實驗一 普通光學(xué)顯微鏡及其使用ppt課件

1、細(xì)胞生物學(xué)實驗xxx2019. 9前言 細(xì)胞生物學(xué)實驗課的教學(xué)目的，主要是通過基本技能訓(xùn)練以及觀察分析實驗結(jié)果，使學(xué)生了解并掌握有關(guān)的實驗技術(shù)原理和操作方法，進(jìn)而培養(yǎng)學(xué)生動手實踐、觀察分析和解決問題的能力。為達(dá)到此目的，實驗內(nèi)容自成體系，著眼于加強學(xué)生的基末技能訓(xùn)練，以及觀察分析問題和科學(xué)思維能力的培養(yǎng)。細(xì)胞生物學(xué)實驗繪圖方法與要求一、在仔細(xì)觀察的基礎(chǔ)上，選擇典型結(jié)構(gòu)進(jìn)行描繪，要求真實、準(zhǔn)確 注意各部結(jié)構(gòu)的比例關(guān)系。二、用鉛筆繪圖，線條要明確清晰，圖的深淺明暗一律以點的疏密來表示，點要圓而一致，不得涂暗影或進(jìn)行其它美術(shù)加工。三、各部結(jié)構(gòu)名稱要在一側(cè)引直線注明。各引線要平行不得交叉。四、每幅圖的

2、大小、位置在紙面上必須安排得當(dāng)并注意紙面的整潔。實驗室規(guī)則一、遵守實驗紀(jì)律，按時到達(dá)實驗室，不得遲到或早退。實驗中途因故需外出時應(yīng)向任課教師請假。二、保持實驗室安靜，不許在實驗室內(nèi)大聲喧嘩及隨意走動。 三、必須嚴(yán)肅認(rèn)真地進(jìn)行實驗。實驗期間不得進(jìn)行任何與實驗無關(guān)的活動。四、實驗室內(nèi)各組儀器及器材由各組自已使用，不得互相調(diào)換。要愛護(hù)儀器、標(biāo)本和設(shè)備。如遇儀器損壞或不靈，應(yīng)及時報告任課教師，以便修理或更換，不要自行亂修。損壞器材或設(shè)備者應(yīng)按有關(guān)規(guī)定進(jìn)行賠償。五、注意節(jié)約實驗材料、藥品和水、電等。六、保持實驗室內(nèi)清潔整齊。實驗結(jié)束后，各組必須認(rèn)真清理各自的實驗臺面，將器材清洗后點清數(shù)目，然后擺放整齊。

3、班級值日生負(fù)責(zé)清掃室內(nèi)衛(wèi)生，關(guān)好水、電開關(guān)和門、窗等，經(jīng)教師允許后方可離開實驗室。七、有不遵守上述要求者，任課老師將終止其實驗，并取消其當(dāng)堂實驗成績。實驗一、 普通光學(xué)顯微鏡及其使用 一、實驗?zāi)康?了解光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造及其工作原理，并熟練掌握其操作方法。 二、實驗用品 普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、香柏油、生物制片標(biāo)本、濾紙及擦鏡紙等。三、實驗原理 普通光學(xué)顯微鏡是我們觀察細(xì)胞形態(tài)最常用的工具，從構(gòu)造上可分光學(xué)、機械和電子三大系統(tǒng)。其所用光源為可見光(或紫外光)，故其分辨率(Resolution)存在有一個無法突破的限制。普通光學(xué)顯微鏡 普通生物顯微鏡由3部分構(gòu)成，即：照明系統(tǒng)，包括光源

4、和聚光器；光學(xué)放大系統(tǒng)，由物鏡和目鏡組成，是顯微鏡的主體，為了消除球差和色差，目鏡和物鏡都由復(fù)雜的透鏡組構(gòu)成；機械裝置，用于固定材料和觀察方便。 分辨率是指顯微鏡能將近鄰的兩個質(zhì)點分辨清楚的能力，通常是用相鄰兩點間的距離(D)來表示。其公式如下： D=0.612/ N.A. 分辨率的數(shù)值越小，顯微鏡的分辨能力就越大，反之越小。由上述公式可以看出，分辨率的數(shù)值與波長成正比，與鏡口率(N.A.)成反比。因此，要想得到高分辨率必須要縮短波長和加大鏡口率。鏡口率的大小決定于鏡口角的大小和物鏡與標(biāo)本間介質(zhì)折射率(refraction coefficient)的大小。其計算公式如下： N.A.=nsin/

5、2 其中，n為物鏡與標(biāo)本之間介質(zhì)的折射率；為鏡口角聚光器交點對物鏡鏡口的張角）。對于干燥物鏡來說，介質(zhì)為空氣，鏡口率一般為0.050.95；而油鏡用香柏油為介質(zhì), 鏡口率可接近1.5。限制光鏡分辨率的關(guān)鍵因素是光的波長(光的衍射效應(yīng))，光鏡無論制作得如何精密都無法突破這一極限，因此一般光鏡設(shè)計的最大放大倍數(shù)為1,0001,500。即將0.2m的質(zhì)點放大到0.20.3mm(人肉眼的分辨率)就可辨認(rèn)清楚。 四、作業(yè) 1、寫出使用普通光鏡進(jìn)行顯微裝片觀察的正確方法和步驟。2、利用光鏡和裝片進(jìn)行生物顯微繪圖。 （注：本實驗為驗證性試驗。）特別注意：1、為保護(hù)鏡頭和裝片的清潔，本次試驗不使用100倍物鏡和香柏油進(jìn)行觀察。如有必須使用的情況，請