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文檔簡介

1、基因診斷基因診斷(gene diagnosis)是利用分子生物學及利用分子生物學及分子遺傳的技術和原理，在分子遺傳的技術和原理，在DNA水平分析基因的存水平分析基因的存在、鑒定疾病所涉及基因的置換、缺失或插入等突在、鑒定疾病所涉及基因的置換、缺失或插入等突變，以診斷各種感染性疾病和遺傳性疾病，進行腫變，以診斷各種感染性疾病和遺傳性疾病，進行腫瘤分子水平的研究。瘤分子水平的研究。主要技術及過程主要技術及過程區(qū)分或鑒定區(qū)分或鑒定DNADNA的異常的異常分離、擴增待測的分離、擴增待測的DNADNA片斷片斷基因探針的制備和標記基因探針的制備和標記要求：要求：1.不能存在對核酸結構功能有影響的物質不能存

2、在對核酸結構功能有影響的物質2.降低蛋白、多糖、脂類分子污染降低蛋白、多糖、脂類分子污染，避免酸堿對核酸的磷酸二脂鍵的破，避免酸堿對核酸的磷酸二脂鍵的破壞壞.破碎.核酸核酸的紫的紫外吸外吸收曲收曲線線 離心機離心機 水浴鍋水浴鍋EPEP管管微量移液器微量移液器儀器用具儀器用具瓊脂糖凝膠瓊脂糖凝膠電泳電泳 儀器儀器 電泳儀電泳儀 電泳槽電泳槽 灌膠模具等灌膠模具等Tris-硼酸（硼酸（TBE） Tris-乙酸（乙酸（TAE） Tris-磷酸（磷酸（TPE）常用電泳緩沖液常用電泳緩沖液 上樣緩沖液上樣緩沖液核酸染色劑核酸染色劑注意事項：注意事項：EBEB是致癌物質，切勿用手接觸，更不要污染環(huán)境。是

3、致癌物質，切勿用手接觸，更不要污染環(huán)境。DNADNA分子量標準分子量標準不同種類不同種類DNA Marker1.1.凝膠制備凝膠制備 制備制備1%1%瓊脂糖凝膠。稱取適量瓊脂糖加入瓊脂糖凝膠。稱取適量瓊脂糖加入 20mL 0.520mL 0.5TBETBE，加熱至瓊脂糖全部熔化，冷卻至，加熱至瓊脂糖全部熔化，冷卻至50-50-60 60 時，加入時，加入 EB EB 至終濃度至終濃度 0.50.5g/mLg/mL。緩慢倒入膠板，。緩慢倒入膠板，待膠凝固后拔出梳子。待膠凝固后拔出梳子。2.2.加樣加樣 取取1010l DNAl DNA樣液與樣液與 2 2l l 上樣上樣 buffer buffer 混勻，混勻，用微量移液器小心加入樣品槽。用微量移液器小心加入樣品槽。3.3.電泳電泳 接通電源，切記靠近加樣孔的一端為負，電壓接通電源，切記靠近加樣孔的一端為負，電壓為為15V/cm15V/cm（長度以兩個電極之間的距離計算）（長度以兩個電極之間的距離計算）, ,待溴酚待

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