000000c6_羅紅霉素與氨溴索體內(nèi)相互作用研究

1、羅紅霉素與氨溴索體內(nèi)相互作用研究彭文興李煥德王峰蘇芬麗(中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院臨床藥學(xué)教研室，湖南，長沙，410011)摘要目的：研究復(fù)方羅紅霉素氨溴索片中二藥在體內(nèi)是否存在藥動(dòng)學(xué)上相互作用。方法：24名健康男性志愿者，采用4X4交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每組1人，交叉服用復(fù)方羅紅霉素氨溴索片、羅紅霉素片加氨溴索片、羅紅霉素片、氨溴索片，服藥后不同時(shí)間點(diǎn)取肘靜脈血45ml,血藥濃度采用高效液相色譜質(zhì)譜(HPLCMS)法測(cè)定。由血藥濃度計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，并進(jìn)行方差分析，以90%的可信區(qū)間進(jìn)行藥物發(fā)生相互作用是否具臨床意義的判定。結(jié)果：復(fù)方制劑、合用藥物以及單用藥物藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均無顯著性差異。無論是復(fù)方或是合用兩種藥

2、物，均未在體內(nèi)產(chǎn)生有臨床意義的藥物相互作用。結(jié)論：羅紅霉素氨溴索片中二種成份在體內(nèi)的吸收速度和程度與單一成份相比，不發(fā)生改變。二者在體內(nèi)不產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)學(xué)上和臨床意義的相互作用。關(guān)鍵詞：藥動(dòng)學(xué)，藥物相互作用，羅紅霉素，氨溴索作者簡介：顏素華，主管藥師，從事臨床藥學(xué)及合理用藥工作。*通訊作者：彭文興，男，中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院臨床藥學(xué)研究室，副教授，研究方向：臨床藥代動(dòng)力學(xué)和藥物相互作用，Tel:(0731)5292097,Fax:(0731)4896038,E-mail: HYPERLINK mailto: Studyonpharmacokineticinteractionbetweenroxithro

3、mycinandambroxolinhumanPengWenxingLiHuande,WangFeng,ClinicalPharmacyresearchinstitute,TheSecondXiangyahospital,CentralSouthUniversity,Changsha,410011,ChinaAbstractObjectiveToevaluatewhetherithaspharmacokineticinteractionhappenedwhenvolunteersoraladministratedroxithromycin-ambroxoltablets(complexpres

4、cription).MethodsThestudywasconductedinaself-controlled,four-periodcross-overexperimentin24healthyvolunteers.thevolunteersreceivedcomplexprescriptionroxithromycin-ambroxoltablets(roxithromycin300mg,ambroxol60mg),orco-administrationroxithromycintablets(300mg)andambroxoltablets(60mg),orroxithromycinta

5、blets(300mg),orambroxoltablets(60mg)for7consecutivedays,onthe7thdaySerialbloodsamplesweredrawnatbeforeand0.5，1,1.5,2,3,4,6,8,12,24,36，48,72hafterdrugadministration.Concentrationsofroxithromycinandambroxolinplasmaweremeasuredbyhigh-performanceliquidchromatographyelectrosprayionizationtandemmassspectr

6、ometry(HPLC-ESI-MS).Non-compartmentalanalysiswasusedtocharacterizeroxithromycinorambroxolplasmaconcentration-timeprofiles,andcomparisonsofmeanvalueswereanalyzedbytheanalysisofvariance,Differenceswereconsideredtobesignificantatp0.05.drug-druginteractionistestby90%confidenceinterval.ResultsThepharmaco

7、kineticparametersofroxithromycinorambroxolwerenotchangedinvolunteerstreatedby4differencemedicine.ConclusionRoxithromycinandambroxoldonotproducepharmacokineticinteractioninhuman.Keywordsroxithromycin,ambroxol,interaction,pharmacokinetics羅紅霉素是常用于治療肺部細(xì)菌感染的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，療效顯著、毒性低，組織分布合理，口服吸收生物利用度高，能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)殺菌，達(dá)到

8、治療徹底不易復(fù)發(fā)的效果。氨溴索為祛痰藥，有研究證實(shí)，氨溴索可提高聯(lián)用抗生素在肺部的濃度，提高抗菌的療效1。另外，氨溴索具有對(duì)肺部多重保護(hù)作用，對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的喘、咳、痰、炎四癥均具有一定的治療和緩解作用。目前,在國內(nèi)外已有羅紅霉素氨溴索復(fù)方制劑的應(yīng)用，但兩者在體內(nèi)在吸收、分布、代謝各環(huán)節(jié)中是否存在相互作用？特別是在多劑量給藥時(shí)，是否會(huì)產(chǎn)生具有臨床意義的相互作用？本文擬對(duì)二者在體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)相互影響進(jìn)行研究，為臨床合理應(yīng)用提供依據(jù)。材料與方法1.1試驗(yàn)藥物羅紅霉素氨溴索片：廣州白云山制藥股份有限公司，180mg/片（含羅紅霉素150mg，氨溴索30mg）；羅紅霉素片：浙江震元制藥有限公司生產(chǎn)，15

9、0mg/片；氨溴索片江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，30mg/片。1.2主要儀器Waters2690液相色譜,ZQ2000型質(zhì)譜；masslynx3.5工作站；METTLERTOLEDOAG285天平。1.3試劑羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)品（含量91.4%）、克拉霉素標(biāo)準(zhǔn)品（含量942U/mg）；氨溴索標(biāo)準(zhǔn)品、芬太尼標(biāo)準(zhǔn)品均購于中國藥品生物制品檢定所；乙腈、甲醇為色譜純；醋酸、甲酸為分析純；水為重蒸餾水。受試者選擇24名受試者均為健康男性，年齡2128（23.251.51）a，體重5580（62.636.56）kg,無煙酒嗜好，試驗(yàn)前經(jīng)詢問病史、體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查未發(fā)現(xiàn)異常。兩周內(nèi)未服用任何可能影響本品吸收

10、、代謝的藥物。受試期間統(tǒng)一清淡飲食，不使用其他任何藥物、不吸煙及不飲酒及含咖啡的飲料，受試者試驗(yàn)前簽署知情同意書。試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方案實(shí)驗(yàn)分為四組：分別為復(fù)方羅紅霉素氨溴索片、羅紅霉素片加氨溴索片、羅紅霉素片、氨溴索片，采用隨機(jī)4X4拉丁方實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：將受試者按報(bào)到體格合格順序入組，每種順序1人。先后4個(gè)周期交叉服用受試藥物。洗脫期為二周。每天早上8：00口服羅紅 霉素300mg和/或氨溴索60mg。連服7天，第七天服藥前及服藥后0.5,1,1.5,2,3,4,6,&12,24,36,4&72h抽取肘部靜脈血各45ml。血樣置于含有肝素的離心管中，立即離心，分離出血漿，置-70C冰箱中保存至測(cè)定。生物

11、樣本的藥物測(cè)定檢測(cè)條件a：羅紅霉素檢測(cè)的色譜一質(zhì)譜條件色譜條件HYPEERSILGOLDC（150mmx2mm，5um）。流動(dòng)相：乙腈：30mmol/L18醋酸銨（含0.4%甲酸）水溶液（58：42,V/V），流速：0.35ml/min,柱溫：45C。質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)質(zhì)譜離子化方式：電噴霧離子化（ESI+）;離子極性:Positive；選擇性離子檢測(cè)（SIM）：羅紅霉素m/z：679.4M+H+，克拉霉素（內(nèi)標(biāo)）m/z:590.4M+H+；毛細(xì)管電壓3.00KV，錐孔電壓56V。萃取電壓1.00V,離子源溫度105C,去溶劑溫度300C，錐孔氣流速70L/h，去溶劑氣流速400L/h。b:氨溴索檢

12、測(cè)的色譜質(zhì)譜條件色譜條件BDSHYPEERSILC柱（250mmx4.6mm,5um）。流動(dòng)相：乙腈：30mmol/L18醋酸銨（含0.4%甲酸）水溶液（36：54,V/V），流速：1.2ml/min,柱后分流比為3：1,柱溫：45C。質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)質(zhì)譜離子化方式：電噴霧離子化（ESI+）；離子極性:Positive；選擇性離子檢測(cè)（SIM）：氨溴索m/z：263.9,263.8,265.9M+H+,芬太尼（內(nèi)標(biāo)）m/z:337.3M+H+；毛細(xì)管電壓3.50KV,錐孔電壓40V。萃取電壓1.00V,離子源溫度105C,去溶劑溫度320C,錐孔氣流速70L/h，去溶劑氣流速400L/h。樣品處理

13、a:羅紅霉素血樣處理：精密吸取血漿0.15ml血漿置入1.5ml離心管中，加入內(nèi)標(biāo)甲醇液600pl（濃度為913ng/ml），渦旋振蕩后2min,10000rpm離心10min,取上清液置于進(jìn)樣瓶中，進(jìn)樣5ul分析。b:氨溴索血樣處理：精密吸取血漿0.5ml血漿置入1.5ml離心管中，加入內(nèi)標(biāo)50Ul（濃度為604ug/ml），振蕩10S,加入乙醚一正已烷（1：1,v/v）3ml,渦旋振蕩1.5min,3000rpm離心3min,取上清液置于置于另一離心管中，60C氮?dú)獯蹈?，殘?jiān)?0%的乙腈定容至100ul,進(jìn)樣30ul分析。離子流色譜圖羅紅霉素的保留時(shí)間約為2.97min，內(nèi)標(biāo)克拉霉素的保

14、留時(shí)間為2.83min(通道2),氨溴索的保留時(shí)間約為3.39min，內(nèi)標(biāo)芬太尼的保留時(shí)間約為5.43min,血漿中無明顯的內(nèi)源性干擾物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量范圍和最低定量濃度羅紅霉素：用空白血漿將羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成0.004，0.014，0.057，0.287，2.867，14.333yg/ml的系列濃度樣品，按“血漿樣品的處理”項(xiàng)下操作，以峰面積之比對(duì)濃度(C)作線性回歸，得回歸方程：Cg/ml)=7.8849e-003XA/A+0.7015,r=0.999,is定量下限濃度為0.004yg/ml。氨溴索：用空白血漿將氨溴索標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成1.00，2.00，5.00，10.01，20.01，5

15、0.01，100.05ng/ml的系列濃度樣品，按“血漿樣品的處理”項(xiàng)下操作，以峰面積之比對(duì)濃度(C)作線性回歸，得回歸方程：C(ng/ml)=5.5887e-003XA/A+0.0101，r=0.994,is定量下限濃度為1.00ng/ml?；厥章始熬芏攘_紅霉素：配制濃度為0.014yg/ml、0.287yg/ml、2.867yg/ml的羅紅霉素人血漿樣品標(biāo)準(zhǔn)管，按“血漿樣品的處理”項(xiàng)下操作，測(cè)定峰面積，按回歸方程計(jì)算實(shí)測(cè)濃度，分別在同一天內(nèi)測(cè)定5次和每天5次連續(xù)測(cè)定3天，分別考察方法的日內(nèi)、日間精密度和方法回收率。日內(nèi)RSD為1.39%5.62%(n=5)；日間RSD為1.91%7.14

16、%(n=15)；方法的絕對(duì)回收率為94.55%98.57%；方法的平均回收率在92.87%95.38%之間。氨溴索：配制濃度為2.00ng/ml、10.01ng/ml、50.03ng/ml的羅紅霉素人血漿樣品標(biāo)準(zhǔn)管，按“血漿樣品的處理”項(xiàng)下操作，測(cè)定峰面積，按回歸方程計(jì)算實(shí)測(cè)濃度，分別在同一天內(nèi)測(cè)定5次和每天5次連續(xù)測(cè)定3天，分別考察方法的日內(nèi)、日間精密度和方法回收率。日內(nèi)RSD為1.94%2.01%(n=5)；日間RSD為2.93%6.63%(n=15)；方法的絕對(duì)回收率為86.21%99.37%；方法平均回收率在93.80%96.39%之間。樣本穩(wěn)定性考察根據(jù)研究的具體情況，進(jìn)行了羅紅霉素

17、與氨溴索在血漿中的穩(wěn)定性。方法如下：配制羅紅霉素濃度為0.014yg/ml、0.287yg/ml、2.867yg/ml和氨溴索濃度為2.00ng/ml、10.01ng/ml、50.03ng/ml人血漿，每個(gè)濃度血漿20ml，然后各取1ml分裝于1.5ml塑料離心管中，取上述血樣于室溫放置，分別于第0、4、8、12、24h測(cè)定其濃度，考察室溫放置的穩(wěn)定性。取上述血樣置-20C冰箱中保存，分別于0、10、20、30、40d取出測(cè)定其濃度，考察冰凍貯存的穩(wěn)定性。取上述血樣置-20C冰箱及室溫中保存，反復(fù)凍融0、1、2、3、4次后測(cè)定其濃度，考察反復(fù)凍融的穩(wěn)定性。按“血漿樣品的處理”項(xiàng)下操作，測(cè)定峰面

18、積，按回歸方程計(jì)算實(shí)測(cè)濃度，結(jié)果經(jīng)不同的處置，各濃度的RSD小于6,與日間誤差相近，證明在這些條件下，羅紅霉素和氨溴索是穩(wěn)定的。藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的求算及結(jié)果AUC：以梯形面積法求得；0tK以消除相時(shí)間對(duì)濃度的對(duì)數(shù)進(jìn)行線性回歸，得斜率乘以-2.303；t=0.693/K；1/2AUC=AUC+C/K，C為不低于最低定量限的末點(diǎn)濃度；0T8ofttT,C均用實(shí)測(cè)值maxmaxAUC(T)相對(duì)生物利用度F%=X100%AUC(R)0-tCL/F=D(F)/穩(wěn)態(tài)時(shí)AUC0-24V=CL/kMRT=AUMC/AUCTOC o 1-5 h z0_80-8AUMC=卜tCdt=FtCdt+卜tCdt00tVt

19、Cdt由梯形法求得，0AtCdt=為竺巴丄(t-1)0I=12ii1fg”tctJtCdt=t+tkk2不同用藥形式羅紅霉素的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表19_21。氨溴索的動(dòng)學(xué)參數(shù)見表2224。統(tǒng)計(jì)方法及結(jié)果藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)差異性檢驗(yàn)：藥藥動(dòng)學(xué)參數(shù)AUC和C，經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換，其他參數(shù)(t、04maxmaxMRT、t、CL、V后采用SPSS(V10.0)統(tǒng)計(jì)學(xué)程序進(jìn)行藥物間、周期間、個(gè)體間的三因素1/2方差分析。藥物間相互作用分析：采用90%可信區(qū)間進(jìn)行檢驗(yàn)(美國FDA推薦使用的方法)。若復(fù)方制劑或合用藥物的AUC的90%可信限落在單獨(dú)使用藥物的80125%范圍內(nèi)，C的04max90%可信限落在70143%范圍內(nèi)

20、，則認(rèn)為二種藥物合用時(shí)無臨床意義的藥物相互作用。90%的可信區(qū)間計(jì)算：參考文獻(xiàn)2多交叉設(shè)計(jì)多組間比較的可信區(qū)間計(jì)算。采用方差分析得出的標(biāo)準(zhǔn)誤，經(jīng)校正后計(jì)算。公式如下：exp（AS.（k-1）F）*100,其中c、a;k-1,vA=LT-LR（二組對(duì)數(shù)均值之差），Sc為校正后的誤差均方，K為處理組數(shù)，F(xiàn)為自由度為（k-1,v）的卩分布的a分位數(shù)，v是方差分析中誤差的自由度。若取90%有可信區(qū)間，貝膽=0.05。結(jié)果多劑量服用復(fù)方羅紅霉素氨溴索片、單方和合用三種用藥的血藥濃度-時(shí)間曲線圖1-2。羅紅霉素的藥代動(dòng)學(xué)參數(shù)顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表1；氨溴索的藥代動(dòng)學(xué)參數(shù)顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表2。結(jié)果表明，復(fù)方制劑

21、、合用藥物以及單用藥物藥動(dòng)學(xué)參數(shù)均無顯著性差異。表明復(fù)方制劑羅紅霉素及氨溴索的昅收速度及吸收程度均未發(fā)生改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)羅紅霉素或氨溴索，無論是復(fù)方或是合用兩種藥物其AUC和AUC0J的90%可信限落在單用藥物的80125%范圍內(nèi)，C的90%可信限落在70143%范圍內(nèi)，證明兩max種藥物均未在體內(nèi)產(chǎn)生有臨床意義的藥物相互作用。結(jié)果見表3-4。整個(gè)試驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)一名志愿者在第三、第四周期服藥半小時(shí)出現(xiàn)腹痛、腹瀉一小時(shí)后自行恢復(fù)，其他志愿者未發(fā)現(xiàn)任何藥物不良反應(yīng)和不良事件發(fā)生。討論一般的藥動(dòng)學(xué)相互作用研究，僅簡單的一種藥物對(duì)另外一種藥物的藥動(dòng)學(xué)的影響，而我們的試驗(yàn)研究了二種藥物的相互作用，因?yàn)樽鳛?/p>

22、復(fù)方制劑，兩者之中，任何一個(gè)藥動(dòng)學(xué)的改變，均對(duì)其藥效產(chǎn)生影響。氨溴索具有對(duì)肺部多重保護(hù)作用的專屬特點(diǎn)，對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的喘、咳、痰、炎四癥均具有一定的治療和緩解作用。羅紅霉素與氨溴索制成復(fù)方制劑，在藥理藥效上具有協(xié)同作用，已有文獻(xiàn)報(bào)道氨溴索可以增加肺中藥物濃度，為了研究兩者是否存在藥動(dòng)學(xué)的相互作用，我們采用了4X4拉丁方設(shè)計(jì)，可以反映藥物間的相互作用（通過單用與合用比較）和因藥劑學(xué)（如輔料）的影響而產(chǎn)生的相互作有用（通過通過復(fù)方與合用的比較），因此，通過此設(shè)計(jì)，而者采用更符合臨床使用情況多劑量給藥，我們研究證明了羅紅霉素與氨溴索在體內(nèi)不產(chǎn)生藥動(dòng)學(xué)的相互作用。參考文獻(xiàn)1.WangP,QiM,Jin

23、XJ.Determinationofroxithromycininratlungtissuebyliquidchromatography-massspectrometry.PharmBiomedAnal.2005，39(3-4):618-23.表1羅紅霉素藥動(dòng)學(xué)比較Tab1Comparisonofpharmacokineticparametersofroxithromycinindifferencetreatmentparameterunitcomplexprescriptionco-administrationsingleuseANVOAFMSDMSDMSDAUCO-72gh/mL)111.

24、36835.433113.4238.725110.19435.1780.684AUCO-wgh/mL)112.68136.278115.03939.976111.70536.2330.69Cmaxg/mL)1O.662.64310.8583.18710.2572.8220.285Tmax(h)1.67O.281.670.411.670.320.08T1/2(h)11.O961.45211.4391.96311.5912.0870.794MRT(h)13.5311.52113.6941.83113.5691.5040.959CL/F(L/h)3.6281.1393.6241.2233.6471.

25、1030.452K(1/h)O.O635O.OO830.0620.010.0620.010.695V/F(L)57.33517.20158.82318.13260.16721.0570.113表2氨溴索藥動(dòng)學(xué)比較Tab2Comparisonofpharmacokineticparametersofambroxolindifferencetreatmentcomplexprescriptionco-administrationsingleuseANVOAparametersunitMSDMSDMSDFAUC0-48gh/mL)591.51179.50571.29168.86620.08177.8

26、60.06AUC0-wgh/mL)607.16184.26588.25175.89634.90183.960.05Cmaxmax(pg/mL)86.0120.5376.2815.3486.4625.900.05Tmax(h)1.730.391.770.391.690.290.43T1/2(h)8.802.119.162.458.661.490.53MRT(h)11.881.1911.621.1111.781.420.76CL/F(L/h)0.130.040.140.040.120.040.05K(1/h)0.080.020.080.020.080.010.61V/F(L)1.680.741.800.721.570.580.11bycomplexorcombinationcomparingtosingleuseparameters90%Confidence