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文檔簡介
1、第一章一、名詞解釋:實驗動物(Laboratory Animal):人工飼養(yǎng),對其攜帶的微生物實行控制,遺傳背景明確或者來源清楚的,用于 科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定及其科學(xué)實驗的動物。實驗用動物(Experimental Animal):指所有以科研、實驗、生產(chǎn)、文字教學(xué)等為目的而使用的動物??砂▽嶒瀯游铩⒓倚蠹仪莺鸵吧鷦游?。實驗動物學(xué):是以實驗動物為主要研究對象,并將培育的試驗動物應(yīng)用于生命科學(xué)等研究的一門綜合性學(xué)科。簡而言之,它是研究實驗動物和動物實驗的一門綜合性學(xué)科。動物實驗:指在實驗室內(nèi),為了獲得有關(guān)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等方面的新知識或解決具體問題而使用動物進(jìn)行的科學(xué)研究。動物實驗必須由經(jīng)過
2、培訓(xùn)的、具備研究學(xué)位或?qū)I(yè)技術(shù)能力的人員進(jìn)行或在其指導(dǎo)下進(jìn)行動物實驗技術(shù):進(jìn)行動物實驗時的各種實驗技術(shù)、方法和標(biāo)準(zhǔn)化操作程序;也包括實驗動物本身的培育、管理、 質(zhì)量控制技術(shù)。普通動物(Conventional Animals, CV):無人畜共患病病原體和體寄生蟲的動物。清潔動物(Clean Animals,CA):無人畜共患病和主要傳染病性疾病的病原體和體外寄生蟲的動物。無特定病原體動物(Specific Pathogen-Free Animals, SPF):機(jī)體內(nèi)無特定微生物和寄生蟲存在的動物,或在清潔動物 的基礎(chǔ)上,不帶對實驗有干擾的微生物。無菌動物(Germ Free Animals
3、,GF):動物機(jī)體內(nèi)外不帶有任何用現(xiàn)有方法可檢驗出微生物或寄生蟲的動物。悉生動物(Gnotobiotice Animals,GN):也稱已知菌動物或已知菌叢動物是指用與無菌動物相同的方法取得飼養(yǎng)(剖 腹取胎,在隔離器內(nèi)飼養(yǎng))、但明確的物體內(nèi)所給予的已知微生物的動物,即凡含有已知的單菌、雙菌、三菌或多 菌的動物。近交系動物(Inbred Strain Animals)經(jīng)連續(xù)20代或20代以上的全同胞兄妹或親子交配培育而成,品系內(nèi)所有個體 都能追述到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先的動物群體突變系動物(Mutant Strain Animals):保持有特殊突變基因的品系動物,突變系動物具有
4、變異性和遺傳性兩大特點 雜交一代動物(Hybrid Animals F1):兩個不同近交系動物雜交所生的第一代動物封閉群動物(Closed Colony Animals):在不從外部引進(jìn)新個體的條件下,以非近親交配方式進(jìn)行繁殖、生產(chǎn)的實驗 動物種群,且至少連續(xù)繁殖四代以上的動物二、簡答題:1、什么是當(dāng)前國外實驗動物科學(xué)發(fā)展的“3R”?答:在西方國家受動物保護(hù)運動的影響,在實驗動物行業(yè)內(nèi),替代研究正在興起,替代研究包括減少、替代和優(yōu)化 的“3R”運動:(1)減少:選用恰當(dāng)?shù)母哔|(zhì)量的實驗動物進(jìn)行動物實驗,提高實驗動物的利用率,從而減少動物使 用數(shù)量(2)替代:以低等動物、微生物或細(xì)胞、組織、器官甚
5、至電子計算機(jī)模擬、替代活動動物實驗(3)優(yōu)化: 主要指技術(shù)路線和手段的精細(xì)設(shè)計和選擇,使動物實驗有更好的結(jié)果,保證動物實驗的可重復(fù)性。2、簡述實驗動物科學(xué)的重要性?答:實驗動物科學(xué)是在現(xiàn)在科學(xué)帶動下,于20世紀(jì)40年代崛起的一門新興學(xué)科。實驗動物科學(xué)的崛起是因為在生 命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)我們不能用人去做試驗,我們必須借助實驗動物去探索生命起源、揭開遺傳的奧秘、攻克癌癥的堡壘 研究各種疾病與衰老的機(jī)理、監(jiān)測公害、污染、保護(hù)人類生活的環(huán)境、生產(chǎn)更多更好的農(nóng)畜產(chǎn)品,為人類生活造福。 在藥品與生物制品、農(nóng)藥、食品添加劑、化工、化妝品、航天、放射性和軍工產(chǎn)品的研究、試驗與生產(chǎn)中,在進(jìn)口 商品的檢驗中,實驗動物是
6、不可缺少的材料,并且總是作為人的替身去承擔(dān)安全評價和效果試驗。是生物醫(yī)藥乃至 整個生命科學(xué)的基礎(chǔ)和條件,是模式化生物體系的主體,是保證實驗動物實驗具有可比性、可重復(fù)性的科學(xué),是反 映一個國家生命科學(xué)發(fā)展水平的重要標(biāo)志。第二章一、名詞解釋:臨界溫度:動物的體溫失去恒定性而開始下降或上升時的環(huán)境溫度成為臨界溫度溫度中性區(qū):動物基礎(chǔ)代謝最低時的環(huán)境溫度稱為溫度中性區(qū)壓強(qiáng)梯度:單位體積上由壓強(qiáng)所產(chǎn)生的表面力的差值??諝鉂崈舳龋罕硎究諝鈨艋潭龋悦苛⒎接⒊呖諝庵泻?.5Mm以上粒子的累積個數(shù)進(jìn)行分類。依此分為100、 10 000、100 000 級.陰道栓:母鼠與公鼠交配后的12個小時內(nèi)在其陰道形
7、成微黃色粘液塞,叫做陰道栓。可以作為母鼠和公鼠是否交 配的判定標(biāo)準(zhǔn)。開放系統(tǒng)(open system):實驗動物的生存環(huán)境直接與大氣相通,設(shè)施不是密閉的,設(shè)施內(nèi)外氣體交流有多條空氣通 道,設(shè)施內(nèi)無空氣凈化裝置屏障系統(tǒng)(Barrier System):動物生活在氣密性很好的設(shè)施環(huán)境內(nèi),設(shè)施內(nèi)外空氣交流只能通過特定的通道進(jìn)入和排 出隔離系統(tǒng)(Isolation system):隔離系統(tǒng)是飼養(yǎng)無菌動物和悉生動物所使用的設(shè)施,在普通清潔環(huán)境中利用隔離器加以 飼養(yǎng),由于隔離器內(nèi)溫、濕度由外界環(huán)境決定,所以放置隔離器的飼養(yǎng)室環(huán)境需用空調(diào)控制R=(A+B+C)*D+E:R:實驗動物的總反應(yīng),A:動物種的共同
8、反應(yīng),B:品種及品系特有的反應(yīng),C:個體反應(yīng),D: 環(huán)境影響,E:實驗誤差獨立通風(fēng)籠盒(IVC):帶空氣過濾帽塑料盒的盒帽上方加了一個進(jìn)風(fēng)口,希望促進(jìn)盒內(nèi)的通風(fēng)換氣,從而出現(xiàn)了第 一個獨立通氣籠盒。代謝籠:有些研究需了解動物的代謝變化,一種在籠底設(shè)置可將糞尿分隔并分別取得的籠子可滿足代謝研究的需要。二、簡答題:1、簡述實驗動物環(huán)境因素的內(nèi)容,對實驗動物和動物實驗結(jié)果的影響。一環(huán)境因素的重要性動物環(huán)境:是指影響動物進(jìn)化、生態(tài)反應(yīng)和生長的所有外界條件的總和。動物對實驗處理的反應(yīng)R=(A+B+C)X D+E D與R呈現(xiàn)正相關(guān)R=(A+B+C) XD+E式中:R實驗動物的總反應(yīng),A實驗動物種的共同反應(yīng)
9、B- 動物品種及品系特有的反應(yīng),C動物個體反應(yīng)(個體差異),D一環(huán)境的影響(包括實驗處理),E實驗誤差 環(huán)境條件不僅影響實驗動物的品質(zhì),還直接影響動物實驗的科學(xué)性、動物反應(yīng)敏感性、實驗結(jié)果的可重復(fù)性。二環(huán)境因素的分類:氣候因素,理、化學(xué)因素,居住因素,營養(yǎng)因素,生物因素(同種、異種)影響:1、溫度()表現(xiàn)在生殖、泌乳、機(jī)體抵抗力、生長、形態(tài)、新陳代謝和實驗反應(yīng)等方面。如果環(huán)境氣溫過高或過低,或溫度變化過于激烈,超出了實驗動物自身的體溫調(diào)節(jié)能 力,就會對實驗動物的健康 產(chǎn)生不利影響。氣溫過低或過高常導(dǎo)致雌性動物性周期紊亂。低溫環(huán)境下,小鼠的性周期出現(xiàn)遲緩,小鼠每年能繁殖3個世代。高溫對雄性動物的
10、影響更大,環(huán)境溫度為33情 況下,雄性小鼠會出現(xiàn)睪丸機(jī)能下降,萎縮或形成精子的能力下降。大鼠和小鼠的攝食量也隨著溫度的變化而有所 改變,在低溫情況下,攝食量增加,在高溫下減少,呈負(fù)相關(guān)。氣溫過低或過高均能導(dǎo)致動物抵抗力降低,易患疾 病,甚至死亡。2、濕度(RH%)空氣相對濕度與動物體溫調(diào)節(jié)機(jī)能有密切關(guān)系。高溫高濕對動物體溫調(diào)節(jié)不利。環(huán)境濕度過高有助于微生物繁殖, 動物群體易發(fā)生傳染病。若環(huán)境濕度過低,也會影響動物的健康。低溫干燥時,大鼠會發(fā)生尾根部壞死,稱環(huán)尾癥。 飼養(yǎng)室相對濕度控制在40%70%之間。3、噪聲(dB)噪聲一般是指頻率高、聲壓大,帶有沖擊生或具有復(fù)雜波形,給人或動物心理或生理方
11、面帶來不利影響的聲音。室 內(nèi)噪聲(如空調(diào)機(jī)組)。噪聲對實驗動物的主要影響:(1)繁殖:噪聲可妨礙受精卵的著床。(2)生理:母鼠咬死仔 鼠或吃掉幼仔的現(xiàn)象。(3)神經(jīng)系統(tǒng):煩躁不安,食欲減退或發(fā)生聽源性痙攣(4)心血管系統(tǒng):小鼠血糖值有明顯差 異;在動物室附近放有洗衣機(jī)、制冰機(jī)發(fā)出聲波也能使發(fā)育中的小鼠死亡。4、照明(lx)光照對調(diào)節(jié)動物的生理機(jī)能有重要意義。在自然狀態(tài)下,動物的各種生理機(jī)能有明顯的晝夜節(jié)律,尤其是嚙齒類動 物在午夜比白晝活躍。研究表明實驗動物的血液學(xué)、生化學(xué)等有相應(yīng)的晝夜節(jié)律,連采食、排糞也有晝夜的周期變 化。光的顏色(波長)和光照時間對小鼠的生殖生理也有影響:用藍(lán)光照明時大鼠
12、的陰道開口比紅色照明時要早3d; 12h照明,12h黑暗的照明周期可使大鼠的發(fā)情呈現(xiàn)最穩(wěn)定的4日周期。16h照明,8h黑暗的照明周期,則呈現(xiàn)5 日性周期或更長。22h照明,2h黑暗,則性周期長短不一,極不規(guī)律,或連續(xù)發(fā)情或不能繁殖。大鼠在2 000 lx的 光照下,幾小時就出現(xiàn)視網(wǎng)膜障礙,連續(xù)暴露2d尚有恢復(fù)的可能,如果暴露8d以上就不能恢復(fù)5、氣流和風(fēng)速滿足生理需要:溫度、濕度、空氣潔凈度和氨濃度等達(dá)國家標(biāo)準(zhǔn)。實驗動物設(shè)施內(nèi)的環(huán)境通風(fēng)量和換氣次數(shù)既不能 多,也不能少,通常采用空調(diào)機(jī)組實現(xiàn)這一目的。氣流速度影響實驗動物的皮膚表面蒸發(fā)和對流散熱。室溫較高時, 氣流有助于降低動物體溫,但若室內(nèi)溫度
13、較低時,則對動物不利。通風(fēng)量系指送入飼養(yǎng)室的空氣體積,或稱新風(fēng)量。 通風(fēng)量等于設(shè)施內(nèi)容積與換氣次數(shù)的乘積。設(shè)施內(nèi)通風(fēng)量不僅與保證設(shè)施內(nèi)動物的生存有關(guān),而且與設(shè)施內(nèi)氨濃度 和氣流速度二個因素有關(guān)。換氣次數(shù)多則設(shè)施內(nèi)的氨濃度就低;若換氣次數(shù)多,設(shè)施內(nèi)氣流速度大,設(shè)施內(nèi)氣流速 度過大,將對動物產(chǎn)生不利的影響;6、氣體污染氨氣、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯和乙醛等。氨氣是細(xì)菌分解尿素而產(chǎn)生的,在各 種動物飼養(yǎng)室內(nèi)均能檢測到。甲基硫醇和硫化氫在狗、猴和貓飼養(yǎng)室能夠檢測到。氨是實驗動物飼育室中污染物質(zhì) 濃度最高的一種,因此常以氨濃度作為實驗動物室空氣污染狀況的指標(biāo)。氨可使實驗動物呼
14、吸器官的粘膜產(chǎn)生異常 或炎癥。在200mg/m3氨環(huán)境下飼養(yǎng)4d,大鼠的氣管粘膜可出現(xiàn)急性炎癥病變,飼養(yǎng)8d可出現(xiàn)氣管粘膜纖毛消失, 形成氣管表面膜,滲出液增加和管壁變厚等現(xiàn)象。4周-6周可發(fā)生嚴(yán)重的鼻炎或支氣管炎或合并支原體肺炎。2、簡述血液瓊脂培養(yǎng)基的制備方法。10成分:普通瓊脂,100ml;無菌脫纖維兔或羊血,810ml(2)制法:將已滅菌的普通瓊脂培養(yǎng)基(pH7. 6),隔水加熱至完全溶化。冷卻至5060左右,以無菌操作加入 無菌脫纖維兔血或羊血,輕輕搖勻(勿使有氣泡),立即傾注滅菌乎皿內(nèi)(直徑為90mm),每皿注人15-25rnl。待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿(蓋在下),放入37恒溫箱內(nèi),
15、 3、實驗動物設(shè)施與實驗動物質(zhì)量等級間的關(guān)系? 答:實驗動物設(shè)施影響動物質(zhì)量的等級,是實驗 動物質(zhì)量等級劃分的條件基礎(chǔ)。不同的實驗動物 設(shè)施產(chǎn)生不同的動物實驗。實驗動物設(shè)施按照微生物控制程度分為:隔離系 統(tǒng)(Isolator system)屏障系統(tǒng)(Barrier system)半 屏障系統(tǒng)(Clean system)開放系統(tǒng)(Open system)第三章一、名詞解釋:遺傳:下一代的形態(tài)、特征、生理等方面與上代 的一致性性。變異:后代與上代或子代兄妹之間的不一致性。經(jīng)24h無菌培養(yǎng),無細(xì)菌生長,方可用于檢測。T,笥述獨立通風(fēng)裝盒設(shè)做的特 點、描廣應(yīng)用意義 答二L能提供高標(biāo)準(zhǔn)的微環(huán)境。 以潔凈
16、度為例,IVC的潔凈度可 達(dá)到100緞完全薪足高級別的 科研要求;2、前期投資少。是 傳統(tǒng)屏障系統(tǒng)投資額的1P2 : 3 . 環(huán)保。讓人與動物的環(huán)境很好的 隔離開來,有效保護(hù)工作人員免 受到航源的侵害;4、節(jié)能。以開 放環(huán)境中的工VC為蒯IVC能自由組合定律:兩對(或多對)相對性狀遺傳,形成性細(xì)胞時,每對性狀基因的耗是傳統(tǒng)屏障系統(tǒng)的三十六分 之一;5、降低勞動強(qiáng)度。工VC 的換氣次數(shù)高,換墊料周期延長 到13周;防交叉感染。解 決了傳統(tǒng)屏障系統(tǒng)中實哈動物 之間交叉感染的問題。工VC系統(tǒng) 能夠在大大減省能源的前提下, 明顯的提高實哈動物在動物室 中的詞羔密度、動物生存環(huán)境舒 適度和防止籠盒間的交
17、叉感染。 IVC系統(tǒng)可在普通開放環(huán)境中和 潔凈工作臺或生物安全柜斷套 使用,對于資金房間有限、實 場課題不多的用戶極為方便。在屏障設(shè)施內(nèi)配以工VC系統(tǒng),也將大大降低屏障系統(tǒng)的運行費用, 在正常的SFF級動物室需換氣次 數(shù)在15次/h以上,如果使用工VC 斷以屏障設(shè)施,可將換氣次數(shù)降 低到8-1 0次/h。分離與其他性狀的基因分離無關(guān),不同性狀的基因組合在一個性細(xì)胞中完全是隨 機(jī)的,兩性細(xì)胞結(jié)合成合子,基因型的組合也是隨機(jī)的。不完全顯性:雜合體表現(xiàn)是兩種親本性狀的中間型,這是由于顯性不完全,不能 把隱性完全遮蓋住。染色質(zhì):是存在于真核生物細(xì)胞核內(nèi),可以被堿性染料著色的一種無定形物質(zhì), 它是以雙鏈
18、的DNA為骨架,與組蛋白,非組蛋白,及少量RNA等共同組成的絲狀結(jié)構(gòu),又稱之為染色質(zhì)絲染色體:在細(xì)胞間期染色質(zhì)是一種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),在細(xì)胞分裂期染色質(zhì)可以進(jìn)一步的扭曲,折疊,形成一種更為致密的 棒狀結(jié)構(gòu),稱之為染色體?;蜻B鎖互換定律:生殖細(xì)胞形成過程中,位于同一染色體上的基因是連鎖在一起,作為一個單位進(jìn)行傳遞,稱為 連鎖律。在生殖細(xì)胞形成時,一對同源染色體上的不同對等位基因之間可以發(fā)生交換,稱為交換律或互換律。分離定律:在生物的體細(xì)胞中,控制同一性狀的遺傳因子成對存在,不相融合;在形成配子時,成對的遺傳因子發(fā) 生分離,分離后的遺傳因子分別進(jìn)入不同的配子中,隨配子遺傳給后代的現(xiàn)象叫做孟德爾分離定律鑲
19、嵌遺傳:雜合體的表現(xiàn)是兩種親本性狀的重疊,即兩種親本性狀無顯性、隱性之分,都在后代中表現(xiàn)出來。復(fù)等位基因:從群體而言,相同位點上存在著不止兩種基因,而可能有多種這兩種基因就排列成一個基因系列?;虻幕プ?控制一個性狀的是兩對等位基因,非等位基因之間相互作用出現(xiàn)了新的性狀類型的現(xiàn)象。上位作用:在非等位基因之間,一對基因抑制另一對基因,使其不能顯示作用,前者稱為上位基因,后者叫做下位 基因。致死基因:導(dǎo)致個體或細(xì)胞死亡的基因。帶有致死基因的個體發(fā)生嚴(yán)重異?;蛩劳觯滤赖臅r間從胚胎早期 至成年不等,致死基因有顯、隱性之分,顯性致死基因純合體不能存活,胚胎早期死亡,雜合體往往表現(xiàn) 異常性狀,容易識別。
20、隱性致死基因,雜合體與正常個體一樣,只有純合體才表現(xiàn)致死作用或有害作用, 因此太太較困難伴性遺傳:控制某種性狀的基因位于染色體上,抑制這種性狀的遺傳基因因性別而異。微衛(wèi)星:是指重復(fù)單位為1-6bp,重復(fù)十?dāng)?shù)次至數(shù)十次的一類DNA序列數(shù)量可變的串聯(lián)重復(fù)序列方式遺傳污染:一個近交系與非本品系動物之間雜交引起遺傳改變。簡答題:1、請以實驗動物遺傳為例,說明孟德爾遺傳的分離定律及自由組合定律和摩爾根的基因連鎖與互換定律。孟德爾的分離分離定律屬于一對性狀的分離實驗,例如小鼠的眼睛顏色為褐色或紅色為一相對性狀的不同表現(xiàn)類 型,用其進(jìn)行雜交實驗。褐眼的基因型為顯性在)紅眼的基因型為隱性(p)用兩只純合基因型
21、的小鼠PP和pp交 配,產(chǎn)生的后來F1為Pp,表現(xiàn)型為褐眼,用F1代進(jìn)行自交,F(xiàn)2代有三種基因型即PP,Pp, pp 其基因比為1; 2; 1,前兩種表現(xiàn)為褐眼,后一種為紅眼。孟德爾自由組合定律為多對相對性狀的遺傳規(guī)律。例如豌豆的顏色綠色R與黃色r是一對相對性狀,而圓形Y與皺 形r是一對相對性狀?,F(xiàn)用綠色圓形豌豆RRYY與黃色皺形豌豆rryy交配,得出F1代豌豆都為綠色圓形(RrPp), F1代自交,F(xiàn)2代有四種表現(xiàn)型即綠圓,綠皺,黃圓,黃皺 其數(shù)量比為9: 3: 3: 1其基因型為R-Y-, R-y-, r-Y-, r-y- 摩爾根的基因連鎖定律,在同一條染色體上的所有基因則形成一個連鎖群,
22、例如小鼠的色斑基因(s)和無色斑基 因(S)是一對等位基因,正常毛基因(Hr)和無毛裸體(hr)也是一對等位基因,HrHrSS和hrhrss雜交時產(chǎn)生F1 基因型為HrhrSs, F1代進(jìn)行回交,結(jié)果為HrhrSs ,Hrhrss ,hrhrSs ,hrhrss的個數(shù)分別為56,4,6,54.這說明形成的F1 配子沒有按照自由組合定律產(chǎn)生四種數(shù)目相等的配子,而Hrs與hrS連在一起的配子比例很小,這是因為Hr和S 是在同一對同源染色體中的一條染色體上,而hr和s是在同一染色體上的緣故?;Q定律:如果Hr和S在同一染色上為什么還會出現(xiàn)Hrs和hrS兩種新配子呢,這是由于F1代在形成配子時,相 對
23、基因發(fā)生了交換,因而產(chǎn)生四種配子。在減數(shù)分裂過程中,部分母細(xì)胞的同源染色體的兩個成員在有關(guān)基因的兩 個位點之間發(fā)生互換,因而使一個基因從一條染色體上轉(zhuǎn)移到另一條染色體上去,互換的結(jié)果兩個基因失去了原來 的連鎖關(guān)系而從新結(jié)合因此出現(xiàn)了不同于親本的類型(非互換型)的新組合和性狀的新類型(互換型)?;Q率(交換律)=重組合個體數(shù)(F2) /總個體數(shù)(F2)X100%2、何為基因圖?他有何意義?舉例說明兩種兩種制作基因圖的方法。答:基因圖就是將基因的結(jié)構(gòu)用圖片畫出來,以方便人們研究?;驁D的意義:保存有致死或不育突變的動物群。 預(yù)知突變個體。連鎖標(biāo)記可簡化操作手續(xù)。A基因鏈鎖定位圖:是根據(jù)測交實驗的結(jié)
24、果,計算互換率,確定三 個基因在染色體上的位置,并用同樣的方法巴蒂4個、第5個等等的基因為點測定出來,安放在染色體圖上, 最終繪制成的遺傳圖。在基因鏈鎖定位圖中,基因在染色體上呈直線排列,1%重組率即cM作為相對位置或遺傳距 離單位。B基因物理圖:是在DNA水平上,以堿基對即bp為單位,表示基因在染色體上的實際距離的遺傳圖。通常, 物理圖由DNA得限制酶片段或克隆的DNA片段有序排列而成。3、簡述小鼠近交系的特征。答:經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成,品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共 同祖先,給系稱為近交系。經(jīng)連續(xù)20代以上親代與子代交配與同胞兄妹交配有同等效果
25、。近交系的系數(shù)應(yīng)大于99% 第四章一、名詞解釋:模式生物:生物學(xué)家通過對選定的生物物種進(jìn)行科學(xué)研究,用于揭示某種具有普通規(guī)律的生命現(xiàn)象。此時,這種被 選定的生物物種就是模式生物。轉(zhuǎn)基因小鼠:將外源重組基因轉(zhuǎn)染并整合到小鼠受體細(xì)胞基因組中,從而形成在體表達(dá)外源基因的小鼠,稱為轉(zhuǎn)基 因小鼠?;蛱蕹∈螅核菓?yīng)用一段外源DNA,因其與ES細(xì)胞染色體上的一段序列具有高度同源性,利用同源重組的原 理使ES帶有這段外源DNA,同時與外源DNA相對應(yīng)的正?;蚴Щ?,把帶有外源DNA的ES細(xì)胞導(dǎo)入小鼠,建 立基因剔除小鼠??寺游铮嚎寺∈怯蓡蝹€細(xì)胞產(chǎn)生的、和親代特別像的個體。克隆動物是指經(jīng)無性繁殖或孤雌生殖
26、而產(chǎn)生的動物。 報告基因:又稱標(biāo)記基因,在制作轉(zhuǎn)基因小鼠時都要把動物轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物與內(nèi)源基因表達(dá)產(chǎn)物的不同區(qū)別開來,構(gòu)建 基因時可考慮插入一個標(biāo)記基因或使轉(zhuǎn)基因表達(dá)一個簡單的產(chǎn)物,以利于檢測和鑒別。而報告基因的使用讓我們能 夠更為清晰準(zhǔn)確的監(jiān)測外源基因的時空表達(dá)。二、簡答題:何為遺傳工程小鼠、簡述遺傳工程小鼠發(fā)展經(jīng)歷了哪些主要階段?用人工手段把一種生物的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到小鼠的細(xì)胞中去,或把重組DNA引入小鼠細(xì)胞或生物體中,這種遺傳物 質(zhì)所帶的遺傳信息在小鼠受體細(xì)胞中表達(dá),得到遺傳工程小鼠。(一)、轉(zhuǎn)基因小鼠的基礎(chǔ)之一 -小鼠胚胎學(xué)研 究(二)、轉(zhuǎn)基因小鼠的基礎(chǔ)之二一一分子遺傳學(xué)的回顧 (三)、轉(zhuǎn)基因
27、小鼠一一從顯微注射到基因打靶(四)、 高通量大規(guī)模篩選新基因及突變技術(shù)之一一一同源性檢索(五)、高通量大規(guī)模篩選新基因及突變技術(shù)之二一一 大規(guī)模地篩選突變技術(shù)簡述獲得基因剔除小鼠的主要技術(shù)路線與操作方法?答:主要技術(shù)路線:構(gòu)建基因剔除載體質(zhì)粒,電轉(zhuǎn)移方法引入ES細(xì)胞,用Neo基因和TK基因篩選ES細(xì)胞克隆, 用PCR和southern雜交篩選重組陽性ES細(xì)胞克隆,擴(kuò)增細(xì)胞克隆,將ES細(xì)胞通過顯微注射注入囊胚腔內(nèi),導(dǎo)入 假孕保姆鼠子宮、得到嵌合鼠,和B6或129小鼠回交得到F1代小鼠,通過PCR或southern雜交確認(rèn)F1代小鼠中 帶有目的基因突變,雜合子小鼠相互交配,有1/4幾率得到突變型純
28、合子,用Northern雜交和Western雜交確認(rèn)基 因表達(dá)改變,觀察和分析純合子的表型。簡述模式生物的共同特點?有利于回答研究者關(guān)注的問題,能夠代表生物界的某一大類的群;對人體和環(huán)境無害,容易獲得并易于在實驗 室內(nèi)飼養(yǎng)和繁殖;世代短,子代的遺傳背景清楚;容易進(jìn)行實驗操作,特別是具有遺傳操作的手段和表型分 第五章一、名詞解釋:濃縮飼料:以蛋白質(zhì)飼料為主,混以礦物質(zhì)和添加劑預(yù)混料配比而成。不能直接飼喂動物,須按說明與能量飼料或粗 飼料混合后才可使用。代乳飼料:能夠替代自然乳的全價配合飼料。實驗動物營養(yǎng)學(xué):是一門研究實驗動物生長發(fā)育、繁殖與營養(yǎng)和飼料,以及與實驗結(jié)果的關(guān)系的專門學(xué)科。二、簡答題請
29、說明影響實驗動物營養(yǎng)需求的各個因素?一、 遺傳因素二、生理狀況 三、環(huán)境因素四、微生物狀態(tài)五、研究條件六、營養(yǎng)成分的相互作用飼養(yǎng)實驗動物時應(yīng)該考慮的營養(yǎng)素有哪些?水、蛋白質(zhì)及氨基酸、碳水化合物與脂肪、礦物質(zhì)、維生素。第八章一、名詞解釋:熱滅菌法:主要分為濕熱高壓滅菌法溫度大約在121-134之間,干熱烤箱滅菌法溫度大約在160-190之間福爾馬林熏蒸消毒法:福爾馬林同高錳酸鉀按一定比例混合,加熱產(chǎn)生熏蒸氣,在不低于25攝氏度一段時間熏蒸 后殺滅微生物而達(dá)到消毒目的的方法。輻照滅菌:利用射線(包括X射線、Y射線和加速電子束等)的輻照來殺滅有害細(xì)菌和昆蟲的一項技術(shù)受胎率:妊娠雌性動物數(shù)/配種雌性動
30、物數(shù)X100%成活率:等于斷奶時成活仔數(shù)除以實際產(chǎn)仔總數(shù)再乘以百分之百。二、簡答題:簡述動物場飼料保管要求、飲水管理的原則和實驗動物墊料的基本要求。(1)必須對每批購進(jìn)的飼料清點登記,每批飼料進(jìn)場后需調(diào)整存貨位置,保證先購進(jìn)的飼料先使用。(2)保管者應(yīng)明確登記飼料的生產(chǎn)日期,應(yīng)清楚影響飼料儲存的可能因素是什么。(3)保持飼料存放區(qū)的清潔干凈,野鼠及昆蟲不應(yīng)出現(xiàn)在儲存區(qū)域,以免飼料因沾染糞尿中的微生物、腸道寄生 蟲、節(jié)肢動物和霉菌污染,而導(dǎo)致動物感染疾病。(4)動物場飼料存放區(qū)域應(yīng)使用擱板、架子或臺車,保證存儲的飼料架離地。(5)飼料的質(zhì)量與穩(wěn)定性會隨溫度和濕度的降低而提升。(6)貯存的顆粒飼料
31、含水率低于11%,高于11%的飼料易變霉。儲藏在空調(diào)環(huán)境的由天然原料制造的飼料,應(yīng)在六個月內(nèi)使用完畢。(7)豚鼠及靈長類動物的飼料應(yīng)添加維生素C,但維生素C的飼料只有3個月存放期,使用維生素C微囊的飼料 可延長其保存期。喂給維生素C過期的飼料需另外補(bǔ)充維生素C.(8)飼料打開包裝后,未使用完的飼料應(yīng)放在防止害蟲侵害的容器里,以免污染而傳布疾病。(9)超過存儲期的飼料使用前再次對飼料養(yǎng)分分析化,確定其實際含量。(10)飼料滅菌后某些營養(yǎng)成分會破壞,應(yīng)在飼料滅菌前補(bǔ)足。每次滅菌的時間日期要記載清楚。(11)在制造及儲存含高脂肪的特殊飼料時,特別要注意下列因素:1不飽和脂肪酸極易被氧化,造成必需脂肪
32、酸的不足。2脂肪氧化酸敗后飼料適口性變差3高脂肪的飼料在制造時 應(yīng)添加抗氧化劑4高脂肪的飼料應(yīng)采取密封,冷藏,充氮的專用車運輸5用不飽和脂肪酸飼料喂給動物時,每隔 24小時更換新鮮飼料6喂給高脂肪酸飼料時,宜額外添加維生素,以減少體內(nèi)過氧化反應(yīng)簡述下列動物的飼養(yǎng)管理:小鼠、大鼠。小鼠:筒述下列動物的飼養(yǎng)管理:小鼠。10小鼠喂給顆粒狀飼料,飼料中蛋白質(zhì)含量應(yīng)在18%22%,可增加0. 1%1%的魚肝油。小鼠對維生素A的 過量敏感,尤其是妊娠小鼠會出現(xiàn)繁殖紊亂、胚胎畸形。小鼠喜吃淀粉含量高的飼料,碳水化合物比重可稍大些。 不同品系小鼠對飼料組成要求有一定差別。(2)小鼠屬于雜食性動物,胃容量較小,
33、有隨時采食習(xí)性,夜間更為活躍。 1周喂水、料23次即可,但應(yīng)經(jīng)常檢查料斗、水瓶是否有足夠量的飼料、飲水。對開眼和斷奶鼠,應(yīng)加喂?fàn)I養(yǎng)較 高的顆粒料或飼料。哺乳期可加喂葵花籽,生產(chǎn)用種母鼠還可加喂大麥芽(35g/d)和加有雞蛋的飼料。配種的雄 鼠不宜過肥。(3)每周更換墊料和清洗鼠籠12次。保持室內(nèi)衛(wèi)生,定期徹底清洗。室內(nèi)一般不用水沖,每天選用 0. 1 %新潔爾滅、0. 1 %消毒靈等消毒液濕抹籠架、墻壁和拖地。大鼠:(1)大鼠喂給顆粒飼料,飼喂方法同小鼠。喂料量隨不同生長發(fā)育階段如妊娠、帶仔、交配的需求作適當(dāng)調(diào) 整。飼料中需注意補(bǔ)充維生素K。(2)每周可添加一次葵花籽、多維素片。每天喂給新鮮水
34、,每周換墊料23次。 每天檢查動物的活動情況,并詳細(xì)記錄。(3)保持室內(nèi)安靜、干燥,避免強(qiáng)光刺激,每天光照1213h。大鼠肝臟微 粒體酶活性極易受某些化學(xué)藥物影響,使用殺蟲劑、消毒劑要謹(jǐn)慎。(4)大鼠病原體多是通過氣溶膠攜帶傳播,過 度擁擠、通風(fēng)不良、氨濃度過高等,易導(dǎo)致大鼠呼吸道感染,特別是支原體病的發(fā)生。大鼠是流行性出血熱的自然 宿主,此病對人威脅很大。大鼠的卡氏肺囊蟲、鼠咬熱、縮小膜殼絳蟲和某些細(xì)菌病等也可傳播給人,應(yīng)特別注意 監(jiān)測。(5)此外,大鼠的皮屑、毛、血清等作為人的變應(yīng)原會影響飼養(yǎng)人員。認(rèn)真做好飼養(yǎng)管理的工作記錄,如生產(chǎn) 繁殖情況,環(huán)境、微生物檢測情況,衛(wèi)生消毒情況,供應(yīng)使用情
35、況等。簡述動物場記錄管理的主要內(nèi)容與生產(chǎn)計劃?一記錄內(nèi)容:1環(huán)境質(zhì)量狀況2動物繁殖狀況3譜系資料4動物生活狀況5動物供應(yīng)情況6動物生長情況7生產(chǎn)消耗情況8人員往來情況9消毒滅菌情況10實驗動物微生物質(zhì) 量定期監(jiān)測情況11工作記錄12其他情況二 生產(chǎn)計劃:1,生產(chǎn)計劃的制定原則:(1),不同種類,品種,品系分別制定生產(chǎn)計劃。(2)根據(jù)教學(xué),科研, 銷售計劃制定生產(chǎn)計劃。(3)要保證種群的正常淘汰,更新和后備。(4)要留有余地。2,生產(chǎn)計劃的內(nèi)容:(1) 供應(yīng)計劃統(tǒng)計各個品種品系,級別實驗動物的逐月供應(yīng)數(shù)。(2)配種計劃根據(jù)供應(yīng)數(shù)指定各品種品系的配種時間和 數(shù)量。(3)計劃的落實所制定的生產(chǎn)計劃一
36、定要及時落實到相應(yīng)的責(zé)任人付諸實施。3,生產(chǎn)計劃的實例:如小鼠 的生產(chǎn)計劃。第七章哨兵動物:哨兵動物通常為隔離器飼養(yǎng)的悉生小鼠或SPF小鼠,利用其對傳染病的高度敏感性而設(shè)置。人畜共患病(Zoonosis):是指在脊椎動物與人類之間自然傳播的疾病和感染。什么是放射性動物試驗?使用的裝備有哪些?放射性動物實驗的廢棄物應(yīng)如何處理?放射性動物實驗:是指使用儀器所產(chǎn)生的a、B、Y、中子或X光等放射線(radiation)照射動物的實驗。PET,正電子發(fā)射斷SPECT,單光子發(fā)射計算機(jī)斷層成像術(shù)(Single-Photon Emission Computed Tomography)層成像術(shù)(Positro
37、n Emission Tomography/CT) 處理:放射性物質(zhì)污染的廢棄物可因其半衰期、自然存在量的多 少及潛在性危險分成三類,第一類在自然界以多量存在,可經(jīng)稀釋劑混合自然界已存在物質(zhì)而處理;第二類半衰期 放射性物質(zhì),只要儲存一段時間即可以一般廢棄物處理;第三類高放射性或長半衰期放射性物質(zhì),則需依據(jù)國家放射性物質(zhì)處理的有關(guān)法規(guī)處置。1.試述小鼠、大鼠的繁殖學(xué)特性。小鼠發(fā)育迅速,性成熟早小鼠出生后20日齡左右即可離乳,此時體重達(dá)14g (10-16g)左右,稍加飼育即可用 于實驗及科研(18-22g)06-7周齡性成熟。雌性35-50d、雄性45-60d便可交配繁殖。配種最好在6590日齡。性周期短,繁殖力強(qiáng)發(fā)情周期4-5d,妊娠期19-21d,哺乳期20-22d。每胎產(chǎn)仔815只,最多可達(dá)25只,年產(chǎn) 6-9胎。生育期為1年,壽命23年大鼠大鼠發(fā)育快,成熟早,繁
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