因素作用下，素作用下，DNADNA分子互分子互補堿基對之間的氫鍵斷補堿基對之間的氫鍵斷裂，使裂，使DNADNA雙螺旋結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu)分開成單鏈。分開成單鏈。 變

2、性因素變性因素：加熱、過量酸或堿。加熱、過量酸或堿。 增色效應(yīng)增色效應(yīng)：DNADNA變性使溶液變性使溶液ODOD260260增高。增高。 解鏈溫度解鏈溫度( (Tm)Tm)： DNADNA的熱變性的熱變性過程中，紫外光吸過程中，紫外光吸收值達(dá)到最大值的收值達(dá)到最大值的50%50%時的溫度。時的溫度。 TmTm值與值與DNADNA分子中的分子中的G+CG+C含量含量呈正比。呈正比。 三、三、DNADNA的復(fù)性與分子雜交的復(fù)性與分子雜交 復(fù)性：復(fù)性：變性變性DNADNA在適當(dāng)條件下，兩條互補在適當(dāng)條件下，兩條互補鏈又重新恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象。鏈又重新恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象。 退火退火（annealingannealing）：）：熱變性的熱變性的DNADNA經(jīng)經(jīng)緩慢冷卻后的復(fù)性。緩慢冷卻后的復(fù)性。 減色效應(yīng)：減色效應(yīng)：復(fù)性后，復(fù)性后，DNADNA的的ODOD260260又降低又降低到原來的水平。到原來的水平。 核酸分子雜交核酸分子雜交(hybridization)： 熱變性的熱變性的DNADNA在復(fù)性過程中，在復(fù)性過程中，具有堿基序列部分具有堿基序列部分互補的不同的互補的不同的DNADNA之間

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