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1、 探究淀粉酶對(duì)淀粉和蔗糖的水解作用1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?(1)初步學(xué)會(huì)探索酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的方法。 (2)探索淀粉酶是否只能催化特定的化學(xué)反應(yīng)。 2、實(shí)驗(yàn)原理 淀粉和蔗糖都沒(méi)有還原性,也就是都不能使斐林試劑還原,所以都不能與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)。唾液淀粉酶將淀粉水解成的麥芽糖則具有還原性,能夠使斐林試劑還原,生成磚紅色的沉淀。蔗糖水解產(chǎn)生的葡萄糖和果糖都具有還原性,但唾液淀粉酶不能將蔗糖水解。 試驗(yàn)中可以用菊糖代替蔗糖。這是因?yàn)榫仗鞘怯啥鄠€(gè)果糖分子縮合而成的,與淀粉同屬于多糖,用菊糖與淀粉進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn),更具有說(shuō)服力。 3、實(shí)驗(yàn)材料 質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為3%的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液;質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的新鮮淀粉酶
2、(化學(xué)試劑商店有售)溶液。 4、試劑與儀器 斐林試劑(也可以用班氏試劑)試管、大燒杯、量筒、滴管、溫度計(jì)、試管夾、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、火柴。 5、實(shí)驗(yàn)方法與步驟 (1)取兩支潔凈的試管,編上號(hào),然后向1號(hào)注入2mL可溶性淀粉溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。向2號(hào)注入2mL蔗糖溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。 (2)輕輕振蕩這兩支試管,使試管內(nèi)的液體混合均勻,然后將試管的下半部浸到60左右的熱水中,保溫5min。 (3)取出試管,各加入2mL斐 林試劑(邊加入斐林試劑,邊輕輕振蕩這兩支試管,以便使試管內(nèi)的物質(zhì)混合均勻)。 (4)將兩支試管的下半部放進(jìn)盛有熱水的大燒杯中,用酒精燈加熱,煮沸并保持1mi
3、n。 (5)觀察并記錄兩支試管內(nèi)的變化 6、注意事項(xiàng) 做好本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是蔗糖的純度和新鮮程度。這是因?yàn)檎崽鞘欠沁€原性糖,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受細(xì)菌作用部分分解成單糖,則與斐林試劑共熱時(shí)能生成磚紅色沉淀,使人產(chǎn)生錯(cuò)覺(jué)。為了確保實(shí)驗(yàn)的成功,實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)檢驗(yàn)一下純度。普通的細(xì)粒蔗糖往往是由于部分水解而具有一些還原糖。可用市售大塊冰糖,水洗去其表面葡萄糖得到純凈的蔗糖。 實(shí)驗(yàn)中要將試管的下半部浸到37的溫水中,因?yàn)榈矸勖冈谶m宜的溫度條件下催化能力最強(qiáng)。 在實(shí)驗(yàn)中,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的蔗糖溶液要現(xiàn)配現(xiàn)用(以免被細(xì)菌污染變質(zhì)),取唾液時(shí)一不定期要用清漱口,以免食物殘?jiān)M(jìn)入唾液中。 制備
4、的可溶性淀粉溶液,一定要完全冷卻后才能使用,因?yàn)闇囟冗^(guò)高會(huì)使酶活性降低,甚至失去催化能力。 實(shí)驗(yàn)中如果2號(hào)試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能的原因是:蔗糖溶液放置的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),蔗糖被溶液中的微生物分解成還原性的糖,從而影響實(shí)驗(yàn)效果。這時(shí)應(yīng)臨時(shí)配制蔗糖溶液。另一個(gè)可能的原因是試管不干凈,所以實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)將試管用清水再清洗一次,試管編號(hào)要醒目。 實(shí)驗(yàn)步驟一定要按要求的程序進(jìn)行,不可隨意改變。 如果實(shí)驗(yàn)中,自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論上的預(yù)期結(jié)果不一致,應(yīng)再設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證或找出問(wèn)題所在。 7、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 1號(hào)管中出現(xiàn)磚紅色沉淀,2號(hào)管無(wú)顏色變化。 實(shí)驗(yàn)思路拓展 酶的專一性驗(yàn)證 1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?通過(guò)對(duì)不同
5、酶消化作用的比較來(lái)驗(yàn)證酶作用的專一性。 2、實(shí)驗(yàn)原理 酶是由生物活細(xì)胞所產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì),在生物體內(nèi)新陳代謝的許多化學(xué)反應(yīng)中起催化劑作用。作為生物催化劑的酶,跟一般的化學(xué)催化劑不同,它表現(xiàn)出高度的專一性,這是酶作用的顯著特征。 3、材料器具 蛋白花、菠蘿汁、稀釋唾液、試管、移液管、燒杯、酒精燈、三角架、石棉網(wǎng)、溫度計(jì)、火柴;1%淀粉糊,胃蛋白酶液、革蘭氏碘液。 方法一 唾液淀粉酶的特性 4、實(shí)驗(yàn)步驟 驗(yàn)證酶作用的專一性,準(zhǔn)備2支試管,分別編號(hào)后,在2支試管內(nèi)各裝入1%淀粉糊2mL。在1號(hào)試管加入稀釋唾液2 mL,2號(hào)試管加入胃蛋白酶液2 mL,把這2支試管放在37水浴中保溫處理10min。 用
6、革蘭氏碘液測(cè)試并觀察水樣的顏色變化。 5、注意事項(xiàng) 在使唾液逐漸稀釋過(guò)程中,應(yīng)該注意把試管中的唾液充分搖勻。 6、分析和討論 1號(hào)試管水樣用革蘭氏碘液測(cè)試,不出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng),說(shuō)明管內(nèi)淀粉已被唾液中唾液淀粉酶所分解,而沒(méi)有淀粉的存在;而2號(hào)試管中的水樣用草蘭氏碘液測(cè)試則呈現(xiàn)藍(lán)色,說(shuō)明有淀粉存在。結(jié)果表明,對(duì)淀粉產(chǎn)生消化作用的酶是唾液淀粉酶,而不是胃蛋白酶,由此證明了酶作用的專一性。 方法二 菠蘿蛋白酶的特性 4、實(shí)驗(yàn)步驟 驗(yàn)證酶作用的專一性,準(zhǔn)備2支試管,分別編號(hào)后,在2支試管內(nèi)各裝入2 mL蛋白花。在1號(hào)試管內(nèi)加入新鮮菠蘿汁2 mL,2號(hào)試管中加入稀釋唾液2 mL。充分混勻后,放在37水浴中保溫處理。 2030min后觀察各管中蛋白花的形狀。 5、分析和討論 菠蘿汁中含有分解蛋白質(zhì)的菠蘿蛋白酶,因此,把1號(hào)試管跟2號(hào)試管彼此對(duì)照就不難看出,2號(hào)試管內(nèi)蛋白花仍保持原狀,而1號(hào)試管內(nèi)的蛋
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