高中生物選修3總結(jié)

1、生物選修3總結(jié)1 基因工程的誕生（識(shí)記）基礎(chǔ)理論：DNA是遺傳物質(zhì)；DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立；遺傳密碼的破譯技術(shù)支持：基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)；工具酶的發(fā)明；DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)；重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功2 基因工程的原理及技術(shù)（識(shí)記）（1）基因重組的基本工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）：主要從原核生物中分離純化出來(lái)，這種酶在原核生物中的作用是防止外來(lái)病原物的侵害，將外源DNA切割保證自身安全它能識(shí)別DNA分子的某種特定核苷酸序列，并切割兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生的末端有黏性末端（如EcoR切割的末端）和平末端DNA連接酶：EcoliDNA連接酶連接黏性末端的DNA片斷；T4DNA連接

2、酶黏性末端和平末端都可以連接；而DNA聚合酶是將單個(gè)的脫氧核苷酸加到DNA片斷上。載體：種類(lèi)有質(zhì)粒（常用，并被人工改造）、動(dòng)植物病毒；條件：能自我復(fù)制；有一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn)；有標(biāo)記基因位點(diǎn)；對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害（2）基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取：概括地說(shuō)，主要有兩條途徑：一條是從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因；另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是“鳥(niǎo)槍法”，又叫“散彈射擊法”。這種方法猶如用獵槍發(fā)射的散彈打鳥(niǎo)，無(wú)論哪一顆彈粒擊中目標(biāo)，都能把鳥(niǎo)打下來(lái)。鳥(niǎo)槍法的具體做法是：用限制酶將供體細(xì)胞中的DNA切成許多片段，將這些片段分別載入運(yùn)載體，然后通過(guò)運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞，讓供

3、體細(xì)胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分別在各個(gè)受體細(xì)胞中大量復(fù)制(在遺傳學(xué)中叫做擴(kuò)增)，從中找出含有目的基因的細(xì)胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來(lái)。如許多抗蟲(chóng)、抗病毒的基因都可以用上述方法獲得。用“鳥(niǎo)槍法”獲取目的基因的缺點(diǎn)是工作量大，具有一定的盲目勝。又由于真核細(xì)胞的基因含有不表達(dá)的DNA片段，不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá)，因此，在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí)，一般是用人工合成基因的方法。目前人工合成基因的方法主要有兩條途徑。一條途徑是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需要的基因。另一條途徑是根據(jù)已

4、知的蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)的方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。如人的血紅蛋白基因、胰島素基因等就可以通過(guò)人工合成基因的方法獲得。目的基因與運(yùn)載體結(jié)合：將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合的過(guò)程，實(shí)際上是不同來(lái)源的DNA重新組合的過(guò)程。如果以質(zhì)粒作為運(yùn)載體，首先要用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使質(zhì)粒出現(xiàn)一個(gè)切口，露出黏性末端。然后用同一種限制酶切斷目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端。將切下的目的基因的片段插入到質(zhì)粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，質(zhì)粒的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就會(huì)因堿基互補(bǔ)配對(duì)而結(jié)合，形成

5、了一個(gè)重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過(guò)這種方式與大腸桿菌中的質(zhì)粒DNA分子結(jié)合，形成重組DNA分子(也叫重組質(zhì)粒)的。重組DNA分子的特點(diǎn)：具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子、以及標(biāo)記基因。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：目的基因的片段與運(yùn)載體在生物體外連接形成重組DNA分子后，下一步是將重組DNA分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增。基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。用人工的方法使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。導(dǎo)入植物細(xì)胞：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉用的是花粉管通道法）；導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：顯微注射技術(shù)（注射入受精卵中）；如果

6、運(yùn)載體是質(zhì)粒，受體細(xì)胞是細(xì)菌，一般是將細(xì)菌用氯化鈣處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，就可以隨著受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制，由于細(xì)菌繁殖的速度非?？欤诤芏痰臅r(shí)間內(nèi)就能夠獲得大量的目的基因。目的基因的檢測(cè)和表達(dá)：以上步驟完成以后，在全部受體細(xì)胞中，真正能夠攝入重組DNA 分子的受體細(xì)胞是很少的。因此，必須通過(guò)一定的手段對(duì)受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)的方法有很多種，1 DNA上檢測(cè)是否有目的基因（利用DNA分子雜交技術(shù)）；2 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA（基因探針與mRNA雜交）；3 目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)（利用抗原-抗體雜交）；

7、4 性狀水平的檢測(cè)。例如，大腸桿菌的某種質(zhì)粒具有青霉素抗性基因，當(dāng)這種質(zhì)粒與外源DNA組合在一起形成重組質(zhì)粒，并被轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞后，就可以根據(jù)受體細(xì)胞是否具有青霉素抗性來(lái)判斷受體細(xì)胞是否獲得了目的基因。重組的DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說(shuō)明目的基因完成了表達(dá)過(guò)程。例如，科學(xué)家最初做抗蟲(chóng)棉試驗(yàn)時(shí)，雖然已經(jīng)檢測(cè)出棉的植株中含有抗蟲(chóng)的基因，但讓棉鈴蟲(chóng)食用棉的葉片時(shí)，棉鈴蟲(chóng)并沒(méi)有被殺死，這說(shuō)明抗蟲(chóng)基因還不能在高等植物中表達(dá)?？茖W(xué)家在研究的基礎(chǔ)上，又一次對(duì)棉植株中的抗蟲(chóng)基因進(jìn)行了修飾，然后再讓棉鈴蟲(chóng)食用棉的葉片，結(jié)果食用的第二天棉鈴蟲(chóng)就中毒死亡了。這說(shuō)明抗蟲(chóng)基因在棉植株中得

8、到了表達(dá)。例如：用基因工程的方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的-珠蛋白。（1） 從小鼠中克隆出-珠蛋白基因的編碼序列（cDNA）注：鼠是真核生物因此用人工合成的方法來(lái)獲得目的基因（2） 將cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，另外加上抗四環(huán)素基因（為了在受體細(xì)胞中篩選出含有目的基因的細(xì)胞），構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。（3） 將表達(dá)載體導(dǎo)入無(wú)四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)因不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果培養(yǎng)基上長(zhǎng)出大腸桿菌菌落，則表明-珠蛋白基因已進(jìn)入其中。（4） 培養(yǎng)進(jìn)入了-珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破碎后從中提取-珠蛋白

9、。3 基因工程的應(yīng)用（理解）（1）植物基因工程成果：抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物（抗蟲(chóng)棉是轉(zhuǎn)入Bt毒蛋白基因培育的）抗病轉(zhuǎn)基因植物（病毒外殼蛋白基因、病毒復(fù)制酶基因） 抗逆轉(zhuǎn)基因植物（生物的抗性基因） 轉(zhuǎn)基因改良植物（營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、實(shí)用價(jià)值、觀賞價(jià)值）（2）動(dòng)物基因工程成果：提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度（外源生長(zhǎng)激素基因） 改善畜產(chǎn)品的品質(zhì) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物（牛、山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)了抗凝血酶、血清白蛋白、生長(zhǎng)激素、-抗胰蛋白酶） 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體（導(dǎo)入調(diào)節(jié)因子，抑制抗原決定基因表達(dá)或除去抗原決定基因培育沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官） 基因工程藥物（利用轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)細(xì)胞因子、抗體、疫苗等）注：

10、如果工程菌為原核生物，因其沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，所以不能生產(chǎn)糖蛋白類(lèi)物質(zhì) 基因治療（從根本上治療遺傳病，不能治療傳染?。? 蛋白質(zhì)工程（識(shí)記）（1）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)（2）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱(chēng)為第二代的基因工程?；就緩剑簭念A(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）設(shè)計(jì)中的困難：如何推測(cè)非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核苷酸序列5 植物的組織培養(yǎng)（理解）（1）克隆的

11、含義：克?。╟lone）是指通過(guò)無(wú)性生殖而產(chǎn)生的遺傳上均一的生物群，即具有完全相同的遺傳組成的一群細(xì)胞或者生物的個(gè)體?，F(xiàn)在則指?jìng)€(gè)體、細(xì)胞、基因等不同水平上的無(wú)性增殖物。（1）個(gè)體水平：在植物的無(wú)性增殖中，植物的發(fā)芽、插條等由同一個(gè)體通過(guò)無(wú)性生殖而增長(zhǎng)的個(gè)體群均被視為克隆。采用組織培養(yǎng)方法可使植物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)育成完全的個(gè)體（愈傷組織），采用這種方法得到的具有相同基因型的個(gè)體群，也被稱(chēng)為克??；在動(dòng)物的無(wú)性增殖中，典型的例子是采用核移植實(shí)驗(yàn)方法，把分化細(xì)胞的核移植到一個(gè)事先去核的蛙卵中，讓其發(fā)育并得到克隆蛙?？寺?dòng)物具有均一遺傳性質(zhì)，在研究環(huán)境條件對(duì)發(fā)育、分化的影響以及藥物的檢測(cè)方面都是重要的實(shí)驗(yàn)材料

12、。（2）細(xì)胞水平：由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)有絲分裂生成的細(xì)胞群叫克隆。但如果培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，則很容易引起染色體變異。（3）基因水平：利用基因重組操作技術(shù)，使特定的基因與載體結(jié)合，在細(xì)菌等宿主中進(jìn)行增殖，有可能得到均勻的基因群?？寺∈侵亟MDNA技術(shù)的核心部分。事實(shí)上，克隆技術(shù)現(xiàn)已被人們用來(lái)通過(guò)營(yíng)養(yǎng)方式繁殖病毒等微生物和植物的純種，從而保證了這些生物基因組的準(zhǔn)確連續(xù)性。細(xì)胞生物的克隆只需要營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，而基因的克隆則需要某種載體復(fù)制子、特定的寄主細(xì)胞和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基。（2）植物細(xì)胞全能性的含義：生物的任何一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛力。原因：細(xì)胞中含有本物種全部的遺傳信息（3）植物組織培養(yǎng)的概念：從植物體分

13、離出符合需要的組織.器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。（4）植物組織培養(yǎng)過(guò)程：取外植體（離體的器官、組織、細(xì)胞），注意要消毒（可用次氯酸鈉、無(wú)菌水處理，在超凈工作臺(tái)上操作）；將外植體接種到培養(yǎng)基，并封口（培養(yǎng)基成分：有機(jī)物、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、水、礦質(zhì)元素、瓊脂）；通過(guò)脫分化，形成愈傷組織（挑選出沒(méi)有被污染的）；進(jìn)行轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，進(jìn)行再分化（生長(zhǎng)素濃度較高利于生根，細(xì)胞分裂素濃度較高利于生芽）；一段時(shí)間后誘導(dǎo)出試管苗；移栽到大田。注意：整個(gè)過(guò)程要進(jìn)行無(wú)菌操作愈傷組織細(xì)胞的特點(diǎn)：排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度

14、液泡化的薄壁細(xì)胞。脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程。再分化：產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根、芽等器官。（5）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：去除細(xì)胞壁（用纖維素酶和果膠酶）得到原生質(zhì)體，誘導(dǎo)原生質(zhì)體間的融合（方法：離心、振動(dòng)、電激、聚乙二醇），形成雜種細(xì)胞并再生出細(xì)胞壁，通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到雜種植株。意義：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙（通過(guò)基因工程技術(shù)也可以克服生殖隔離）（6）植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用：A 植物繁殖微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖作物脫毒：采用莖尖組織培養(yǎng)來(lái)除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒極少或沒(méi)有）人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的

15、胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，不受季節(jié)的限制；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸B 作物新品種培育單倍體育種：a過(guò)程：植株（AaBb）通過(guò)減數(shù)分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四種類(lèi)型）；對(duì)花粉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)（技術(shù)是植物組織培養(yǎng)）；得到單倍體植株；對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素處理；得到了正常的純合二倍體植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類(lèi)型）。b 優(yōu)點(diǎn)：明顯縮短育種年限C 突變體利用：在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體，通過(guò)從有用的突變體中選育出新品種（如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體）D 細(xì)胞產(chǎn)物的生產(chǎn)：通過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)

16、行組織培養(yǎng)，從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的細(xì)胞產(chǎn)物。6 動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆（識(shí)記）（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程：取出組織剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞；用培養(yǎng)液（含有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、血清、血漿；注意與植物培養(yǎng)基成分的區(qū)別）稀釋制成細(xì)胞懸液，在培養(yǎng)瓶中適宜條件下培養(yǎng)。注意在此過(guò)程中的相關(guān)概念：細(xì)胞貼壁：懸液中分散的細(xì)胞帖附在瓶壁上。細(xì)胞的接觸抑制：細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。（癌細(xì)胞無(wú)）原代培養(yǎng)：動(dòng)物組織消

17、化后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞要重新用胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖細(xì)胞株：原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10到50代左右，這種傳代細(xì)胞叫細(xì)胞株（遺傳物質(zhì)未改變）細(xì)胞系：有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱(chēng)細(xì)胞系（遺傳物質(zhì)已改變）（3）培養(yǎng)條件：無(wú)菌、無(wú)毒；有營(yíng)養(yǎng)（放在培養(yǎng)基中）；溫度和pH值（分離細(xì)胞用胃蛋白酶為什么不行？）；氣體環(huán)境（CO2維持培養(yǎng)液pH）。（4）應(yīng)用：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體都可以借助動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)，另外，基因工程也離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)（當(dāng)受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí)）。（5）動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念：將動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移入已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)

18、胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。哺乳動(dòng)物核移植分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。注：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易；而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。細(xì)胞分化程度：體細(xì)胞生殖細(xì)胞受精卵； 細(xì)胞全能性：受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞（6）動(dòng)物細(xì)胞核移植的過(guò)程：高產(chǎn)奶牛（提供體細(xì)胞）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)；同時(shí)采集卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減二分裂中期的卵母細(xì)胞，去核（顯微操作）注：為什么要用卵細(xì)胞？它可以提供充足的營(yíng)養(yǎng)；操作簡(jiǎn)便；細(xì)胞質(zhì)不會(huì)抑制細(xì)胞核全能性的表達(dá)；將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞；通過(guò)電刺激使兩細(xì)胞融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎；將胚胎移入受體（代

19、孕）母牛體內(nèi)；生出與供體奶牛遺傳基因相同的犢牛（7）應(yīng)用：促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；保護(hù)瀕危物種；可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)珍貴醫(yī)用蛋白；體外培育組織、器官用于組織器官的移植7 細(xì)胞融合與單克隆抗體（識(shí)記）（1）動(dòng)物細(xì)胞融合概念：是兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。（2）原理：與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同；植物原生質(zhì)體融合的原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性；動(dòng)物細(xì)胞融合的原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性（3）基本過(guò)程：不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行融合方法：滅活的病毒、PEG、電激等；形成融合細(xì)胞；再使之進(jìn)行有絲分裂后，得到兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞。（4）特點(diǎn)：雜交細(xì)胞可以具備原先兩種細(xì)胞的特點(diǎn)，突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣

20、雜交成為可能。（5）總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物細(xì)胞融合的異同（6）應(yīng)用：?jiǎn)慰寺】贵w的制備（解決了獲得的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差的問(wèn)題）（7）單克隆抗體的制備過(guò)程：對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠產(chǎn)生了效應(yīng)B細(xì)胞）；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提?。淮偈顾鼈兗?xì)胞融合注：融合的結(jié)果是有很多不符合要求的；如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等，所以要進(jìn)行篩選；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞特點(diǎn)是能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細(xì)胞；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)

21、液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體。（8）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可能大量制備。（9）實(shí)際應(yīng)用：作為診斷試劑，識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差別；用于治療疾病和運(yùn)載藥物，用于癌癥治療，可制成生物導(dǎo)彈。8 動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程（識(shí)記）（1）精子的發(fā)生：補(bǔ)充，精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂；變形過(guò)程中，細(xì)胞核為精子頭的主要部分，高爾基體發(fā)育為頂體，中心體演變?yōu)榫拥奈?，線粒體在尾基部形成線粒體鞘膜，其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。線粒體為精子運(yùn)動(dòng)提供能量（2）卵子的發(fā)生：在胎兒時(shí)期，卵原細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂演變成初級(jí)卵母細(xì)胞被卵泡細(xì)胞包圍，減一分裂在排卵前后完成，形成次級(jí)卵母細(xì)胞和第

22、一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精；減二分裂是在受精過(guò)程中完成的。（3）受精：精子獲能（在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi)）；卵子的準(zhǔn)備（排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減二中期才具備受精能力）；受精階段卵子周?chē)慕Y(jié)構(gòu)由外到內(nèi)：放射冠、透明帶、卵黃膜，a頂體反應(yīng)：精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，穿越放射冠。b透明帶反應(yīng)：頂體酶可將透明帶溶出孔道，精子穿入，在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來(lái)精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)它是防止多精子入卵受精的第一道屏障；c卵黃膜的封閉作用：精子外膜和卵黃膜融合，精子入卵后，卵黃膜會(huì)拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過(guò)程它是防止多精子入卵受精的第二道屏障；精子尾部脫落，原有核膜破裂形成雄原核，同時(shí)卵

23、子完成減二分裂，形成雌原核注意：受精標(biāo)志是第二極體的形成；受精完成標(biāo)志是雌雄原核融合成合子。（4）胚胎發(fā)育：a卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；b桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞；c囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化；d原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度9 胚胎工程的理論基礎(chǔ)（識(shí)記）（1）胚胎工程的概念及

24、技術(shù)手段：對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。（2）體外受精屬有性生殖過(guò)程：a卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)對(duì)體型小的動(dòng)物用促性腺激素處理，從輸卵管沖取卵子（可直接受精）；對(duì)體型大的動(dòng)物從卵巢中采集卵母細(xì)胞（要在體外培養(yǎng)成熟）b精子的采集假陰道法、手握法和電刺激法；獲能對(duì)嚙齒動(dòng)物、兔、豬等的精子用培養(yǎng)法（放入人工配制的獲能液中）；對(duì)牛、羊等精子用化學(xué)法（放在肝素或鈣離子載體溶液中）（3）胚胎的早期培養(yǎng)：a培養(yǎng)液成分：無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等注意與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分的比較；b當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，可將其取

25、出向受體移植或冷凍保存。（4）胚胎移植：a概念：將雌性動(dòng)物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后代的過(guò)程，通過(guò)轉(zhuǎn)基因、核移植、體外受精獲得的胚胎必須移植給受體才能獲得后代。b優(yōu)勢(shì)：可以充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖潛力，縮短供體本身的繁殖周期。c胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理；早期胚胎形成后處于游離狀態(tài)，為胚胎的收集提供可能；受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受影響。d胚胎移植的程序：對(duì)供、

26、受體母牛進(jìn)行選擇，用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理；對(duì)供體母牛用激素做超數(shù)排卵處理；選擇同種優(yōu)秀公牛配種有性生殖過(guò)程；對(duì)胚胎進(jìn)行收集此時(shí)胚胎處于游離狀態(tài)；對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查此時(shí)胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚；胚胎移植或冷凍保存；檢查受體母牛是否受孕；產(chǎn)下胚胎移植的犢牛。（5）胚胎分割：a概念：用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)可看作是動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆b基本過(guò)程：選擇良好的桑椹胚或囊胚移入培養(yǎng)皿中，用分割針或分割刀片將其切開(kāi)，吸出其中的半個(gè)胚胎注入透明帶中或直接移植給受體。注意：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育10 胚胎干細(xì)胞的移植（識(shí)記）（1）胚胎

27、干細(xì)胞的含義：由早期胚胎囊胚或原始性腺胎兒中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞，又叫ES或EK細(xì)胞。（2）特征：形態(tài)上體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；功能上具有發(fā)育的全能性，即可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。體外培養(yǎng)下，ES細(xì)胞可以只增殖不分化（3）應(yīng)用：用于治療人類(lèi)疾病，如利用ES細(xì)胞誘導(dǎo)其分化成新的組織細(xì)胞特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)。11 胚胎工程的應(yīng)用（理解）包含胚胎移植、胚胎分割等方面的內(nèi)容，詳見(jiàn)9、1012 轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題（識(shí)記）（1）轉(zhuǎn)基因成果：見(jiàn)考點(diǎn)3（2）對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的疑問(wèn)：擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)即過(guò)一段時(shí)間后才出現(xiàn)不良效應(yīng)；擔(dān)心出現(xiàn)新的過(guò)敏原；擔(dān)心營(yíng)養(yǎng)成分改變等實(shí)質(zhì)性等同：指在轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中只要某些重要成分沒(méi)有發(fā)生改變，就可以認(rèn)為與天然品種“沒(méi)有差別”，因此不必再進(jìn)行安全性檢測(cè)。食品安全可能破壞區(qū)域生態(tài)平衡；可能成為“入侵的外來(lái)物種”威脅生態(tài)系統(tǒng)中的其他生物；例如可能重組中對(duì)人類(lèi)或其他生物的病原體；抗除草劑基因可能是雜草成為“超級(jí)雜草”。生物安全重組微生物的中間產(chǎn)物可能會(huì)造成二次污染；轉(zhuǎn)基因中的某些有毒蛋白或過(guò)敏蛋白可能通過(guò)食物鏈進(jìn)入動(dòng)物或人體內(nèi)。環(huán)境