中藥現(xiàn)代化研究和新藥開發(fā)1課件

1、第1頁，共95頁。第2頁，共95頁。第3頁，共95頁。第4頁，共95頁。第5頁，共95頁。 我國中藥制劑年出口僅僅為1億美元，然而“洋中藥”進口量已經(jīng)超過6億美元！ 世界中草藥市場年銷售額已超過160億美元，并以每年10%-20%的速度遞增。中藥產(chǎn)業(yè)是我國加入世界貿(mào)易組織后為數(shù)不多的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的民族工業(yè)。 目前,我國中藥出口貿(mào)易額僅占國際貿(mào)易總額的3%到5%左右，而且其中一半以上是中藥材原料的出口。日本、韓國等國的植物藥產(chǎn)品占據(jù)了90%的份額，而他們使用的原料主要來自中國。國人還要吃多久“洋中藥” 人大代表談中藥業(yè)應對國際競爭第6頁，共95頁。 主要原因是藥理作用不明確，工藝和標準太落后

2、。我國的中藥以復方藥物為主，是由多種藥材組合而成的，具體哪味藥起什么作用，誰也說不清楚。 不同產(chǎn)地的同一種藥材，有效成分的含量是否一致；同一產(chǎn)地的同一種藥材，不同的采摘時期，有效成分會有什么變化，沒有哪個部門能給出確切的數(shù)據(jù)。這些沒有有效成分含量的藥品難以被發(fā)達國家接受。人大代表談中藥業(yè)應對國際競爭第7頁，共95頁。 中成藥生產(chǎn)工藝的落后，導致中藥一次服藥的量大，讓人覺得難以下咽。 中藥的包裝不講究，從外觀看顯得很粗糙，不上檔次，容易讓不熟悉中藥的外國人產(chǎn)生“這樣的東西也能治病”的疑問。人大代表談中藥業(yè)應對國際競爭第8頁，共95頁。 要使我國的中藥具有國際競爭力，首先要在生產(chǎn)工藝和標準上下功夫

3、，促進企業(yè)和科研單位的橫向聯(lián)合，充分利用現(xiàn)代技術(shù)和設(shè)備，形成有效成分提取、分離、純化等先進的工藝和質(zhì)量控制標準。其次是國家有關(guān)部門支持和發(fā)展一批具有自主創(chuàng)新能力和現(xiàn)代化生產(chǎn)條件的企業(yè)，盡快形成知名品牌，形成規(guī)模市場效益，這是中藥現(xiàn)代化占領(lǐng)國際市場的關(guān)鍵。其三是國家有關(guān)部門和企業(yè)聯(lián)合，投入足夠的人力和財力進行科學研究，確定中藥成分，制定中藥標準。人大代表談中藥業(yè)應對國際競爭第9頁，共95頁。一、我國中藥產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀二、中藥現(xiàn)代化研究勢背景和意義 三、中藥現(xiàn)代化研究面臨的良好機遇和 挑戰(zhàn) 四、中藥現(xiàn)代化研究的目標和對策五、中藥現(xiàn)代化研究的開發(fā)途徑和方法 六、中藥有效成分的研究和質(zhì)量評價七、中藥指紋圖

4、譜研究技術(shù)第10頁，共95頁。 中藥現(xiàn)代化研究是一項功在民族，利在國家、造福人類，繼往開來的偉大事業(yè)。 中醫(yī)藥學以其獨特的理論和現(xiàn)實的療效生存發(fā)展至今，保持了強大的生命力，足見其中有著深刻的科學內(nèi)涵。 在21世紀生命科學的發(fā)展和回歸自然的世界潮流中，中國傳統(tǒng)醫(yī)藥學的突破，很可能成為中華民族對整個人類的新的重大貢獻之一。第11頁，共95頁。一、我國中藥產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀 我國中藥資源豐富，現(xiàn)有中藥資源種類已達12807種，其中藥用植物11146種，藥用動物1581種，藥用礦物80種。 全國藥材種植面積超過580萬畝，藥材生產(chǎn)基地600多個，常年栽培的藥材達200余種。 野生變家種也取得了積極的成果，對珍

5、稀瀕危野生動、植物品種開展了人工種植、養(yǎng)殖和人工替代品的研究。對進口藥材的引種也取得了可喜的成績。第12頁，共95頁。 迄今為止，我國中藥還沒有真正進入國際醫(yī)藥主流市場。 重要的原因是： （1）產(chǎn)品質(zhì)量沒有獲得國際主流市場的認可； （2）在藥效學和安全性評價、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標準、制劑技術(shù)、臨床研究等方面還比較滯后； （3）高效、速效、 長效（三效），體積小、單劑量小、毒副作用?。ㄈ。┮约百A存、攜帶、服用方便（三方便）的優(yōu)質(zhì)大品種不多；第13頁，共95頁。 （4）基礎(chǔ)性的科學研究比較薄弱； （5）在產(chǎn)業(yè)化的過程中對現(xiàn)代工程技術(shù)研究應用不夠； （6）在專業(yè)標準規(guī)范如GLP、GMP、GSP、GCP

6、等實施方面與國際先進水平差距較大。 因而影響了中藥產(chǎn)品的市場競爭能力，這是中藥打入國際主流市場的最大障礙之一。第14頁，共95頁。 國內(nèi)現(xiàn)狀： 有些產(chǎn)品還處于低水平重復，還沒有完全沖破“丸、散、膏、丹”的傳統(tǒng)用藥劑量形式，有的還是大鍋湯、總提取物等。 因為真正的有效部位、有效成分還沒有完全搞清楚，很難講清楚中藥的化學成分與藥效和作用機理之間的關(guān)系。 另一方面，中藥的質(zhì)量標準評價是影響中藥發(fā)展以及進入國際市場的重要原因。 有的很難制訂質(zhì)量標準，有的即使制訂了質(zhì)量標準也很難控制其質(zhì)量，有的質(zhì)量標準控制的不一定是有效成分（指示性成分），達不到真正控制藥品質(zhì)量的目的。第15頁，共95頁。 中藥要想全面

7、進入國際市場： 必須達到“安全、有效、穩(wěn)定、可控”； 必須展開中藥的現(xiàn)代化研究； 必須靠實實在在的產(chǎn)品質(zhì)量； 必須建立一整套科學規(guī)范化的中藥質(zhì)量保證體系。第16頁，共95頁。 目前，“洋中藥”就以每年300%的速度進入我國。我國雖為中醫(yī)藥大國，但在世界中醫(yī)藥市場上，我國僅占160億美元份額的3%，97%為日、韓、臺、西歐等國家和地區(qū)占有。 西藥仿制已不再可能，而自行研制則費用高、周期長、成功率低。 “洋中藥”大量涌入，國家甚感形勢的嚴峻，國家成立了中藥現(xiàn)代化領(lǐng)導小組，將中藥新藥的研發(fā)列為科研的重中之重。 二、中藥現(xiàn)代化研究背景和意義第17頁，共95頁。國家對中藥現(xiàn)代化的舉措國家科技部制定中藥現(xiàn)

8、代化科技產(chǎn)業(yè)行動計劃（2019）國家多個部委局將中藥現(xiàn)代化列入到相關(guān)計劃中將中藥現(xiàn)代化匯入西部大開發(fā)戰(zhàn)略中，帶動了西部10余個省市將中藥現(xiàn)代化作為新的經(jīng)濟增長點東部8個省市將中藥現(xiàn)代化作為本地區(qū)的支柱產(chǎn)業(yè)予以支持國務院發(fā)布了中藥現(xiàn)代化發(fā)展綱要2019-2019 年（2019）啟動了 863 計劃“十五”期間啟動了“創(chuàng)新藥物和中藥現(xiàn)代化”國家重大專項國家中長期科技發(fā)展規(guī)劃（2019-2020）“創(chuàng)新藥物”重大專項實施計劃第18頁，共95頁。 國家于2019年7月提出了中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)行動計劃。 2019年12月8日向國務院有關(guān)領(lǐng)導作了專題匯報，得到了中央領(lǐng)導以及18個部委領(lǐng)導的肯定，同時在海內(nèi)

9、外引起了強烈的反響，得到了社會各界的廣泛支持。 在2019年召開的兩院院士大會上，中國工程院醫(yī)藥衛(wèi)生學部的14名院士聯(lián)合發(fā)出了開展現(xiàn)代中藥系統(tǒng)工程及可持續(xù)戰(zhàn)略研究的建議。第19頁，共95頁。 國家中醫(yī)藥管理局、國家自然科學基金委員會也分別對中藥現(xiàn)代化研究給予了專項經(jīng)費支持。 新組建了國家中藥制劑工程技術(shù)研究中心，以促進中藥現(xiàn)代化研究成果和技術(shù)向現(xiàn)實生產(chǎn)力轉(zhuǎn)化。第20頁，共95頁。 國家科技部于2019年提出了中藥現(xiàn)代化研究發(fā)展戰(zhàn)略，并制定了“中藥現(xiàn)代化研究與產(chǎn)業(yè)化開發(fā)”的實施方案，該方案作為國家重中之重的項目于2019年5月正式實施。 科技部確定四川、寧夏、吉林等五省區(qū)為國家中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)

10、基地。第21頁，共95頁。 科 學 技 術(shù) 部 衛(wèi) 生 部 國家藥品監(jiān)督管理局 國家中醫(yī)藥管理局 中 國 科 學 院 四 川 省 人 民 政 府國科發(fā)農(nóng)社字201976號第22頁，共95頁。中藥現(xiàn)代化發(fā)展綱要（2019-2019年）國家科技部國家計委國家經(jīng)貿(mào)委國家衛(wèi)生部國家藥品監(jiān)督局國家中醫(yī)藥局中國科學院國家知識產(chǎn)權(quán)局第23頁，共95頁。中藥現(xiàn)代化研究平臺建設(shè)中藥新藥研發(fā)和評價技術(shù)平臺藥效學評價技術(shù)平臺藥物代謝動力學技術(shù)平臺藥物安全評價技術(shù)平臺中藥標準研究平臺中藥生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)平臺專業(yè)化企業(yè)新藥研究技術(shù)平臺第24頁，共95頁。 中藥現(xiàn)代化研究總體目標: 在繼承和發(fā)揚中醫(yī)藥優(yōu)勢和特色的基礎(chǔ)上，充分

11、利用現(xiàn)代科學技術(shù)的方法和手段，按照國際認可的醫(yī)藥標準規(guī)范，研究開發(fā)能夠正式進入國際醫(yī)藥市場的中藥產(chǎn)品； 初步建立我國中藥研究開發(fā)和生產(chǎn)的標準規(guī)范體系，并爭取使之成為國際傳統(tǒng)藥物研究開發(fā)的標準規(guī)范； 培育一批跨國中藥企業(yè)集團，增強中藥的國際競爭力，將我國中藥在國際中草藥市場的占有率從目前的3提高到15，使其成為我國新的經(jīng)濟增長點，進而推動中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)向我國支柱性產(chǎn)業(yè)方向發(fā)展。 第25頁，共95頁。 目的和意義: 1.中藥現(xiàn)代化和國際化，對于推動我國經(jīng)濟、社會、文化和科學技術(shù)發(fā)展具有重大的意義。 2.中藥現(xiàn)代化研究和開發(fā)，可以將我國中醫(yī)藥歷史文獻資源和中藥材資源轉(zhuǎn)變成現(xiàn)實生產(chǎn)力，形成新的經(jīng)濟增長點，

12、有利于醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)調(diào)整，增強出口創(chuàng)匯能力，振興我國民族醫(yī)藥工業(yè)。 3.中藥材規(guī)范化、規(guī)模化種植，有利于帶動地方經(jīng)濟的發(fā)展，提高農(nóng)民收入，扶助貧困地區(qū)，改善生態(tài)環(huán)境，同時保證中藥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。第26頁，共95頁。 4.建立國際認可的傳統(tǒng)藥物標準規(guī)范體系，創(chuàng)制具有自主知識產(chǎn)權(quán)的現(xiàn)代中藥。 5.開展中醫(yī)藥應用基礎(chǔ)研究，通過跨領(lǐng)域聯(lián)合攻關(guān)，帶動多學科的發(fā)展，提高整體創(chuàng)新能力。 第27頁，共95頁。三、中藥現(xiàn)代化研究面臨的良 好機遇和挑戰(zhàn) 隨著現(xiàn)代社會文明的發(fā)展和科技的進步，人類對疾病的認識正在發(fā)生變化，醫(yī)療模式已由單純的疾病治療轉(zhuǎn)化為預防、保健、治療、康復相結(jié)合的模式。 此外，化學藥品的毒

13、副作用大，抗藥性及其藥源性疾病增多，研究開發(fā)周期長、投入高、風險大，迫使人們從不同角度去尋找新的治療方法和藥物。第28頁，共95頁。 相對而言，天然藥物毒副作用較小，對疑難病、慢性病、老年病具有特殊療效，越來越受到人們的歡迎，從天然藥物中尋找新的有效藥物已成為全世界醫(yī)藥學界的研究熱點。 目前，全世界已有124個國家與地區(qū)建立了各種類型的中醫(yī)藥機構(gòu)，世界各大制藥公司也紛紛設(shè)立天然藥物研究開發(fā)機構(gòu)。 中醫(yī)藥在東南亞、日本、韓國等國家已有廣泛的應用。 第29頁，共95頁。 歐美一些國家也逐步改善對中醫(yī)藥的看法與限制。美國政府近期專門制定了“植物藥在美上市批準法”，開始接受植物藥復方制劑作為治療藥物。

14、 國際上申請中藥及其它植物藥的專利數(shù)量在迅速增長，中醫(yī)藥在世界范圍逐步得到接受。 從天然產(chǎn)物中研究開發(fā)新藥已成為一種必不可少的重要途徑。 第30頁，共95頁。 中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)行動計劃已作為國家科技部“十一五”規(guī)劃的重中之重項目組織實施。 已經(jīng)納入攻關(guān)計劃、攀登計劃和啟動的國家重大基礎(chǔ)研究規(guī)劃開始組織實施。 國家863重大課題創(chuàng)新藥物與中藥現(xiàn)代化 。 河北省創(chuàng)新藥物與中藥現(xiàn)代化重大專項（六個技術(shù)平臺）。第31頁，共95頁。 另外，我國對中藥知識產(chǎn)權(quán)問題研究和重視不夠，致使許多中藥知識財富流失。 國外無償利用我國中藥獲取了巨大財富和利益，還搶占了國際中成藥市場，甚至還向我國出口“洋中成藥”。

15、一方面要鼓勵發(fā)明創(chuàng)造，提高創(chuàng)新意識，擁有自己的名牌產(chǎn)品和自主知識產(chǎn)權(quán)； 另一方面要健全知識產(chǎn)權(quán)保護法規(guī)，提高中醫(yī)藥知識產(chǎn)權(quán)保護的意識和水平。第32頁，共95頁。河北省創(chuàng)新藥物與中藥現(xiàn)代化重大專項藥理毒理技術(shù)平臺藥物制劑與技術(shù)平臺創(chuàng)新藥合成與篩選平臺中藥有效成分研究平臺藥學院承擔河北省創(chuàng)新藥物與中藥現(xiàn)代化重大專項第33頁，共95頁。醫(yī)大藥學院河北省中藥現(xiàn)代化應用基礎(chǔ)研究基地；河北省藥學重點學科；河北省藥理毒理學研究重點實驗室；河北省創(chuàng)新藥物與中藥現(xiàn)代化重大專項。第34頁，共95頁。四、中藥現(xiàn)代化研究的目標和對策 基本目標是：“十二五”期間開發(fā)出一批符合國際市場需求的現(xiàn)代中藥，爭取其中3-5個產(chǎn)品

16、進入國際市場，同時建立和完善我國中藥現(xiàn)代研究開發(fā)體系和標準規(guī)范體系。 到2015年基本建成我國中藥的研究開發(fā)體系，形成國際認可的中藥現(xiàn)代標準和規(guī)范體系，提高我國中藥在國際市場的占有率。第35頁，共95頁。 研究開發(fā)符合市場需求的現(xiàn)代中藥，進行優(yōu)質(zhì)品種的篩選與評價，加強基礎(chǔ)性研究，進行中藥復方的二次研究與開發(fā)。 制定和完善質(zhì)量標準，建立中藥現(xiàn)代評價體系，進行現(xiàn)代中藥新劑型研究和以國際市場為導向的產(chǎn)品開發(fā)，形成我國科技先導型中藥產(chǎn)業(yè)。第36頁，共95頁。 “十二五”期間，選擇一批療效確切、使用方便、國際需求、藥味相對簡單、有一定科學研究基礎(chǔ)的代表性中藥復方為研究對象， 進行復方組成藥材和有效成分的

17、基礎(chǔ)研究 制備工藝研究 劑型改造研究 質(zhì)量標準和穩(wěn)定性研究 安全性評價研究 給藥方案研究 臨床藥理學和藥效學研究 毒理學研究等。 第37頁，共95頁。 將中藥或復方中藥開發(fā)成高效、優(yōu)質(zhì)的現(xiàn)代中藥產(chǎn)品，在制劑工藝水平和質(zhì)量標準上超過現(xiàn)有同類產(chǎn)品水平，力爭達到進入國際醫(yī)藥主流市場的要求。第38頁，共95頁。五、中藥現(xiàn)代化研究的開發(fā)途徑 和方法 目前,中藥開發(fā)研究基本上有兩條途徑： 一是從單味中藥或植物中提取有效成分（單體化合物）或提取物（有效部位）開發(fā)成新藥。前者是提取有效單體，或再經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾，制成一系列的藥物。 二是中藥復方制劑的二次開發(fā)研究，這是中醫(yī)藥發(fā)展的主流。第39頁，共95頁。中藥開發(fā)療

18、效的疑惑1千多種常用中藥材1萬多種中成藥20多萬個方劑合理的療效評價安全性的疑惑是否有過長期安全性的追蹤長期安全性評價有效成分的疑惑化學成分研究是否與藥效結(jié)合？是否與中藥藥效結(jié)合？中藥藥效相結(jié)合的有效成分研究體內(nèi)過程的問題天然產(chǎn)物體內(nèi)順應性，代謝快，大分子、高極性成分難吸收藥代動力學研究代謝產(chǎn)物的活性研究多成分、多靶點作用的疑惑如何去證實？方法學的思考質(zhì)量控制的疑惑質(zhì)控的意義如何建立有效的質(zhì)量控制方法和體系發(fā)現(xiàn)新藥的疑惑直接來源于天然產(chǎn)物的單體化合物有多少結(jié)構(gòu)改造與構(gòu)效關(guān)系研究系統(tǒng)研究？第40頁，共95頁。中藥、天然藥物活性成分研究基于天然資源的藥物先導化合物或新藥的發(fā)現(xiàn)：中藥、天然藥物中藥化

19、學成分及其生物活性的闡明：第41頁，共95頁。中藥天然藥物活性篩選活性提取物TLC或HPLC分析化合物分離與結(jié)構(gòu)鑒定衍生物合成與結(jié)構(gòu)溝通活性篩選活性化合物動物試驗作用機理研究系列化合物NMR規(guī)律研究MS規(guī)律研究中藥或著名植物藥定量分析指紋圖譜研究DAD、LC-MS分析DAD、ELSD、CAD比較分析高含量化合物HSCCC藥代動力學體內(nèi)代謝研究單味中藥、天然藥物研究思路第42頁，共95頁。 中藥復雜體系的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機理研究思路單味中藥中藥復方化學成分研究LC-DAD-MS分析構(gòu)建化學組分庫拆方試驗模型動物藥理學試驗基因組學蛋白組學含藥血清體外活性試驗基因組學蛋白組學藥代動力學藥效試驗機理研究

20、LC-DAD-MS分析構(gòu)建化學組分庫活性評價闡明化學組學與基因組學、蛋白組學的關(guān)系闡明中藥復雜體系的物質(zhì)基礎(chǔ)、藥理作用、作用機理闡明藥理作用、作用機理第43頁，共95頁。高效植物單體新藥感咳雙清膠囊 1. 傳統(tǒng)的植物提取物植物有效部位 植物中提取的一組成分的總稱，不是單一成分，并每種成分含量不確切。 （如：川琥寧、魚腥草等）. 植物內(nèi)提取化學結(jié)構(gòu)式明確，含量能準確測定，純度高的單一成分。 （如：黃連素、甘草甜素等）第44頁，共95頁。感咳雙清膠囊的成分高效植物單體新藥 主要成分：黃芩苷（植物單體成分,150mg/粒） 協(xié)同成分：穿心蓮內(nèi)酯（植物單體成分,37.5mg/粒）分子式為C20H30O

21、5分子量為350.457-葡糖醛酸，5，6-二羥基黃酮分子式是C21H18O11分子量為446第45頁，共95頁。感咳雙清膠囊的成分特點與西藥相比1、不同點：天然植物中提取。2、相同點：同樣是量化了的成分，并且有明確的化學結(jié)構(gòu)式。與傳統(tǒng)中成藥相比1、不同點：成分量化，化學結(jié)構(gòu)式明確，成分藥代動力學研究充分，作用機制清楚。2、相同點：原料為天然植物藥。高效植物單體新藥第46頁，共95頁。 目前，國內(nèi)外對中藥復方化學成分的研究，主要是對中藥復方進行藥味的拆分研究，證明其配伍的合理性。 或采用總提取物和分提取物，或測定中藥復方中的幾個化學成分的粗略做法，較少開展藥效學與化學成分相結(jié)合的研究。 根本問

22、題在于中藥復方無法說明其藥效的整體性和成分的復雜性。二是中藥復方制劑的二次開發(fā)研究第47頁，共95頁。 中藥復方是一個復雜體系，起療效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，應是廣義的化學成分，包括無機物、小分子有機化合物（如揮發(fā)油、生物堿、黃酮、皂苷、有機酸等）及生物大分子（如肽、蛋白、糖肽、多糖等）三大類。 中藥復方依賴這些化學成分，起到有主次的多靶點、有機的整體協(xié)同的治療效果。第48頁，共95頁。 開展有中藥復方物質(zhì)基礎(chǔ)和藥效、作用機理相關(guān)性研究，應采用“一個結(jié)合、二個基本講清、三個化學層次、四個藥理水平”這樣一整套研究體系和引進現(xiàn)代化學、分子生物學、信息科學等先進的技術(shù)來解決相應的方法學問題。 要科學闡明中藥

23、復方的療效，必須堅持化學成分研究和藥理學研究相結(jié)合。第49頁，共95頁。 離開藥效學指導的化學成分研究將變成為單純的學術(shù)研究，而缺乏化學成分研究的藥理學研究也只能是不知其因、重復性差的低水平研究。 實現(xiàn)二者的結(jié)合，就能做到基本講清中藥復方的化學成分，基本講清中藥復方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機制。 第50頁，共95頁。 中藥復方少則四、五味，多則十幾味中藥材，化學成分少則幾十種，多則上百種。 單味藥材的化學成分尚在不斷增加，何況全部說清中藥復方中全部化學成分根本是不可能。 第51頁，共95頁。 結(jié)合藥理學研究找出起藥效作用的那些有效化學部位、有效化學成分，即可基本講清中藥復方的化學成分。 結(jié)合化學成

24、分研究從藥效和作用機理方面就可說明各有效化學部位和有效化學成分所起的有主次的多靶點、有機整體協(xié)同的治療效果。第52頁，共95頁。 闡明中藥復方的復雜性和整體性，有必要在藥物（藥材、復方）、有效部位和有效成分三個化學層次上進行高效、現(xiàn)代的分離、分析及鑒定研究。 并結(jié)合整體動物試驗、組織器官、細胞亞細胞及分子生物學四個藥理學水平上的藥效和作用機理研究。 研究“君臣佐使”各有效部位和“君臣佐使”各有效成分，闡明中藥復方配伍理論的化學物質(zhì)基礎(chǔ)（藥效物質(zhì)基礎(chǔ)）。第53頁，共95頁。 確定各有效部位的藥效作用之后，再將有效部位分離成各個單一的化學成分，進行第三層次的研究。 從某有效部位分離所得各化學成分，

25、結(jié)合該部位的藥理作用，再次開展四個藥理水平的藥效、作用機理研究。 確定各個成分所起的作用及相互配伍的規(guī)律、協(xié)同作用等，即確定出“君臣佐使”有效成分。第54頁，共95頁。 中藥復方化學成分的研究，從藥味、有效部位、有效成分三個化學層次上進行綜合研究，是一條較現(xiàn)實的基本講清化學成分和藥效、作用機制的研究之路。 在此基礎(chǔ)上，進行適當簡化，確定出簡化的指紋圖譜和指標成分，又是最合理的中藥復方質(zhì)量控制方法。第55頁，共95頁。 實施這個研究體系，有效部位和有效成分的提取需要用到超臨界萃取、超濾、逆流色譜、雙水相萃取等現(xiàn)代技術(shù)。 特別是滿足藥理試驗所需的大量樣品時，要借助現(xiàn)代化學工程學進行制備分離。分離與

26、分析科學中的新方法、新技術(shù)，如現(xiàn)代各種色譜及波譜技術(shù)。第56頁，共95頁。六、中藥有效成分研究和質(zhì)量評價 強化中藥質(zhì)量監(jiān)督，加強中藥質(zhì)量標準化、規(guī)范化管理，建立一整套科學規(guī)范的中藥質(zhì)量保證體系是中藥走出國門的關(guān)鍵。 科學技術(shù)研究手段的局限性 中藥（尤其是中藥復方）有效成分的復雜性 中醫(yī)藥理論的特殊性 目前，中藥材生產(chǎn)、藥效研究、安全評價、臨床試驗等方面，還沒有形成一個國際共同認可、使用的標準規(guī)范。第57頁，共95頁。 而今，新技術(shù)新方法特別是高效液相色譜/毛細管電泳-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC/CE-MS/MS）可對其十幾種乃至幾十種化學成分進行指紋圖譜分離鑒定，再從指紋圖譜中選擇四、五種有效成

27、分（特征成分）進行定量分析。 借助于計算機在中藥質(zhì)量評價中的應用與數(shù)學的應用相結(jié)合的手段，制訂出符合現(xiàn)代要求的、科學的、規(guī)范的、為國際市場所接受、認可的質(zhì)量標準。第58頁，共95頁。 總之，采用各種現(xiàn)代技術(shù)，進行中藥復方化學體系研究，明確中藥復方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)將是解決中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵問題。是開拓具有創(chuàng)新藥物的新思路、新途徑和新方法。 種種信息表明，中藥現(xiàn)代化研究已迫在眉睫，而中藥工業(yè)生產(chǎn)現(xiàn)代化正是中藥現(xiàn)代化研究的基礎(chǔ)。 張?zhí)m桐，等:中藥現(xiàn)代化研究與發(fā)展戰(zhàn)略(綜述),河北醫(yī)科大學學報, 2000；21（4）：253第59頁，共95頁。隨著中藥現(xiàn)代化研究的進程，中藥材、中成藥（現(xiàn)階段主要是中藥注射劑

28、）質(zhì)量已成為制約整個發(fā)展戰(zhàn)略的首要問題，中藥質(zhì)量的可控性問題制約著整個中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，制約著中藥以藥品名義進入國際市場的步伐。七、中藥指紋圖譜研究技術(shù)第60頁，共95頁。 目前，隨著世界環(huán)保意識的增強，近年來涌現(xiàn)的回歸自然的熱潮，人們對“綠色中藥材”（無污染中藥材）的需求越來越大。 由于長期過度開采天然藥材，造成野生資源已近枯竭，稀有藥材缺乏，如何尋找替代品及稀有藥材的引種問題已迫在眉睫。 中藥指紋圖譜將成為研究道地藥材、稀有藥材替代品，以及原藥材真?zhèn)舞b別的依據(jù)。 第61頁，共95頁。 指紋圖譜技術(shù)是在現(xiàn)有的技術(shù)條件下對中藥材、中成藥進行質(zhì)量控制最好的解決辦法。 指紋圖譜能提供從原藥材的栽培、

29、引種，中成藥生產(chǎn)過程中生產(chǎn)工藝的規(guī)范與優(yōu)化，到產(chǎn)品質(zhì)量標準的制訂提供全方位的質(zhì)量保證。 第62頁，共95頁。 目前已被美國、歐洲、印度、日本等國家廣泛應用，并被多個國家的藥典所承認。 各種能真正反映中藥材、中成藥內(nèi)在質(zhì)量的指紋圖譜的建立，是實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵，是研制開發(fā)“安全、有效、穩(wěn)定、可控”現(xiàn)代中藥的必要手段。第63頁，共95頁。中藥注射劑(已生產(chǎn)品種）指紋圖譜研究的技術(shù)要求 為了加強中藥注射劑的質(zhì)量管理，確保中藥注射劑的質(zhì)量穩(wěn)定、可控，中藥注射劑在固定中藥材品種、部位、產(chǎn)地、采收期以及加工工藝的前提下，需制定中藥材、有效部位或中間體、注射劑的指紋圖譜。第64頁，共95頁。五固定固定中藥

30、材品種、部位、產(chǎn)地、采收期以及加工工藝三種指紋圖譜制定中藥材、有效部位或中間體、注射劑的指紋圖譜第65頁，共95頁。主要內(nèi)容 第一部分：中藥指紋圖譜研究技術(shù) 第二部分：中藥注射劑(已生產(chǎn)品種） 指紋圖譜研究的技術(shù)要求 第三部分：中藥注射劑色譜指紋圖譜 實驗研究技術(shù)指南 第四部分：指紋圖譜研究示例第66頁，共95頁。一、中藥指紋圖譜的定義及基本屬性 1. 指紋圖譜的定義 2. 兩個基本屬性 3. 指紋圖譜研究的兩個目的 4. 中藥指紋圖譜建立的意義與原則二、中藥指紋圖譜的研究方法 1. 常用指紋圖譜研究的方法與技術(shù) 2. 液相色譜法指紋圖譜研究的要求三、中藥指紋圖譜研究的關(guān)鍵問題第一部分第67頁

31、，共95頁。 一、中藥指紋圖譜的定義及基本屬性 1. 指紋圖譜的定義 是指中藥材或中成藥，經(jīng)適當處理后，采取一定的分析手段，得到能夠標定該中藥材、中成藥特性的共有峰的圖譜。 運用現(xiàn)代分析技術(shù)對中藥化學信息以圖形（圖像）的方式進行表征并加以描述。 現(xiàn)代分析技術(shù)：光譜、波譜、色譜、核磁共振、X-射線衍射和各種聯(lián)用技術(shù)等。第68頁，共95頁。 2. 兩個基本屬性 兩個基本屬性，即整體性和模糊性。 所謂整體性：是指要把所得指紋圖譜作為一個整體進行考察，而不是孤立地看其中單個峰的有無，高低來判斷藥材或成藥的質(zhì)量； 所謂模糊性：是指個體樣品本身就存在著差異，難以精確的進行測量，絕大多數(shù)的指紋圖譜本身也存在

32、著模糊性。第69頁，共95頁。 不能保證在所得的指紋圖譜中每一個峰都沒有重疊，而且也不能保證所得的圖譜包含了樣品的所有特征，況且在不同的實驗條件下所得的圖譜可能會有較大的差異。 但是，只要能圈定圖譜中關(guān)鍵部分，就可對樣品進行質(zhì)量控制。 第70頁，共95頁。 3. 指紋圖譜研究的兩個目的 (1) 對中藥質(zhì)量控制的補充和提高 理想的指紋圖譜不僅能達到定性鑒別（因大部分色譜峰可達基線分離），也可進行定量分析。 (2) 控制中間體、成品的一致性，減少批間差異 中藥生產(chǎn)的原藥材，因土壤、氣候等環(huán)境因素及采收加工的不同，實際使用時不能保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定，經(jīng)加工提取得到的中間體，每個批次在成分含量、成分組成

33、及各成分含量比例方面都不能保持一致。第71頁，共95頁。 4. 中藥指紋圖譜建立的意義與原則 中藥指紋圖譜的建立，應以系統(tǒng)的化學成分研究和藥理學研究為依托，應體現(xiàn)系統(tǒng)性、特征性、重現(xiàn)性三個基本原則。 系統(tǒng)性:是指指紋圖譜所反映的化學成分應包括中藥所含大部分的種類，或指標成分的全部。 如中藥人參中所含的有效成分多為皂苷類化合物，則其指紋圖譜應盡可能多地反映其中的皂苷成分； 銀杏葉的有效成分是黃酮和銀杏內(nèi)酯類，則其指紋圖譜可采用兩種方法針對這兩類成分，分別分析，以達到系統(tǒng)、全面的目的。第72頁，共95頁。特征性：是指指紋圖譜中反映的化學信息（表現(xiàn)為保留時間或位移值）具有高度的選擇性，能特征地區(qū)分中

34、藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣，成為中藥自身的“化學條碼”。重現(xiàn)性：是指建立的指紋圖譜，在規(guī)定的方法和條件下，不同的操作者、不同的實驗室應能作出相同結(jié)果，其誤差應在允許的范圍內(nèi)，這樣才能保證指紋圖譜的通用性和實用性。第73頁，共95頁。河北道地藥材指紋圖譜研究示例河北省自然基金課題我省主要的道地藥材有黃芩、知母、北柴胡及酸棗仁等，尤以熱河黃芩、西陵知母最為有名，且黃芩、知母乃我國常用的大宗中藥材。但因藥材產(chǎn)區(qū)不同，其化學成分的積累不同，藥性和藥效也有差別。第74頁，共95頁。西陵知母 熱河黃芩 第75頁，共95頁。不同產(chǎn)地黃芩藥材指紋圖譜研究 1. 樣品采集樣品號樣品來源樣品號樣品來源 1河北承德（熱河） 7

35、吉林 2山西北部野生 8河北易縣野生 3山西北部家種 9中國藥品生物制品 檢定所 4四川雅安 10河北安國家種 5甘肅 11河北易縣家種 6內(nèi)蒙古 第76頁，共95頁。 2 . 色譜條件色譜柱為DiamonsilTM C18柱（250mm4.6mm，5m）；乙腈-0.25%磷酸-四氫呋喃為流動相進行梯度洗脫，檢測波長274nm，流速1ml/min，柱溫30C，進樣量10l，理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應不低于10萬，分離度大于1。梯度洗脫時間程序見表 1。第77頁，共95頁。時間（min）流動相組成（%）乙腈0.25%磷酸四氫呋喃02178114217811728711253168145396016

36、03960165306917021781表1 指紋圖譜梯度洗脫時間程序第78頁，共95頁。S0102040306050min020604080120100mAU圖1 熱河黃芩指紋圖譜第79頁，共95頁。0100200600300500400700mAU02030405060min7010圖2 不同產(chǎn)地黃芩藥材指紋圖譜第80頁，共95頁。其它指紋圖譜示例第81頁，共95頁。S030405010206070minABC圖1 銀杏葉藥材、注射劑中間體和注射液指紋圖譜A. 銀杏葉藥材 B. 注射劑中間體 C. 銀杏酮酯注射劑 S. 蘆丁峰第82頁，共95頁。圖2 10批銀杏酮酯注射液指紋圖譜第83頁，共95頁。圖3 銀杏酮酯注射液與金納多注射液指紋圖譜 A. 銀杏酮酯注射液 B. 金納多注射液 S. 蘆丁峰 第84頁，共95頁。030405010206070minSAB 圖4 銀杏酮酯注射液與舒血寧注射液指紋圖譜A. 銀杏酮酯注射液 B. 舒血寧注射液 S. 蘆丁峰第85頁，共95頁。烏藥乙醚部分HPLC-DAD圖譜第86頁，共95頁。三七藥材指紋圖譜相似度