微生物基礎(chǔ)知識1課件

1、微生物基礎(chǔ)知識第二十九條所有人員都應(yīng)當(dāng)接受衛(wèi)生要求的培訓(xùn)，企業(yè)應(yīng)當(dāng)建立人員衛(wèi)生操作規(guī)程，最大限度地降低人員對藥品生產(chǎn)造成污染的風(fēng)險(xiǎn)。第二十條凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）應(yīng)當(dāng)定期培訓(xùn)，使無菌藥品的操作符合要求。培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識。未受培訓(xùn)的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產(chǎn)期間需進(jìn)入潔凈區(qū)時(shí)，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行特別詳細(xì)的指導(dǎo)和監(jiān)督。微生物基礎(chǔ)知識一、微生物概況在自然界中，用肉眼無法直接看到的，必須用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大幾百倍、幾千倍甚至幾萬倍才能觀察到的微小生物的總稱。微生物的種類繁多，至少在十萬種以上。包括病毒、細(xì)菌、霉菌及酵母菌等。微生物

2、在自然界分布極廣。土壤、水、空氣、人類及動(dòng)植物的體表、呼吸道、消化道等腔道中均存在數(shù)量不等的微生物。 二.微生物的作用及危害1. 與我們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、疫苗等是利用微生物發(fā)酵做成的。2.微生物中有一部分能引起人及動(dòng)、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、可以導(dǎo)致產(chǎn)品腐敗變質(zhì)、 成品不合格的重要因素。藥品生產(chǎn)需控制的微生物 在藥品生產(chǎn)過程中，根據(jù)GMP中潔凈度級別要求以及產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，對物料、產(chǎn)品、生產(chǎn)環(huán)境需進(jìn)行控制的污染（有害）微生物主要為 細(xì)菌和真菌（霉菌，酵母菌）三. 微生物

3、的特點(diǎn)1.體積小，面積大；2.吸收多，轉(zhuǎn)化快；3.生長旺，繁殖快；4.易變異，適應(yīng)強(qiáng)；5.分布廣，種類多。細(xì)菌細(xì)菌（英文：germs；學(xué)名：bacteria）廣義的細(xì)菌即為原核生物是指一大類細(xì)胞核無核膜包裹，只存在稱作擬核區(qū)（nuclear region)（或擬核）的裸露DNA的原始單細(xì)胞生物.人們通常所說的即為狹義的細(xì)菌，狹義的細(xì)菌為原核微生物的一類，是一類形狀細(xì)短，結(jié)構(gòu)簡單，多以二分裂方式進(jìn)行繁殖的原核生物，是在自然界分布最廣、個(gè)體數(shù)量最多的有機(jī)體，是大自然物質(zhì)循環(huán)的主要參與者。 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 觀察細(xì)菌最常用的儀器是光學(xué)顯微鏡，其大小可以用測微尺在顯微鏡下測量，一般以微米為單位。細(xì)菌按

4、其形態(tài)不同，主要分為球菌、桿菌和螺形菌三類。（1）球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時(shí)分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)（2）桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。（3）螺形菌菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細(xì)菌都有，是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。細(xì)菌結(jié)構(gòu)示意圖細(xì)菌的繁殖 二分裂繁殖是細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延長菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞

5、質(zhì)膜凹陷生長，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。 細(xì)菌分裂細(xì)菌的繁殖 細(xì)菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計(jì)算，細(xì)菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實(shí)上由于細(xì)菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細(xì)菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時(shí)間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。 細(xì)菌的菌落 單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)，這就是菌落。細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位顏色一致等。 細(xì)菌菌落形態(tài)

6、真菌 真菌是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。真菌真菌生長的最適的溫度為2228，最適的pH值為46。其繁殖能力強(qiáng)，但生長速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱60701小時(shí)即被殺死，但對干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對2.5碘酒、10甲醛則較敏感。 霉菌霉菌是絲狀真菌的俗稱，意即發(fā)霉的真菌，它們往往能形成分枝繁茂的菌絲體，但又不象蘑菇那樣產(chǎn)生大

7、型的子實(shí)體。 霉菌的形態(tài)、大小和結(jié)構(gòu) 構(gòu)成霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲是一種管狀的細(xì)絲，把它放在顯微鏡下觀察，很像一根透明膠管，它的直徑一般為3-10微米，比細(xì)菌的細(xì)胞約粗幾倍到幾十倍。菌絲可伸長并產(chǎn)生分枝，許多分枝的菌絲相互交織在一起，就叫菌絲體。 霉菌的繁殖 霉菌有著極強(qiáng)的繁殖能力，而且繁殖方式也是多種多樣的。在自然界中，霉菌主要依靠產(chǎn)生形形色色的孢子進(jìn)行繁殖。孢子有點(diǎn)像植物的種子，不過數(shù)量特別多，特別小。 霉菌的孢子具有小、輕、干、多，以及形態(tài)色澤各異、休眠期長和抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，每個(gè)個(gè)體所產(chǎn)生的孢子數(shù)，經(jīng)常是成千上萬的，有時(shí)竟達(dá)幾百億、幾千億甚至更多。這些特點(diǎn)有助于霉菌在自然界中隨處

8、散播和繁殖。對人類的實(shí)踐來說，孢子的這些特點(diǎn)有利于接種、擴(kuò)大培養(yǎng)、菌種選育、保藏和鑒定等工作，對人類的不利之處則是易于造成污染、霉變和易于傳播動(dòng)植物的霉菌病害。 霉菌的菌落 由于霉菌的菌絲較粗而長，因而霉菌的菌落較大，有的霉菌的菌絲蔓延，沒有局限性。菌落質(zhì)地一般比較疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或緊或松的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀或棉絮狀；菌落與附著物的連接緊密，不易挑?。痪湔疵娴念伾瓦吘壟c中心的顏色常不一致。 霉菌菌落形態(tài)酵母菌 酵母菌在自然界中分布很廣，尤其喜歡在偏酸性且含糖較多的環(huán)境中生長，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果園土壤中最為常見。 酵母菌的形態(tài)、大小和結(jié)構(gòu) 酵母菌是單細(xì)胞真核微生物

9、。酵母菌細(xì)胞的形態(tài)通常有球形、卵圓形、臘腸形、橢圓形、檸檬形或藕節(jié)形等。比細(xì)菌的單細(xì)胞個(gè)體要大得多，一般為1-5微米5-30微米。酵母菌具有典型的真核細(xì)胞結(jié)構(gòu),有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、液泡、線粒體等。酵母菌的繁殖 酵母菌有多種繁殖方式，包括無性繁殖和有性繁殖。有人把只進(jìn)行無性繁殖的酵母菌稱作假酵母，而把進(jìn)行有性繁殖的酵母菌稱作真酵母。 酵母菌的菌落 大多數(shù)酵母菌的菌落特征與細(xì)菌相似，但比細(xì)菌菌落大而厚，菌落表面光滑、濕潤、粘稠，容易挑起，菌落質(zhì)地均勻，正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一，菌落多為乳白色，少數(shù)為紅色，個(gè)別為黑色。 酵母菌落形態(tài)病毒 病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非

10、常廣泛，可在人、動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的能量、營養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過程。 病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。 病毒的大小、形態(tài)和結(jié)構(gòu) 病毒體積微小，大多數(shù)病毒只有采用電子顯微鏡將其放大數(shù)千、數(shù)萬倍才能看見。病毒的形態(tài)不一，基本可歸納為三種：桿狀、球狀和這兩種形態(tài)結(jié)合的復(fù)合型。病毒沒有細(xì)胞構(gòu)造，病毒粒子的主要成分是核酸和蛋白質(zhì)，在宿主細(xì)胞協(xié)助下，通過核酸

11、的復(fù)制和核酸蛋白裝配的形式進(jìn)行增殖。病毒的結(jié)構(gòu)通常有螺旋對稱型、20面體立體對稱型和復(fù)合對稱型。病毒的增殖 病毒只有在宿主的活細(xì)胞里才能進(jìn)行增殖。病毒的增殖不是二分裂方式，而是以其基因組為模板，藉DNA多聚酶或RNA多聚酶以及其它必要因素，經(jīng)過復(fù)雜的生化合成過程，復(fù)制出病毒的基因組。此時(shí)宿主細(xì)胞的生化合成受到抑制，病毒基因則經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等過程，產(chǎn)生大量病毒蛋白質(zhì)，再經(jīng)過裝配，最終釋放出子代病毒。病毒這種以核酸分子為模板進(jìn)行增殖的方式稱為自我復(fù)制。 理化因素對病毒的影響 （1）物理因素溫度多數(shù)病毒耐冷不耐熱。在干冰溫度（-70）和液氮溫度（-196）下，病毒感染性可保持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。在5060

12、30分鐘，100幾秒鐘即可滅活。pH多數(shù)病毒在pH59范圍內(nèi)穩(wěn)定，強(qiáng)酸或強(qiáng)堿條件下可被滅活。射線X射線、射線和紫外線都能滅活病毒。理化因素對病毒的影響 （2）化學(xué)因素主要有化學(xué)消毒劑、抗生素及中草藥等。除強(qiáng)酸、強(qiáng)堿消毒劑外，酚類、氧化劑、鹵素類、醇類等對病毒均有滅活作用。芽孢芽孢是細(xì)菌的休眠體，對不良環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗能力。小而輕的芽孢還可以隨風(fēng)四處飄散，落在適當(dāng)環(huán)境中，又能萌發(fā)成為細(xì)菌。細(xì)菌快速繁殖和形成芽孢的特性，使它們幾乎無處不在。內(nèi)毒素內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分，叫做脂多糖。脂多糖對宿主是有毒性的。內(nèi)毒素只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細(xì)胞后才釋放出來，所以叫做內(nèi)毒素。

13、其毒性成分主要為類脂質(zhì)A。內(nèi)毒素位于細(xì)胞壁的最外層、覆蓋于細(xì)胞壁的黏肽上。各種細(xì)菌的內(nèi)毒素的毒性作用較弱，大致相同，可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性血管內(nèi)凝血等。內(nèi)毒素耐熱而穩(wěn)定，抗原性弱。 肉毒桿菌事件2013年8月2日，新西蘭恒天然公司發(fā)布消息稱，該公司一個(gè)工廠2012年5月生產(chǎn)的濃縮乳清蛋白檢出肉毒桿菌。娃哈哈、可口可樂、上海糖酒、多美滋、可瑞康等品牌均卷入“涉毒門”。這些“受污”產(chǎn)品總量達(dá)38噸。多美滋 12個(gè)批次奶粉實(shí)施“預(yù)防性召回”娃哈哈（營養(yǎng)快線、 AD鈣奶和爽歪歪）可口可樂（菠蘿口味果粒奶優(yōu)）牛欄牌 10萬罐奶粉肉毒桿菌肉毒桿菌是一種生長在常溫、低酸和缺氧環(huán)境中的革蘭

14、氏陽性細(xì)菌，在不正確加工、包裝、儲存的罐裝食品或真空包裝食品里都能生長。是目前毒性最強(qiáng)的毒素之一。人體的胃腸道很適于肉毒桿菌居住。而肉毒毒素對酸的抵抗力特別強(qiáng)，胃酸溶液24小時(shí)內(nèi)不能將其破壞，故可被胃腸道吸收，損害身心健康。所以食入和吸收這種毒素后，神經(jīng)系統(tǒng)將遭到破壞，出現(xiàn)惡心、嘔吐、頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等癥狀。藥品污染事件強(qiáng)生公司2010年4月30日發(fā)表聲明，以產(chǎn)品質(zhì)量不能完全達(dá)標(biāo)為由，宣布在12個(gè)國家和地區(qū)召回嬰幼兒用感冒退燒藥泰諾林、美林、抗過敏藥仙特明及可他敏等40多種非處方藥。原因是該藥廠發(fā)現(xiàn)了大量灰塵和受污染成分，污染了藥品。2008年7月1日，昆明特大暴雨造成庫存的刺五加注射

15、液被雨水浸泡，使藥品受到細(xì)菌污染。這些被雨水浸泡、本應(yīng)退回生產(chǎn)企業(yè)并由其進(jìn)行銷毀的注射劑，被完達(dá)山藥業(yè)公司云南銷售人員張某從完達(dá)山藥業(yè)公司調(diào)來包裝標(biāo)簽，更換后銷售。致使云南省紅河州第四人民醫(yī)院使用黑龍江省完達(dá)山制藥廠刺五加注射液后致人死亡。消毒與滅菌一、消毒 1、概念 （1）消毒：是指對病原微生物的殺滅作用，但不能殺死芽孢等全部微生物。 （2）消毒劑：是指用于消毒的化學(xué)藥品。2、常見消毒劑類別名 稱濃度消毒用途性 質(zhì)酚類甲酚皂（來蘇兒）%水溶液皮膚溶于水，呈堿性反應(yīng)，有除垢作用，殺菌力強(qiáng)，有毒性，消毒手有麻木感。%-%地漏濃煤焦油溶液0.16 %環(huán)境消毒消毒力中等。醇類乙醇70-75%皮膚、工

16、具、設(shè)備、容器能使蛋白質(zhì)變性，有揮發(fā)性，無殘留，作用時(shí)間短，對芽孢無效。醛類甲醛每立方米用3740%甲醛液-ml,加-克高錳酸鉀熏蒸無菌室能破壞細(xì)菌繁殖體及許多芽胞、病毒、真菌；有揮發(fā)性，對眼睛及皮膚有刺激性。氧化劑過氧乙酸.%皮膚消毒廣譜殺菌劑，能殺死細(xì)菌繁殖體，芽胞、真菌與某些病毒；強(qiáng)氧化劑，時(shí)對皮膚、金屬有較強(qiáng)腐蝕性。稀釋液只能存放三天。表面活性劑新潔爾滅（苯扎溴銨）.-.%皮膚、工具，設(shè)備、容器破壞細(xì)胞膜，使蛋白質(zhì)變性，對革蘭氏陰性菌不敏感，具清潔與消毒雙生作用，對皮膚刺激性少，遇合成洗滌劑活性減弱杜滅芬(消毒寧).-.%水溶液皮膚性質(zhì)穩(wěn)定，易溶于水，抗菌譜窄，遇合成洗滌劑活性減弱。洗

17、必泰.%水溶液皮膚對革蘭氏陽、陰性菌有效，能快速殺滅繁殖體，無毒性，但不能與陰離子清潔劑等物質(zhì)、升汞、肥皂合用。二、滅菌1.概念:滅菌是指對所有微生物的殺滅作用，包括所有微生物的繁殖體和芽孢或孢子。細(xì)菌的芽孢具有較強(qiáng)的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽孢為準(zhǔn)。芽孢是某些特殊種群的細(xì)菌，主要是芽孢桿菌屬與梭菌屬中細(xì)菌產(chǎn)生的特殊休眠體，有極強(qiáng)的抗逆性，對熱、堿、酸、高滲以及輻射均有強(qiáng)耐受性。通常使用的殺滅芽孢的方法為高壓滅菌。2、滅菌的方法基本上分為二大類：物理方法（干熱滅菌、濕熱滅菌、射線滅菌、濾過滅菌）化學(xué)方法（氣體滅菌、藥液滅菌）。常用的滅菌方法。（1）干熱滅菌法(干熱滅菌柜,隧道滅菌器)（

18、2）濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌法)（3）紫外線滅菌法( 紫外燈照射)（4）臭氧消毒法( O3 消毒)（5）過濾滅菌法(除菌過濾器)干熱滅菌法本法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設(shè)備中、利用干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或消除熱原物質(zhì)的方法。適用于耐高溫但不宜用濕熱滅菌法滅菌的物品的滅菌，如玻璃器具、金屬制容器、纖維制品、固體試藥、液狀石蠟等均可采用本法滅菌。干熱滅菌條件一般為160170120min以上、17018060min以上或25045min以上，也可采用其它溫度和時(shí)間參數(shù)?？傊?，應(yīng)保證滅菌后的產(chǎn)品其SAL10-6。干熱過度殺滅后產(chǎn)品的SAL應(yīng)10-12。250 45min的干熱滅菌也可除去無菌

19、產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。由于在相同的溫度下，干熱對微生物的殺滅效果遠(yuǎn)低于飽和蒸汽，故干熱滅菌需要較高的溫度或較長的滅菌時(shí)間。濕熱滅菌是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。高壓蒸汽滅菌法是最為可靠的滅菌方法，一般為121，20分鐘或115，30分鐘。紫外線滅菌法是指用紫外線照射殺滅微生物方法。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線進(jìn)行直線傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用于照射物體表面之滅菌

20、、無菌室的空氣及水的滅菌；不適用于藥液的滅菌、固體物質(zhì)深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線，因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線對人體照射過久，會(huì)發(fā)生結(jié)膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現(xiàn)象，故一般在人入室前開啟紫外線燈1 2小時(shí)，關(guān)閉后人才進(jìn)入潔凈室，如果必須在人進(jìn)去后仍要開紫外線滅菌，則人的皮膚及眼睛應(yīng)有有效的防護(hù)措施。臭氧消毒法臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用,臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。它不但對各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺來滅能力，而且對霉菌也很有效。生產(chǎn)臭氧的原料主要是電能和空氣，一般通過高頻臭氧發(fā)生器（電子消毒器）來獲得，消毒時(shí),直接將臭氧發(fā)生器直于房間中間即可。過濾滅菌法過濾滅菌法是用濾過方法