食用菌菌種制作PPT學習教案

1、會計學1食用菌菌種制作食用菌菌種制作菌種概述菌種概述第1頁/共83頁狹義狹義是指經(jīng)人工培養(yǎng)，并可是指經(jīng)人工培養(yǎng)，并可供進一步繁殖或栽培使用的供進一步繁殖或栽培使用的食用菌純雙核菌絲體。食用菌純雙核菌絲體。廣義廣義以保藏、試驗、栽培和其它以保藏、試驗、栽培和其它用途為目的，具繁衍能力，遺用途為目的，具繁衍能力，遺傳特性相對穩(wěn)定的孢子、組織傳特性相對穩(wěn)定的孢子、組織或菌絲體及其營養(yǎng)性或非營養(yǎng)或菌絲體及其營養(yǎng)性或非營養(yǎng)性的載體性的載體 一、菌種的概念一、菌種的概念第2頁/共83頁一級種一級種二級種二級種三級種三級種來源、繁殖代來源、繁殖代數(shù)和使用目的數(shù)和使用目的按按保藏種保藏種實驗種實驗種生產(chǎn)種生產(chǎn)

2、種使用目的使用目的固體菌種固體菌種液體菌種液體菌種狀態(tài)狀態(tài)二、菌種類型二、菌種類型第3頁/共83頁（一）級別不同的菌種（一）級別不同的菌種1.一級種（母種）一級種（母種）用組織分離或孢子分離用組織分離或孢子分離而得到的最初的菌種而得到的最初的菌種概念概念概況概況培養(yǎng)環(huán)境培養(yǎng)環(huán)境 試管、斜面培養(yǎng)基試管、斜面培養(yǎng)基用途用途 再生母種再生母種擴大原種擴大原種保藏用種保藏用種菌絲弱而少、不可直接栽培菌絲弱而少、不可直接栽培特點特點第4頁/共83頁第5頁/共83頁2.二級種（原種）二級種（原種）將母種擴大至粗放培養(yǎng)基上將母種擴大至粗放培養(yǎng)基上形成的菌種形成的菌種概念概念概況概況培養(yǎng)環(huán)境培養(yǎng)環(huán)境菌絲較多而

3、壯、適應性較強菌絲較多而壯、適應性較強特點特點用途用途擴大栽培擴大栽培種種大口瓶、較粗放的大口瓶、較粗放的液體或固體培養(yǎng)基液體或固體培養(yǎng)基第6頁/共83頁第7頁/共83頁3.三級種（栽培種）三級種（栽培種）將原種擴大至粗放培養(yǎng)基上將原種擴大至粗放培養(yǎng)基上形成的菌種形成的菌種概念概念概況概況培養(yǎng)環(huán)境培養(yǎng)環(huán)境菌絲多而壯、適應性強菌絲多而壯、適應性強特點特點用途用途栽培生產(chǎn)栽培生產(chǎn)菌種袋、較粗放的菌種袋、較粗放的液體或固體培養(yǎng)基液體或固體培養(yǎng)基第8頁/共83頁第9頁/共83頁生產(chǎn)總過程生產(chǎn)總過程母種栽培種栽培原種子實體第10頁/共83頁第11頁/共83頁（二）狀態(tài)不同的菌種用固體基質培養(yǎng)的菌種1.固

4、體 菌種概念特點設備、工藝簡單菌齡長而不一發(fā)酵率較低用液體基質培養(yǎng)的菌種2.液體 菌種概念特點設備、工藝較復雜菌齡短而一致發(fā)酵率高易老化和自溶第12頁/共83頁三、菌種生產(chǎn)程序三、菌種生產(chǎn)程序四大步驟四大步驟制培養(yǎng)基制培養(yǎng)基滅菌滅菌培養(yǎng)培養(yǎng)接種接種第13頁/共83頁第14頁/共83頁一、制種場地倉庫配料室滅菌室接種室培養(yǎng)室辦公室栽培棚門口曬料場第15頁/共83頁第16頁/共83頁一、制培養(yǎng)基設備（一）原料處理設備切片粉碎兩用機切片粉碎兩用機切片粉碎兩用機鍘鍘草草機機粉粉碎碎機機第17頁/共83頁拌料機拌料機第18頁/共83頁裝袋機裝袋機（二）培養(yǎng)基分裝設備第19頁/共83頁裝瓶機裝瓶機挖瓶機挖

5、瓶機第20頁/共83頁菌種袋菌種袋頸圈頸圈第21頁/共83頁菌種瓶菌種瓶第22頁/共83頁二、滅菌設備高高壓壓鍋鍋外鍋：裝水外鍋：裝水內鍋：裝物（有壁管內鍋：裝物（有壁管）鍋鍋蓋蓋安全閥安全閥排氣閥排氣閥壓力表壓力表第23頁/共83頁常壓常壓第24頁/共83頁密閉性好密閉性好要要求求1.接接 種種 箱箱用用法法清潔、放物品清潔、放物品 消毒消毒噴霧噴霧熏蒸熏蒸紫外燈紫外燈特特點點簡易、利移動簡易、利移動對人體低害對人體低害效果好、工效低效果好、工效低 三、接種設備三、接種設備（一）接種環(huán)境（一）接種環(huán)境第25頁/共83頁觀察窗觀察窗紫外紫外燈燈操作操作孔孔第26頁/共83頁2.接種室接種室緩沖

6、間：緩沖間：23m2接種間：接種間：56m2面積面積79m2高高2.22.5m要求要求 6個面平滑個面平滑兩門錯開、平拉式兩門錯開、平拉式頂裝紫外燈頂裝紫外燈清潔清潔物品放緩沖間物品放緩沖間消毒消毒 移物至接種間移物至接種間 噴消毒液噴消毒液 10min 后接種后接種消毒液清潔消毒液清潔 使用使用第27頁/共83頁第28頁/共83頁第29頁/共83頁使一定工作區(qū)達到相對無菌、無塵狀態(tài)的電器使一定工作區(qū)達到相對無菌、無塵狀態(tài)的電器3.超凈工作臺超凈工作臺雙人雙人單單人人第30頁/共83頁要求要求:前端為導熱性好的金屬材料前端為導熱性好的金屬材料槍匙鉤鏟鑷耙針環(huán)接種接種4.接種工具接種工具第31頁

7、/共83頁固固體體菌菌種種接接種種槍槍液體菌種接種槍液體菌種接種槍返回本節(jié)第32頁/共83頁四、菌種培養(yǎng)設備四、菌種培養(yǎng)設備1.培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱培養(yǎng)少量菌種的恒溫電器（培養(yǎng)少量菌種的恒溫電器（2040）第33頁/共83頁2.培養(yǎng)室培養(yǎng)室培養(yǎng)大量菌種的恒溫房培養(yǎng)大量菌種的恒溫房要求要求光線暗光線暗密閉好、通風性強密閉好、通風性強能升溫、降溫（空調機能升溫、降溫（空調機）有培養(yǎng)架）有培養(yǎng)架第34頁/共83頁貯貯藏藏室室遠離污染源遠離污染源低溫（低溫（48）干燥、通風、遮光干燥、通風、遮光 用前要嚴格消毒殺用前要嚴格消毒殺蟲蟲地面常撒石灰粉地面常撒石灰粉保藏原種、栽培種：保藏原種、栽培種：五、菌種保藏設

8、備五、菌種保藏設備保藏母種：冰箱（保藏母種：冰箱（4）左右）左右第35頁/共83頁基本概念基本概念殺死一切微生物，包括芽孢。殺死一切微生物，包括芽孢。滅菌滅菌分為分為殺菌：菌體尚存殺菌：菌體尚存溶菌：菌體消失溶菌：菌體消失消毒：只殺死病源菌，未傷及芽孢消毒：只殺死病源菌，未傷及芽孢防腐：暫時抑制微生物生長防腐：暫時抑制微生物生長除菌：用沖洗、過濾等機械的方法，除去微生物除菌：用沖洗、過濾等機械的方法，除去微生物第36頁/共83頁第37頁/共83頁第38頁/共83頁第39頁/共83頁第40頁/共83頁第41頁/共83頁第42頁/共83頁第二節(jié)母種制作一、母種培養(yǎng)基制作一、母種培養(yǎng)基制作二、菌種分

9、離二、菌種分離三、母種擴繁三、母種擴繁第43頁/共83頁1.1.準備工作準備工作（1 1）材料）材料 馬鈴薯、葡萄糖（或蔗糖）、瓊脂馬鈴薯、葡萄糖（或蔗糖）、瓊脂、水。、水。（2 2）儀器用具及消毒藥品）儀器用具及消毒藥品 電爐子、鋁鍋、玻電爐子、鋁鍋、玻璃棒、漏斗、紗布、止水夾、漏斗架、切菜小刀、璃棒、漏斗、紗布、止水夾、漏斗架、切菜小刀、切板、切板、1000ml1000ml燒杯、捆扎繩、棉花、試管（燒杯、捆扎繩、棉花、試管（18mm18mm180mm180mm）、試管架、鐵絲筐、厚的長木條、標）、試管架、鐵絲筐、厚的長木條、標簽、天平、稱量紙、牛角匙、精密簽、天平、稱量紙、牛角匙、精密pH

10、pH試紙、牛皮紙試紙、牛皮紙、皮筋、紗布、恒溫培養(yǎng)箱、手提式高壓滅菌鍋、皮筋、紗布、恒溫培養(yǎng)箱、手提式高壓滅菌鍋、超凈工作臺或接種箱、接種鏟、酒精燈、火柴、記超凈工作臺或接種箱、接種鏟、酒精燈、火柴、記號筆等。消毒藥品包括：號筆等。消毒藥品包括：7575的酒精棉球、的酒精棉球、0.25%0.25%新新潔爾滅溶液、煙霧消毒王或菇保一號等。潔爾滅溶液、煙霧消毒王或菇保一號等。一一 母種培養(yǎng)基制作母種培養(yǎng)基制作第44頁/共83頁 將學生分成幾組，分別負責切土豆、稱量水將學生分成幾組，分別負責切土豆、稱量水、稱量藥品、處理瓊脂等。、稱量藥品、處理瓊脂等。 2.2.稱量、材料預處理稱量、材料預處理第45

11、頁/共83頁將切好的馬鈴薯塊加適量水后放將切好的馬鈴薯塊加適量水后放入鋁鍋或電飯鍋中，煮至酥而不爛。入鋁鍋或電飯鍋中，煮至酥而不爛。3.3.熬制熬制第46頁/共83頁4.4.過濾、加可溶藥物過濾、加可溶藥物用雙層紗布過濾，取濾汁，用雙層紗布過濾，取濾汁，放在鋁鍋中加入糖。放在鋁鍋中加入糖。第47頁/共83頁 在沸騰狀態(tài)下加入瓊脂粉，直到瓊脂完全在沸騰狀態(tài)下加入瓊脂粉，直到瓊脂完全溶化為止，定容至溶化為止，定容至1000ml1000ml。5.5.加瓊脂，定容加瓊脂，定容第48頁/共83頁（二）營養(yǎng)液分裝（二）營養(yǎng)液分裝 1.1.用注射器或用帶止水夾的漏斗分裝用注射器或用帶止水夾的漏斗分裝 2.2

12、.分裝量為試管長度的分裝量為試管長度的1/41/51/41/5。注。注意培養(yǎng)基不能沾污試管口。意培養(yǎng)基不能沾污試管口。第49頁/共83頁9 9或或1111支試管捆支試管捆在一起，棉塞上包在一起，棉塞上包好防水紙，直立放好防水紙，直立放入高壓滅菌鍋中。入高壓滅菌鍋中。棉塞松緊適度棉塞松緊適度，1/31/3在管外，在管外，2/32/3在管內。在管內。3.3.塞棉塞塞棉塞4.4.捆扎捆扎A正確 B不正確第50頁/共83頁 在在3 3壓力下維持壓力下維持30-40min30-40min。（三）滅菌（三）滅菌第51頁/共83頁滅菌結束后鍋蓋開滅菌結束后鍋蓋開1/51/5的小縫，用余熱烘干報紙和的小縫，用

13、余熱烘干報紙和棉塞，然后擺斜面。斜面長是試管總長的棉塞，然后擺斜面。斜面長是試管總長的1/21/2( (四四) )擺斜面擺斜面第52頁/共83頁概念：菌種移至新培養(yǎng)基上的過程概念：菌種移至新培養(yǎng)基上的過程關鍵：無菌操作關鍵：無菌操作接種接種在嚴格消毒滅菌條件下進在嚴格消毒滅菌條件下進行的操作行的操作無菌操作概念無菌操作概念要點要點接種環(huán)境消毒滅菌接種環(huán)境消毒滅菌酒精棉球消毒雙手酒精棉球消毒雙手開啟的管口、瓶口靠近燈焰開啟的管口、瓶口靠近燈焰拔出的棉塞勿觸及任何地方拔出的棉塞勿觸及任何地方動作快，接種時間勿太長動作快，接種時間勿太長第53頁/共83頁二二 菌種分離菌種分離第54頁/共83頁1 1

14、組織分離法（無性繁殖組織分離法（無性繁殖）第55頁/共83頁第56頁/共83頁第57頁/共83頁第58頁/共83頁第59頁/共83頁第60頁/共83頁第61頁/共83頁第62頁/共83頁第63頁/共83頁第64頁/共83頁第65頁/共83頁第66頁/共83頁步驟種菇消毒采收孢子接種孢子整菇插種法鉤懸法第67頁/共83頁 在無菌條件下，可用在無菌條件下，可用75%的棉的棉球對種菇進行表面消毒，或用球對種菇進行表面消毒，或用0.1%的升汞溶液浸的升汞溶液浸1-2分鐘，再用無分鐘，再用無菌水沖洗三次，無菌紗布吸干表菌水沖洗三次，無菌紗布吸干表面水分。面水分。1.種菇的消毒種菇的消毒第68頁/共83頁

15、2.采收孢子采收孢子整菇插種法種菇插在孢子收集器中使孢子散落于培養(yǎng)皿內的方法用前滅菌25、24h現(xiàn)孢子粉取出分離材料培養(yǎng)皿蓋嚴第69頁/共83頁鉤懸法25、24h現(xiàn)孢子粉現(xiàn)孢子粉取出分離材料取出分離材料第70頁/共83頁3.接種與培養(yǎng)接種與培養(yǎng)第71頁/共83頁第72頁/共83頁第73頁/共83頁第74頁/共83頁第75頁/共83頁1.將接種用品及原始母種放入接種箱內。將接種用品及原始母種放入接種箱內。2.用氣霧消毒盒（用氣霧消毒盒（4g/m3）進行密閉熏蒸）進行密閉熏蒸30min以上。以上。3.手、臺面、接種工具、母種管用酒精棉球擦試消毒。手、臺面、接種工具、母種管用酒精棉球擦試消毒。4.點

16、燃酒精燈，火焰灼燒接種鎬至燒紅后冷卻，凡能伸點燃酒精燈，火焰灼燒接種鎬至燒紅后冷卻，凡能伸進試管的桿部均過火滅菌。進試管的桿部均過火滅菌。 ( (一一) )母種轉管無菌操作技術要點母種轉管無菌操作技術要點第76頁/共83頁6右手小指、無名右手小指、無名指及手掌拔掉棉塞，用火指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼燒試管口并不斷攪動焰灼燒試管口并不斷攪動。5.將母種和空白斜面培將母種和空白斜面培養(yǎng)基用大拇指和其他四指握養(yǎng)基用大拇指和其他四指握在左手中，斜面向上，并使在左手中，斜面向上，并使它們與桌面接近水平，試管它們與桌面接近水平，試管口略向下傾斜。口略向下傾斜。第77頁/共83頁7 7先棄去前端先棄去前端1

17、cm1cm處，然后用接種處，然后用接種鎬快速移取黃豆粒大鎬快速移取黃豆粒大小的菌種入待接試管小的菌種入待接試管斜面培養(yǎng)基中央。斜面培養(yǎng)基中央。8抽出接種鉤，燒灼管口，棉塞燎烤至微焦，在火抽出接種鉤，燒灼管口，棉塞燎烤至微焦，在火焰旁塞上棉塞。焰旁塞上棉塞。9用接種鎬挑持住母種管，另一只手換待接管，重用接種鎬挑持住母種管，另一只手換待接管，重復上述操作。復上述操作。10.收拾臺面。收拾臺面。 11.貼標簽貼標簽第78頁/共83頁 接種后，于接種后，于22左右的環(huán)境避光培養(yǎng)，每天左右的環(huán)境避光培養(yǎng)，每天都有要仔細觀察，對污染的試管及時挑除。原始都有要仔細觀察，對污染的試管及時挑除。原始母種的培養(yǎng)初期一定要天天檢查，以