幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌的室內(nèi)毒力測(cè)定(共39頁(yè))

1、PAGE 河 南 科 技 大 學(xué)畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)（論 文） 幾種(j zhn)藥劑對(duì)玉米彎孢菌的室內(nèi)(sh ni)毒力測(cè)定姓 名 車志平 院 （系） 林學(xué)院 專 業(yè) 植物保護(hù)(zhwboh) 指導(dǎo)教師 崔林開(kāi) 2007年 6 月 26 日畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）包含內(nèi)容(nirng)及裝訂順序1. 畢業(yè)設(shè)計(jì)(b y sh j)（論文）任務(wù)書(shū)2. 中英文摘要(zhiyo)（含關(guān)鍵詞）3. 目錄4. 前言5. 正文6. 結(jié)論7. 參考文獻(xiàn)8. 致謝9. 附錄10. 外文資料譯文 - 4 -畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)（ 論 文 ）任 務(wù) 書(shū)（指導(dǎo)(zhdo)教師填表） 填表時(shí)間(shjin)：2007 年01月 10 日

2、學(xué)生姓名車志平專業(yè)班級(jí)植保032指導(dǎo)教師崔林開(kāi)課題類型論文設(shè)計(jì)（論文）題目幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌的室內(nèi)毒力測(cè)定主要研究?jī)?nèi)容1.從田間采到的病葉上分離玉米彎孢病菌，單孢分離純化，并從形態(tài)上進(jìn)行初步鑒定；2. 幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌分生孢子萌發(fā)的影響3. 幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)的影響4. 幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌芽管伸長(zhǎng)的影響主要技術(shù)指標(biāo)(或研究目標(biāo))1.通過(guò)形態(tài)鑒定，明確分離所得玉米彎孢菌的種類；2.找到抑制玉米彎孢菌分生孢子萌發(fā)較好的藥劑；3.找到抑制玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)較好的藥劑；4.找到抑制玉米彎孢菌芽管伸長(zhǎng)較好的藥劑；5.綜合幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌分生孢子萌發(fā)、菌絲生長(zhǎng)和芽管 伸長(zhǎng)的影響，找到

3、一種抑制玉米彎孢菌較好的藥劑。進(jìn)度計(jì)劃2006.01-2007.02 查閱資料，撰寫(xiě)開(kāi)題報(bào)告 2007.03-2007.04 進(jìn)行玉米彎孢菌的分離與鑒定2007.04-2007.05 進(jìn)行幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌的室內(nèi)毒力 測(cè)定的研究2007.06 撰寫(xiě)論文，準(zhǔn)備畢業(yè)答辯主要參考文獻(xiàn)1.蔣家珍 , 吳學(xué)民 , 趙美琦.13 種殺菌劑對(duì)草坪新月彎孢菌的毒力測(cè)定及應(yīng)用分析. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，25（4）：20-222.古麗皮艷, 韓青梅, 王蘭.不同殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌的毒力測(cè)定. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，33：49-523.方中達(dá).植病研究方法.中國(guó)農(nóng)業(yè)出版，1998研究所（教

4、研室）主任(zhrn)簽字： 年 月 日目 錄摘要(zhiyo)YAbstractY1前言(qin yn)11.1玉米(ym)彎孢病菌在我國(guó)及世界的危害狀況11.2癥狀11.3 病原21.3.1病原菌種類21.3.2病原菌的生物學(xué)特性21.4影響分生孢子萌發(fā)的因素31.5影響病殘?bào)w產(chǎn)孢的因素31.6病原菌的致病性及生理分化31.7病菌毒素41.8發(fā)生規(guī)律和影響發(fā)病因素41.8.1發(fā)生規(guī)律41.8.2影響發(fā)病因素51.9危害損失及其估計(jì)模型51.10玉米對(duì)彎孢葉斑病的抗性及抗性機(jī)制61.11綜合防治71.11.1選育和種植抗病品種71.11.2輪作換茬和清除田問(wèn)病茬，減少菌源71.11.3加強(qiáng)栽

5、培管理，培育壯苗，增強(qiáng)植株抗病能力71.11.4藥劑防治71.11.5搞好病情測(cè)報(bào)工作82 材料與方法82.1試驗(yàn)材料92.1.1玉米病葉92.1.2供試殺菌劑92.1.3儀器(yq)與用品92.1.4其他(qt)試驗(yàn)用品(yngpn)92.2試驗(yàn)方法102.2.1病原菌的分離102.2.2病原菌的純化102.2.3 分離病菌的初步鑒定102.2.4殺菌劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響102.2.5殺菌劑對(duì)孢子萌發(fā)的影響113 結(jié)果與分析123.1 玉米彎孢菌的種類鑒定123.2不同殺菌劑對(duì)病菌菌絲生長(zhǎng)的影響133.3不同殺菌劑對(duì)病菌分生孢子萌發(fā)的影響154 結(jié)論與討論184.1 試驗(yàn)結(jié)論184.2 討論1

6、8參考文獻(xiàn)20致謝22附錄23幾種藥劑對(duì)玉米彎孢菌的室內(nèi)(sh ni)毒力測(cè)定摘 要玉米(ym)彎孢葉斑病Currularia lunata (Boed) Wakker是我國(guó)近幾年玉米上發(fā)生(fshng)的重要病害。其危害在一些地區(qū)已經(jīng)超過(guò)玉米大小斑病，成為玉米主要病害，對(duì)玉米產(chǎn)量的損失相當(dāng)嚴(yán)重，但目前在藥劑防治方面還沒(méi)有篩選出一套可行的方案。鑒于此，本試驗(yàn)從玉米彎孢菌葉斑病的病葉上分離純化病菌，并進(jìn)行初步鑒定，鑒定是新月彎孢菌。然后采用室內(nèi)生長(zhǎng)速率法和分生孢子萌發(fā)法測(cè)定了6種殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌Currularia lunata (Boed) Wakker的毒力作用，得到6條毒力回歸曲線

7、及相應(yīng)的EC501。結(jié)果表明，不同殺菌劑，同種殺菌劑不同系列濃度之間存在差異，且同種殺菌劑對(duì)菌絲與分生孢子毒力作用不同。生長(zhǎng)速率抑制試驗(yàn)中，退菌特、多菌靈、粉銹寧、百菌清、代森錳鋅、甲基硫菌靈的EC50分別為0.080mg/mL，0.055mg/mL，0.172mg/mL，0.137mg/mL，0.595mg/mL，0.548mg/mL；分生孢子萌發(fā)試驗(yàn)中，退菌特、多菌靈、粉銹寧、百菌清、代森錳鋅、甲基硫菌靈的EC50分別為0.076mg/mL，0.055mg/mL，0.063mg/mL，0.172mg/mL，0.298mg/mL，0.521mg/mL。通過(guò)測(cè)定6種殺菌劑對(duì)玉米彎孢菌的菌絲生長(zhǎng)

8、、孢子萌發(fā)的抑制作用，初步找到對(duì)防治玉米彎孢菌葉斑病較好的藥劑，為防治此病提供科學(xué)的理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：殺菌劑；玉米彎孢葉斑病菌；EC50；生長(zhǎng)速率；孢子萌發(fā)法Several PHarmaceutical Right Curvularia Fungus Indoor Virulence TestAbstractThe corn curved spore leaf spot Currularia lunata (Boed) Wakker is the important plant disease which on our country corn occurs in recent years.

9、Its harm already surpassed the corn size spot sickness in some areas, became the corn main plant disease, Is quite serious to the corn output loss, but at present has not filled in the chemical control aspect selects set of feasible plans. Is situated between this, this experiment separates the puri

10、fication germ from on the corn curved spore fungus leaf spot sickness leaf, and carries on the preliminary appraisal, the appraisal is the crecent moon curved spore fungus. Then to uses in the room to grow the speed law and a minute fresh spore sprouts the law has determined 6 kind of disinfectants

11、to the corn curved spore leaf spot fungus Currularia lunata (Boed) Wakker the toxicity function, obtains 6 toxicity regression curve and corresponding EC50. The result indicated that, the different disinfectant, between the homogeneous disinfectant different series density the existence difference,

12、also the homogeneous disinfectant is different to germs silk and the minute fresh spore toxicity function, Growth rate inhibition test,and the withdrawal from UNSCOM, carbendazim, triadimefon, chlorothalonil, mancozeb, Ling-flow strain EC50 were 0 .080mg/mL, 0.055mg/mL，0.172mg/mL, 0.137mg/mL, 0.595m

13、g/mL, 0.548mg / mL; In the experiment of a minute fresh spore sprouts ,and the withdrawal from UNSCOM, carbendazim, triadimefon, chlorothalonil, mancozeb, Ling-flow strain EC50 were 0.076mg/mL, 0.055mg/mL, 0.063mg/mL, 0.172mg/mL, 0.298mg/mL, 0.521mg/mL. By measuring six fungicides on Curvularia fung

14、us from the Andean governor, spore germination inhibition Preliminary find a microbicide to combat Curvularia lunata better PHarmacy, To control the disease with scientific theory.Key words : Fungicide; Curvularia leaf spot disease bacteria; EC50; Growth rate; Spore germination1前言(qin yn)1.1玉米彎孢病菌在我

15、國(guó)及世界(shji)的危害狀況玉米(ym)彎孢葉斑病Curvularia lunata(Wakker)Boed是近年來(lái)我國(guó)玉米生產(chǎn)上新發(fā)生的一種危害性很大的病害1。早在1956年國(guó)外就有報(bào)道。我國(guó)有關(guān)該病的記載始于l9世紀(jì)70年代末80年代初，只因當(dāng)時(shí)未能確定其病原，故稱為“無(wú)名斑”。80年代中期，在河南省新鄉(xiāng)地區(qū)種植的玉米骨干自交系黃早四上發(fā)生了該病。近10幾年來(lái)，隨著栽培制度改進(jìn)，作物品種更換，氣候條件的變化，玉米彎孢葉斑病已成為繼玉米大、小斑病和黑穗病之后，在我國(guó)北方發(fā)生的又一災(zāi)害性病害。該病害發(fā)展蔓延快，已在遼寧、北京、河北、河南、山東、吉林和天津等地普遍發(fā)生，并對(duì)玉米生產(chǎn)造成極為嚴(yán)重

16、的影響。如1996年該病在遼寧省大面積爆發(fā)流行，發(fā)病面積達(dá)192105 hm ，其中絕收166l04 hm ，減產(chǎn)25l08kg，僅綏中縣該病病級(jí)達(dá)4級(jí)以上，損失玉米800萬(wàn)kg。為了解決玉米彎孢葉斑病對(duì)玉米生產(chǎn)所造成的嚴(yán)重影響，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)該病害做了較多的研究，本文前半部分就目前國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀做一綜述。1.2癥狀玉米(ym)彎孢葉斑病又稱擬眼斑病、黑霉病2。它主要危害玉米葉片，有時(shí)也危害葉鞘和苞葉，在不同品種上其癥狀變化極大(j d)。其典型癥狀初為褪綠小斑點(diǎn)，逐漸擴(kuò)展為圓形或橢圓形褪綠透明的病斑，中心枯白色或黃褐色，邊緣暗褐色，周圍有淡黃色暈圈。病斑大小一般為(0.54mm)(0.52

17、mm)，大的可達(dá)7mm 3 mm。在田間空氣潮濕的條件下，病斑正反兩面均可產(chǎn)生(chnshng)分生孢子?；蚍稚咦?，以背面為多，呈灰色霉?fàn)钗?。嚴(yán)重時(shí)葉片上的病斑可出現(xiàn)聯(lián)合現(xiàn)象，導(dǎo)致全葉干枯。趙來(lái)順依據(jù)病斑的大小、形狀、顏色及產(chǎn)孢情況等特征，將該病的癥狀類型分為抗病型(R)、中間型(M)和感病型(S)。感病型病斑(S)：病斑較大，寬l2mm，長(zhǎng)l4mm，圓形、橢圓形、長(zhǎng)條形或不規(guī)則形，中央蒼白色或黃褐色，邊緣有較寬的褐色環(huán)帶，最外圍有較寬的半透明草黃色暈圈，數(shù)個(gè)病斑相連可形成葉片壞死區(qū)。中間型(M)：病斑小，12mm圓形、橢圓形或不規(guī)則形，中央蒼白色或淡褐色，邊緣有較窄或的褐色環(huán)帶，最外圍有

18、明顯的褪綠暈圈?？共⌒?R)：病斑小，12mm圓形、橢圓形或不規(guī)則形，中央蒼白色或淡褐色，邊緣無(wú)褐色環(huán)帶或有較細(xì)的褐色環(huán)帶，最外圍有狹細(xì)的半透明暈圈。1.3病原1.3.1病原菌種類引起玉米彎孢葉斑病的病原為半知菌亞門、絲孢綱、絲孢目、暗色菌科、彎孢霉屬的真菌。國(guó)外學(xué)者認(rèn)為，玉米上有多種彎孢霉菌引起的葉斑病，包括：新月彎孢菌Curvularia lunata(Wakker)Boed、蒼白彎孢菌(C. Pallescens Boed)、斑點(diǎn)彎孢菌Cmaculans.(Bancroft)Boed和棒彎孢菌(C. clavata Jain.)、C. tested、C.tetramera、 C.erag

19、rostidis、C.trifolii、C. inaegualis)等。其中以新月彎孢菌氣生變種Curvularia lunata(Wakker)Boed為優(yōu)勢(shì)種，造成的損失也最嚴(yán)重。我國(guó)到目前為止報(bào)道的有6種彎孢霉菌引起的玉米葉斑病，包括：新月彎孢氣生變種(C. lunata Boed)、蒼白彎孢菌(C.Pallescens Boed)、不等彎孢菌(C.inaeguais Boed)、畫(huà)眉草彎孢C.eragrostidis(P.Henn.)JAMeyer、棒狀彎孢(C.clavata Jain.)和中隔彎孢(C. intermedia Boed)，其中，(C. lunata)是主要的致病菌，

20、也是研究和防治的重點(diǎn)。1.3.2病原菌的生物學(xué)特性(txng)影響(yngxing)病原茵茵絲生長(zhǎng)(shngzhng)的因素?fù)?jù)張定法等報(bào)道4，該病菌的菌絲生長(zhǎng)的溫度范圍為938，最適溫度為2832。戴法超等人認(rèn)為病菌的菌絲在40生長(zhǎng)緩慢，菌絲生長(zhǎng)的溫度范圍為640。該病菌對(duì)pH的適應(yīng)范圍比較廣，戴法超、張定法等報(bào)道5，當(dāng)pH為112時(shí)病菌均能生長(zhǎng)，形成正常菌落。而白元俊則報(bào)道6，病菌在pH為28的范圍內(nèi)才可以生長(zhǎng)，病菌生長(zhǎng)的pH范圍為412，最適為69。白元俊還報(bào)道，該病菌的菌絲生長(zhǎng)的碳源以六碳糖為好，氮源以NH4+形態(tài)時(shí)較好；光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)無(wú)顯著影響，但黑暗交替有利于孢子形成。病菌菌生長(zhǎng)的最

21、適碳源為可溶性淀粉，氮源以NO3-形態(tài)最好，以NH4+形態(tài)最差。1.4影響分生孢子萌發(fā)的因素多數(shù)的研究者均認(rèn)為，分生孢子萌發(fā)的溫度范圍為741?？琢顣缘葓?bào)道，分生孢子在1045范圍內(nèi)均可萌發(fā)，最適溫度范圍在2040。李富華認(rèn)為，分生孢子萌發(fā)的溫度范圍在840，最適在25357。多數(shù)的研究者均認(rèn)為，分生孢子萌發(fā)時(shí)要求高濕度，但在濕度范圍上的報(bào)道并不一致。甘賢友認(rèn)為，在5條件下，孢子在水滴中的萌發(fā)率為7090，在飽和濕度下萌發(fā)率僅50，相對(duì)濕度低于90時(shí)孢子很少萌發(fā)或不萌發(fā)。張定法報(bào)道，25飽和濕度下孢子萌發(fā)率只有7，而孢子在水滴中的萌發(fā)率為91，同時(shí)他認(rèn)為分生孢子萌發(fā)的pH值范圍為310。白元俊

22、認(rèn)為，分生孢子在pH為411之間均可萌發(fā)。鄭鉉爽等報(bào)道，花粉粒(不論是新鮮花粉粒還是放置一年的花粉粒)及葉面物質(zhì)都可以促進(jìn)孢子的萌發(fā)，且隨著濃度的增加，促進(jìn)作用更明顯。1.5 影響病殘?bào)w產(chǎn)孢的因素有關(guān)影響(yngxing)病殘?bào)w產(chǎn)孢的因素研究報(bào)道不是很多8。張定法報(bào)道，病殘?bào)w產(chǎn)孢的溫度(wnd)范圍為1538，適宜(shy)溫度為2535，病斑上分生孢子形成要求98以上的空氣相對(duì)濕度。病殘?bào)w產(chǎn)孢的溫度范圍為838，且隨著溫度的升高，病殘?bào)w產(chǎn)孢時(shí)間縮短，當(dāng)溫度高于20，處理24 h后即可產(chǎn)生大量的孢子病殘?bào)w產(chǎn)孢的最低空氣相對(duì)濕度為961。1.6 病原菌的致病性及生理分化彎孢霉菌的寄主范圍較廣，據(jù)

23、報(bào)道彎孢霉菌除危害玉米外，還可以侵染水稻、高粱子粒和葉片，引起黑霉粒和變色米病害，還可以引起一種新的水稻葉鞘腐敗病9。Fakir和Kulkami報(bào)道，該病菌可以侵染小麥，具有一定的致病性。WU報(bào)道，它還可危害一些禾本科雜草。此外還有研究者發(fā)現(xiàn)它可以寄生于番茄、辣椒的果實(shí)以及中藥材山奈上。戴法超等對(duì)來(lái)自不同地區(qū)的10個(gè)菌株進(jìn)行致病性測(cè)定，結(jié)果表明，不同菌株之間致病性存在顯著差異，這種差異一方面表現(xiàn)在地區(qū)不同差異顯著，如來(lái)自北京周邊的菌株要強(qiáng)于山東濟(jì)南的菌株。另一方面在不同寄主上分離獲得的菌株致病性差異也表現(xiàn)顯著，如玉米上分離獲得的菌株致病性強(qiáng)于分離自水稻和小紅豆上的菌株。呂國(guó)忠也報(bào)道該病菌的致病

24、性存在差異。鄢洪海在做博士論文時(shí)采用同工酶電泳技術(shù)、鑒別寄主鑒定技術(shù)、基因組隨機(jī)多態(tài)性擴(kuò)增技術(shù)(RAPD)及人工誘變，從寄主病原互作角度研究了玉米彎孢葉斑病的遺傳、變異與致病性分化，明確了該病菌存在致病性分化和生理分化，并從遺傳物質(zhì)DNA水平證實(shí)病菌致病性分化并非是表現(xiàn)型差異，而是一種基因的分化，具有較穩(wěn)定的遺傳基礎(chǔ)。他經(jīng)過(guò)篩選大量玉米品種和自交系后，確定自交系沈135、78599-1、Mo17、477、C8605、E28、7922和黃早四為較理想的鑒別寄主，建立起我國(guó)玉米彎孢葉斑病菌致病性分化的鑒別寄主體系，并采用這8個(gè)鑒別寄主將我國(guó)玉米彎孢葉斑病菌大致劃分為AF6個(gè)致病性分化型10。用鑒別

25、寄主鑒定結(jié)果和DNA遺傳多態(tài)性輔助鑒定結(jié)果關(guān)系密切，特別是在強(qiáng)致病性菌株分組3種方法鑒定結(jié)果上基本一致。這一研究首次在國(guó)內(nèi)外建立起以鑒別寄主鑒定為主，DNA遺傳多態(tài)性和同工酶分析鑒定為輔的病菌致病性分化鑒定技術(shù)，為玉米彎孢葉斑病菌生理分化的進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。陳捷等還研究了影響病菌生理分化鑒定的主要環(huán)境因子，其中濕度、溫度和植株?duì)I養(yǎng)狀況對(duì)病菌生理分化鑒定結(jié)果有明顯影響。1.7 病菌(bngjn)毒素Macri報(bào)道(bodo)，C.1unata在Fries改良培養(yǎng)基上至少能產(chǎn)生兩種毒素，且活性強(qiáng)，在稀釋倍數(shù)較大時(shí)仍能引起玉米葉片(ypin)枯死。這兩種毒素具有溶于水和乙醇，還溶于氯仿和二乙基醚

26、、可透析等特點(diǎn)，在pH較低時(shí)活性大，進(jìn)一步研究表明，該毒素屬非寄主?；远舅?1。我國(guó)呂國(guó)忠等、趙來(lái)順等也報(bào)道，玉米彎孢菌葉斑病菌可以產(chǎn)生毒素，且毒素對(duì)寄主種子的萌發(fā)及胚根和胚芽生長(zhǎng)都有抑制作用，可使幼苗枯死；毒索還可使寄主葉片組織的葉綠體、線粒體及細(xì)胞壁等超微結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯的傷害作用，病菌毒素的紫外光譜分析顯示，這種毒素是非蛋白質(zhì)類物質(zhì)，具有熱穩(wěn)定性。玉米彎孢葉斑病菌毒素不僅是病原菌的致病因子之一，在適當(dāng)濃度下也可作為玉米抗性的誘導(dǎo)因子，但彎孢菌毒素中的有效誘導(dǎo)成份有待于進(jìn)一步研究。1.8 發(fā)生規(guī)律和影響發(fā)病因素1.8.1 發(fā)生規(guī)律許多研究表明12，玉米彎孢葉斑病菌以菌絲體潛伏于病殘?bào)w組織中或

27、以分生孢子狀態(tài)越冬。遺留在田間的病葉、秸稈或施入田間的由帶病玉米秸稈漚制而未腐熟的農(nóng)家肥是該病重要的初侵染源。一般田間發(fā)病始于7月底至8月初，由于此病害潛育期短(23 d)，710 d后即可完成一次侵染循環(huán)，病菌可隨風(fēng)雨傳播，短期內(nèi)侵染源急劇增加，如遇高溫濕，則在田間形成病害流行(高峰期)。但由于受生態(tài)因子的影響，各地在病害發(fā)生的始發(fā)期、進(jìn)人高峰期的時(shí)間以及發(fā)病嚴(yán)重程度上都有一定的差異。1.8.2影響發(fā)病因素影響玉米彎孢菌葉斑病流行的因素主要包括田間菌源積累量、氣候因素、耕作制度和栽培技術(shù)等。玉米彎孢菌菌源量是病害發(fā)生的內(nèi)因，是發(fā)病的基礎(chǔ)條件。多年來(lái)玉米秸稈一直作為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民的燒柴，有的群眾家在

28、第二年春播時(shí)還堆存有玉米秸稈沒(méi)有燒掉。加之秋翻地不及時(shí)，地里還殘留帶病菌的植株、殘葉，這是第二年發(fā)病的初發(fā)菌源。隨著發(fā)病面積的擴(kuò)大，病菌量逐年增加。氣候因素影響發(fā)病的嚴(yán)重程度。玉米彎孢菌葉斑的發(fā)生程度與7、8月份的不良?xì)夂驐l件密切相關(guān)，主要是濕度和溫度。高溫高濕是該病發(fā)生的有利因素，特別是78月份的濕度和溫度是決定當(dāng)年病害流行程度的關(guān)鍵因子。耕作制度和栽培技術(shù)對(duì)該病的發(fā)病程度有嚴(yán)重影響。各地大面積的種植感病品種是該病大發(fā)生的主導(dǎo)因素，現(xiàn)在主栽的玉米品種絕大多數(shù)都是感病和高感病的，高抗品種很少，不存在抗病品種，這就對(duì)該病的大發(fā)生創(chuàng)造了條件。玉米大面積連作，造成田間病殘?bào)w多，增加了菌源數(shù)量。栽培管

29、理粗放也是造成玉米彎孢菌葉斑病發(fā)生流行的主要原因，有機(jī)肥施用量少，偏施無(wú)機(jī)肥，氮、磷、鉀及微量元素失調(diào)；播種量大，植株密度大，田間郁閉，通風(fēng)透光條件差，濕度增加，光照不足，既降低了玉米植株的抗病性，又有利于病害的發(fā)生流行。1.9 危害損失及其估計(jì)(gj)模型傅俊范研究了玉米彎孢菌葉斑病引起的產(chǎn)量(chnling)損失，認(rèn)為該病對(duì)玉米百粒重、單穗重和產(chǎn)量都有顯著影響，產(chǎn)量損失率與病情指數(shù)呈正相關(guān)，產(chǎn)量損失率最高為38.24，而病情指數(shù)對(duì)穗數(shù)沒(méi)有直接影響13。他還利用統(tǒng)計(jì)分析軟件構(gòu)建了兩個(gè)玉米彎孢菌葉斑產(chǎn)量(chnling)損失估計(jì)模型：關(guān)鍵期病情模型(CPM)：L=2.821 9+0.7402X

30、1(R=0.879 9，SD=5.214 9，N=18)。多期病情模型(MPM)：L=I.073+0.426X1+0.170X2(R=0.892，SD=5.289 8，N=18)。式中：L為玉米產(chǎn)量損失率，X1為授粉期病情指數(shù)，X2 為灌漿后期病情指數(shù)。張定法認(rèn)為，產(chǎn)量損失與病級(jí)、病情指數(shù)之間均存在著極顯著的直線相關(guān)。病級(jí)每提高1級(jí)，產(chǎn)量損失平均增加8.25；病情指數(shù)每增加10，產(chǎn)量損失平均增加4.14。在產(chǎn)量損失構(gòu)成中，千粒重下降處于主導(dǎo)地位，約占66.6；穗粒數(shù)減少次之，約占33.4。1.10 玉米對(duì)彎孢葉斑病的抗性及抗性機(jī)制玉米(ym)品種和自交系對(duì)彎孢葉斑病的抗性存在即存抗性和誘導(dǎo)抗性

31、。Oye kan做了播期與玉米抗病性關(guān)系(gun x)的研究，結(jié)果表明14，播期對(duì)玉米的抗性影響很大，播期早，發(fā)病輕，抗性強(qiáng)；播期晚，感病重，抗性弱。趙來(lái)順等就播期與抗病性關(guān)系的研究也得出同樣結(jié)果。戴法超不同生育期抗性試驗(yàn)結(jié)果表明。玉米苗期抗性較強(qiáng)，隨著生育期進(jìn)程的發(fā)展玉米對(duì)彎孢葉斑病的抗性也在逐漸減弱，在13葉期最感病，由此看來(lái)玉米對(duì)彎孢葉斑病的抗性具有階段性，可能受生理機(jī)能調(diào)控，是一種即存抗性。Olufolaji和趙來(lái)順等報(bào)道(bodo)，在玉米生育期增施N肥，促進(jìn)玉米健壯，葉片濃綠，可提高抗性；相反，缺乏營(yíng)養(yǎng)特別是N肥不足，抗性明顯下降。因此，玉米的生理狀況也影響其抗性。Mandok h

32、ot報(bào)道，玉米彎孢葉斑菌分生孢子接觸葉片后，利用雨水，2 h就可萌發(fā)侵入，芽管生長(zhǎng)特快，并不斷形成分枝和附著胞直接侵入寄主組織角質(zhì)層、蠟質(zhì)層根本對(duì)它侵入不構(gòu)成障礙，因此，玉米對(duì)彎孢葉斑病幾乎不存在結(jié)構(gòu)抗性。Mandok hot的結(jié)論說(shuō)明。在彎孢菌的強(qiáng)侵染力面前，玉米對(duì)彎孢葉斑病的即存抗性比誘導(dǎo)抗性弱。目前，對(duì)玉米彎孢菌葉斑病的研究多集中在品種抗性鑒定上。據(jù)報(bào)道15，不同玉米品種對(duì)彎孢菌葉斑病的抗性有明顯差異，但是針對(duì)特定品種，不同的研究年份和不同生態(tài)條件下，其抗性鑒定的結(jié)果并不完全相同，甚至有時(shí)會(huì)出現(xiàn)完全相反的結(jié)論?？傮w說(shuō)來(lái)，目前我國(guó)玉米主栽品種抗性單一，主要是抗玉米大小斑病和絲黑穗病，一旦新

33、的病害出現(xiàn)，條件適宜，品種往往很快失去抗性，由抗病品種變?yōu)楦胁∑贩N，這也是近幾年玉米彎孢菌葉斑病從輕到重猖獗危害的主要原因之一。由于玉米彎孢葉斑病是一種新病害，目前有關(guān)該病的抗性機(jī)制研究較少，黃婭琳對(duì)玉米抗彎孢葉斑病的生化機(jī)制進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明16，病原菌侵染可以刺激寄主玉米產(chǎn)生酚類物質(zhì)，且酚類物質(zhì)的含量與玉米抗彎孢葉斑病性能之間存在明顯的正相關(guān)；受病原菌侵染后，抗、感品種的PAL酶活性均呈上升趨勢(shì)，但抗病品種PAL酶活性在接種前的基礎(chǔ)水平和接種后的上升速度以及峰值均高于感病品種，故認(rèn)為PAL酶在玉米抗彎孢葉斑病中發(fā)揮積極作用；受病原菌侵染后，抗、感品種的POD酶活性均呈上升趨勢(shì)，但抗病

34、品種的POD酶活峰值的出現(xiàn)早于并高于感病品種；此外，受病后抗、感品種的POD同工酶變化趨勢(shì)相同，都是在發(fā)病前、中期酶活性上升，后期稍下降，其中抗病品種的各酶帶活性明顯高于感病品種，這說(shuō)明過(guò)氧化物酶在病菌侵染早、中期對(duì)抗病起著作用。在玉米與病原菌互作的過(guò)程中，感病品種的酯酶活性稍有下降，抗病品種在發(fā)病中期各酶活性均稍有升高，但抗、感品種的酶譜變化沒(méi)有差異。此外，抗、感品種的過(guò)氧化氫同工酶譜的變化趨勢(shì)相同，僅程度上有一定差異。1.11 綜合(zngh)防治1.11.1 選育(xun y)和種植抗病品種抗病育種是防治彎孢葉斑病經(jīng)濟(jì)(jngj)有效的措施之一17。引進(jìn)新的抗病種質(zhì)資源，通過(guò)雜交、生物技

35、術(shù)等手段導(dǎo)入抗病基因，拓寬品種的遺傳基礎(chǔ)是遏制玉米彎孢葉斑病危害的關(guān)鍵。目前抗性較好的自交系及品種有Mo17 、沈137、799、沈試29和農(nóng)大108等18。1.11.2 輪作換茬和清除田問(wèn)病茬，減少菌源玉米收獲后，及時(shí)清除病殘?bào)w，集中燒毀或深埋。也可以在秋天時(shí)深耕、深翻，把病葉殘株翻入底層或在玉米收獲后進(jìn)行澆水，而后深耕，造成濕潤(rùn)的土壤條件，消滅病菌。嚴(yán)禁利用玉米秸稈作架材。1.11.3 加強(qiáng)栽培管理，培育壯苗，增強(qiáng)植株抗病能力適當(dāng)早播，可以減輕病害的發(fā)生；增施有機(jī)肥，培肥地力，優(yōu)化氮、磷、鉀及微量元素配方，合理密植，一般大穗型品種60 000株/hm2左右為宜；雨后及時(shí)排除田間積水，創(chuàng)造有

36、利于玉米生長(zhǎng)發(fā)育的田間生態(tài)環(huán)境，提高植株抗病力，減輕發(fā)病程度。1.11.4 藥劑防治 噴灑藥劑是防治的最后一道防線，也是應(yīng)急措施。當(dāng)病情指數(shù)達(dá)到防治指標(biāo)時(shí)(田間病斑株率達(dá)到10)，應(yīng)立即噴藥防治，一般用40多菌靈乳液6kg/hm2(500倍液)噴霧，7天1次，連噴3次，防效較好；用50的退菌特、80的炭疽福美或50的福美雙，防治效果也可達(dá)70.082.5。此外，效果較好的還有70的代森錳鋅可濕性粉劑、75的百菌清可濕性粉劑等19。1.11.5 搞好(o ho)病情測(cè)報(bào)工作由于玉米彎孢葉斑病的發(fā)病規(guī)律有待進(jìn)一步研究(ynji)，故尚無(wú)一整套預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)的方法20。從上述的研究結(jié)果看，可根據(jù)頭年發(fā)病危

37、害程度和種源地玉米彎孢葉斑病的發(fā)病情況，結(jié)合當(dāng)?shù)氐臍庀箢A(yù)報(bào)，做出病害(bnghi)發(fā)生危害估計(jì)。玉米彎孢葉斑病一般田間發(fā)病始于7月底至8月初，潛育期短。短期內(nèi)即可完成一次侵染循環(huán)，因此，應(yīng)注意預(yù)報(bào)和及時(shí)防治。2 材料與方法2.1試驗(yàn)材料2.1.1 玉米病葉 玉米病葉采自河南省林州市玉米彎孢菌葉斑病發(fā)生嚴(yán)重的玉米田塊。2.1.2 供試殺菌劑50%退菌特可濕性粉劑(河北冠龍農(nóng)化有限公司)50%多菌靈可濕性粉劑(青島谷成金作物科學(xué)有限公司研制)20粉銹寧可濕性粉劑（天津市田園農(nóng)用化工科技實(shí)業(yè)公司開(kāi)發(fā)）75百菌清可濕性粉劑（連云港市德龍農(nóng)藥有限公司）80%代森錳鋅可濕性粉劑(山東榮邦化工有限公司)70

38、甲基硫菌靈可濕性粉劑（江蘇新沂中興農(nóng)化有限公司）2.1.3 儀器與用品無(wú)菌工作臺(tái)、培養(yǎng)箱、玻璃棒、剪刀、解剖刀、接種針、接種環(huán)、70%酒精、0.1%升汞、火柴、橡皮筋套、滅菌培養(yǎng)皿、接種鏟、打孔器、酒精燈、滅菌吸管（1.0mL）、吸液管（1.0mL）、鑷子、燒杯、凹玻片、電子稱、滅菌試管、吸水紙、記號(hào)筆、試管架、計(jì)數(shù)器、無(wú)菌水、熒光顯微鏡。2.1.4 其他試驗(yàn)用品培養(yǎng)基：PDA（去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15-20g、蒸餾水1000mL），制作方法是：稱取200g去皮馬鈴薯切成小塊，在小鐵鍋內(nèi)先加1000mL蒸餾水，并用玻璃鉛筆標(biāo)記水液面，然后放入切好的馬鈴薯，煮沸半個(gè)小時(shí)，用紗布

39、濾除馬鈴薯，濾液仍倒入鐵鍋內(nèi)，加適量蒸餾水使液面仍保持原標(biāo)記處，再加20g葡萄糖和20g瓊脂，加熱使瓊脂溶化，并用玻璃棒不停地?cái)噭?dòng)，以免糊底，直到瓊脂溶化后再次補(bǔ)足水份。充分溶解后趁熱紗布過(guò)濾，然后分裝在100200mL的三角瓶中并封口，用滅菌鍋（121）滅菌30分鐘左右后取出冷卻后貯存?zhèn)溆谩?.1%升汞(shn n)溶液：升汞1g、濃鹽酸2.5mL、蒸餾水1000mL（配制方法：先將升汞溶于鹽酸中，待充分溶解(rngji)后，再加水稀釋）2.2試驗(yàn)(shyn)方法2.2.1病原菌的分離從玉米田間找取發(fā)病的新鮮玉米葉片（特點(diǎn)為：葉部病斑初為水浸狀褪綠半透明小點(diǎn)，后擴(kuò)大為圓形、橢圓形、梭形或長(zhǎng)條

40、形病斑，病斑長(zhǎng)25，12，最大的可達(dá)73，病斑中心灰白色，邊緣黃褐或紅褐色，外圍有淡黃色暈圈，并具有黃褐相間的斷續(xù)環(huán)紋。潮濕條件下，病斑正反兩面均可產(chǎn)生灰黑色霉?fàn)钗?，即病原菌的分生孢子和分生孢子梗。感病品種葉片密布病斑，病斑接合后葉片枯死。）或找取上一年發(fā)病過(guò)的玉米葉帶回實(shí)驗(yàn)室備用（如果是去年的發(fā)病葉片必須在用前浸泡于清水中24h以后用）剪取大小接近1cm的玉米彎孢病葉斑（玉米彎孢病葉斑的斑點(diǎn)大小為25mm左右，中心為白色且透明，邊緣灰色至褐色）用刀子除去剪取斑點(diǎn)上的灰塵和其他雜質(zhì)（目的是使分離的菌更純化）在無(wú)菌臺(tái)上將獲得的病斑浸入酒精中56s然后浸入 0.1%砷汞中12min而后在準(zhǔn)備好的無(wú)

41、菌水中浸蘸34s重復(fù)用無(wú)菌水沖洗34次將沖洗過(guò)的病斑葉片放在滅菌過(guò)的吸水紙上使病斑上的水吸干準(zhǔn)備好倒好的PDA培養(yǎng)基平板將45片處理過(guò)的玉米彎孢病病斑放在倒好的PDA培養(yǎng)基上（病斑必須用十字交叉法方在倒好的PDA培養(yǎng)基上，而且互相不能靠近，以防止病菌相互交叉感染。此過(guò)程均在無(wú)菌下操作。）趕快蓋上培養(yǎng)皿蓋并記下制作的日期置于2728的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)23天以后觀察。2.2.2 病原菌的純化 分離的菌長(zhǎng)到菌落直徑為12cm時(shí)，倒PDA培養(yǎng)基平板（待PDA培養(yǎng)基冷卻以后開(kāi)始純化）用挑針挑取一小塊帶菌的培養(yǎng)基或菌絲然后快速接種到準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基中心（此過(guò)程都在無(wú)菌臺(tái)上進(jìn)行，并且必須在靠近酒精燈旁邊操作

42、。接種時(shí)必須將有菌的一面接在培養(yǎng)基上）快速蓋上培養(yǎng)皿蓋并記下接種日期置于2728培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，三到四天以后進(jìn)行鏡檢，根據(jù)彎孢菌的形態(tài)特征鑒定出玉米彎孢菌。其特點(diǎn)為：分生孢子梗單生或數(shù)根從生，暗褐色，不分枝，有隔，頂端多呈屈膝狀，頂端和側(cè)面著生分生孢子。分生孢子淡褐色、灰褐色，棍棒形或橢圓形，向一端彎曲，多數(shù)分生孢子3個(gè)隔膜4個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，中間兩個(gè)細(xì)胞膨大，暗褐色，從基部向上數(shù)第三個(gè)細(xì)胞最大，兩端細(xì)胞較小。分離到玉米(ym)彎孢菌進(jìn)行單孢分離：其過(guò)程(guchng)為：（1）在產(chǎn)孢的培養(yǎng)皿中加入約5m的無(wú)菌水后用推布玻璃棒在菌絲表面輕輕推布以使產(chǎn)生的孢子進(jìn)入無(wú)菌水中，然后倒入試管中備用。（2）制僅

43、有瓊脂的平板冷卻以后備用，同時(shí)(tngsh)倒幾皿PDA培養(yǎng)基備用。（3）給制好的平板上滴一滴備用的孢子液后用推布玻璃棒推布以使孢子分布均勻。然后在超凈臺(tái)上用挑針在顯微鏡下挑去單個(gè)的孢子并接種在PDA培養(yǎng)基上。（4）將接種好的單孢培養(yǎng)皿方入2728的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),45天以后鑒定。2.2.3 分離病菌的初步鑒定用PDA 平面培養(yǎng)純化的菌株,先在25 下暗培養(yǎng)，逐日觀察、記錄病原菌的培養(yǎng)性狀;培養(yǎng)45 天后, 挑取病原菌進(jìn)行鏡檢, 觀察菌絲、分生孢子梗和分生孢子的形態(tài)特征。根據(jù)形態(tài)特征確定分離病菌的種類。當(dāng)分離的病菌菌落顏色為淡黃色后，挑取病原菌進(jìn)行鏡檢，其分生孢子梗單生或數(shù)根從生，暗褐色，不分枝

44、，有隔，頂部多呈區(qū)狀，大小約70270um24um，頂端和側(cè)面著生分生孢子。分生孢子淡褐色、灰褐色，棍棒形或橢圓形，少數(shù)呈“Y”型，向一端彎曲，多數(shù)分生孢子為3個(gè)隔膜4個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，中間兩個(gè)細(xì)胞膨大，暗褐色，從基部向上數(shù)第三個(gè)細(xì)胞最大，兩端細(xì)胞較小，大小為1930819,淡褐色。如果在顯微鏡下觀察的病原菌符合以上特點(diǎn)，說(shuō)明分離的病菌是所需的玉米彎孢菌。2.2.4不同殺菌劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響將6種不同供試殺菌劑用無(wú)菌水分別(fnbi)稀釋成所需的5種梯度濃度藥液，每種藥劑每一濃度各取5mL分別(fnbi)與45mLPDA培養(yǎng)基混合(hnh)均勻后倒入三個(gè)培養(yǎng)皿中冷卻后備用，此即為所制的藥板。將直徑為

45、8mm的彎孢菌菌餅置于含藥平板中央，每皿1塊，以滅菌水為對(duì)照（CK）。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。28下培養(yǎng)，定期檢查，待培養(yǎng)四天后用十字交叉法測(cè)量菌落直徑。也可以在接種后第二天就開(kāi)始用十字交叉法每天測(cè)量菌落直徑直到第四天。三天記錄的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可根據(jù)情況選擇一天的作為論文中所要的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。用下式計(jì)算抑制率：抑制率=（對(duì)照生長(zhǎng)直徑-處理生長(zhǎng)直徑）/（對(duì)照生長(zhǎng)直徑-0.8）100% 試驗(yàn)方法及步驟：（1）將消毒三角瓶中盛放的一定體積的無(wú)菌水分別于各種不同殺菌劑按所需比例混合，并作好藥劑名稱、濃度的標(biāo)記。（2）加熱融化定量即45mL培養(yǎng)基，冷卻至5055時(shí)加入5mL供試藥劑，充分搖勻后迅速倒入3個(gè)培養(yǎng)皿中，此時(shí)

46、等于將藥液又稀釋了10倍。因此，在配制藥液時(shí)應(yīng)該將藥液濃度擴(kuò)大10倍，這樣正好達(dá)到所設(shè)計(jì)的有效濃度。待凝固后，標(biāo)記各皿藥劑名稱及濃度。對(duì)照組的培養(yǎng)基加入5mL無(wú)菌水。（3）以無(wú)菌操作，用切菌環(huán)切取一塊8mm的純粹培養(yǎng)的菌種（最好均在菌落邊緣選取，菌落邊緣生活力強(qiáng)也比較一致），移植于各個(gè)凝固培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中央，然后置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48小時(shí)即第二天后測(cè)量菌落直徑，作為第一組數(shù)據(jù)，第三、第四天的作為第二、第三組數(shù)據(jù)。由于第四天后菌落長(zhǎng)置于培養(yǎng)皿大小一樣大，無(wú)法繼續(xù)測(cè)量，因此，一組試驗(yàn)到此為止。2.2.5 不同殺菌劑對(duì)孢子萌發(fā)的影響將6種不同供試殺菌劑用無(wú)菌水分別稀釋成所需的5種梯度濃度藥液，采

47、用懸滴法將不同濃度的殺菌劑分別與同體積的孢子懸浮液混合，各取1滴于載玻片中央，蓋上蓋玻片，放入墊有吸水紙的培養(yǎng)皿，以滅菌水為對(duì)照（CK）。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。在28恒溫箱中保濕培養(yǎng)，24h后鏡檢孢子萌發(fā)數(shù)。孢子萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)為芽管長(zhǎng)直超過(guò)孢子短徑的一半。萌發(fā)率、抑制率的計(jì)算公式為：萌發(fā)率=已萌發(fā)的孢子/鏡檢的孢子總數(shù)100%抑制率=（對(duì)照萌發(fā)率處理萌發(fā)率/對(duì)照萌發(fā)率100%試驗(yàn)方法及步驟(bzhu)：（1）凹玻片是專為孢子萌發(fā)試驗(yàn)用的一種載玻片，必須先用肥皂洗凈，再用洗滌液洗滌干凈(gnjng)。普通載玻片也可以涂上硝酸纖維素，以改變液滴在其上的張力，或直接使用微型燒杯作萌發(fā)器皿。（2）孢子懸浮液的制

48、備：于純粹培養(yǎng)的試管中注入滅菌蒸餾水約5mL，再用接種針或接種環(huán)輕輕推下斜面上的孢子(boz)，并使其充分分散，造成孢子懸浮液。用顯微鏡檢查孢子密度，以在1010的視野中有80100個(gè)孢子為宜，尤其是不要過(guò)于密集，太密的難于檢查計(jì)算。（注意：在與藥劑混合后的每個(gè)液滴中的孢子密度不能相差太大，否則會(huì)影響準(zhǔn)確度）。（3）每種供試藥劑的各個(gè)濃度分別用1mL吸管依由低到高的濃度順序各級(jí)取1mL注入吸取藥液名稱、濃度相同標(biāo)記的小燒杯中。另用1mL吸管逐個(gè)吸取1mL孢子懸浮液注入已盛有藥液的小燒杯中。搖勻后用移液管取一滴置于萌發(fā)玻片的凹穴中，每一濃度重復(fù)34片。然后放在墊有吸水紙的大培養(yǎng)皿或有蓋的瓷盆中，

49、25恒溫保濕培養(yǎng)。（4）經(jīng)812小時(shí)后檢查孢子萌發(fā)情況。培養(yǎng)時(shí)間不宜太長(zhǎng)，不然萌發(fā)的孢子芽管過(guò)長(zhǎng)而影響觀察計(jì)數(shù)。一般萌發(fā)芽管有菌體孢子長(zhǎng)度的1倍為宜。如果時(shí)間來(lái)不及檢查，應(yīng)加1：200的HgCl2 溶液一滴于萌發(fā)玻片的培養(yǎng)液中用于固定。3 結(jié)果與分析3.1 玉米彎孢菌的種類鑒定 圖1玉米彎孢菌菌絲 圖2玉米彎孢菌孢子在PDA培養(yǎng)基上，如圖1，菌落中間呈灰色、灰黑色或墨綠色的地毯狀，菌落邊緣灰白色，呈整齊發(fā)射狀，氣生菌絲不發(fā)達(dá)、不致密，菌落表面不形成同心環(huán)，不產(chǎn)生或很少產(chǎn)生子座?；鶅?nèi)顏色為黑色或墨綠色；分枝的菌絲微微著色至淡褐色，菌絲直徑在25毫米左右；如圖2，分生孢子梗深褐色，不分枝、有隔膜，

50、頂端常彎曲或糾結(jié)；27個(gè)分生孢子輪生、側(cè)生或束生在分生孢子梗上；分生孢子基部不突出，壁光滑，3分隔，中隔不居中，自基部起第三個(gè)細(xì)胞特大而色深，孢子都在此彎曲，兩端細(xì)胞色淺，孢子大小在1832816微米之間。根據(jù)以上特征，鑒定所分離的玉米彎孢菌為新月彎孢菌。3.2 不同(b tn)殺菌劑對(duì)玉米(ym)彎孢菌菌絲生長(zhǎng)(shngzhng)的影響表1 6種殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的測(cè)定（4d）殺菌劑Fungicide濃度（mg/m）Concentration菌落平均直徑（cm）Diameter of colony抑制率（%）Percentage ofinhibition代森錳鋅0.82.706

51、6.80.44.7730.70.25.2023.20.15.5317.50.055.9310.50（CK）6.53多菌靈0.41.2093.00.31.3390.80.22.1077.30.12.7366.30.053.7049.40（CK）6.53百菌清1.50.9797.00.751.2392.40.3751.7782.90.18753.2357.20.093754.3737.20（CK）6.48粉銹寧0.33.2357.20.153.6350.20.0754.3737.20.03755.1323.80.018755.6714.30（CK）6.486種殺菌劑分別通過(guò)等比稀釋，制成含有不同(

52、b tn)濃度藥劑的PDA 平板，其中70%代森錳鋅的濃度分別為0.8 mgmL-1、0.4 mgmL-1、0.2 mgmL-1、0.1 mgmL-1、0.05 mgmL-1，50%多菌靈的濃度(nngd)分別為0.4 mgmL-1、0.3 mgmL-1、0.2 mgmL-1、0.1 mgmL-1、0.05 mgmL-1，75%百菌清的濃度(nngd)分別為1.5 mgmL-1、0.75 mgmL-1、0.375 mgmL-1、0.1875 mgmL-1、0.09375 mgmL-1，20粉銹寧的濃度分別為0.3 mgmL-1、0.15 mgmL-1、0.075 mgmL-1、0.0375 m

53、gmL-1、0.01875 mgmL-1，70甲基硫菌靈可濕性粉劑的濃度分別為1.4 mgmL-1、0.7 mgmL-1、0.35 mgmL-1、0.175 mgmL-1、0.0875 mgmL-1，50%退菌特的濃度分別為1.0 mgmL-1、0.5 mgmL-1、0.25 mgmL-1、0.125 mgmL-1、0.0625 mgmL-1，然后接上玉米彎孢菌，于28下培養(yǎng)96h后測(cè)定玉米彎孢菌的菌落直徑，并計(jì)算抑制率，結(jié)果見(jiàn)表1。 續(xù)表1 6種殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的測(cè)定（4）殺菌劑Fungicide濃度（mg/m）Concentration菌落平均直徑（cm）Diameter

54、of colony抑制率（%）Percentage ofinhibition甲基硫菌靈1.42.8363.10.73.1756.90.353.9043.60.1754.5731.50.08755.1720.50（CK）6.30退菌特1.01.1793.30.51.2791.50.252.2374.00.1253.1357.60.06253.7746.00（CK）6.30 從表1可以(ky)看出，代森錳鋅、多菌靈、百菌清、粉銹寧、甲基硫菌靈、退菌特等六種殺菌劑對(duì)對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)(shngzhng)均有一定的抑制作用。然后以各處理殺菌劑的濃度對(duì)數(shù)值為自變量X,以抑制率轉(zhuǎn)化的幾率值為應(yīng)變量Y,應(yīng)

55、用(yngyng)統(tǒng)計(jì)回歸方法 ,擬合出殺菌劑的毒力回歸曲線。并且令Y = 5(抑制率為50%時(shí)的幾率值) 代入毒力回歸方程求出X，再轉(zhuǎn)化成殺菌劑的濃度，即為EC50。EC50的數(shù)值越小，說(shuō)明該藥劑對(duì)玉米彎孢病菌的抑制效果越好。結(jié)果見(jiàn)表2表2 6種殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的回歸方程及EC50藥劑(Fungicide)回歸方程(Regression equation)R2 (Correlation co-efficient)EC50（mg/m）代森錳鋅y=5.2851.264x0.8850.595多菌靈y=7.0991.667x0.9680.055百菌清y=6.6251.882x0.99

56、00.137粉銹寧y=5.8171.067x0.9850.172甲基硫菌靈y=5.2580.987x0.9860.548退菌特y=6.5961.454x0.9630.080從表2可以(ky)看出，除代森錳鋅的R2值為0.885外，其他(qt)殺菌劑的R2值均大于0.960，說(shuō)明(shumng)根據(jù)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行的毒力回歸曲線的擬合程度比較好，所求得抑制中濃度也比較準(zhǔn)確。多菌靈的EC50值最小，其EC50=0.055mg/mL。這說(shuō)明多菌靈對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用最強(qiáng)。退菌特次之，其EC50=0.080mg/mL，對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用弱于多菌靈。而代森錳鋅和甲基硫菌靈的EC50

57、值均較大，其EC50值分別為0.595mg/mL和0.548mg/mL，說(shuō)明對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用最差，不適合防治玉米彎孢病。百菌清和粉銹寧位于中間，其其EC50值分別為0.137mg/mL和0.172mg/mL，說(shuō)明對(duì)玉米彎孢菌菌絲生長(zhǎng)的也有較強(qiáng)抑制作用。3.3 不同殺菌劑對(duì)玉米彎孢菌分生孢子萌發(fā)的影響6種殺菌劑分別通過(guò)等比稀釋，然后加入分生孢子，制成含有不同濃度藥劑的孢子懸液，其中70%代森錳鋅的濃度分別為0.8 mgmL-1、0.4 mgmL-1、0.2 mgmL-1、0.1 mgmL-1、0.05 mgmL-1，50%多菌靈的濃度分別為0.25 mgmL-1、0.125 mgm

58、L-1、0.0625 mgmL-1、0.03125 mgmL-1、0.015625 mgmL-1，75%百菌清的濃度分別為1.5 mgmL-1、0.75 mgmL-1、0.375 mgmL-1、0.1875 mgmL-1、0.09375 mgmL-1、20粉銹寧的濃度分別為0.15 mgmL-1、0.075 mgmL-1、0.0375 mgmL-1、0.01875 mgmL-1、0.009375mgmL-1，70甲基硫菌靈可濕性粉劑的濃度分別為1.4 mgmL-1、0.7 mgmL-1、0.35 mgmL-1、0.175 mgmL-1、0.0875 mgmL-1，50%退菌特的濃度分別為0.5

59、 mgmL-1、0.25 mgmL-1、0.125 mgmL-1、0.0625 mgmL-1、0.03125 mgmL-1，于25下培養(yǎng)12h后測(cè)定玉米彎孢病菌分生孢子的萌發(fā)率，并計(jì)算抑制率，結(jié)果見(jiàn)表3。表3 殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌分生孢子萌發(fā)的測(cè)定（）殺菌劑Fungicide濃度（mg/mL）Concentration孢子萌發(fā)率（%）Percentage of germ ination抑制率（%）Percentage ofinhibition代森錳鋅0.832.866.40.446.752.20.253.145.60.164.933.60.0575.922.30（CK）97.7多菌靈0.2

60、57.692.20.12537.561.60.062555.243.50.0312563.834.70.01562574.024.30（CK）97.7百菌清1.517.582.10.7526.473.00.37544.154.90.187545.853.10.0937556.142.60（CK）97.7續(xù)表3 殺菌劑對(duì)玉米彎孢葉斑病菌分生孢子萌發(fā)的測(cè)定（）殺菌劑Fungicide濃度（mg/mL）Concentration孢子萌發(fā)率（%）Percentage of germ ination抑制率（%）Percentage ofinhibition粉銹寧0.1530.968.40.07539.7