高考生物DNA重組技術應用基本工具

1、高考生物DNA重組技術應用基本工具每100kg 豬或牛的胰腺中僅可提取45g。1979年，美國將人的胰島素基因重組到大腸桿菌年，美國將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內，實現了細菌生產胰島素，大大降低了生產成本。內，實現了細菌生產胰島素，大大降低了生產成本。治療糖尿病特效藥 據WTO調查： 2005年全世界約有糖尿病患者億人，我國約6000基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程問題探討：蘇云金芽孢桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。讓細菌的毒蛋白基因在棉花細胞中表達，可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。想一想需要做哪些關鍵工作？蘇云金芽孢桿菌蘇云金芽孢桿菌普通棉花普通棉花抗蟲棉抗蟲棉思考：自然界是

2、否存在一種生物的DNA進入另一生物的情況？2.單細胞生物并沒有在進化中滅絕，有何保護機制？可能產生了一些特殊的酶可能產生了一些特殊的酶來防范?？啥@種酶能識別外來防范?？啥@種酶能識別外來侵入的來侵入的DNA并將其分解，而并將其分解，而對自身的對自身的DNA不能起作用。不能起作用?！胺肿邮中g刀分子手術刀”限制限制性核酸內切酶性核酸內切酶思考與探究 P7 （2）為什么限制酶不剪切細菌本身的DNA？1、細菌中含有某種限制酶的細胞，其DNA分子中不具備這種限制酶的識別切割序列；2：通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的堿基上，使限制酶不能將其切開。分子手術刀分子手術刀-限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶

3、(限制酶限制酶)A.來源來源:主要從原核生物中分離純化主要從原核生物中分離純化想一想:這類酶在原核生物中起什么作用? 為什么細菌中限制酶不剪切細菌本身的DNA？B.作用作用:識別雙鏈識別雙鏈DNADNA分子的某種特定核苷酸序列分子的某種特定核苷酸序列, ,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開之間的磷酸二酯鍵斷開. .一、限制性核酸內切酶“分子手術刀” 主要來源： 種類與命名： 作用特點（特異性） 4.限制酶識別序列 5.作用結果：種類與命名： 現在已經從約300種微生物中分離出了約4000種限制性內切酶(限制酶)。粘質沙雷氏桿菌粘質沙雷氏

4、桿菌（Serratia marcesens練習：流感嗜血桿菌的練習：流感嗜血桿菌的d d菌株菌株( Haemophilus influenzae d )( Haemophilus influenzae d )中先后分離到中先后分離到3 3種限制酶，則分種限制酶，則分別命名為別命名為: :Hind、Hind和和Hind T磷磷酸酸二二酯酯鍵鍵1234512345 A限制酶DNA解旋酶區(qū)別切割特定的核苷酸序列切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵的磷酸二酯鍵將將DNADNA兩條鏈的氫鍵兩條鏈的氫鍵打開形成兩條單鏈打開形成兩條單鏈能被限制性內切酶特能被限制性內切酶特異性識別的切割部位異性識別的切割部位都具

5、有回文序列：在都具有回文序列：在切割部位，一條鏈正切割部位，一條鏈正向讀的堿基順序與另向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序一條鏈反向讀的順序完全一致。完全一致。黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端平末端平末端平末端平末端二、“分子縫合針” DNA連接酶催化磷酸二酯鍵形成催化磷酸二酯鍵形成類型DNA聚合酶DNA連接酶區(qū)別區(qū)別1 1區(qū)別區(qū)別2 2相同點相同點1)1)只能將單個核苷酸連只能將單個核苷酸連接到已有的核酸片段上，接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵1)1)在兩個在兩個DNADNA片段之片段之間形成磷酸二酯鍵間形成磷酸二酯鍵2)2)以一條以一條DNADNA鏈為模板，鏈為模板，連接成一條互補連接成一條互補的的DNADNA鏈鏈2)2)將將DNADNA雙鏈上的兩雙鏈上的兩個缺口同時連接起來，個缺口同時連接起來，不需要模板不需要模板Go onGo on三、“分子運輸車” 基因進入受體細胞的載體載體需要的條件：有1多個限制酶切點對受體細胞無害導入基因能在受體細胞中復制、表達有某些標記基因，便于篩選常用運載體： 細菌的質粒 噬菌體或某些動植物病毒假如目的基因導入受體細胞后不能復制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效果嗎？作