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文檔簡介
1、畜牧微生物學(xué)講義主旨動(dòng)物科學(xué)專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)微生物教研組陸英杰E-mail:jieyinglu05QQ:919220436; Tel零一二年三月緒論(1學(xué)時(shí)) 微生物(microorganism)是指個(gè)體微小,通常須借助顯微鏡才能看見的生物類群的總稱。 一、微生物的類型與基本特征 按形態(tài)、結(jié)構(gòu)、繁殖等特征,可將微生物分為細(xì)菌、螺旋體、霉形體(又稱支原體)、立克次體、衣原體、真菌、病毒、藻類和原生動(dòng)物。按核的類型和個(gè)體形態(tài),微生物界又劃分為三大類型。 1、原核細(xì)胞型:個(gè)體為單細(xì)胞,含DNA和RNA,DNA分子在細(xì)胞漿中未形成細(xì)胞核結(jié)構(gòu)。原核細(xì)胞微生物包括細(xì)菌、螺旋體、霉形
2、體、立克次體和衣原體。2、真核細(xì)胞型:個(gè)體為單細(xì)胞或多細(xì)胞,含DNA和RNA,DNA分子在完整的細(xì)胞核內(nèi)。真菌、藻類和原生動(dòng)物屬于此類型。3、非細(xì)胞型:個(gè)體不呈細(xì)胞結(jié)構(gòu),僅含一種核酸,DNA或RNA,與蛋白質(zhì)構(gòu)成簡單的顆粒,可以繁殖,但不能獨(dú)立生存,必須在宿主細(xì)胞內(nèi)才能增殖。病毒屬于這一類型。二、微生物與人類、動(dòng)物、植物的關(guān)系 微生物個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡單,種類繁多,分布廣泛,繁殖很快,與人類、動(dòng)物、植物的關(guān)系十分密切。 1、微生物與自然界中的物質(zhì)循環(huán)轉(zhuǎn)化 2、微生物與人類食品、動(dòng)物飼料 3、微生物與醫(yī)藥 4、微生物與科學(xué)研究 三、微生物學(xué) 微生物學(xué)(microbiology)是研究微生物形態(tài)、結(jié)
3、構(gòu)、生理、遺傳變異、生態(tài)分布、分類,以及與人類、動(dòng)物、植物相又關(guān)系的科學(xué)。原來的微生物學(xué)包括了免疫學(xué)、原蟲學(xué),隨著研究系統(tǒng)的深入與發(fā)展,原蟲學(xué)已列入寄生蟲學(xué)科,免疫學(xué)已獨(dú)立成為門學(xué)科。 1、初期形態(tài)學(xué)階段2、生理學(xué)與免疫學(xué)發(fā)展階段3、現(xiàn)代微生物學(xué)發(fā)展階段 四、畜牧微生物學(xué) 第一章 原核細(xì)胞微生物(5學(xué)時(shí))第一節(jié) 細(xì)菌一、細(xì)菌的大小測量細(xì)菌大小常用的單位是:微米(mivrometer,µm) 1/µm=1/1000mm二、細(xì)菌的外形及排列 根據(jù)外形將細(xì)菌分為三類:球菌、桿菌和螺旋狀菌。 細(xì)菌裂殖后,形成不同排列,是分類、鑒定的依據(jù)。(一) 球菌(coccus) 雙球菌(Dip
4、lcoccus)鏈球菌(Streptococcus)四聯(lián)球菌(Tetracoccus)八疊球菌(Sarcina)葡萄球菌(Staphylococcus)(二)桿菌(bacterium,bacillus)外形:正圓柱形(端);球桿菌;分枝桿菌;棒狀/長絲排列:單桿菌;雙桿菌(Diplobacilli); 鏈桿菌(strepto)也有呈現(xiàn)叢狀或柵欄狀,如馬棒狀桿菌。(三) 螺旋菌( Spiral form bacteria )呈彎曲或螺旋狀的圓柱形,兩端圓或尖突。分為二種:弧菌(Vibrio)一個(gè)彎曲呈逗點(diǎn)形;螺菌( Spirillum )兩個(gè)以上的彎曲,呈螺旋狀。細(xì)菌的形狀和排列,也受環(huán)境和培養(yǎng)
5、條件影響,在鏡檢觀察時(shí)應(yīng)予注意。第二節(jié) 細(xì)菌的構(gòu)造一、 基本構(gòu)造(一) 細(xì)胞壁(Cell wall)細(xì)胞壁在細(xì)菌細(xì)胞外層,是一層透明、堅(jiān)韌、有一定彈性的膜。可占菌體干重的1040%。具有直徑110nm的微孔,可容直徑為1nm的可溶性物質(zhì)通過。細(xì)胞壁的主要功能:保持細(xì)菌的一定外形和保護(hù)細(xì)菌免受外界的損害;具有相對通透性的膜,選擇性分子篩的屏障作用。革蘭氏染色:應(yīng)用革蘭氏染色法染色,由于反應(yīng)不同,可將細(xì)菌分為G+和G-菌兩大類。他們之間細(xì)胞壁組成和結(jié)構(gòu)是有區(qū)別的。革蘭氏陽性菌: 壁磷酸 磷壁酸 細(xì)胞壁 (teichoic acid) 膜磷酸壁1535nm厚 肽聚糖 4060%(有的則達(dá)80nm)
6、(peptidoglycon)1550層多糖、蛋白質(zhì)等脂類(分支桿菌) 蠟質(zhì)/分枝桿菌酸(mycolic acid) 革蘭氏陰性菌: 脂多糖 脂類A外胞壁 磷脂 多糖 蛋白質(zhì) 脂蛋白內(nèi)胞壁 肽聚糖革蘭氏染色反應(yīng)機(jī)理 與肽聚糖和脂類相關(guān);分枝桿菌抗酸性;與抗生素作用相關(guān)。(二)胞漿膜 (cytoplasmic memberane) 三層結(jié)構(gòu):內(nèi)、外兩層電子致密層,中間一層電子透明層。整個(gè)厚度約在510nm之間,占菌體干重約10%。 組成: 脂類 20%30% 蛋白質(zhì) 55%75% 液態(tài)鑲嵌結(jié)構(gòu)碳水化合物 2%功能: 主要滲透屏障,選擇地調(diào)節(jié)內(nèi)外環(huán)境物質(zhì)的交換;物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)境的傳遞(主動(dòng)作用);對菌
7、體是有保護(hù)性作用,維持完整結(jié)構(gòu).(三)核體(Nuclear apparatus)其分裂方式是簡單直接分裂,分裂時(shí)核質(zhì)也一分為二。 質(zhì)粒(plasmid):獨(dú)立于染色體外的,能夠自我復(fù)制的的雙鏈閉合DNA內(nèi)含一些不是生命所必需的基因如抗菌性基因(四) 細(xì)胞槳(cytoplasm)主要成分是水、蛋白質(zhì)、脂類、多糖、核酸和少量的無機(jī)鹽類。細(xì)胞槳是細(xì)菌營養(yǎng)物質(zhì)代謝以及合成核酸和蛋白質(zhì)的場所,在其中含有多種系統(tǒng),還有核糖體等內(nèi)含物。二、特殊構(gòu)造(一)莢膜(capsule)有些細(xì)菌在生活過程控中,在細(xì)胞壁外面產(chǎn)生一種粘液性的物質(zhì),包圍整個(gè)菌體,稱為菌膜。當(dāng)多個(gè)細(xì)菌的莢膜物質(zhì)融成膠狀物,內(nèi)含有細(xì)菌細(xì)胞時(shí),則
8、稱之為菌膠團(tuán)(zoogleoa)。莢膜不易著色,、需用特殊染色法染色,其厚度nm以上。有些細(xì)菌其外圍有一層薄層圍繞,厚度在nm以下,為微莢膜(icrocapsule)。也有一些細(xì)菌能產(chǎn)生類似莢膜的蔬松粘液層(loose slime lager),是菌體的分泌物。莢膜的作用莢膜可以保護(hù)細(xì)菌免受干燥和不良環(huán)境因素的影響;在機(jī)體內(nèi)的細(xì)菌莢膜可以抵抗吞噬和消除抗體作用;莢膜也是營養(yǎng)物質(zhì)的貯藏所和廢物排出的地方;莢膜是多肽或多糖物質(zhì),具有抗原化具有種和型特異化。(二)鞭毛(flageclum)大多數(shù)弧菌、螺菌、許多桿菌和個(gè)別球菌,有實(shí)出于菌體表面的細(xì)長絲狀物,稱為鞭毛。分為一端單毛菌;二端毛菌、叢毛菌和
9、周毛菌。鞭毛是細(xì)菌運(yùn)動(dòng)器官,其有規(guī)律地收縮,引起運(yùn)動(dòng);鞭毛的主要成分是一種單純的蛋白質(zhì),其有具有抗原性,稱為鞭毛或抗原;鞭毛的有無、數(shù)目,排列方式,具有種的特征,是鑒定細(xì)菌主要依據(jù)。 (三)柔毛(pilus fimb xia)一些革蘭氏陰性菌和少數(shù)革蘭氏陽性菌,在菌體上生長有一種比鞭毛數(shù)量多,細(xì)、直、短的毛發(fā)狀細(xì)絲,稱為柔毛,也有菌毛,傘毛,纖毛。直徑nm,長0.21.5nm有的長達(dá)um。一普柔毛:細(xì)、短、多每個(gè)細(xì)菌有50400條,周身排列;性柔毛:較長、粗、每個(gè)細(xì)菌一般不超過um。作用及功能:有普通柔毛可以分為其附著于動(dòng)植物細(xì)胞上,與致病性有關(guān);柔毛是菌體的吸附部位;性柔毛在雌雄細(xì)菌接合過程
10、中,是質(zhì)?;蚋郊芋w的通道;柔毛是一種空心的蛋白質(zhì)管,具有抗原性。(四)芽胞(孢)(spore)一部份桿菌、個(gè)別的球菌弧菌和螺旋菌,在生長發(fā)育的某一階段,可以在菌體內(nèi)形成一內(nèi)生長的孢子,稱為芽胞。帶有芽胞的菌體稱為芽胞體(sporangium);未形成芽胞的菌體稱之為繁殖體營養(yǎng)體(vegetative form).芽胞一般呈圓形,、橢圓形或圓柱形,根據(jù)芽胞的位置分為幾種類型:中間芽胞;偏端芽胞,末端芽胞;游離芽胞。細(xì)菌的芽胞具有較厚的芽胞壁和多層的芽胞膜,結(jié)構(gòu)堅(jiān)貢,含水量少,代謝極低,折光性強(qiáng)。耐高溫,干燥,滲透壓和化學(xué)藥品。芽胞抵抗外界不良因素和環(huán)境條件、保存生命物一種休眠狀態(tài)構(gòu)造。細(xì)菌能否形
11、成芽胞以及芽胞形狀、大小、位置等具有的特征,在鑒定細(xì)菌上有意義。第二節(jié) 其他原核微生物1其他原核微生物:支原體、螺旋體、立克次氏體、衣原體、放線菌1.1支原體:(霉形體)是一類介于細(xì)菌和病毒之間,能獨(dú)立生活的最小、最簡單的原核生物結(jié)構(gòu)形態(tài)特征:原核細(xì)胞,具有DNA和RNA兩種核酸,但無細(xì)胞壁,(與細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌相區(qū)別)所以細(xì)胞柔軟且形態(tài)多變,具有高度的多性性?;拘螒B(tài)為球形、絲狀、分枝狀。革蘭氏染色陰性,但不宜著色,姬姆薩氏染色較好,呈淡紫色。培養(yǎng)特性:營養(yǎng)要求高,必須在培養(yǎng)基中加入膽固醇、血清、腹水、酵母侵液等特殊成分。需氧或兼性厭氧,pH7.8-8.0,培養(yǎng)溫度37。在血清肉湯中培養(yǎng)呈乳光
12、樣輕度混濁,固體培養(yǎng)基上菌落圓形、邊緣整齊、透明、表面光滑、菌落中心致密、隆起,邊緣薄圓,整個(gè)菌落外觀似“油煎蛋樣”或乳頭狀;在血液培養(yǎng)基上有-溶血。 繁殖方式:主要以二等分裂繁殖,有些以出芽和斷裂繁殖。 致病性:目前發(fā)現(xiàn)有80多種,對人、畜、禽等都有致病性。如:人的原發(fā)性非典型肺炎、牛羊的傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、雞慢性呼吸道病。牛的傳染性胸膜肺炎絲狀支原體(牛肺疫支原體),病原體存在于牛的肺組織、胸腔滲出液和氣管分泌物中。豬喘氣?。ㄘi地方流行性肺炎)豬肺炎支原體。病原體存在于病豬的肺組織、肺門淋巴結(jié)、縱隔淋巴結(jié)、氣管、鼻腔分泌物中。雞慢性呼吸道病禽敗血支原體微生物學(xué)診斷:1病料采集 2涂片
13、鏡檢:姬姆薩氏染色較好,呈淡紫色。 3分離培養(yǎng):根據(jù)不同的菌,選擇不同的培養(yǎng)基,如牛肺疫支原體在含8%-10%的動(dòng)物血清的培養(yǎng)基中生長;豬肺炎支原體必須在血清培養(yǎng)基中加入乳蛋白水解物或新鮮組織侵出液或酵母膏或氨基酸等;禽敗血支原體培養(yǎng)基中必須含有酪蛋白。 4血清學(xué)試驗(yàn)(生化試驗(yàn))1.2螺旋體:是一類介于細(xì)菌與原生動(dòng)物之間的原核單細(xì)胞微生物。(與細(xì)菌相似處是具有細(xì)菌細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu),二分裂繁殖;與原生動(dòng)物相似處是無鞭毛,但能快速運(yùn)動(dòng)。)形態(tài)結(jié)構(gòu):外形為螺旋形或波浪形,具有一個(gè)或多個(gè)完整的螺旋彎曲,長二纖細(xì),柔軟,菌體大小差異比較大。革蘭氏染色陰性,但不宜著色,姬姆薩氏染色或鍍銀染色法染色較好。繁殖
14、方式:以二等分裂繁殖,培養(yǎng)特性:需氧、厭氧、或兼性厭氧、一般人工培養(yǎng)不能成功,常為營腐生、共生、寄生。致病性:螺旋體的種類比較多,一般根據(jù)螺旋的數(shù)目、大小、兩螺旋的距離分類,大致有:螺旋體屬、脊螺旋體屬、密螺旋體屬、疏螺旋體屬、細(xì)螺旋體屬。但對人和動(dòng)物致病的比較少,1)豬痢疾密螺旋體:使斷奶仔豬發(fā)生痢疾(8-14周齡最常見)2)兔密螺旋體:兔梅毒的病原體,引起兔的慢性傳染病,主要通過交配接觸傳染,臨床特征是:外生殖器及顏面部的皮膚和粘膜發(fā)生炎癥、結(jié)節(jié)和潰瘍。3)細(xì)螺旋體鉤端螺旋體:引起人和動(dòng)物的鉤端螺旋體病。1.3立克次氏體:是一類介于細(xì)菌和病毒之間單細(xì)胞微生物。(于細(xì)菌形似處:細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)
15、、繁殖方式;病毒相似處:只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生)。形態(tài):多形性,一般多為求桿狀,在不同的發(fā)育階段在不同的宿主內(nèi)可出現(xiàn)不同的形態(tài)。革蘭氏染色陰性,但不宜著色,姬姆薩氏染色(藍(lán)色或紫色)或馬基維羅法染色(紅色)效果較好。致病性:一般寄生在節(jié)肢動(dòng)物的腸壁上皮細(xì)胞內(nèi),但不引起致病,排除體外可感染人和一般動(dòng)物 。一般動(dòng)物感染較輕或隱性感染。普氏立克次氏體致人斑疹傷寒(美國青年醫(yī)生立克次氏)、恙蟲病立克次氏體致人的恙蟲熱、貝氏柯克氏體致疑問熱(Q熱)、可厥氏體引起牛羊和野生動(dòng)物的心水病。1.4衣原體:是一類介于細(xì)菌和病毒之間單細(xì)胞原核微生物。在形態(tài)結(jié)果及生長要求方面與立克次氏體相似,所以在伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊中
16、把衣原體歸類到立克次氏體群。 形態(tài):革蘭氏染色陰性,球形或橢圓形,個(gè)體形態(tài)大小由兩種,小的叫原體,有高度傳染性,姬姆薩氏染色(紫色)或馬基維羅法染色(紅色);大的叫始體,是繁殖型,無傳染性,姬姆薩氏染色或馬基維羅法染色都為藍(lán)色。 繁殖:以二等分裂繁殖。 感染過程:原體通過胞飲作用侵入宿主細(xì)胞被宿主細(xì)胞胞漿莫包裹形成巨噬空泡原體在巨噬空泡內(nèi)發(fā)育成始體始體以二等分裂繁殖,反復(fù)分裂轉(zhuǎn)變成大量新的原體,原體堆積形成嗜堿性包涵體宿主細(xì)胞破裂放出原體原體再感染新的細(xì)胞。致病性:主要致病菌為:鸚鵡熱以原體:可引起人的鸚鵡熱、牛羊豬馬的鸚鵡熱病(特征:牛羊豬多發(fā)生關(guān)節(jié)炎、牛羊胎盤炎流產(chǎn)、牛腦脊髓炎)。第二章
17、真核細(xì)胞型微生物(2學(xué)時(shí)) 真菌進(jìn)行有性和無性繁殖。從外形上可分為酵母菌(Yeasts)、霉菌(Molds)和擔(dān)子菌(Basidomycetes)3大類群。第一節(jié) 真菌一、酵母菌酵母菌的細(xì)胞構(gòu)造酵母菌具有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu),有細(xì)胞壁、胞漿膜、細(xì)胞漿、細(xì)胞核及其他內(nèi)含物等。 (三)酵母菌的菌落特征單獨(dú)的酵母菌細(xì)胞是無色的,但在固體培養(yǎng)基上形成的菌菌,多數(shù)是乳白色,少數(shù)是黃色或紅色。菌落表面光滑、濕潤和黏稠,與某些細(xì)菌的菌落相似,但比細(xì)菌的菌落大而厚。酵母菌細(xì)胞生長在培養(yǎng)基表面,很容易將菌體挑起。有些酵母菌表面是干燥粉狀的,有些種培養(yǎng)時(shí)間長了,菌落呈皺縮狀,還有些種可以形成同心環(huán)等。(四)酵母菌的繁殖
18、酵母菌一般以無性繁殖為主。在無性繁殖中以出芽生殖為多見,個(gè)別為橫分裂。酵母菌通常不產(chǎn)生抱子,只有在一定條件下才產(chǎn)生孢子。1、芽殖:出芽生殖2、橫分裂(裂殖):無性繁殖3、子囊孢子形成:子囊孢子是是內(nèi)生孢子,它們的形成決定于酵母菌的種類。二、霉菌(一)霉菌菌絲形態(tài)結(jié)構(gòu)菌絲主要由孢子萌發(fā)生長而成。菌絲頂端延長,旁側(cè)分枝?;ハ嘟诲e(cuò)成團(tuán),形成菌絲體。菌絲的細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本上類似酵母菌細(xì)胞,都具有細(xì)胞壁、胞漿膜、細(xì)胞核、細(xì)胞漿及其內(nèi)含物。霉菌的菌絲分有隔菌絲和無隔菌絲兩種。霉菌的菌絲功能也有了分工,既有伸入固體培養(yǎng)基內(nèi)或蔓生于固體培養(yǎng)基表面,具有攝取營養(yǎng)物質(zhì)功能的菌絲,稱為營養(yǎng)菌絲或基質(zhì)菌絲;亦有伸向空中的
19、菌絲,稱為氣生菌絲。氣生菌絲上能生出各種孢子進(jìn)行繁殖的,稱為繁殖菌絲。(二)霉菌的菌落特征 霉菌的菌落比細(xì)茵、酵母菌的都要大,常常是絨毛狀、絮狀和蜘蛛網(wǎng)狀等。有些霉菌在固體培養(yǎng)基上能呈擴(kuò)散性生長,有的則有局限性。菌落最初往往是淺色或白色,當(dāng)菌落上長出各種顏色的孢子后,菌落便相應(yīng)地呈黃、綠、青、黑、橙等各色。有的霉菌由于能產(chǎn)生色素,使菌落背面也帶有顏色,或進(jìn)一步擴(kuò)散到培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基變色。(三)霉菌的繁殖方式 1、無性繁殖:芽孢子、節(jié)孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子 2、有性繁殖:合子、卵孢子、接合孢子和子囊孢子3、霉菌孢子的抵抗力及其發(fā)芽:霉菌孢子對熱、射線、藥物、滲透壓、干燥等的抵抗力
20、比其營養(yǎng)細(xì)胞要強(qiáng),比細(xì)菌芽胞弱。(四)幾種常見的霉菌 青霉呈掃把狀,曲霉菌呈燒瓶狀。三、真菌的培養(yǎng)(一)真菌的生長繁殖條件 1、真菌生長繁殖的基本營養(yǎng)需要:真菌絕大多數(shù)為異養(yǎng)菌,它們不僅能利用單糖和雙糖,而且也能利用淀粉、纖維素、木質(zhì)素、甲殼質(zhì)等多糖以及多種有機(jī)酸。 2、溫度:大多數(shù)真菌最適宜的生長溫度范圍為2030。3、氧氣:4、濕度與滲透壓5、pH:大多數(shù)真菌喜生長在酸性環(huán)境,它們在pH36之間生長良好,而在pH1.510.0之間也可以生長。(二)真菌的分離真菌的酵母細(xì)胞、菌絲和孢子(無性或有性孢子),都可以生長成新的個(gè)體。真菌的分離方法有菌絲分離法、組織分離法和孢子分離法3類。(三)真菌
21、的培養(yǎng) 真菌的培養(yǎng)分固體培養(yǎng)(分離鑒定)和液體培養(yǎng)(淺層培養(yǎng)和深層培養(yǎng))第三章 非細(xì)胞型微生物-病毒(3學(xué)時(shí))病毒( Virus):是一類非細(xì)胞形態(tài)的只能在特殊的宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制的最小微生物。病毒的個(gè)體稱為病毒顆?;虿《咀?。絕大多數(shù)病毒只有在電鏡下可看見其大小和形態(tài),但一些較大的病毒顆粒(大于150nm)經(jīng)染色后可再光學(xué)顯微鏡下看見(原生小體)。病毒與其它微生物的區(qū)別:1)病毒不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。其它微生物具有細(xì)胞的完整或部分結(jié)構(gòu)。2)病毒只含一種核酸RNA或DNA,其它微生物同時(shí)具有兩種核酸。3)病毒依靠核酸復(fù)制,而其它微生物是核酸和其它成分一起參與繁殖。4)病毒缺乏完整的酶系統(tǒng),不能單獨(dú)進(jìn)行
22、物質(zhì)代謝,不能在無生命的培養(yǎng)基上生長,必須寄居于一定種類的活細(xì)胞內(nèi)才能生長繁殖。5)病毒的核酸具有感染性,其它微生物在整個(gè)生活過程中都由細(xì)胞結(jié)構(gòu)組成,含有細(xì)胞膜和內(nèi)部結(jié)構(gòu)的獨(dú)立代謝系統(tǒng)。6)病毒對抗生素不敏感(利福平可抑制痘病毒繁殖)。第一節(jié) 病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu) (一)病毒的大?。簞?dòng)物病毒顆粒多呈球狀或近似球狀,少數(shù)呈桿狀、絲狀、彈狀或磚塊狀。病毒顆粒很少,測量單位為納米(nm)(1nm=1/1000um)。最大的病毒子為300nm(痘病毒類);最小的病毒為17nm( 圓環(huán)病毒)。大多數(shù)病毒都能通過細(xì)菌濾器。(二)病毒子的形態(tài)結(jié)構(gòu):病毒的形態(tài)采用負(fù)染色技術(shù)在電子顯微鏡下可清晰看見。病毒的形態(tài)與結(jié)
23、構(gòu)有關(guān)(囊膜):有囊膜的動(dòng)物病毒:1)磚形:(痘病毒)2)彈狀病毒:形態(tài)象子彈頭,一端較圓,一端較平,呈長圓形(狂犬病、水泡性口炎)3)近乎圓形無囊膜的病毒:1)近似圓形:二十面體立體對稱的核衣殼2)圓柱形:螺旋對稱的核衣殼病毒顆粒又稱病毒子(virion)。病毒顆粒結(jié)構(gòu)為中心為一團(tuán)核酸,稱為芯髓,它含有病毒的基因組及遺傳信息。核酸的外周包有蛋白質(zhì)外殼,稱為衣殼。衣殼是由一定數(shù)量的殼粒規(guī)則排列成單層或雙層。殼粒是由單個(gè)或多個(gè)多肽分子構(gòu)成。殼粒的排列有的整齊排列呈二十面體立體對稱型,有的圍繞核酸呈螺旋對稱型,也有的排列不規(guī)律呈復(fù)合對稱型。衣殼具有以下功能:1)保護(hù)著基因組以對抗環(huán)境中的核酸酶或其
24、他破壞性因素;2)介導(dǎo)病毒核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞;3)具有抗原性,能引起免疫應(yīng)答。第二節(jié) 病毒子的化學(xué)組成一、核酸:一般情況下病毒核酸與其它生物的核酸相似, DNA是雙鏈的、線狀的、環(huán)狀的,RNA是單鏈的、有些是連續(xù)的單分子RNA、有些是分節(jié)段的單分子RNA,(細(xì)小病毒、是單鏈DNA,呼腸孤病毒是雙鏈RNA)。核酸的功能:病毒的核酸無論是RNA或DNA都含有病毒的基因組,攜帶遺傳信息,控制病毒的遺傳變異、增值和對宿主的感染性(裸露核酸的感染性:核酸可用化學(xué)的方法叢病毒顆粒中取出,如果把取出的核酸進(jìn)入易感細(xì)胞,表現(xiàn)出與完整病毒一樣的感染性,但感染力低于病毒顆粒的103-106倍。在DNA病毒,除痘病毒
25、和部分細(xì)小病毒外,幾乎都具有感染性;對RNA病毒而言,只有當(dāng)基因組是一個(gè)核酸片段且病毒RNA本身可以呈現(xiàn)mRNA的作用時(shí)才具有感染性:小核糖核酸病毒、環(huán)狀病毒、披膜病毒、冠狀病毒。二、蛋白質(zhì)病毒的蛋白質(zhì)主要是結(jié)構(gòu)蛋白包括衣殼蛋白、囊膜蛋白、基質(zhì)蛋白和酶。1、衣殼蛋白是包裹在核酸外面的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)以殼類形式存在,殼粒一般由1-6個(gè)相同的多肽分子鏈構(gòu)成,不同部位的殼粒的多肽組成不同。殼粒的多肽分子對稱排列,圍繞著核酸形成一層保護(hù)外殼。由于核酸的結(jié)構(gòu)和形態(tài)不同,多肽分子的排列也不同,主要形成兩種主要對稱形式:(1)螺形對稱:核酸堅(jiān)韌或柔軟,卷曲,盤繞成團(tuán)或彈簧樣,呈螺旋狀對稱。如:正粘膜病毒、副粘
26、膜病毒、彈狀病毒等(2)二十面體對稱型:核酸濃集在一起,形成球形或近似球形。(動(dòng)物病毒多呈二十面體對稱,皰疹病毒、腺病毒等)(3)復(fù)合對稱型:排列復(fù)雜。如:痘病毒、噬菌體等病毒蛋白質(zhì)的功能:(1)形成保護(hù)性的外殼 (2)與病毒的構(gòu)型和抗原性有關(guān) (3)入侵細(xì)胞 (4)參與核酸的轉(zhuǎn)錄、調(diào)控、加工和復(fù)制過程 (5)特殊功能的病毒蛋白,如:血凝素,能凝集某些動(dòng)物的紅細(xì)胞,稱為紅細(xì)胞凝集作用(鑒定)。2、囊膜蛋白:在衣殼的外面包裹著一層結(jié)構(gòu)復(fù)雜的包膜,是病毒成熟以后,從宿主細(xì)胞排除時(shí),由細(xì)胞的胞漿膜、或核膜包繞而成,一般由脂類(從細(xì)胞中直接獲得)、糖類、蛋白質(zhì)(病毒自身編碼的)組成。 三、脂類 四、糖
27、類第三節(jié) 病毒的抵抗力 干燥物理因素 低溫 高溫 射線 甘油 甲醛化學(xué)因素 PH 脂溶劑 蛋白質(zhì)溶劑第四節(jié) 病毒的增殖與人工培養(yǎng) 所有動(dòng)物病毒的增殖都涉及到:吸附、穿入、脫殼、裝配、成熟和釋放的過程。所有的病毒增殖時(shí)都必須通過mRNA為中心,將其分為6大類:1、雙股DNA病毒 2、單股DNA病毒 3、雙股RNA病毒4、正股RNA病毒5、負(fù)股RNA病毒6、反轉(zhuǎn)錄病毒一、病毒的吸附第一步是靜電吸引、pH值、陽離子、是屬于非特異的。第二步是與特異性受體結(jié)合:細(xì)胞上的受體數(shù)目:104105。纖突:血凝素纖突:HI和HA;神經(jīng)氨酸酶纖突:微叢或多肽。二、病毒的穿入和脫殼病毒的穿入與吸附是一個(gè)連續(xù)過程,侵
28、入(穿入)是一個(gè)依靠能量的過程。病毒侵入細(xì)胞有3種方式:病毒直接轉(zhuǎn)入胞漿;細(xì)胞吞飲病毒;病毒囊膜與細(xì)胞膜融合。(一)無囊膜病毒1、吞飲作用:病毒首先被套吞入,進(jìn)入吞噬泡,再與溶酶體融合,脫衣殼(蛋白酶作用),暴露基因組。痘病毒脫殼分進(jìn)一步,呼腸孤病毒內(nèi)層衣殼沒有脫去。2、結(jié)構(gòu)改變:病毒吸附于細(xì)胞后,衣殼就開始解體,失去完整性。如小RNA病毒。主要是受體使殼粒重新安排。隨后病毒被吞噬或直接進(jìn)入細(xì)胞,將基因組釋放到胞漿中。3、直接侵入:病毒吸附于細(xì)受體后,直接穿入細(xì)胞膜,衣殼被細(xì)胞蛋白酶所消化,釋放核酸,如腺病毒。(二)有囊膜病毒有些有囊膜病毒在吸附后囊膜與細(xì)胞膜融合,核衣殼侵入細(xì)胞漿,而完成脫殼
29、程序,如副粘病毒和皰診病毒,這種情況下細(xì)胞膜上有病毒抗原。也可經(jīng)過吞噬作用而侵入細(xì)胞,如彈狀病毒和披膜病毒。三、病毒成分的合成吸附于細(xì)胞上的病毒通常迅速消失。這說明吸附病毒很快侵入細(xì)胞,并迅速融裂解。從脫殼開始直到子代病毒出現(xiàn),這一段時(shí)間稱為隱藏期。此期內(nèi)是病毒增殖過程中最主要的階段,是病毒成分生物合成的活躍時(shí)期,主要是基因組復(fù)制,mRNA轉(zhuǎn)錄、病毒蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)譯等。四、病毒的成熟和釋放病毒的成熟就是核酸與衣殼裝配在一起,形成病毒子;有囊膜的病毒在外面還要加上一層囊膜,形成成熟的病毒子。五、病毒的人工培養(yǎng)分離培養(yǎng):動(dòng)物接種原動(dòng)物/實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雞胚接種尿囊腔、卵黃囊、尿囊膜、羊膜腔等 細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)
30、胞 cpe觀察空斑 二倍體細(xì)胞 技術(shù)克隆/擴(kuò)增 傳代細(xì)胞 組織塊培養(yǎng)腸管、氣管環(huán)等第五節(jié) 病毒的致病作用與干擾現(xiàn)象一、 干擾素的概念二、 干擾情況:同種異型病毒之間產(chǎn)生干擾,異型病毒之間產(chǎn)生干擾第六節(jié) 噬菌體感染細(xì)菌、支原體和螺旋體的病毒統(tǒng)稱為噬菌體(phage),它們又分別稱為細(xì)菌噬菌體(bacteriophage)和支原體噬菌體(mycoplasmaphage)。噬菌體形態(tài)似蝌蚪狀,但不同類型噬菌體的形態(tài)構(gòu)造亦有不同。有些具一個(gè)正20面體的頭和一條長而能收縮的尾,如大腸桿菌噬菌體T4(圖示);有些尾部不能收縮,有些只有短尾,有些無尾,有些則整個(gè)呈長絲狀。噬菌體的核酸,多數(shù)為DNA,少數(shù)為R
31、NA。噬菌體在宿主菌體內(nèi)的復(fù)制增殖過程與動(dòng)物病毒相似。增殖后能使菌細(xì)胞裂解的噬菌體稱為烈性噬菌體。在固體培養(yǎng)基上生長的菌體感染了烈性噬菌體,可因菌體被裂解出現(xiàn)噬菌斑;在液體培養(yǎng)基中生長的菌體感染烈性噬菌體后,原來混濁的菌液可逐漸變?yōu)榍辶痢S械氖删w感染菌體后,并不復(fù)制也不使菌細(xì)胞裂解,而是將其核酸整合到菌細(xì)胞染色體中去,隨著細(xì)菌的繁殖,噬菌體的核酸也復(fù)制遺傳下去,可能到某一世代,才使菌細(xì)胞裂解,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體,帶這種噬菌體的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。第七節(jié) 亞病毒亞病毒(Subvirus)是個(gè)體更微小,結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成更簡單,具有感染性的致病因子,又稱為亞病毒因子(Subviral age
32、nts)。亞病毒包括衛(wèi)星因子、類病毒和朊病毒。一、衛(wèi)星因子 衛(wèi)星因子(Satellites)是必須依賴宿主細(xì)胞內(nèi)共同感染的輔助性病毒才能復(fù)制的核酸分子,有的衛(wèi)星因子也有外完蛋白包裹,這些又稱衛(wèi)星病毒(Sate11ite viruses)。二、類病毒類病毒(Viroid)是一類感染植物引起病害的感染因子。它們的結(jié)構(gòu)只有單股環(huán)狀的RNA分子,沒有蛋白質(zhì)外殼,RNA的基因組很小,不編碼任何蛋白質(zhì),復(fù)制必須完全依賴宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng),復(fù)制過程只是RNARNA的直接轉(zhuǎn)錄。因?yàn)檫@類感染因子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與常規(guī)病毒不同,稱為類病毒。三、朊病毒朊病毒(Prion)是一類感染人類與其他哺乳類動(dòng)物,引起亞急性海綿樣腦
33、病的感染因子,它們的結(jié)構(gòu)主要是蛋白質(zhì),尚未確切證實(shí)是否含有核酸,故目前定名為朊病毒,或蛋白侵染因子(Prion)。第八節(jié) 病毒的分類與命名一、根據(jù)核酸類型分為7大類二、根據(jù)病理顆粒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成第四章 微生物在自然界中的分布與作用(1學(xué)時(shí))第一節(jié) 正常動(dòng)物體的微生物動(dòng)物機(jī)體的內(nèi)部器官在正常情況下是無菌的。但是,動(dòng)物的體表皮膚以及與外界溝通的孔道,如口腔、鼻咽腔、消化道、泌尿生殖道等黏膜,由于經(jīng)常與外界接觸,都有微生物的存在。在這些微生物中,有的是長期生活在動(dòng)物體表或體內(nèi)的共生的或寄生的微生物,稱常住菌;有的是從土壤、水、空氣和動(dòng)物所接觸的環(huán)境或食物中污染的,稱過路菌。常住菌是與其宿主在
34、共同的長期進(jìn)化過程中形成的,在宿主體內(nèi)某一特定部位長期適應(yīng)和選擇,定居繁殖,形成微生物區(qū)系。在正常情況下區(qū)系中的微生物各類和數(shù)量基本上保持穩(wěn)定,處于平衡狀態(tài),對宿主生長和健康有益,具有免疫、營養(yǎng)、對病原微生物進(jìn)行生物頡頏等作用。過路菌一般不能在動(dòng)物體表或體內(nèi)定植,如果致病性的過路菌發(fā)生定植、繁殖,則可能對機(jī)體產(chǎn)生致病作用。一、 體表的微生物動(dòng)物皮膚和皮毛上的微生物,多數(shù)是從土壤、空氣和水中污染的,有的是從動(dòng)物糞便中沾染的。皮毛上常見的微生物以球菌為主,如葡萄球菌、鏈球菌、雙球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌;桿菌中主要有大腸桿菌、綠膿桿菌、棒狀桿菌和枯草桿菌等。二、消化道微生物(一)畜禽消化道微生物分布
35、概述正常畜禽胚胎及初生畜禽的消化道是無菌的。(二)禽類嗉囔和腸道的微生物及其作用禽類嗉囔中的微生物主要是乳桿菌,小腸中主要是兼性厭氧性細(xì)菌,如鏈球菌、大腸桿菌、葡萄球菌和芽孢桿菌等,數(shù)量上小腸前段較少,后段較多,在應(yīng)激情況下,大腸桿菌、鏈球菌可大量增殖,使小腸消化出現(xiàn)異常狀態(tài)。盲腸和大腸中主要是厭氧菌,如各種類桿菌、雙歧桿菌和乳桿菌等,其次是大腸桿菌。腸道正常菌群的種類和數(shù)量可隨禽的日齡、投喂飼料種類、抗菌藥物、天氣變化、疫病等因素而變動(dòng),如雛雞隨日齡增長,腸道后段的菌群中,雙歧桿菌與大腸桿菌不斷增加,厭氣彎桿菌和腸球菌逐漸減少,類桿菌、乳桿菌、芽孢桿菌、消化球菌和葡萄球菌等變化不大。嗉囔中的
36、優(yōu)勢菌乳桿菌產(chǎn)生的乳酸和短鏈揮發(fā)性脂肪酸使嗉囔內(nèi)的酸度達(dá)到pH45,起抑制病原微生物的作用。試驗(yàn)證明,腸道菌群具有增強(qiáng)腸黏膜上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的分裂增殖,維持代謝功能、免疫功能,對病原微生物起屏障和頡頑等作用。(三)反芻動(dòng)物瘤胃微生物及其作用前胃(瘤胃、網(wǎng)胃和辨胃)是消化粗飼料的主要場所。前胃內(nèi)微生物每天消化的碳水化合物占所采食的總粗纖維和無氮浸出物的70%80%。其中瘤胃中的微生物數(shù)量和種類最多,它們每天消化的量占采食總碳水化合物的50%55%,因此,瘤胃微生物在反芻動(dòng)物的飼料消化過程中起著重要的作用。瘤胃微生物包括細(xì)菌、原生蟲和厭氧真菌。一般每克瘤胃內(nèi)容物中含細(xì)菌1091010個(gè),原生蟲1
37、05106個(gè),真菌105個(gè)菌體形成單位。(1)協(xié)同:是指兩種或多種微生物在同一環(huán)境中,互相協(xié)助共同完成某種作用的關(guān)系。典型的例子是瘤胃中厭氧真菌和纖維分解細(xì)菌共同降解粗纖維的作用關(guān)系。瘤胃真菌可通過其豐富的菌根體系侵入飼料粗纖維片段,把片段降解成小片段,瘤胃細(xì)菌進(jìn)一步降解飼料的小片段。(2)競爭:是指兩種或多種以上微生物共同生存時(shí),為獲得能源、空間或有限的生長因子而發(fā)生的爭取現(xiàn)象。很多纖維分解細(xì)菌和厭氧真菌都以纖維素或半纖維素為生長基物或發(fā)酵底物,因此,瘤胃中的粗纖維是它們共同爭奪的能源,但是這些微生物在競爭中又和平共處,并協(xié)同降解粗飼料,所以瘤胃中的這些微生物在降解飼料的過程中既有協(xié)同又有競
38、爭關(guān)系。(3)共棲:是指兩種微生物共同生存時(shí),可一方受益或互相受益,為對方提供營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子或生存條件的關(guān)系。典型的例子是一類微生物的發(fā)酵產(chǎn)物是另一類微生物的生活所需的前體。如瘤胃真菌發(fā)酵飼料,產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸、乙醇、二氧化碳和氫氣,其中的甲酸和氫氣破產(chǎn)甲烷細(xì)菌利用,因此瘤胃內(nèi)基本上測不到甲酸,氫氣含量也很低。目前,一般認(rèn)為這是瘤胃微生物種間氫轉(zhuǎn)移作用。(4)吞噬:是指一種較大型的微生物吞入并消化另一種小型微生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。瘤胃中原蟲也有降解和利用租纖維的能力,但是一般認(rèn)為它們主要靠吞食瘤胃細(xì)菌來獲得能量和氮源。5、瘤胃微生物的主要作用 (1)粗纖維的消化 反芻家畜飼料
39、的碳水化合物有結(jié)構(gòu)性和非結(jié)構(gòu)性之分。前者也稱粗纖維,包括纖維素、半纖維素和木質(zhì)素,是植物細(xì)胞壁的主要成分。后者是泛指所有除粗纖維以外的碳水化合物,也稱無氮浸出物,包括淀粉和水溶性碳水化合物。因?yàn)榇掷w維是反芻家畜粗飼料的主要組成成分,也是決定粗飼料消化率的主要因素,并且由于反芻家畜自身不分泌能降解粗纖維的酶,因此瘤胃微生物產(chǎn)生的纖維素酶和半纖維素酶對反芻家畜粗飼料的消化非常重要。(2)蛋白質(zhì)的消化 瘤胃微生物能產(chǎn)生多種蛋白酶和肽酶,飼料蛋白質(zhì)經(jīng)過這些酶的作用水解成肽和氨基酸,其中一些氨基酸又進(jìn)一步降解為有機(jī)酸、氨和二氧化碳。另一方面,瘤胃微生物利用水解生成的和飼料來源的氨、一些簡單肽類和游離氨基
40、酸,合成微生物蛋白質(zhì)。當(dāng)這些微生物轉(zhuǎn)移到皺胃和小腸時(shí),它們的細(xì)胞蛋白質(zhì)被消化、吸收、利用。由于這些微生物既能合成非必需氨基酸又能合成必需氨基酸,所以反芻家畜所需的必需氨基酸不依賴于飼料的供給。 (3)維生素合成 瘤胃微生物能合成B族維生素和維生素K等,所以成年反芻家畜一般也不依賴從飼料中供給這些維生素。 一些瘤胃微生物還可產(chǎn)生植酸酶,使植酸磷變?yōu)闊o機(jī)磷,有助于動(dòng)物體對磷的有效利用。有研究表明,某些瘤胃細(xì)菌還能產(chǎn)生降解植物有毒物質(zhì)的酶,使瘤胃起到解毒作用。 (四)單胃動(dòng)物的大腸微生物及其作用 單胃動(dòng)物在胃和十二指腸部分,由于胃酸和膽汁的作用,微生物活動(dòng)受到限制。1、粗纖維的發(fā)酵2、其他有機(jī)物的發(fā)
41、酵3、大腸內(nèi)的腐敗作用4、有機(jī)物的合成 (五)消化道微生物區(qū)系的平衡及意義1、營養(yǎng):消化道的正常菌群在消化道獲取營養(yǎng)的同時(shí),通過對日糧特別是蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪等的消化和代謝,合成有利于動(dòng)物吸收和利用的養(yǎng)分,如必需氨基酸、揮發(fā)性脂肪酸、維生素等,促進(jìn)動(dòng)物生長。另外,消化道中的正常菌群還有助于破壞飼料中某些有害物質(zhì)并阻止其吸收。2、免疫:正常菌群對提高宿主機(jī)體免疫器官的免疫功能方面有重要的作用。研究證明,當(dāng)普通動(dòng)物的正常菌群失去平衡,其細(xì)胞免疫和體液免疫功能降低;無菌動(dòng)物的體液免疫或細(xì)胞免疫均顯著低于普通動(dòng)物。這是因?yàn)闆]有正常菌群抗原的刺激,機(jī)體免疫系統(tǒng)不可能正常發(fā)育和維持功能。3、頡頏:消
42、化道的正常菌群對非正常菌群的侵襲具有很強(qiáng)的屏障作用和頡頏作用。正常菌群中厭氧菌活動(dòng)、細(xì)菌素的產(chǎn)生、免疫作用以及物理屏障和生理生化環(huán)境等都會(huì)對非正常菌群的入侵起頡頏作用。 (六)菌群失調(diào)及其影響 (七)畜禽糞中的微生物及其作用1、微生物群的數(shù)量及種類畜禽特別是禽類糞中含有大量的有機(jī)物,是各種微生物生長繁殖的良好場所。糞中微生物的數(shù)量很高,每克含細(xì)菌量約在1010以上,在適宜的溫度和環(huán)境中,微生物繁殖更快,數(shù)量更多。糞中的微生物,有的是宿主腸道排出來的,有的是后來接觸環(huán)境污染的。糞中主要有腐敗菌、嗜熱菌、霉菌、酵母菌、放線菌等,糞中有時(shí)還含傳染病的病原菌。對于反芻家畜以及單胃草食家畜來說,其糞中還
43、含有厭氧真菌。2、堆肥的微生物作用糞含有大量的植物所需的營養(yǎng)物質(zhì),但是生糞肥尤其是混有墊草的糞廄肥直接施用的效果不好。糞肥應(yīng)先堆放一段時(shí)間,通過糞中微生物的作用,使糞中的有機(jī)物特別是纖維類物質(zhì)適當(dāng)分解腐熟,才成為優(yōu)質(zhì)的有機(jī)肥料。三、其他器官系統(tǒng)的微生物(一)呼吸道的微生物 呼吸道以鼻腔內(nèi)細(xì)菌為最多,其中主要是葡萄球菌,它們通常隨空氣進(jìn)入。氣管黏膜上細(xì)菌一般距氣管分支越深其數(shù)量越少,支氣管末梢和肺泡內(nèi)一般無細(xì)菌,只有在宿主患病時(shí)才有細(xì)菌存在。 (二)生殖器官的微生物 在正常情況下,動(dòng)物的腎臟、輸尿管、睪丸、卵巢、子宮以及輸精管、輸卵管等是無菌的,只有在泌尿生殖道口有細(xì)菌。陰道中微生物主要為乳桿菌
44、,其次為葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌,也有抗酸桿菌存在。 (三)其他組織器官的微生物 動(dòng)物的組織器官內(nèi),在正常情況下是無菌的。四、無菌動(dòng)物和無特定病原動(dòng)物無菌動(dòng)物(germ-free animals,GFA)是指體內(nèi)外不攜帶任何微生物或寄生蟲的動(dòng)物。無菌動(dòng)物必須經(jīng)無菌剖腹產(chǎn)、并在絕對無菌的隔離器內(nèi)培育飼養(yǎng)。 無特定病原動(dòng)物(specific pathogen free animals,SPFA)是指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性的微生物及其抗體或寄生蟲的動(dòng)物(或禽胚胎)。SPFA的培育和飼養(yǎng)與GFA同樣嚴(yán)格。五、微生態(tài)制劑微生態(tài)制劑(microbial ecological agents
45、)是指一類可通過有益的微生物活菌或相應(yīng)的有機(jī)物質(zhì),幫助宿主建立起新的腸道微生物區(qū)系,以達(dá)到預(yù)防疾病、促進(jìn)生長的添加劑。微生態(tài)制劑包括益生素(probiotics)和化學(xué)益生素(prebiotics)。 益生素又稱益生菌, 般是指通過改善腸道內(nèi)微生物區(qū)系的平衡而對動(dòng)物起有利作用的微生物活菌添加劑,也稱微生物活菌制劑。被用作益生素的微生物通常有乳酸桿菌、雙歧桿菌等?;瘜W(xué)益生素又稱益生元,是指不被宿主消化吸收,但能選擇性地促進(jìn)宿主消化道有益微生物,或飼喂的益生素的活性和生長,從而對宿主有益的飼料或食品中的某些成分,如寡果糖等。 第二節(jié) 土壤、空氣、水中微生物一、土壤中的微生物(一)分布概況 離地面1
46、020cm深的土壤肥沃,微生物數(shù)量最多,愈往深處微生物的數(shù)量愈少。(二)群類、數(shù)量和作用 土壤中微生物的種類很多。有細(xì)菌(包括放線菌)、真菌、螺旋體、噬菌體、藻類和原生動(dòng)物等,其中以細(xì)菌最多,占土壤微生物總數(shù)的70%90%。霉菌次之,藻類和原生動(dòng)物較少。(三)土壤中的病原微生物 土壤中除了固有的微生物種群外,還有一些隨著動(dòng)、植物尸體及人、畜排泄物、分泌物、污水、垃圾等廢棄物一起進(jìn)入土壤的病原微生物。它們成為傳播人、畜及植物傳染病的重要來源。但是,土壤對大多數(shù)病原微生物來說,并不是生長繁殖的適宜環(huán)境,這是因?yàn)橥寥廊狈Σ≡⑸镄枰奶厥鉅I養(yǎng)物質(zhì)和適宜的理化因素,而且還有土著微生物對病原微生物的頡
47、頏作用等,從而妨礙著病原微生物的生存,故大多數(shù)病原微生物只能在土壤中生存較短的時(shí)間。只有少數(shù)抵抗力強(qiáng)的芽抱菌,如炭疽桿菌、破傷風(fēng)梭菌、氣腫疽梭菌、腐敗梭菌、魏氏梭菌等能在土壤中生存數(shù)年甚至數(shù)十年以上,當(dāng)其他條件同時(shí)具備時(shí),隨時(shí)都可能使家畜感染相應(yīng)的傳染病,成為土壤感染傳染來源。但有些抵抗力較強(qiáng)的非芽孢病原菌也能生存較長的時(shí)間。 二、空氣中的微生物 (一)來源及存活情況 由于空氣中缺乏營養(yǎng)物質(zhì),加上干燥、流動(dòng)以及陽光的直接照射,進(jìn)入空氣中的微生物一般都很快死亡。只有一些對干燥和陽光抵抗力強(qiáng),能產(chǎn)生芽孢或色素的細(xì)菌以及真菌的孢子能在空氣中存活較長時(shí)間??諝庵形⑸锏闹饕獊碓词侨?、動(dòng)植物體及土壤中的
48、微生物伴隨著土壤塵埃、水滴、動(dòng)物吼叫、噴嚏、咳嗽時(shí)噴出的飛沫等微粒一并飛揚(yáng)進(jìn)入,以氣溶膠(aerosol)的形式存在;霉菌的孢子,則常被氣流直接吹散入空氣中。空氣中微生物的數(shù)量和種類隨地區(qū)、海拔高度、季節(jié)、氣候等環(huán)境條件的不同而異。在畜舍、醫(yī)院、商店、候車(機(jī))室、城市街道等人流較頻繁的地方空氣中細(xì)菌含量較高,而在大山、高空、原始森林、草地、田野、終年積雪的山脈等地方空氣中微生物的含量極少。(二)群類和數(shù)量 空氣中微生物的群類和數(shù)量、以空氣中塵埃的多少和地面上土壤、水、動(dòng)植物體表微生物的群類數(shù)量為轉(zhuǎn)移??諝庵形⑸锍R姷娜侯愔饕欠啪€菌、霉菌的孢子、酵母菌、需氧性芽孢桿菌的芽孢,以及某些產(chǎn)生色
49、素的球菌等。 通風(fēng)不良、不合衛(wèi)生要求的畜舍內(nèi),微生物數(shù)量最多,尤其是冬天,畜舍密閉,空氣不流通,空氣中的含菌數(shù)比夏季多。(三)空氣中的病原微生物 空氣中一般沒有病原微生物存在,只有在病人、病畜、患病植物附近,醫(yī)院和獸醫(yī)院周圍,當(dāng)病人病畜噴嚏、咳嗽時(shí)噴出含有病原體的微細(xì)泡沫以氣溶膠的形式飛散到空氣中,或者其帶有病原體的分泌物和排泄物干燥后隨塵埃進(jìn)入空氣中,則該處空氣中暫時(shí)帶有病原微生物,健康人或動(dòng)物往往因吸人而感染,分別稱為氣沫傳染和塵埃傳播,總稱為空氣傳播。(四)空氣中微生物的測定 空氣中微生物測定技術(shù)有沉降平板培養(yǎng)技術(shù)、膜濾器采樣培養(yǎng)技術(shù)、高速直線沖擊液體采樣培養(yǎng)技術(shù)等。 三、水中的微生物(
50、一)來源及存活情況 研究發(fā)現(xiàn),不論是地上水還是地下水中都含有微生物。由于不同水域中有機(jī)物和無機(jī)物的種類、含量、光照度、酸堿度、滲透壓、溫度、含氧量和有毒物質(zhì)的含量不同,水中微生物的數(shù)量也有差異。水中的微生物一般來自土壤、污水溝、空氣中的塵埃、腐敗的動(dòng)植物體以及動(dòng)植物的排泄物、分泌物等。在有機(jī)物豐富的水中,微生物不但能夠生存,并且還能大量地增殖,這時(shí),水本身反過來又成為微生物的來源之一。(二)分布、群類和數(shù)量 水中微生物的分布、群類和數(shù)量,因水源的不同、污染程度的差異、有機(jī)物含量以及各種理化因素的影響而有很大的差別。大氣水如雨水和雷中的微生物含量很少;江河、湖泊、淺井等地上水的微生物種類多,數(shù)量
51、大;地下水,如自流井和泉水,微生物種類少,數(shù)量少。 深度不同的水層中,微生物的分布、群類及數(shù)量也不同。在水面由于受到陽光的直接照射,細(xì)菌數(shù)量少;而在距水面5-20m的水層中,含菌數(shù)最多;20m以下,菌數(shù)將隨深度的增加而減少,但是在水底層由于有機(jī)質(zhì)豐富,含菌數(shù)又有增加。 (三)河水的自潔作用 (四)污水的生物處理 (五)水中的病原微生物 空氣、飛沫、畜禽排泄物等 (六)水中微生物的檢查 MPN第五章 外界因素對微生物的影響(1學(xué)時(shí))基本概念: 1、滅菌:殺死物體中所有微生物,叫做滅菌。這里指的所有微生物中包括病原微生物和非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子等。 2、消毒:殺死物體中的病原微生物,叫做消
52、毒。用于消毒的化學(xué)藥品叫做消毒劑或殺菌劑。 3、防腐:阻止或抑制微生物的生長繁殖叫做防腐或抑菌。用于防腐的化學(xué)藥品稱為防腐劑或抑菌劑。 4、無菌法:無菌是指一定的空間范圍內(nèi)沒有活的微生物。所謂無菌法是指在實(shí)際操作過程中,防止任何微生物進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體或物體的方法。 5、抑菌作用:是指抑制或阻礙微生物生長繁殖的作用。 6、殺菌作用:是指能使菌體致死的作用。 7、抗菌作用:抗菌作用包括抑菌作用和殺菌作用,是這兩者的總稱。另外,某些藥物具有殺滅病毒的能力,稱有抗病毒作用。外界因素對微生物的影響,可分為物理因素、化學(xué)因素及生物因素。第一節(jié) 物理因素影響微生物的物理因素主要有:干燥、滲透壓、溫度、光線、射線
53、、濾過等。一、干燥:水分是微生物新陳代謝過程中小可缺少的成分。微生物在干燥的環(huán)境中失去大量水分,新陳代謝便會(huì)發(fā)生障礙甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。二、滲透壓:滲透壓與微生物的生命活動(dòng)有密切關(guān)系。在自然界或人工培養(yǎng)中,滲透壓與微生物細(xì)胞的滲透壓相等時(shí),則有利于微生物的生長繁殖。大多數(shù)微生物的細(xì)胞質(zhì)中含有K+、谷氨酸、脯氨酸等,具有調(diào)整菌體內(nèi)滲透壓作用的物質(zhì),若微生物所處環(huán)境的滲透壓在一定范圍逐漸改變,它們也有一定的適應(yīng)能力,對微生物的活力無多大影響。但當(dāng)滲透壓發(fā)生突然的或超過一定限度的變化時(shí),則將抑制微生物的生長繁殖或?qū)е缕渌劳?。將微生物置于高滲溶液(如濃鹽水、濃糖水
54、)中,則菌體內(nèi)的水分向外滲出,細(xì)胞漿因高度脫水而濃縮,并與細(xì)胞壁脫離,這種現(xiàn)象稱為“質(zhì)壁分離”或“生理干燥”。三、溫度:溫度是影響微生物生長繁殖的重要因素,其影響具體表現(xiàn)在3個(gè)方面;影響酶活性、細(xì)胞質(zhì)膜流動(dòng)性和物質(zhì)的溶解度。在適當(dāng)?shù)臏囟确秶鷥?nèi),微生物的生命活動(dòng)才能正常進(jìn)行。根據(jù)各種微生物適應(yīng)的溫度范圍,可將其分為嗜冷菌、嗜溫菌和嗜熱菌3大類。在每一類中,根據(jù)微生物對溫度的適應(yīng)性,將溫度范圍劃分為3個(gè)溫度基點(diǎn):生長最低溫度、最適溫度、最高溫度。微生物生長繁殖最快、最盛,并能將它們的生活機(jī)能充分地表現(xiàn)出來的溫度叫做最適溫度;能夠生長的最高或最低溫度,分別叫做最高溫度和最低溫度。低于最低溫度,微生物
55、停止生長;超過最高溫度基點(diǎn)愈高,微生物死亡愈快。 (一)低溫對微生物的影響大多數(shù)微生物對低溫具有很強(qiáng)的抵抗力。當(dāng)微生物所處環(huán)境的溫度降低到生長最低溫度以下時(shí),微生物的新陳代謝活動(dòng)逐漸降低,最后處于停滯狀態(tài),但該微生物仍能在較長時(shí)間內(nèi)維持生命;當(dāng)溫度上升到該微生物生長最適溫度時(shí),它們又可以開始正常的生長繁殖。應(yīng)用低溫保存微生物時(shí)必須迅速冷凍,復(fù)蘇時(shí)迅速融化,而不應(yīng)緩慢冷凍和融化,其原因是當(dāng)緩慢冷凍或融化接近冰點(diǎn)時(shí),微生物細(xì)胞漿內(nèi)的水分容易形成結(jié)晶,擾亂細(xì)胞漿的肢體狀態(tài),冰結(jié)晶還能機(jī)械地刺傷菌體胞膜、胞壁,產(chǎn)生損害。迅速冷凍使細(xì)胞漿內(nèi)的水分結(jié)成均勻的玻璃樣狀態(tài),損害作用不大;而且在迅速融化時(shí),此種菌體內(nèi)的玻璃樣水分,也不形成結(jié)晶。用冷凍法保存食品(肉品、乳品、蛋品及其他食品等),因食品中的微生物生長被抑制,故食品可保存較長時(shí)間。但微生物仍存活,故食品解凍后要迅速食用。若食品在冰陳前已被某種病原微生物污染,因病原微生物在冰凍的條件下仍存活,故此種冰凍食品解凍后具有傳播疾病的危險(xiǎn)性。冷凍真空干燥法(簡稱凍干法)是采用迅速冷凍和抽真空除水的
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