藥敏試驗(yàn)方法1

1、藥敏試驗(yàn)方法1藥敏試驗(yàn)方法[1]藥敏驗(yàn)試-藥敏試驗(yàn)分類、一紙片擴(kuò)散法法是含有定將抗菌藥量物的濾片紙?jiān)谝呀臃N貼了測(cè)試菌瓊的脂面表，紙上片的中藥在瓊脂中物擴(kuò)，散隨擴(kuò)散著距的離增，加菌藥抗的物度呈對(duì)數(shù)濃減，少?gòu)脑诙募垏沃艹啥葷馓荻韧瑫r(shí)。紙片周，抑菌濃圍范圍內(nèi)度的株菌能不生，長(zhǎng)抑菌范二圍外的菌則株以生長(zhǎng)可，從而在片的周紙形圍成透明的菌圈，不抑同抑的藥菌的抑物圈菌直因受藥徑在物瓊脂擴(kuò)中散度速的影響而能不可同，菌圈抑大小可的以反映試菌對(duì)測(cè)藥的敏感程度，物并該與藥對(duì)測(cè)試菌物MI的呈C負(fù)關(guān)相。稀釋法藥敏驗(yàn)可用試定量于測(cè)試菌藥抗對(duì)某物一細(xì)的體外活性菌分，為瓊脂釋稀法

2、和湯肉釋法。稀實(shí)驗(yàn)，抗時(shí)菌物的濃藥度通經(jīng)常倍過(guò)（比gl2）稀，釋能制抑待菌測(cè)肉可見(jiàn)眼生長(zhǎng)的低藥最物濃成度為最小抑濃度（Ml菌C）,一個(gè)特定菌藥物的測(cè)抗?jié)舛仍嚪稇?yīng)圍該包含能檢測(cè)細(xì)夠菌的解釋性點(diǎn)（敏折、中介和耐藥）的濃感度同，時(shí)應(yīng)該包也含質(zhì)參考控菌株Ml的.C.2瓊1脂釋法稀首先制備含菌藥抗物的脂稀瓊平釋板。接再種測(cè)待株，然后是菌果判結(jié)讀。2.肉2稀釋湯法、抗生素三濃度度梯法四自動(dòng)化、器儀法藥敏驗(yàn)試-實(shí)步驟驗(yàn)一、普通養(yǎng)瓊營(yíng)培養(yǎng)基脂：可去化生劑店購(gòu)買，做不同試細(xì)的藥敏試菌可驗(yàn)選不同擇的培養(yǎng)基如做，腸大菌的藥敏試驗(yàn)桿選可擇通普營(yíng)養(yǎng)瓊或脂麥糠培凱養(yǎng)基。沙做門氏可菌擇血清選培基。養(yǎng)藥試紙：購(gòu)敏或買自制詳見(jiàn)

3、實(shí)（準(zhǔn)驗(yàn)）備細(xì)菌：做藥待敏試驗(yàn)細(xì)的菌器儀接種：、環(huán)精燈、酒孔打器、津牛杯、移液器、頭滴二實(shí)驗(yàn)、備準(zhǔn)21.藥片的敏備準(zhǔn)購(gòu)買或：制自21. 1制方法備取新華1號(hào)：性濾定，用打孔機(jī)打紙6毫成直米徑圓形小的紙。片圓取片紙0片5放入潔清干的燥霉青空素瓶，中瓶以單層?？谄ぐ?jiān)?jīng)。1磅55-10分2高壓消毒鐘，放后在37溫C箱烘箱或中天，使數(shù)全干燥完。21.2菌藥紙抗制作片：上述含有在5片紙0的片霉青素瓶加入藥液0.內(nèi)25毫，升翻并紙動(dòng)片，各紙片使分浸充透液藥，動(dòng)紙翻時(shí)片能將不片搗爛。紙同在瓶口時(shí)記上藥錄物名，放37C稱溫內(nèi)過(guò)箱夜，干后即燥密蓋，有如件條可空干燥。真勿切受，置潮暗干燥處存陰，有放期效3-個(gè)

4、6。月22.藥的液備（用于商制品的藥試）驗(yàn)按：商藥的品用治療使的比例配量藥液制；商如藥品病百按消說(shuō)其明治量療量.01%飲0，可水按這比個(gè)例制配液，藥可取0毫克1加1入0毫的升水混勻。中稀此釋液為即用做藥敏試驗(yàn)于藥的。液、三實(shí)驗(yàn)操作方3.1藥敏法片.131.“在超凈臺(tái)中，”用經(jīng)（酒精燈火）滅菌的接種環(huán)焰取挑適細(xì)菌培養(yǎng)物量以劃線，方式將菌涂布到平細(xì)皿培基養(yǎng)上具。體式；方用滅菌種接取環(huán)適細(xì)量菌分在平皿邊別緣相對(duì)點(diǎn)涂菌，以四每開(kāi)點(diǎn)始劃線菌涂至皿平1/的2然。，后到找二第劃線至平皿的1點(diǎn)2/依次劃，線，至直菌細(xì)勻密布于平均皿（另：可挑取待。試細(xì)于少菌量生理水鹽制中細(xì)菌混成液懸用滅，菌拭子將待檢棉細(xì)菌懸液

5、涂混布于皿培平基養(yǎng)表。要面涂求布勻致密均）31.2.將子于酒精鑷燈焰火滅后略停，取藥菌敏貼片平皿培到養(yǎng)基面表為。使了藥敏與培片養(yǎng)緊基相密，可用鑷貼輕子按幾藥下敏片。為使能準(zhǔn)了確的觀察結(jié)果，要藥敏求能有規(guī)片律的分布于皿平培基養(yǎng)；一上般在可皿中平貼一片央，外可周等離貼若干距片（外一周可般七片），貼種藥敏每片名的要記稱住。.13.3將平培皿基置養(yǎng)于37C箱中培養(yǎng)24溫時(shí)小，后觀察果效。3.2 牛杯津法.321.在“超臺(tái)”中凈用，經(jīng)酒精燈）火焰滅（的菌種接環(huán)取挑量適菌培養(yǎng)細(xì)物，以劃方線將式細(xì)菌涂布平到培養(yǎng)皿基上。體具式；用方滅菌接環(huán)取種量細(xì)菌分適別在皿平邊相緣對(duì)點(diǎn)涂四，菌每點(diǎn)開(kāi)以劃線涂菌至平皿的始/2

6、。1后然，找第二到點(diǎn)劃至線皿的平12，/依次劃線，直細(xì)菌至均勻密于布皿。平（：可另取挑待試菌細(xì)少量于生鹽水理中成制菌混懸細(xì)液用滅，菌拭子將待棉檢細(xì)混菌液涂布懸于平皿培基養(yǎng)表面要。求布涂均勻致。）密32.2 以無(wú).操菌作將菌滅不的銹鋼管（小內(nèi)6徑nm外徑8、n、高10nm的圓m小管,形管兩端的光要，滑可用也璃玻管、管瓷，放）在培養(yǎng)置基上輕輕，加壓，其與使培養(yǎng)基觸無(wú)接隙，空在并小管標(biāo)處記各藥種物名稱每個(gè)平?？煞?板-6小管。支待鐘后分分，向各小別管中加滴一數(shù)定量各的種液，藥勿其外溢。置使7C3培養(yǎng)81-8時(shí)小，察觀果。結(jié)23將3皿培養(yǎng)平置于3基C溫7箱中培養(yǎng)2小時(shí)4，后觀察果。效3.3打法孔：法較

7、簡(jiǎn)該單，成低本，操易，作較適用比于品藥物的檢商測(cè)。.3.3在“1凈超”中，臺(tái)用經(jīng)酒精（燈）焰滅火菌接種環(huán)的挑取量細(xì)菌培養(yǎng)物，以適劃線方將細(xì)菌式涂布到平皿培養(yǎng)上基具。體方；式用菌滅種接取適量細(xì)菌環(huán)分在平皿別緣相邊對(duì)四涂點(diǎn)菌以，點(diǎn)每開(kāi)始線劃菌至涂平皿1/的。然2，找后第到二劃線至點(diǎn)皿的平/1，2次依劃，直至細(xì)線菌勻均密于平皿布（。：可另挑取試待細(xì)菌于量生少理水中制成鹽菌混懸液細(xì)，用菌棉拭子滅將待細(xì)菌混懸檢液布于平涂皿養(yǎng)培表面基。求涂要布均勻致。）密33. 2以菌無(wú)操將滅作菌不的銹鋼小（外管為4徑毫、孔徑米孔距均為3與米毫管，的兩端光滑，也可用要璃管、瓷玻），放置管在養(yǎng)培上基打，孔將中的培孔基養(yǎng)針用

8、挑出頭，并以焰封火，使底培基能充養(yǎng)分的與平皿合（以融藥防滲漏，影液結(jié)果響。）33.3加.樣：按不同藥加液樣，品樣加至滿不溢而為。止.334將.皿培平基養(yǎng)于置7C溫箱中培養(yǎng)342小時(shí)，觀后察果效。藥敏試驗(yàn)結(jié)果觀察-涂在細(xì)菌有瓊的平脂上，抗菌藥物在板瓊脂向四周擴(kuò)散內(nèi)其濃度，梯度遞呈，減此因紙?jiān)谥車痪喽▋?nèi)離細(xì)的菌生長(zhǎng)到受制抑過(guò)夜。培后養(yǎng)成一個(gè)形抑菌圈抑菌圈，越，大明該菌說(shuō)對(duì)此藥感敏越性大，之反越，小無(wú)抑若菌，圈則明說(shuō)該對(duì)菌此具藥有藥耐性其。徑大直小與物藥濃、度劃線菌細(xì)濃度直接關(guān)系。有藥敏驗(yàn)試-判定準(zhǔn)標(biāo)一、藥敏實(shí)的驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)按菌抑直圈大徑小為作判定感敏度高的標(biāo)低。準(zhǔn)1表藥敏感實(shí)驗(yàn)物判標(biāo)準(zhǔn)定抑菌圈直

9、徑毫（米）敏度感20上極敏以1520敏高101中4敏0以下低敏1、藥物二感實(shí)敏驗(yàn)定判標(biāo)參準(zhǔn)表考，1黏多菌抑素圈菌在；毫米9上以為敏，高69毫米低敏，為無(wú)抑菌圈為不。敏藥試驗(yàn)敏影-響敏結(jié)果藥因的素一培、養(yǎng)：應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)菌的營(yíng)養(yǎng)需基要行配制。傾進(jìn)注平板時(shí)，厚合適度約(-6m5)，不可太薄m,般一0m9直m徑的培養(yǎng)皿傾注，養(yǎng)培基8-21mOI宜。培為養(yǎng)基內(nèi)應(yīng)盡避免有抗量菌藥的拮抗物質(zhì)物，鈣如鎂、子能減低氨基糖苷類的離菌抗性，活腺嘧胸啶核和對(duì)氨苯苷酸甲PAB()A拮能抗磺胺和藥TPM的活性。、細(xì)菌二接種：量菌細(xì)種接應(yīng)量恒定，太多，如菌圈抑小，變能酶產(chǎn)菌株更的可破壞藥的物抗菌活性。三藥物濃、：藥度物的濃和度總量直影接響抑試驗(yàn)的菌果，需結(jié)精確配。商品藥應(yīng)制嚴(yán)按格其照推薦療治量配。制、四養(yǎng)培間：時(shí)一培養(yǎng)溫般度和時(shí)為間7C38-18小，有些抗菌藥擴(kuò)散慢時(shí)多粘如菌，素將已可好放菌藥抗平的培板養(yǎng)基，先4C冰箱置2內(nèi)小時(shí)，4使抗藥預(yù)菌擴(kuò)，然后散放再7C3溫箱培中，養(yǎng)可以遲細(xì)菌的生長(zhǎng)，而得推較大到抑的菌圈。藥敏試驗(yàn)-藥敏試的應(yīng)驗(yàn)