葡萄糖酸鈣檢驗操作規(guī)程

1、文件編碼SOP-QC-2011-01共 7 頁題 目葡萄糖酸鈣檢驗操作規(guī)程制 定制定日期審 核審核日期批 準批準日期頒發(fā)部門GMP辦公室頒發(fā)日期執(zhí)行部門質(zhì)量部執(zhí)行日期取 代共 印4份分發(fā)部門質(zhì)量部、生產(chǎn)部、物流部1 感官要求 取10g被測樣品，置于潔凈的白瓷盤中，用肉眼在自然光線下觀察其色澤、組織形態(tài)、雜質(zhì)，品嘗其滋味，嗅其氣味。2一般規(guī)定 本標準所用試劑除非另有說明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和 GB/T 66822008中規(guī)定的三級水。 試驗方法中所需標準滴定溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按 GB/T 601、GB/T 603之規(guī)定制備。 3 鑒別試驗3.1 試劑和材料

2、3.1.1 冰乙酸。 3.1.2 苯肼：臨用時蒸餾。 3.2 鑒別試驗 3.2.1 鈣鹽鑒別 3.2.1.1 方法原理鈣鹽與草酸銨試液反應，生成白色沉淀，沉淀在乙酸中不溶解，但可溶解于稀鹽酸。 3.2.1.2 分析步驟取約 1.0 g實驗室樣品，精確至 0.01 g，加 40 mL水溶解，必要時加熱使溶解，取此溶液按中華人民共和國藥典 2005年版二部附錄 一般鑒別試驗鈣鹽項下（ 2），應顯鈣鹽的鑒別反應。 3.2.2 葡萄糖的鑒別 3.2.2.1 方法原理樣品在乙酸介質(zhì)中，與苯肼共熱，生成黃色葡萄糖酰苯肼結(jié)晶。 3.2.2.2 分析步驟取約 0.5 g實驗室樣品，精確至 0.01 g，置 1

3、0 mL試管中，加 5 mL水，溶解（必要時加熱），加 0.7 mL冰乙酸和 1 mL苯肼，在水浴上加熱 30min，放至室溫，用玻璃棒摩擦試管內(nèi)壁，則析出黃色的結(jié)晶。 3.2.3 紅外光吸收圖譜鑒別 采用溴化鉀壓片法測定，實驗室樣品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜藥品紅外光譜集465圖）一致，對照圖譜見附錄 B。 4 葡萄糖酸鈣的測定 4.1 方法提要以鈣紫紅素為指示劑，用乙二胺四乙酸二鈉標準滴定液滴定樣品水溶液，根據(jù)乙二胺四乙酸二鈉標準滴定液的用量，計算以 C12H22CaO14·H2O計的葡萄糖酸鈣的含量。 4.2 試劑與材料 4.2.1 鈣紫紅素指示劑。 4.2.2 氫氧化鈉溶

4、液：40g/L。 4.2.3 乙二胺四乙酸二鈉標準滴定液：c(EDTA)=0.05mol/L。 4.3 分析步驟取約 0.5g實驗室樣品，精確至 0.000 1g，加 100 mL水，使溶解（必要時加熱），放至室溫，加 15mL氫氧化鈉溶液， 0.1g鈣紫紅素指示劑，用乙二胺四乙酸二鈉標準溶液滴定至溶液由紫色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兯{色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，每 1mL的乙二胺四乙酸二鈉滴定液相當于 22.42mg的 C12H22CaO14·H2O 。 4.4 結(jié)果計算葡萄糖酸鈣（以 C12H22CaO14·H2O 計）的質(zhì)量分數(shù) w1，數(shù)值以 %表示，按公式計算： 式中： V實驗室

5、樣品消耗乙二胺四乙酸二鈉標準滴定液體積的數(shù)值，單位為毫升(mL)； V0空白試驗消耗乙二胺四乙酸二鈉標準滴定液體積的數(shù)值，單位為毫升(mL)； c乙二胺四乙酸二鈉標準滴定溶液濃度的準確數(shù)值，單位為摩爾每升(mol/L)； m1實驗室樣品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）；w3按A.8下測定的供試品干燥減量質(zhì)量分數(shù)，數(shù)值以%表示； MC12H22CaO14·H2O 的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，單位為克每摩爾（ g/mol）（ M=448.39）。取兩次平行測定結(jié)果的算術平均值為測定結(jié)果，兩次平行測定結(jié)果的絕對差值不大于0.2%。 5 氯化物的測定 5.1 試劑和材料 5.1.1 硝酸溶液：25100。

6、5.1.2 硝酸銀溶液：17g/L。 5.1.3 氯化鈉標準溶液：每毫升含0.01mg的Cl。 5.2 分析步驟稱取 1.0g±0.01g實驗室樣品，置 100mL容量瓶中，加 80mL水使溶解，再用水稀釋至刻度，搖勻，即為實驗室樣品溶液。分別吸取 10.0 mL實驗室樣品溶液與 5mL±0.05mL氯化鈉標準溶液，按 GB/T 9729測定。 6 硫酸鹽的測定 6.1 試劑和材料 6.1.1 鹽酸：20100。 6.1.2 硫酸鉀乙醇溶液：0.2g/L。 6.1.3 氯化鋇溶液：250g/L。 6.1.4 硫酸鹽標準溶液：每毫升含0.1mg 的SO4。 6.2 分析步驟稱

7、取0.5g±0.01g實驗室樣品，加水微熱溶解成約 20mL，用此溶液，同時另取2.5mL±0.05mL硫酸鹽標準溶液按 GB/T 9728測定。 7 還原物質(zhì)的測定 7.1 方法原理還原糖將二價銅離子還原成氧化亞銅，剩余的二價銅離子在酸性條件下與碘離子反應生成定量的碘，以硫代硫酸鈉標準溶液滴定生成的碘，從而計算出樣品中還原糖的含量。 7.2 試劑和材料 7.2.1 堿性檸檬酸銅溶液的配制：溶液A：稱取 173 g檸檬酸鈉（枸櫞酸鈉）和 100g無水碳酸鈉，加溫水使溶解成 700mL（若溶液顯渾濁過濾使澄清）。 溶液B：稱取17.3 g硫酸銅結(jié)晶，加水使溶解成 100mL。

8、臨用前取100 mL溶液B，在不斷振搖下，緩緩加入700mL溶液A，冷卻后，加水定容至1000mL。 7.2.2 碘標準液：c(1/2I2)=0.05 mol/L。 7.2.3 硫代硫酸鈉標準滴定溶液：0.1mol/L。 7.2.4 淀粉指示液：10g/L。 7.2.5 乙酸溶液：1+27。 7.2.6 鹽酸溶液：3mol/L。 7.3 分析步驟稱取約1.0g實驗室樣品，精確至 0.001g，置250mL碘瓶中，加 20mL水（必要時加熱）使溶解，冷卻至室溫，精確加入25.0 mL堿性檸檬酸銅溶液，瓶口用小表面皿蓋住，準確微沸5 min后，迅速冷卻至室溫，加25.0 mL乙酸溶液，搖勻，精確加

9、入 10.0 mL碘標準液，密塞，搖勻，放置10 min，加入10.0mL鹽酸溶液，再加3.0mL淀粉指示液，立即用硫代硫酸鈉標準溶液滴定至溶液顯亮藍色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每毫升硫代硫酸鈉標準溶液（0.1mol/L）相當于 2.7mg葡萄糖。 7.4 結(jié)果計算還原糖(以C6H12O6計) 的質(zhì)量分數(shù) w 2，數(shù)值以%表示，按公式計算式中： V0 空白試驗所消耗的硫代硫酸鈉標準滴定溶液的體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）； V1滴定試驗溶液所消耗的硫代硫酸鈉標準滴定溶液的體積的數(shù)值，單位為毫升（ mL）； c硫代硫酸鈉標準滴定溶液實際濃度的數(shù)值，單位為摩爾每升（mol/L）； m2實驗室樣

10、品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）；M還原糖（3/20C6H12O6）的摩爾質(zhì)量的數(shù)值，單位為克每摩爾（g/mol）（M=27）。 8 干燥減量的測定 8.1 儀器和設備恒溫干燥箱。 8.2 分析步驟稱取約1.0g實驗室樣品細粉，精確至 0.000 1g，置于已經(jīng)在 105 ±2干燥至恒重的稱量瓶中，精密稱定，再置 105 ±2恒溫干燥箱內(nèi)干燥至恒重，從減失的質(zhì)量和稱樣量計算樣品的干燥減量。 8.3 結(jié)果計算葡萄糖酸鈣干燥減量的質(zhì)量分數(shù) w3，數(shù)值以 %表示，按公式計算 式中： M0稱量瓶的質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）；M3稱量瓶和干燥前實驗室樣品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）；M4稱

11、量瓶和干燥后實驗室樣品質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。9 重金屬的測定 9.1 試劑和材料 9.1.1 硝酸。 9.1.2 甘油。 9.1.3 乙酸銨。 9.1.4 硝酸鉛。 9.1.5 硫代乙酰胺。 9.1.6 鹽酸溶液：c（HCl）=2 mol/L。 9.1.7 氨水溶液：c（NH3·H2O）=5 mol/L。 9.1.8 氫氧化鈉溶液：c（NaOH）=1 mol/L。 9.1.9 鹽酸溶液：c（HCl）=7 mol/L。9.1.10 乙酸鹽緩沖液（pH3.5）：稱取25 g乙酸銨，精確至0.01 g，加25 mL水溶解后，加7 mol/L鹽酸溶液38 mL，用2 mol/L鹽酸溶液

12、或5 mol/L氨水溶液準確調(diào)節(jié) pH至3.5（pH計），用水稀釋至 100 mL。 9.1.11 硫代乙酰胺試液：稱取4 g硫代乙酰胺，精確至 0.01 g，加水使溶解成 100 mL，置冰箱中保存。臨用前取5.0 mL混合液（由15 mL 1 mol/L氫氧化鈉溶液、5.0 mL水及20 mL甘油組成），加上述1.0 mL硫代乙酰胺溶液，置水浴上加熱20s，冷卻，立即使用。 9.1.12 鉛標準溶液：稱取 0.160 g硝酸鉛，精確至 0.000 2g,置于1000 mL容量瓶中，加硝酸5 mL與50 mL水溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，移取 10 mL±0.

13、 02mL貯備液，置于 100 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每 1mL相當于10 g的Pb）。配制與貯存用的玻璃儀器均不得含鉛。 9.2 分析步驟 按中華人民共和國藥典 2005年版二部附錄 H 重金屬檢查法第一法進行。具體方法如下：取 25 mL納氏比色管兩支，甲管中加入 1 mL±0.01mL（含鉛 10.0g）鉛（Pb）標準溶液與 2 mL乙酸鹽緩沖液后，加水稀釋成 25 mL，另稱取 1 g實驗室樣品，精確至 0.01 g，置于納氏比色管乙管中，加 20 mL水，微熱溶解后，放冷，加 2 mL乙酸鹽緩沖液（ pH3.5），用水稀釋成 25 mL，若該溶液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其