川芎嗪對大鼠腸缺血再灌注肝損傷保護作用的實驗研究

1、川芎嗪對大鼠腸缺血再灌注肝損傷保護作用的實驗研究 作者：高卉， 阮明鳳， 白育庭， 萬敬之【關(guān)鍵詞】 川芎嗪；腸缺血再灌注損傷；小腸；肝臟摘要：目的探討川芎嗪對大鼠腸缺血再灌注肝損傷的保護作用。方法選用健康Wistar大鼠24只，隨機分成3組（每組8只）：假手術(shù)對照組、缺血再灌注組、川芎嗪治療組。夾閉大鼠腸系膜上動脈（SMA）60 min造成缺血，再灌注2 h后取出肝組織制成勻漿，測定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSHPX）、丙二醛（MDA）、Ca2+Mg2+ATP酶的含量及肝形態(tài)細胞學(xué)變化。結(jié)果川芎嗪治療組肝組織MDA含量明顯低于缺血再灌注組（P0.01），SOD，GSHPX

2、，Ca2+Mg2+ATP酶的含量均明顯高于缺血再灌注組（P0.01），肝細胞形態(tài)學(xué)異常變化明顯減輕。結(jié)論川芎嗪能減少大鼠脂質(zhì)過氧化，改善ATPase功能，減輕大鼠腸缺血再灌注所致肝臟損傷。關(guān)鍵詞：川芎嗪； 腸缺血再灌注損傷； 小腸； 肝臟Protective Effects of Tetramethylpyrazine on Hepatic Damage Induced by Intestinal Ischemiareperfusion in RatsAbstract:ObjectiveTo explore the protective effects of tetramethylpyrazi

3、ne on hepatic damage induced by intestinal ischemiareperfusion in rats. MethodsDivide the rats randomly into three groups: sham operated group, untreated ischemiareperfution(I/R) group, pretreatment with tetramethylpyrazine before I/R(Te). Superior mesenteric artery was clipped for 60 min to cause i

4、schimia, and then unclipped to make reperfusion for 2 hours after reperfusion, the liver tissues were gathered and homogenized respectively, and the contents of SOD, GSHPX, MDA and ATPase,and morphological changes of hepatocytes were assayed.ResultsThe contents of MDA in liver in Te groups were less

5、 than that in I/R group （P0.01）,the contents of SOD,GSHPX and Ca2+,Mg2+,ATPase in Te groups were higher than those in I/R group（P0.01）,and the abnormal morphological changes of hepatocytes diminished remarkably. ConclusionTetramethylpyrazine can reduce lipid peroxidation, improve ATPase activity and

6、 decrease the injury of liver tissue in the rats after intestinal ischemiareperfusion.Key words:Tetramethylpyrazine; Ischemiareperfusion injury; Gut; Liver 腸缺血再灌注（ischemiareperfusion，I/R）是機體遭受嚴重創(chuàng)傷、大手術(shù)、燒傷、感染等刺激后發(fā)生較早的病理過程之一，可引起肝、腎、肺等遠隔器官的損傷1。目前認為，缺血再灌注損傷產(chǎn)生的機理主要與氧自由基大量生成導(dǎo)致組織器官脂質(zhì)過氧化有關(guān)2。川芎嗪（Tetramethylpy

7、razine，TMP）是從川芎中提出的一種生物堿，具有解痙、擴管、降壓等廣泛的生物作用，主要應(yīng)用于心血管疾病的治療3。本研究旨在探討川芎嗪對大鼠腸缺血再灌注肝損傷的保護作用，并探討其可能機制。1 材料與方法1 藥品及試劑川芎嗪注射液40 mg/2ml（無錫市第七制藥有限公司生產(chǎn)，批號H32023383）。SOD，GSHPX，MDA，Ca2+Mg2+ATPase試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。2 實驗動物選用健康雄性Wistar大鼠24只，體重250 g，由咸寧學(xué)院動物室提供。隨機分為3組。3 模型制備及動物分組10%水合氯醛（0.35 ml/100g）腹腔注射麻醉后，仰臥固定，取腹部正中切

8、口，暴露腸系膜上動脈（SMA）用無損傷動脈夾夾閉其根部導(dǎo)致缺血，松夾即為再灌注，在各設(shè)定時相點經(jīng)髂動脈取血并迅速放血致死，取肝左中葉組織勻漿，同時取少許肝左中葉組織行光、電鏡觀察。將24只大鼠隨機分為3組，每組8只。假手術(shù)對照組（sham）：僅暴露SMA而不夾閉，共3 h結(jié)束實驗后取材；缺血灌注組（I/R）：夾閉SMA 60 min后松夾2 h再取材；川芎嗪治療組（TMP）：夾閉SMA前15 min經(jīng)舌下靜脈注射川芎嗪（8 mg/kg）余同I/R組。4 指標測定SOD活性用鄰苯三酚自氧化法檢測4，MDA含量測定用改良硫代巴比妥酸（TBA）比色法測定5，5.5,二硫?qū)Χ趸郊姿幔―TNB）比色

9、法測定GSHPX6，定磷法測定Ca2+Mg2+ATP酶7。光鏡檢查：取肝組織經(jīng)10%甲醛固定，石臘包埋切片，HE染色，觀察切片。電鏡檢查：肝組織用生理鹽水漂洗后2.5%戊二醛固定，送電鏡室，經(jīng)四氧化鋨雙固定，脫水、包埋、切片等操作后，在日立H600透視電鏡下觀察并拍片。5 統(tǒng)計學(xué)分析所有數(shù)據(jù)均以s表示，組與組之間采用t檢驗。 1 楊 漢,金麗娟.庫普弗細胞功能狀態(tài)對腸缺血再灌注肝、脾、胸腺細胞凋亡的音響J.解放軍醫(yī)學(xué)雜志,1999,24(4):86.2 Neil Granger D.Ischemia-reperfusion injury. Role of Oxygen-derived free radicalsJ.Axta physiol Scand,1986，126(548Suppl):47.3 楊光田,王迪潯.實驗動物復(fù)蘇及缺氧時川芎嗪對心腦的作用J.中國急救醫(yī)學(xué),1997,17(1):7.4 鄧碧玉,彭勤生,李文杰.改良的連苯三酚自氧化測定超氧化物歧化酶活性的方法J.生物化學(xué)與物理進展,1991，18(2):163.5 向 榮,王鼎年.過氧化脂質(zhì)硫代巴比妥酸分光光度法的改進J.生物化學(xué)與生物物理進展,1990，17(3):241.6 夏奕明,朱連珍.血和組織中谷胱甘肽過氧化酶活力測定J.衛(wèi)生研究,1987，16(4):29.7 Bradford MM.A