水環(huán)境糞大腸菌群監(jiān)測(cè)2種分析方法的對(duì)比

1、水環(huán)境糞大腸菌群監(jiān)測(cè)2種分析方法的比照糞大腸菌群是監(jiān)測(cè)水體是否被糞便污染的指示菌，是監(jiān)測(cè)地表水尤其是飲用地表水的重要指標(biāo)之一。它是總大腸菌群的一部分，其根本性狀和總大腸菌群相似。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，將培養(yǎng)溫度進(jìn)步到44.5C，我們把可以在此條件下生長(zhǎng)并發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣的，稱糞大腸菌群。經(jīng)典的糞大腸菌群的監(jiān)測(cè)方法是采用多管發(fā)酵法，但這種方法具有前期準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng)、任務(wù)繁重;培養(yǎng)過(guò)程中操作繁瑣的缺點(diǎn)，并且事后還要清洗大量的試管，浪費(fèi)人力、物力、財(cái)力。為此很多廠家研發(fā)了大腸菌群的快檢紙片。采用紙片法，大大縮短了實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，并且根本不需要再清理大量的試管，減輕了勞動(dòng)強(qiáng)度，也節(jié)約了珍貴的水資源。那么，多管發(fā)酵法和紙片法的

2、數(shù)據(jù)終究有沒(méi)有相關(guān)性?作者采用某廠消費(fèi)的大腸菌群的快檢紙片通過(guò)比照實(shí)驗(yàn)旨在討論這個(gè)問(wèn)題。一、分析方法1、多管發(fā)酵法(1)培養(yǎng)基單倍和三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(培養(yǎng)液的成分與制備略，下同)EC培養(yǎng)液(2)步驟水樣接種量：將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣的接種量，每個(gè)樣品至少用3個(gè)不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五管。假設(shè)接種的體積為10ml，那么接種于含有三倍濃度5ml的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管內(nèi)，假設(shè)接種量為1ml或者小于1ml，那么接種于含有單倍濃度10ml的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的試管內(nèi)。初發(fā)酵：將接種了水樣的試管，在370.5C下培養(yǎng)242h，產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的發(fā)酵管說(shuō)明實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。如產(chǎn)氣不

3、明顯，可輕拍試管，有小氣泡升起的為陽(yáng)性。復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)細(xì)微振蕩初發(fā)酵陽(yáng)性的發(fā)酵管，用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中。在440.5C水浴中培養(yǎng)242h，培養(yǎng)后立即觀察。發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣說(shuō)明確信試驗(yàn)陽(yáng)性。計(jì)算和報(bào)告結(jié)果根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目，從MPN表中查相應(yīng)的MPN指數(shù)，計(jì)算出每升水中糞大腸菌群的MPN值。2、紙片法采用某廠消費(fèi)的大腸菌群快檢紙片水樣接種量：將水樣充分混勻后，根據(jù)水樣污染的程度確定水樣的稀釋倍數(shù)，每個(gè)樣品至少用3個(gè)不同的水樣量接種，同一接種水樣量要有五個(gè)紙片。假設(shè)接種的體積為10ml，那么接種于大紙片內(nèi)。假設(shè)接種量為1ml或者小于1ml，那么接種小紙片內(nèi)。

4、發(fā)酵試驗(yàn)樣品接種后在440.5C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10-16小時(shí)后，觀察結(jié)果。計(jì)算和報(bào)告結(jié)果紙片說(shuō)出現(xiàn)紅點(diǎn)，其周圍呈黃色者為陽(yáng)性。根據(jù)不同接種量的紙片所出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目，從MPN表中查相應(yīng)的MPN指數(shù)，計(jì)算出每升水中糞大腸菌群的MPN值。二、t檢驗(yàn)的結(jié)果根據(jù)成對(duì)樣本的假設(shè)檢驗(yàn)，對(duì)這2組數(shù)據(jù)進(jìn)展成對(duì)數(shù)據(jù)平均數(shù)的比較，看它們有無(wú)顯著性差異。(公式略)計(jì)算結(jié)果：t=0.648,查t值表，df=14-1=13,t0.01,13=3.012,現(xiàn)實(shí)得t0.01。推斷：認(rèn)為2種試驗(yàn)方法沒(méi)有顯著性差異。三、結(jié)論紙片法和多管發(fā)酵法監(jiān)測(cè)的結(jié)果沒(méi)有顯著性差異，用紙片法取代多管發(fā)酵法完全可行。(一)與傳統(tǒng)的多管發(fā)酵法相比，紙片法具有如下優(yōu)點(diǎn)：1、時(shí)間短10-16小時(shí)出檢測(cè)結(jié)果，大大縮短了監(jiān)測(cè)時(shí)間;2、降低了監(jiān)測(cè)人員的工作強(qiáng)度省去了煩瑣的前期培養(yǎng)基的配制、分裝、滅菌，后期洗刷試管，中期重新接種、培養(yǎng)等工作;3、結(jié)果易于判斷根據(jù)顏色識(shí)別，不用費(fèi)力觀察氣泡，檢測(cè)結(jié)果斷定簡(jiǎn)單直觀;(二)在使用紙片法時(shí)，筆者認(rèn)為需要注意以下幾點(diǎn)：1、對(duì)取樣量為1ml的紙片，移液管要在紙片的中央放液，使樣品均勻的向四周擴(kuò)散。2、取樣量為10ml的紙片，因?yàn)樗畼硬荒芡耆患埰?/p>