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1、實(shí)驗(yàn)(shyn)五電導(dǎo)法測(cè)定果蔬細(xì)胞膜滲透率共十六頁一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?果蔬在冷藏及冷藏運(yùn)輸中,經(jīng)常發(fā)生(fshng)冷害或凍害而影響產(chǎn)品質(zhì)量。如何及時(shí)正確地鑒別冷害及凍害的發(fā)生(fshng),是果蔬貯運(yùn)中需要解決的問題。 共十六頁 植物體遭受冷害時(shí),細(xì)胞膜的透性發(fā)生變化,細(xì)胞中電解質(zhì)(主要是鉀離子)向外滲透速度加快,細(xì)胞膜滲透速度稱為滲透率。它可以通過測(cè)定果蔬組織(zzh)提取液電導(dǎo)率的方法來確定。二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理共十六頁果蔬組織(zzh)提取液的電導(dǎo)率可用下式表示: LKC (1)C電導(dǎo)度,表示提取液的導(dǎo)電能力,可用電導(dǎo)儀直接測(cè)得。另外,電導(dǎo)度(C)是電阻R的倒數(shù),即:C1/R K電極常
2、數(shù),它是測(cè)定電導(dǎo)時(shí)兩極片間的距離(單位為)與極片的截面A(單位為2)之比,其單位為()-1,因此,電導(dǎo)率L的單位則為-1-1,m-1-1和-1-1,測(cè)定植物細(xì)胞膜的電導(dǎo)率多以-1-1為單位。(歐姆)共十六頁電極常數(shù)(K),因電極而異。每個(gè)電極的電極常數(shù)均應(yīng)個(gè)別測(cè)定,測(cè)定電極常數(shù)(K)值的方法是利用已知電導(dǎo)率L的標(biāo)準(zhǔn)(biozhn)KCl溶液。用需測(cè)定的電極測(cè)定此標(biāo)準(zhǔn)溶液的電導(dǎo)度(C),從式中可求出它的K值。 共十六頁果蔬細(xì)胞膜滲透率(Le),是測(cè)試材料(cilio)活組織提取液的電導(dǎo)率(L1)與測(cè)試材料被殺死后提取液的電導(dǎo)率(L0)之百分比。Le(%)L1/L0100%(2) 共十六頁Le實(shí)際
3、表示在一定時(shí)間內(nèi),細(xì)胞電解質(zhì)滲出量占總電解質(zhì)量的百分比。因?yàn)椋篖1KC1 L0KC0所以:LeKC1/(KC0)100%C1/C0100% 由式可見(kjin),不必計(jì)算電導(dǎo)率,而用電導(dǎo)儀直接測(cè)定電導(dǎo)度(C),即可計(jì)算出細(xì)胞膜的滲透率(Le)。共十六頁黃瓜(hung gu)、青椒(部分進(jìn)行低溫處理)DJS1C型電導(dǎo)儀、抽氣機(jī)、切片器、振蕩器、打孔器、濾紙、大試管、燒杯、電爐。三、材料(cilio)及用具共十六頁 材料(cilio)處理:選取果品一份放入室溫下貯藏,為正常組;另一份放入過低溫度下使其受冷害,為處理組。用打孔器及切片器將樣品制成厚薄均勻,大小一致的組織圓片,稱取2克(或十個(gè)圓片),
4、放入盛有20mL去離子水的試管中,在真空干燥器中抽氣浸泡10min后,緩慢放入空氣,水即滲入細(xì)胞間隙,組織圓片變成透明,細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)易于滲出,重復(fù)3-5次,取出試管振蕩半小時(shí)。四、操作方法共十六頁測(cè)定(cdng):用DJS1C型電導(dǎo)(din do)儀插入試管,測(cè)定外滲液的電導(dǎo)(din do)度。測(cè)定后再將試管放入水浴鍋沸水中5min,加熱殺死組織,待冷卻室溫后再測(cè)定提取液的電導(dǎo)(din do)度,按式即可計(jì)算出細(xì)胞膜的滲透率。 共十六頁電導(dǎo)(din do)儀的使用將電極引線接到儀器相應(yīng)接線柱上。接通電源,打開電源開關(guān)。將量程開關(guān)撥向“檢查”位置,常數(shù)旋鈕指向“1”刻度,溫度鈕指向“25”,調(diào)節(jié)校
5、準(zhǔn)鈕,使儀器顯示100uS/cm, 完成(wn chng)校準(zhǔn)。將開關(guān)撥向“測(cè)定位置”,指針應(yīng)回到零點(diǎn)。共十六頁撥動(dòng)選擇測(cè)量范圍(fnwi)的旋鈕,使其處于測(cè)定范圍(fnwi)之內(nèi),如不知測(cè)量范圍(fnwi),應(yīng)先放在最大程位置上,由大到小,逐級(jí)調(diào)整。將電極用重蒸餾水沖洗干凈,并用濾紙吸取附著的水分,放在需測(cè)組織提取液中,等指針穩(wěn)定后,讀指針?biāo)傅臄?shù)值,此數(shù)值即是該提取液的電導(dǎo)度。共十六頁按上述方法,測(cè)定(cdng)組織圓片殺死后提取液的電導(dǎo)度。將電極用蒸餾水洗干凈,放在水中,如長(zhǎng)期不用,則應(yīng)將電極冼凈晾干,包裝放置。 共十六頁五、記錄(jl)與計(jì)算處理電導(dǎo)度(C)滲透率(Le)正常組正常煮死
6、處理組凍害煮死共十六頁六 注意事項(xiàng)整個(gè)電導(dǎo)測(cè)定需要在恒溫條件下進(jìn)行,因?yàn)闇囟炔粌H影響細(xì)胞內(nèi)離子內(nèi)外滲透速度,而且影響提取液的電導(dǎo)率。一般溫度每增加1 ,電導(dǎo)率約增加2%,通常(tngchng)都以25 為標(biāo)準(zhǔn)溫度。如果不在25 下測(cè)定,則要求把電導(dǎo)率換算成標(biāo)準(zhǔn)溫度25 的電導(dǎo)率。共十六頁內(nèi)容摘要實(shí)驗(yàn)五電導(dǎo)法測(cè)定果蔬細(xì)胞膜滲透率。如何及時(shí)正確地鑒別冷害及凍害的發(fā)生,是果蔬貯運(yùn)中需要解決的問題。植物體遭受冷害時(shí),細(xì)胞膜的透性發(fā)生變化,細(xì)胞中電解質(zhì)(主要是鉀離子)向外滲透速度加快,細(xì)胞膜滲透速度稱為滲透率。另外(ln wi),電導(dǎo)度(C)是電阻R的倒數(shù),即:。Le實(shí)際表示在一定時(shí)間內(nèi),細(xì)胞電解質(zhì)滲出量占總電解質(zhì)量的百分比。DJS1C型電導(dǎo)儀、抽氣機(jī)、切片器、振蕩器、打孔器、濾紙、大試管、燒杯、電爐。
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