結(jié)核感染酶聯(lián)免疫法定量檢測在結(jié)核病中的應(yīng)用課件

1、結(jié)核感染酶聯(lián)免疫法定量檢測在結(jié)核病中的應(yīng)用流行病學(xué)調(diào)查結(jié)核病的傳播途徑傳染源活動性肺結(jié)核大量排菌：直接涂片法查出微量排菌：直接涂片法陰性，培養(yǎng)陽性傳播途徑飛沫傳播：通過咳嗽、噴嚏、大笑、大聲談話產(chǎn)生微滴排到空氣中傳播結(jié)核病的傳播途徑易感人群自然抵抗力：與遺傳因素、生活貧困、居住擁擠、營養(yǎng)不良有關(guān)。嬰幼兒、老年人、HIV感染者、免疫抑制劑使用者、慢性疾病患者易患。獲得性特異性抵抗力：來自自然或人工感染。山區(qū)及農(nóng)村居民移居城市易感。結(jié)核感染后的免疫應(yīng)答臨床表現(xiàn)癥狀呼吸系統(tǒng)癥狀咳嗽、咳痰咯血：1/31/2患者胸痛：胸膜性疼痛呼吸困難：干酪性肺炎和大量胸腔積液全身癥狀午后潮熱、倦怠乏力、盜汗、食欲減退

2、、體重減輕。育齡女性月經(jīng)不調(diào)。臨床表現(xiàn)體征取決于病變性質(zhì)，部位，范圍或程度，如病變范圍大，可有肺實變體征。局限性干濕羅音實變征-干酪性肺炎哮鳴音 見于支氣管結(jié)核胸腔積液征結(jié)核變態(tài)反應(yīng)引起的過敏表現(xiàn)：結(jié)節(jié)性紅斑泡性結(jié)膜炎和結(jié)核風(fēng)濕癥等診斷方法病史和癥狀體征癥狀體征情況診斷治療過程肺結(jié)核接觸史診斷方法2. 影像學(xué)檢查胸部X線檢查肺部CT對肺結(jié)核診斷的重要作用診斷方法3. 纖支鏡檢查常用于支氣管結(jié)核診斷表現(xiàn)為粘膜充血、潰瘍、糜爛，組織增生、形成瘢痕、支氣管狹窄可以病檢、采集分泌物、沖洗液標(biāo)本作病原學(xué)檢查診斷方法4. 實驗室檢查結(jié)核菌素試驗：檢出結(jié)核分枝桿菌感染，而非檢出結(jié)核病。對兒童、少年及青年的結(jié)

3、核病診斷有參考意義；不能區(qū)分自然感染或是卡介苗接種的免疫反應(yīng)；陰性反應(yīng),一般表明未受過結(jié)核分枝桿菌的感染；以下情況不能排除結(jié)核病：感染后4-8周內(nèi)未充分建立變態(tài)反應(yīng)，可陰性；營養(yǎng)不良、HIV感染、麻疹、水痘、癌癥、嚴(yán)重的細(xì)菌感染包括重癥結(jié)核病如粟粒性結(jié)核病和結(jié)核性腦膜炎和卡介苗接種后，多為陰性。診斷方法痰涂片和痰培養(yǎng)： 排菌具有間斷性、不均勻性結(jié)核菌涂片：初治者3份痰標(biāo)本（清晨，夜間，即時痰1次痰涂片80%陽性，2次痰涂片90%陽性，3次痰涂片95%陽性。 優(yōu)點：標(biāo)本易獲?。?缺點：易污染、檢測時間長，敏感度低。診斷方法結(jié)核菌培養(yǎng)：6 weeks結(jié)核桿菌DNA和抗體檢查：缺點：特異性欠強,敏感

4、性較低,尚需進一步研究。 ADA法：優(yōu)點：檢測特異性高，個別報道可達100%；缺點：靈敏度低，40%，影響其整體檢測效果。傳統(tǒng)檢測手段結(jié)核病實驗室檢測難題結(jié)核桿菌特異性T細(xì)胞應(yīng)答體外檢測實驗檢測原理 結(jié)核分枝桿菌的感染者，當(dāng)這些人的血液再次接觸到結(jié)核分枝桿菌的抗原時，特異性T細(xì)胞就能迅速產(chǎn)生IFN-。而沒有感染結(jié)核分枝桿菌的人就不會產(chǎn)生IFN-，并且IFN-的含量與結(jié)核菌的量有很好的對應(yīng)關(guān)系，含菌量越高IFN-產(chǎn)生的越多。TB-IGRA就是通過檢測體外釋放的IFN-的含量來檢查是否感染結(jié)核分枝桿菌的。通過比較基因組學(xué)發(fā)現(xiàn)卡介苗和結(jié)核分枝桿菌間存在RD區(qū)，RD1區(qū)一般只存在于結(jié)核分枝桿菌，可能形

5、成ESX-1分泌機制。該分泌系統(tǒng)中有兩個重要蛋白，早期分泌抗原-6(ESAT-6)和培養(yǎng)基濾過蛋白-10(CFP-10)具有較強的Thl表位。隨后，ESAT-6和CFP-10作為體外刺激抗原來檢測結(jié)核分枝桿菌越來越頻繁，這種方法被定義為體外T細(xì)胞IFN-釋放試驗（IGRA）。兩種方法 (TB-IGRA,T-SPOT.TB)TST與IGRA ；、活動性結(jié)核與潛伏性結(jié)核感染的鑒別 “菌陰”結(jié)核患者的輔助診斷 肺外結(jié)核的鑒別診斷 結(jié)核發(fā)病風(fēng)險的預(yù)測免疫力低下或受抑制患者的結(jié)核病診斷 區(qū)別結(jié)核感染者與BCG接種者 抗結(jié)核療效的監(jiān)測 臨床應(yīng)用優(yōu)點：敏感性及特異性高：不受卡介苗接種及環(huán)境分枝桿菌影響，不受

6、機體免疫狀態(tài)影響。應(yīng)用廣泛：在活動性肺結(jié)核、肺外結(jié)核、結(jié)核性漿膜炎、潛伏性結(jié)核感染及免疫抑制的結(jié)核患者均能檢測。診斷快速：24小時可報告結(jié)果?？蛇M行療效評估：治療有效則T-SPOT.TB斑點數(shù)減少甚至陰性。評價評價缺點：目前尚無統(tǒng)一的界值用來鑒別潛伏結(jié)核感染及活動性肺結(jié)核。在 5歲兒童、近期暴露于結(jié)核桿菌者、免疫功能低下者和需要二次檢測者中使用的證據(jù)不足。對標(biāo)本要求高：室溫保存和運輸血液樣本（18-25），不能冷凍或冷藏；血液樣本從采集到檢測不超過8小時。結(jié)果需結(jié)合臨床和其它檢測進行判斷，陰性結(jié)果不能排除暴露或感染結(jié)核桿菌的可能性。不能確定病變部位。IGRA應(yīng)用實例 IGRA對涂陰肺結(jié)核具有較好的輔助診斷作用 治療效果的評價治療效果的評價治療效果的評價小結(jié)IGRA不易受BCG接種和NTM感染的干擾，檢測MTB感染的特異性高于TST；IGRA對肺結(jié)核（涂陽/涂陰）和肺外結(jié)核均具有較好的檢測性能； IGRA可作為臨床結(jié)核的輔助診斷方法； IGRA在結(jié)核病診斷、流行學(xué)調(diào)查、疾病發(fā)展與治療效果評價等方面的應(yīng)用越來越廣泛； 開展情況歐、美、日、韓等低流行國家和地區(qū)已作為常規(guī)診斷和篩查指標(biāo)。國內(nèi)早就