免疫缺陷動(dòng)物

1、免疫缺陷動(dòng)物1 免疫缺陷動(dòng)物是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成的一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動(dòng)物，是一類帶有突變基因的動(dòng)物。一、定義 2二 、分 類3三 、裸小鼠4 發(fā)現(xiàn)與發(fā)展 1962年英國(guó)格拉斯哥醫(yī)院Grist在非近交系的小鼠中偶然發(fā)現(xiàn)有個(gè)別小鼠無(wú)毛。1966年證實(shí)是由于第11對(duì)染色體基因突變所致。1968年P(guān)antelouris解剖發(fā)現(xiàn)裸鼠失去了正常的胸腺。1969年Rygaard首先將人結(jié)腸腺癌移植獲得成功。 由于裸鼠原種抵抗力差，生育力低，壽命短，不能用于實(shí)際。和純系BALB/c，C3H，C57BL/6小鼠交配，不斷選育，獲得了三種近交系鼠新種。 裸鼠自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，廣泛應(yīng)用于腫

2、瘤學(xué)、免疫學(xué)和病毒學(xué)等多個(gè)學(xué)科的研究。5生物學(xué)特性一般特點(diǎn)純合子突變裸鼠（nu/nu）主要表現(xiàn)為無(wú)毛以及胸腺缺陷。雜合子小鼠（nu/+）各方面表現(xiàn)正常。體重小于同齡普通鼠，發(fā)育緩慢。必須養(yǎng)育在 SPF環(huán)境中 。繁殖方式：一般采用隱性純合子雄性與雜合子雌鼠交配（nu/nunu/+）。6解剖生理特點(diǎn)胸腺殘留一些上皮樣細(xì)胞；淋巴組織胸腺依賴區(qū)的淋巴細(xì)胞消失；外周血淋巴細(xì)胞減少。雖然有原始的T細(xì)胞，但缺乏成熟的T細(xì)胞。T細(xì)胞的輔助，抑制及殺傷功能不全。在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中無(wú)有絲分裂反應(yīng)，對(duì)刀豆素A或植物凝集素P亦無(wú)促分裂原應(yīng)答。無(wú)接觸敏感性，無(wú)移植排斥，無(wú)移植物抗宿主反應(yīng)。B細(xì)胞數(shù)量正常但功能有缺陷，

3、合成的免疫球蛋白主要是IgM，只有少量IgG。 粒細(xì)胞功能較低，NK細(xì)胞活性高。7裸鼠的應(yīng)用 1、腫瘤研究上的應(yīng)用 制作人類腫瘤移植瘤模型人類腫瘤移植于動(dòng)物的歷史 免疫排斥問(wèn)題眼前房，腦內(nèi)，地鼠的頰囊等免疫逃避部位免疫抑制劑、射線照射的使用裸鼠作為人類腫瘤受體8腫瘤移植瘤模型在腫瘤基礎(chǔ)研究中的意義添加人為因子（致突變劑，癌基因，藥物等）觀察腫瘤病因及機(jī)理和治療。建立腫瘤細(xì)胞株，提供大量腫瘤組織供分析。腫瘤移植瘤模型在臨床腫瘤學(xué)中的意義診斷和預(yù)后。 建立平行模型，明確診斷和跟蹤預(yù)后。個(gè)體化療有效試驗(yàn)。 對(duì)于晚期和復(fù)發(fā)腫瘤有重要意義。藥物有效的標(biāo)準(zhǔn)。 腫瘤不生長(zhǎng)；腫瘤生長(zhǎng)緩慢；腫瘤長(zhǎng)出后又消失；

4、腫瘤無(wú)轉(zhuǎn)移；動(dòng)物壽命延長(zhǎng)。9腫瘤移植瘤模型制作方法 腫瘤組織塊或腫瘤細(xì)胞皮下移植腹腔內(nèi)或腎包膜下移植原位移植10腫瘤組織惡性程度：惡性和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)瘤成功率較高種類：細(xì)胞系成功率活檢標(biāo)本來(lái)源：淋巴瘤、骨腫瘤等難獲成功部位：腫瘤塊的外周部接種易成活裸鼠遺傳背景：胰腺癌接種BALB/c 成功，NIH系則失敗性別：雌激素依賴性腫瘤接種雄鼠生長(zhǎng)慢鼠齡：46周齡動(dòng)物健康狀態(tài)影響移植瘤模型制作的因素11接種部位原位移植成功率高，移植腫瘤與人類原發(fā)瘤相似。有些腫瘤需要接種在特定的部位（對(duì)雌激素依賴的人乳腺癌MCF-7 細(xì)胞系，接種乳腺脂肪墊才能活）。其他環(huán)境：細(xì)菌病毒可以影響NK細(xì)胞活性；接種時(shí)間越早越好，注意

5、無(wú)菌操作。122、放射治療實(shí)驗(yàn)中的研究3、微生物學(xué)和免疫學(xué)方面的應(yīng)用 4、在遺傳學(xué)上的研究和應(yīng)用 5、醫(yī)學(xué)其他領(lǐng)域的應(yīng)用 寄生蟲(chóng)感染的動(dòng)物模型，美洲錐蟲(chóng)，卡氏肺囊蟲(chóng)；皮膚（魚(yú)鱗?。?；免疫缺陷模型（麻風(fēng)，結(jié)核）。13四、嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠 （Sever Combined Immunodeficient Mice, SCID mice）141983年Bosma首次報(bào)告,來(lái)源于C.B-17小鼠。由于第16對(duì)染色體隱性基因突變，純合突變導(dǎo)致淋巴細(xì)胞抗原受體基因VDJ區(qū)域重排的重組酶活性異常，基因重排時(shí)斷裂無(wú)法正常連接，從而影響B(tài)、T細(xì)胞的正常功能分化。1988年我國(guó)醫(yī)科院動(dòng)物所從美國(guó)Jackson實(shí)

6、驗(yàn)室引進(jìn)；1992年中山大學(xué)從澳大利亞引進(jìn)。 發(fā)現(xiàn)與發(fā)展15一般特點(diǎn)外觀體重與普通小鼠相同。繁殖特點(diǎn) 純合子兄妹交配。必須養(yǎng)育在 SPF環(huán)境中，平均壽命1年以上。對(duì)鼠肝炎，巴氏桿菌、卡氏肺囊蟲(chóng)極易感染，感染后易發(fā)病死亡。生物學(xué)特性16組織解剖學(xué)特點(diǎn)脾臟、胸腺、淋巴結(jié)體積低于普通小鼠的30%。淋巴組織缺乏淋巴細(xì)胞。胸腺殘留上皮樣細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，脾臟沒(méi)有脾小體，白髓缺陷，紅髓正常。淋巴結(jié)由網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成。外周血白細(xì)胞總數(shù)減少，淋巴細(xì)胞占1020%,非淋巴性造血細(xì)胞如粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞正常。NK、LAK細(xì)胞正常。17免疫功能特點(diǎn)沒(méi)有T 、B細(xì)胞陽(yáng)性標(biāo)志細(xì)胞，對(duì)外來(lái)抗原無(wú)細(xì)胞和體液免疫。NK、LAK細(xì)胞功能正?；蛟龈?；肥大細(xì)胞因缺乏T細(xì)胞因子而分化受阻。約223%的SCID小鼠在青年期T 、B細(xì)胞功能可以恢復(fù)，稱為滲漏（Leaky），此時(shí)仍帶有SCID基因，淋巴細(xì)胞不受影響而發(fā)育成熟，原因不明?？梢杂醚鍖W(xué)和組織學(xué)方法診斷。18SCID小鼠的應(yīng)用免疫學(xué) 用于自然防御細(xì)胞如NK、LAK、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞，及免疫輔助細(xì)胞的分化和功能研究，也可以研究這些細(xì)胞與輸入的B、T細(xì)胞、淋巴因子的相互