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1、 實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理 (continued) 實驗材料實驗材料 涂片涂片干燥干燥 固定固定染色染色水洗水洗干燥干燥鏡檢鏡檢操作步驟操作步驟 操作步驟操作步驟(continued) 革蘭氏染色(革蘭氏染色(Gram stain) 1984年,丹麥醫(yī)生年,丹麥醫(yī)生Gram采用革蘭氏染色法細采用革蘭氏染色法細菌細胞壁區(qū)分為兩種類型:革蘭氏陰性(菌細胞壁區(qū)分為兩種類型:革蘭氏陰性(G+)和革蘭氏陽性(和革蘭氏陽性(G-)革蘭氏染色步驟革蘭氏染色步驟: 1)結(jié)晶紫初染;)結(jié)晶紫初染;2)碘液媒染;)碘液媒染; 3)酒精脫色;)酒精脫色; 4)番紅復(fù)染)番紅復(fù)染 G G菌:細胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)
2、菌:細胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性屏障,當狀分子形成一種透性屏障,當乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫障縮小,故保留結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物在細胞膜上。呈紫色。合物在細胞膜上。呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高縮,其脂含量高, ,乙醇將脂溶乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫解,縫隙加大,結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物溶出細胞壁,番紅復(fù)染后合物溶出細胞壁,番紅復(fù)染后呈紅色。呈紅色。本實驗安排本實驗安排細菌三形永久片觀察細菌三形永久片觀察簡單染色:枯草芽孢(簡單染色:枯草芽孢(1d1d)。)。革蘭氏染色:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、革蘭氏染色:大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、斜面菌株。斜面菌株。芽孢染色:枯草芽孢(芽孢染色:枯草芽孢(2d2d)另外,每大組派兩人從斜面挑取枯草芽孢另外,每大組派兩人從斜面挑取枯草芽孢(2d2d)于離心管,水浴鍋中煮沸。)于離心管,水浴鍋中煮沸。思考題思考題80頁思考題第頁思考題
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