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農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法根瘤根瘤存在于能引起植物形成冠癭瘤的農(nóng)桿菌中,誘導(dǎo)雙子葉冠癭瘤形成,又稱腫瘤誘導(dǎo)質(zhì)粒(tumor inducing plasmid)。 Ti質(zhì)粒質(zhì)粒第三步第三步 毒性基因(毒性基因(vir)表達(dá))表達(dá)T-DNA上的產(chǎn)物催化產(chǎn)生過量的生長(zhǎng)素和上的產(chǎn)物催化產(chǎn)生過量的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,形成植物冠癭瘤。細(xì)胞分裂素,形成植物冠癭瘤。virA、virG、virD、virB第四步第四步 T-DNA轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移第五步第五步 誘導(dǎo)冠癭瘤誘導(dǎo)冠癭瘤T-DNA被被vir基因產(chǎn)物切下來,并運(yùn)送到植物細(xì)胞基因產(chǎn)物切下來,并運(yùn)送到植物細(xì)胞核里,整合到植物基因組中。核里,整合到植物基因組中。第六步第六步 土壤農(nóng)桿菌代謝冠癭堿。土壤農(nóng)桿菌代謝冠癭堿。 包括原生質(zhì)體共培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞共培養(yǎng)和愈傷組織共培養(yǎng)。3 3、活體接種法、活體接種法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的方法 1.共培養(yǎng)法The co-integration method 農(nóng)桿菌共培養(yǎng)侵染愈傷組織分化生芽生根2.葉盤轉(zhuǎn)化法3.活體接種法
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