HIV抗體檢測與質(zhì)量控制

1、HIV抗體檢測與質(zhì)量控制抗體檢測與質(zhì)量控制滋病毒（人類免疫缺陷病毒）n艾滋病毒（即人類免疫缺陷病毒）是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，它具有極強的迅速變異能力，這一特征不僅使人體的免疫系統(tǒng)難以抵御其侵害，而且給特效治療藥物和預防用疫苗的研制帶來困難。艾滋病毒直接侵犯人體的免疫系統(tǒng)，破壞人體的細胞免疫和體液免疫。它主要存在于感染者和病人的體液（如血液、精液、陰道分泌物、乳汁等）及多種器官中，它可通過含HIV的體液交換或器官移植而傳播。 病毒現(xiàn)狀病毒現(xiàn)狀 n在世界范圍內(nèi)導致了近1200萬人的死亡，超過3000萬人受到感染。在感染后會整合入宿主細胞的基因組中，而抗病毒治療并不能把病毒根除。在2004年底，全球有約四

2、千萬被感染并與人類免疫缺陷病毒共同生存的人，流行狀況最為嚴重的仍是撒哈拉以南非洲。n1986年7月25日，世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)布公報，國際病毒分類委員會會議決定，把艾滋病病毒改稱為人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus）簡稱HIV。病毒特點病毒特點 nHIV病毒主要攻擊人體的輔助T淋巴細胞系統(tǒng)；一旦侵入機體細胞，病毒會和細胞整合在一起終生難以消除；病毒基因變化多樣；廣泛存在于感染者的血液、精液、陰道分泌物、唾液、尿液、乳汁、腦脊液、有神經(jīng)癥狀的腦組織液，其中以血液、精液、陰道分泌物中濃度最高；對外界環(huán)境的抵抗力較弱，對乙肝病毒有效的消毒方法對艾滋病病毒消

3、毒也有效；感染者潛伏期長、死亡率高；艾滋病病毒的基因組比已知任何一種病毒基因都復雜。體外生存體外生存 n人類免疫缺陷病毒在人體外生存能力極差，不耐高溫，抵抗力較低，離開人體不易生存，常溫下只可生存數(shù)小時至數(shù)天。nHIV對熱敏感。在56條件下30分鐘即失去活性，但在室溫保存7天，仍保持活性。滅活方法滅活方法 n國際衛(wèi)生組織推薦對艾滋病病毒滅活加熱100持續(xù)20分鐘，效果較理想。 病毒形態(tài)n人類免疫缺陷病毒直徑約120納米，大致呈球形。 致病機制nHIV選擇性的侵犯帶有CD4分子，主要有T淋巴細胞、單核巨噬細胞、樹突狀細胞等。 傳播途徑傳播途徑 nHIV感染者是傳染源，曾從血液、精液、唾液、尿液、

4、陰道分泌液、眼淚、乳汁等分離得HIV。n性接觸傳播 n血液傳播 n母嬰傳播 疾病診斷HIVHIV抗體篩查試驗抗體篩查試驗nELISAELISA試驗試驗n化學發(fā)光法化學發(fā)光法n快速檢測快速檢測補充試驗補充試驗n抗體確證試驗：抗體確證試驗：免疫印跡試劑（免疫印跡試劑（WBWB）和條和條帶免疫試驗（帶免疫試驗（RIBARIBA）n核酸試驗：核酸定性和核酸定量試驗核酸試驗：核酸定性和核酸定量試驗 HIVHIV抗體檢測目的抗體檢測目的nHIV抗體檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等?？贵w檢測可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測等。n以以診斷診斷為目的的檢測是為了確定個體為目的的檢測是為了確定個體HIV感染狀況，包括感

5、染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進行的體檢等。n以以血液篩查血液篩查為目的的檢測是為了防止輸血傳播為目的的檢測是為了防止輸血傳播HIV，包括，包括獻血員篩查和原料血漿篩查。獻血員篩查和原料血漿篩查。n以以監(jiān)測監(jiān)測為目的的檢測是為了解不同人群為目的的檢測是為了解不同人群HIV感染率及其變感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。化趨勢，包括各類高危人群、重點人群和一般人群。HIVHIV抗體篩查樣品抗體篩查樣品n血清血清/ /血漿血漿/ /全血全血n濾紙干血斑濾紙干血斑n口腔黏膜滲出液口腔黏膜滲出液n尿液尿液篩查試劑

6、篩查試劑n國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準n有效期內(nèi)有效期內(nèi)n酶聯(lián)免疫試劑應批批檢合格酶聯(lián)免疫試劑應批批檢合格n選擇敏感性和特異性高的試劑選擇敏感性和特異性高的試劑篩查方法篩查方法n酶聯(lián)免疫吸附試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISAELISA）n化學發(fā)光或免疫熒光試驗化學發(fā)光或免疫熒光試驗（CIA/IFACIA/IFA） ：采用發(fā)光或熒光底物，采用發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果用發(fā)光或熒光儀測定結(jié)果n快速檢測快速檢測（RTRT）及其它檢測試驗及其它檢測試驗 酶聯(lián)免疫吸附試驗（酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISAELISA）nHIV抗體檢測試劑（第三代）：抗體檢測試劑（第三

7、代）：檢測檢測HIV-1/2抗抗體體nHIV抗原抗體聯(lián)合檢測試劑（第四代）：抗原抗體聯(lián)合檢測試劑（第四代）：可同時可同時檢測血液中檢測血液中HIV-1P24抗原和抗原和HIV-1/2抗體抗體n用用酶標儀酶標儀測定結(jié)果測定結(jié)果n有效試驗的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定有效試驗的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定ELISAELISA試驗中可能出現(xiàn)的問題和原因分析試驗中可能出現(xiàn)的問題和原因分析問題可能的原因（非試劑盒本身的原因）測定的重復性差1.加樣本及試劑量不準2.加樣過快，孔間發(fā)生污染3.加錯樣本4.加樣本和試劑時，加在孔壁上部非包被區(qū)5.溫育時間、洗板、顯色時間不一致6.酶標儀濾光片問題ELI

8、SAELISA試驗中可能出現(xiàn)的問題和原因分析試驗中可能出現(xiàn)的問題和原因分析問題可能的原因（非試劑盒本身的原因）白板（陽性對照不顯色）1.漏加酶結(jié)合物2.洗液配制問題，量筒不干凈含酶抑制物3.漏加顯色劑A或B4.終止液當顯色劑使用全部板孔都有顯色1.洗板不干凈2.加底物的吸頭被酶污染3.洗板液受酶污染4.由于儀器或加樣頭造成的交叉污染ELISAELISA測定中的干擾因素測定中的干擾因素n內(nèi)源性干擾因素n外源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素 n人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的有：類以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的有：類風濕因

9、子、補體、嗜異性抗體、醫(yī)源性誘風濕因子、補體、嗜異性抗體、醫(yī)源性誘導的抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥導的抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子等物小分子等外源性干擾因素外源性干擾因素n常常是由于血標本的采集、貯存等不當常常是由于血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、細菌污染、標本貯所致。如標本溶血、細菌污染、標本貯存時間過長、凝集不全、反復凍融等存時間過長、凝集不全、反復凍融等分析ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果時，需綜合考慮試劑因素、操作因素和標本因素等。ELISAELISA法結(jié)果判斷法結(jié)果判斷n臨界值概念臨界值概念: : 將檢測的陽性和（或）陰性對照的將檢測的陽性和（或）陰

10、性對照的ODOD值代入計算公式計算出來的判斷陽性和陰性結(jié)值代入計算公式計算出來的判斷陽性和陰性結(jié)果的界值果的界值n判斷標準判斷標準: :標本標本ODOD值與臨界值的比值大于等于值與臨界值的比值大于等于1(S/CO1)1(S/CO1)為陽性為陽性n注意注意: :不同廠家、不同方法臨界值計算公式不同不同廠家、不同方法臨界值計算公式不同酶聯(lián)免疫吸附試驗（酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISAELISA）n優(yōu)點：準確性高、價格低廉、判斷結(jié)果優(yōu)點：準確性高、價格低廉、判斷結(jié)果標準客觀、結(jié)果便于記錄和保存標準客觀、結(jié)果便于記錄和保存n用途：流行病學監(jiān)測及臨床大量標本的用途：流行病學監(jiān)測及臨床大量標本的檢測檢測化學發(fā)

11、光或免疫熒光試驗化學發(fā)光或免疫熒光試驗n采用采用發(fā)光或熒光底物發(fā)光或熒光底物n既可檢測抗體，也可聯(lián)合檢測抗原抗體既可檢測抗體，也可聯(lián)合檢測抗原抗體n酶或熒光標記的酶或熒光標記的HIVHIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物光底物n用用發(fā)光儀或熒光儀發(fā)光儀或熒光儀測定結(jié)果測定結(jié)果（1 1）免疫滲濾試驗：斑點免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗）免疫滲濾試驗：斑點免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗n以硝酸纖維膜為載體以硝酸纖維膜為載體nHIVHIV抗原點狀固定在膜上抗原點狀固定在膜上n加待檢樣品加待檢樣品n陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點n有效試驗的質(zhì)

12、控點必須顯色有效試驗的質(zhì)控點必須顯色快速檢測（快速檢測（RTRT）及其它檢測試驗）及其它檢測試驗斑點免疫膠體金快速診斷試驗斑點免疫膠體金快速診斷試驗（2 2）免疫層析試驗：）免疫層析試驗：n以硝酸纖維膜為載體以硝酸纖維膜為載體nHIVHIV抗原線狀固定在膜上抗原線狀固定在膜上n待檢樣品（血液、唾液或尿液）沿著固相載體遷移待檢樣品（血液、唾液或尿液）沿著固相載體遷移n陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶陽性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶n有效試驗的質(zhì)控帶必須顯色有效試驗的質(zhì)控帶必須顯色第四代快速試劑（第四代快速試劑（SDSD）：）：可區(qū)分抗原抗體的檢測可區(qū)分抗原抗體的檢測全血樣品加50ul樣品

13、于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果快速檢測（快速檢測（RTRT）及其它檢測試驗）及其它檢測試驗病人條質(zhì)控條快速檢測（快速檢測（RTRT）及其它檢測試驗）及其它檢測試驗優(yōu)點優(yōu)點: :n快速快速 n單份標本檢測單份標本檢測 n不需額外試劑或設備不需額外試劑或設備 n操作簡便操作簡便缺點缺點: :n肉眼判斷較主觀肉眼判斷較主觀n價格較貴價格較貴n結(jié)果不易保存（結(jié)果不易保存（建議拍照保存建議拍照保存）HIVHIV篩查試劑的選擇篩查試劑的選擇n檢測目的檢測目的n實驗設施條件實驗設施條件n價格價格n其他：檢測數(shù)量、標本用量、復檢問題、習慣等其他：檢測數(shù)量、標本用量、復檢問題、習慣

14、等等等試劑試劑-1有反應有反應 無反應無反應 試劑試劑1雙份或雙孔檢測或兩雙份或雙孔檢測或兩種試劑種試劑*均有反應均有反應 一有反應一有反應 ,一無反應一無反應 均無反應均無反應補充實驗補充實驗報告報告HIV抗體陰性抗體陰性 圖圖2 2 使用抗體檢測試劑的檢測流程使用抗體檢測試劑的檢測流程*兩種試劑可以是原有試劑加另一種試劑， 也可以是兩種不同試劑。臨床診斷相關的檢測策略臨床診斷相關的檢測策略使用抗體檢測試劑的篩查檢測流程使用抗體檢測試劑的篩查檢測流程HIVHIV抗體篩查結(jié)果的意義及處理抗體篩查結(jié)果的意義及處理n陰性：真陰性陰性：真陰性 未感染未感染HIV病毒病毒 假陰性假陰性 注意窗口期注意

15、窗口期n陽性：真陽性陽性：真陽性 感染感染HIV病毒病毒 假陽性假陽性 非特異性反應非特異性反應 操作失誤操作失誤n處理：篩查試驗無反應報告為處理：篩查試驗無反應報告為“HIV抗體陰性抗體陰性”；有；有反應必須進行復檢，復檢兩次檢測均無反應報告為反應必須進行復檢，復檢兩次檢測均無反應報告為“HIV抗體陰性抗體陰性”，復檢檢測均有反應或一個有反應，復檢檢測均有反應或一個有反應一個無反應需進行一個無反應需進行“補充試驗補充試驗”；報告為；報告為“HIV感染感染待確定待確定”，不能出具陽性報告。，不能出具陽性報告。補充試驗補充試驗 是通過檢測樣本中是否存在是通過檢測樣本中是否存在艾滋病病毒抗體艾滋病

16、病毒抗體或或者者核酸核酸確定艾滋病病毒感染的檢測方法。確定艾滋病病毒感染的檢測方法。 補充試驗包括補充試驗包括抗體確證試驗抗體確證試驗 免疫印跡試驗、免疫印跡試驗、條帶條帶/ /線性免疫試驗線性免疫試驗，特定條件下的特定條件下的替代檢測（替代檢測（三三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗或酶聯(lián)加快速試驗種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗或酶聯(lián)加快速試驗），免疫層析和免疫層析和核酸檢測試驗核酸檢測試驗（核酸定性檢測和核酸定（核酸定性檢測和核酸定量檢測試驗）量檢測試驗）HIVHIV抗體確證試驗抗體確證試驗確證試驗的試劑：確證試驗的試劑： 必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準、在有效期內(nèi)的試劑。確證樣品：確證樣品： 可

17、采用血清、血漿、濾紙干血斑確證試驗方法：確證試驗方法： 免疫印跡試驗、條帶/線性免疫試驗，特定條件下的替代檢測（三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗或酶聯(lián)加快速試驗），免疫層析或免疫滲濾試驗條帶免疫試驗（RIBA）/重組免疫印跡法（萬泰）陽性陽性免疫印跡試驗免疫印跡試驗（WB/RIBA）陰性陰性不確定不確定核酸試驗核酸試驗或或2-42-4周后周后隨訪隨訪出現(xiàn)出現(xiàn)HIV-2HIV-2指示帶指示帶根據(jù)情況根據(jù)情況進一步進一步檢測檢測HIV-2報告報告HIV-1抗體陰性抗體陰性報告報告HIV-1抗體陽性抗體陽性圖圖5 5 免疫印跡試劑（免疫印跡試劑（WB/RIBA）試驗流程）試驗流程抗體確證試驗檢測流程抗體確

18、證試驗檢測流程HIV抗體WB及 RIBA/LIA試驗結(jié)果報告：（1）符合HIV-1抗體陽性判斷標準，報告“HIV-1抗體陽性”，并按規(guī)定做好檢測后咨詢和疫情報告。符合HIV-2抗體陽性判斷標準，報告“HIV-2抗體陽性”，并按規(guī)定做好檢測后咨詢和疫情報告。（2）符合HIV抗體陰性判斷標準，報告“HIV抗體陰性”。如疑似“窗口期”感染，建議2-4周后隨訪或進一步做HIV核酸檢測，盡早明確診斷。（3）符合HIV抗體不確定判斷標準，報告“HIV抗體不確定”，在備注中應注明“2-4周后復檢”或盡快做核酸檢測。 抗體確證試驗檢測報告n原因：原因：HIVHIV感染早期感染早期 HIV HIV感染晚期感染晚

19、期 非特異性反應非特異性反應 污染污染n處理：核酸檢測處理：核酸檢測 2- 2-4 4周后隨訪周后隨訪 重采血重采血 HIV-1核酸檢測核酸檢測HIV-1核酸定性檢測核酸定性檢測HIV-1核酸定量試驗核酸定量試驗有反應報有反應報告告HIV-1核酸陽性核酸陽性無反應報無反應報告告HIV-1核酸陰性核酸陰性報告報告低于檢低于檢測限測限5000cps/ml,報告報告檢測值檢測值5000cps/ml重新采重新采樣樣 檢測檢測高于檢測限高于檢測限低于檢測限低于檢測限圖核酸試驗流程圖核酸試驗流程臨床診斷相關的檢測策略臨床診斷相關的檢測策略核酸補充試驗報告核酸補充試驗報告n定性檢測定性檢測結(jié)果有反應，報告結(jié)

20、果有反應，報告“HIV-1核酸陽性核酸陽性”；無反；無反應，報告應，報告“HIV核酸核酸陰陰性性”。n定量檢測定量檢測結(jié)果低于檢測限，報告低于檢測限；結(jié)果低于檢測限，報告低于檢測限；n檢測結(jié)果大于檢測結(jié)果大于5000CPs/ml，報告檢測值；，報告檢測值；n檢測結(jié)果低于等于檢測結(jié)果低于等于5000CPs/ml，盡快再次嚴格按核，盡快再次嚴格按核酸檢測的要求采樣檢測，報告檢測值酸檢測的要求采樣檢測，報告檢測值。n臨床醫(yī)生可臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、結(jié)合臨床及流行病史、CD4+T淋巴細胞檢淋巴細胞檢測值或者測值或者HIV-1抗體隨訪檢測結(jié)果等進行抗體隨訪檢測結(jié)果等進行診斷或排除診診斷或排除診斷

21、斷。HIVHIV抗體抗體n母親母親 HIV HIV 抗體經(jīng)胎盤進入胎兒，出生時新生抗體經(jīng)胎盤進入胎兒，出生時新生兒和嬰兒早期抗體陽性，不一定是感染兒和嬰兒早期抗體陽性，不一定是感染n出生時母親的抗體，出生時母親的抗體，8090% 8090% 在生后在生后 912 912 個個月消失，出生后月消失，出生后 18 18 個月基本上全部消失個月基本上全部消失n18 18 個月后兒童個月后兒童 HIVHIV抗體仍然陽性，視為自身抗體仍然陽性，視為自身感染產(chǎn)生的抗體感染產(chǎn)生的抗體1818個月以下嬰幼兒的個月以下嬰幼兒的HIVHIV診斷診斷嬰幼兒嬰幼兒HIVHIV感染的抗體檢測感染的抗體檢測適用于：適用于

22、：nHIVHIV感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；n母親母親HIVHIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIVHIV相關臨床表現(xiàn)，相關臨床表現(xiàn)，臨床懷疑臨床懷疑HIVHIV感染的兒童。感染的兒童。n嬰兒嬰兒1212個月個月時進行時進行HIVHIV抗體檢測抗體檢測 陰性排除感染陰性排除感染，納入正常兒童保??；，納入正常兒童保?。?陽性者繼續(xù)追蹤隨訪陽性者繼續(xù)追蹤隨訪，至，至1818個月再次進行個月再次進行HIVHIV抗體檢抗體檢測，結(jié)果陰性排除感染。測，結(jié)果陰性排除感染。HIVHIV抗體檢測的要點抗體檢測的要點n根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。n

23、嚴格遵守實驗室標準操作程序（嚴格遵守實驗室標準操作程序（SOPSOP）。）。n結(jié)果判定以試劑盒說明書為標準。結(jié)果判定以試劑盒說明書為標準。n篩查試驗有反應，須作補充試驗篩查試驗有反應，須作補充試驗質(zhì)量控制質(zhì)量控制 質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常進行而在每一次實驗過程中必須采取進行而在每一次實驗過程中必須采取的各種措施。以保證檢驗結(jié)果達到允的各種措施。以保證檢驗結(jié)果達到允許的準確度。許的準確度。n實驗前質(zhì)量控制 正確的標本采集和處理正確的標本采集和處理 正確及時的運送樣品正確及時的運送樣品 實驗前正確地處理和保存樣品實驗前正確地處理和保存樣品n實驗中質(zhì)量控制 儀器校

24、準儀器校準 選擇選擇合格試劑，采用合格試劑，采用正確的檢測方法正確的檢測方法 標準程序標準程序 質(zhì)控品的準備質(zhì)控品的準備 開展質(zhì)控圖質(zhì)控開展質(zhì)控圖質(zhì)控n實驗后質(zhì)量控制 結(jié)果記錄結(jié)果記錄 記錄核對記錄核對 結(jié)果解釋結(jié)果解釋 記錄保存記錄保存 質(zhì)量控制質(zhì)量控制實驗前質(zhì)量控制實驗前質(zhì)量控制樣品的采集：實驗室應根據(jù)待測項目選用適當?shù)姆綐悠返牟杉簩嶒炇覒鶕?jù)待測項目選用適當?shù)姆椒ú杉瘶悠?。法采集樣品。n抗體檢測可采集血清、血漿和全血；抗體檢測可采集血清、血漿和全血；nCD4+TCD4+T淋巴細胞檢測可采集淋巴細胞檢測可采集K3EDTAK3EDTA或肝素或枸櫞酸或肝素或枸櫞酸鈉抗凝全血，并在鈉抗凝全血，

25、并在2424小時內(nèi)室溫送檢；小時內(nèi)室溫送檢；nHIV-1HIV-1病毒載量測定可采集病毒載量測定可采集EDTAEDTA或枸櫞酸鈉或枸櫞酸鈉(ACD)(ACD)抗凝全血，最好在抗凝全血，最好在6 6小時內(nèi)離心分離血漿和血細胞。小時內(nèi)離心分離血漿和血細胞。將分離的血漿分裝到將分離的血漿分裝到2-32-3支，冰凍保存，在凍存管支，冰凍保存，在凍存管上編號。做好樣品處理記錄并注明分裝時間。上編號。做好樣品處理記錄并注明分裝時間。實驗前質(zhì)量控制實驗前質(zhì)量控制樣品的保存：樣品的保存：n用于用于HIVHIV抗體檢測的血清和血漿樣品抗體檢測的血清和血漿樣品, ,應存放于應存放于- -2020以下，短期（以下，

26、短期（1 1周）內(nèi)進行檢測的樣品可存放周）內(nèi)進行檢測的樣品可存放于于2-82-8；n用于用于CD4+TCD4+T淋巴細胞檢測的樣品應在室溫下淋巴細胞檢測的樣品應在室溫下（1818 2323）保存，避免極端溫度（冷凍或過熱）保存，避免極端溫度（冷凍或過熱）, ,樣品采集時間超過樣品采集時間超過72h72h則不可檢測；則不可檢測；n用于病毒載量檢測的樣品的保存條件應根據(jù)血漿用于病毒載量檢測的樣品的保存條件應根據(jù)血漿檢測時間而定，檢測時間而定，4 4天內(nèi)可在天內(nèi)可在44暫時保存，暫時保存，3 3個月以個月以內(nèi)凍存于內(nèi)凍存于-20-20以下，以下，3 3個月以上應置于個月以上應置于-70-70以下以下

27、保存。血漿樣品凍融次數(shù)不可超過保存。血漿樣品凍融次數(shù)不可超過3 3次。每次凍融次。每次凍融在樣品上標明。在樣品上標明。 實驗前質(zhì)量控制實驗前質(zhì)量控制樣品的運輸：樣品的運輸：n1 1、樣品送檢時需與相應送樣單同時送檢。、樣品送檢時需與相應送樣單同時送檢。n2 2、血清和血漿樣品在、血清和血漿樣品在2-82-8條件下由專人低溫運輸。條件下由專人低溫運輸。n3 3、CD4+TCD4+T淋巴細胞檢測樣品需在在室溫下（淋巴細胞檢測樣品需在在室溫下（1818 2323）運送，）運送，避免極端溫度（冷凍或過熱）。超過避免極端溫度（冷凍或過熱）。超過3737的溫度會破壞細胞，的溫度會破壞細胞，對血液學和流式細

28、胞儀的檢測有影響。對血液學和流式細胞儀的檢測有影響。n4 4、病毒載量測定樣品的運送：凍存的血漿樣品在運輸過程中、病毒載量測定樣品的運送：凍存的血漿樣品在運輸過程中要保持樣品在冷凍狀態(tài)，防止樣品凍融。在要保持樣品在冷凍狀態(tài)，防止樣品凍融。在44暫時保存的樣暫時保存的樣品，在品，在2-82-8條件下低溫運輸?？鼓獦悠吩跅l件下低溫運輸?？鼓獦悠吩?424小時內(nèi)小時內(nèi)2-82-8條件下低溫運輸。條件下低溫運輸。實驗前質(zhì)量控制實驗前質(zhì)量控制運輸采用運輸采用WHOWHO提出的三級包裝系統(tǒng)提出的三級包裝系統(tǒng) n第一層容器：裝樣品，要求防滲漏第一層容器：裝樣品，要求防滲漏 n第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。保護第一層容器，可以裝若干個第一層容器。 n第三層容器：放在一個運輸用外層包裝內(nèi)，應第三層容器：放在