高三生物一輪復(fù)習(xí)——基因工程的基本操作程序

1、高三生物一輪復(fù)習(xí)基因工程的基本操作程序 選修3 現(xiàn)代生物科技專題考綱考情考綱考情點(diǎn) 擊 真 題1.(2013江蘇， 22)小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因(目的基因)后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述正確的是()點(diǎn)擊真題點(diǎn)擊真題2(2013廣東，3)從某海洋動物中獲得基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌體和溶血性均較強(qiáng)的多肽 P1。目前在 P1 的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是()A合成編碼目的肽的 DNA 片段B構(gòu)建含目的肽 DNA 片段的表達(dá)載體C依據(jù) P1 氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作

2、為目的肽3(2013安徽，6)下圖為通過 DNA 分子雜交鑒定含有某特定 DNA 的細(xì)菌克隆示意圖。下列敘述正確的是 ()基因工程操作的基本程序1目的基因的獲取途徑(1)直接分離：從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫中獲取。(2)人工合成目的基因常用的方法有：已知核苷酸序列的較小基因，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板。以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。(3)PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建(1)基因表達(dá)載體的組成：啟動子、目的基因、終止子以及標(biāo)記基因等。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法3將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4.目的基因的檢測與鑒定(1)分子水平檢測導(dǎo)入檢

3、測：DNA分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作探針檢測。(2)個體生物學(xué)水平鑒定：對轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。 (2010年北京海淀區(qū)抽查)下圖是含某目的基因的DNA片段，據(jù)圖回答下列問題。(1)根據(jù)圖示可知，若用EcoR和Sma限制酶切割，則此DNA片段可有_個限制酶切割位點(diǎn)，切割后共有_種_個切割末端。(2)EcoR限制酶切割后形成的末端是_末端，在圖中用筆標(biāo)出切割部位。(3)如果要將用EcoR限制酶切割形成的目的基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞，一般需要_作載體。其應(yīng)具備的特點(diǎn)有：_、_、_。(4)Ecoli DNA連接酶連接目的基因和載體時連接的是圖中_(填字母

4、)部位的化學(xué)鍵?！敬鸢浮?1)326(不計算原有的)(2)黏性(3)質(zhì)粒至少有一個切割位點(diǎn)能自我復(fù)制含標(biāo)記基因(4)X (2009年江蘇高考題)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖回答下列問題。(1)將圖中的DNA用Hind、BamH完全酶切后，反應(yīng)管中有_種DNA片段。(2)圖中表示Hind與BamH酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得_種重組質(zhì)粒；如果換用Bst與BamH酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得_種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的_。(4)圖中的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vi

5、r蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的TDNA導(dǎo)入植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中_對TDNA的降解。(5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞_。(6)生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的_基因頻率的增長速率?！窘馕觥勘绢}重點(diǎn)考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)的相關(guān)知識，需特別注意基因工程的步驟、DNA的復(fù)制、基因工程的操作工具等知識。本題需特別注意圖示過程，從中獲取有效信息，然后結(jié)合課本知識即可正確解答?！敬鸢浮?1)4(2)21(3)復(fù)制(4)DNA水解酶(5)表面無相

6、應(yīng)的特異性受體(6)抗性B限制性核酸內(nèi)切酶和限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的連接酶是兩類常用的工具酶工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)1(2009年浙江高考題)下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是()A目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物D2(2007年高考北京卷)利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列選項(xiàng)中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是()A棉花二倍體細(xì)胞

7、中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因B大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其mRNAC山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素DNA序列D酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白D3(2011年上海高考題)科學(xué)家已能運(yùn)用基因工程技術(shù)，讓羊合成并分泌人的抗體。相關(guān)敘述正確的是（ ）該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異DNA連接酶把目的基因與運(yùn)載體粘性末端的堿基對連接起來蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料受精卵是理想的受體該羊的產(chǎn)生要用到核移植技術(shù)該羊的產(chǎn)生要用到胚胎移植技術(shù)ABCDB4.(2012年廣東高考題)科學(xué)家通過基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白。以下有關(guān)該基因工程的敘述錯誤的是( ) A采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因有內(nèi)含

8、子 B基因非編碼區(qū)對于目的基因在塊莖中的表達(dá)是不可缺少的 C馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞 D用同一種限制酶處理質(zhì)粒和含有目的基因的 DNA，可產(chǎn)生黏性末端而形成重組DNA分子A5(2009年上海高考題)人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生的P53基因，生物技術(shù)可對此類基因的變化進(jìn)行檢測。(1)目的基因的獲取方法通常包括_和_。(2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P53基因的部分區(qū)域。與正常人正比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基對；這種變異被稱為_。(3)已知限制酶E識別序列為CCGG，若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P53基因部分區(qū)域(見上圖)，那么正常人的會被

9、切成個片段；而患者的則被切割成長度為_對堿基和_對堿基的兩種片段。(4)如果某人的P53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是_(以P+表示正常基因，P-表示異?；??！敬鸢浮?1)從細(xì)胞中分離通過化學(xué)方法人工合成(2)見下圖基因堿基對的替換基因堿基對的替換(基因突變基因突變)(3)3460220(4)P+P-6(2008年山東高考題)為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的_處，

10、DNA連接酶作用于_處。(填“a或“b”)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和_法。(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用_技術(shù)，該技術(shù)的核心是_和_。(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用_方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。【答案】(1)aa(2)基因槍(花粉管通道)(3)植物組織培養(yǎng)脫分化(去分化)再分化(4)耐鹽基因(目的基因)一定濃度鹽水澆灌的(移栽到鹽堿地中)7.(2010福建理綜，32節(jié)選)紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)