臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)及體內(nèi)藥物分析

1、臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)名解部分（5 *10）1、臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)：應(yīng)用藥物代謝動(dòng)力學(xué)的基本原理，研究人體對(duì)藥物的作用，理解 藥物及其制劑在人體內(nèi)的ADME規(guī)律，闡明內(nèi)部因素、外部因素與藥效之間相互關(guān)系。它 的研究和發(fā)展對(duì)藥物評(píng)價(jià)，新藥設(shè)計(jì)，藥物劑型改進(jìn)，指導(dǎo)臨床安全、有效和合理用藥，實(shí) 現(xiàn)臨床優(yōu)化給藥方案和設(shè)計(jì)個(gè)體化給藥方案，具有重大的實(shí)用價(jià)值。2、血腦屏障：將腦和血液循環(huán)分開的屏障，它是機(jī)體防止外源性化合物進(jìn)入腦內(nèi)的自身防 護(hù)機(jī)制。血腦屏障的解剖學(xué)基礎(chǔ)是將腦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接，從而形成物理學(xué)屏障。 它可以阻止水溶性、大分子藥物通過。親脂性藥物能夠橫跨毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)被動(dòng)擴(kuò)散方 式進(jìn)入血

2、腦屏障。3、胎盤屏障：存在于母體循環(huán)系統(tǒng)和胎兒循環(huán)系統(tǒng)之間，是母體和胎兒之間控制內(nèi)外物質(zhì) 流通的結(jié)構(gòu)，也是要藥物母體進(jìn)入胎兒的流通結(jié)構(gòu)。胎盤屏障有類似于血腦屏障的性質(zhì)，非 離子型的、脂溶性高的藥物易于通過，而脂溶性低得、易離解的藥物則較難通過，與血清蛋 白結(jié)合的藥物也易于通過屏障，進(jìn)入胎兒。4、固定效應(yīng)因素：也稱為相關(guān)因素，這類因素相對(duì)穩(wěn)定，容易測定，包括生理、病理因素， 以及實(shí)驗(yàn)實(shí)施的季節(jié)和人員、單位等。固定效應(yīng)因素分為兩類：一類為非連續(xù)變化因素，如 性別、種族、實(shí)驗(yàn)場所等，多以數(shù)字代表狀態(tài)；另一類為連續(xù)變化因素，如體重、身高、某 些病理生理指標(biāo)等。5、隨機(jī)效應(yīng)因素：是一類較難以預(yù)知，但服從

3、某種分布的因素。如一些未知的病生理狀態(tài)， 無法解釋的個(gè)體間差異，不易察覺的環(huán)境變化，無法避免的測量誤差等均可歸為隨機(jī)效應(yīng)的 影響。6、藥物相互作用：指幾種藥物同時(shí)或前后序貫應(yīng)用時(shí)藥物原有的理化性質(zhì)、機(jī)體對(duì)藥物的 作用或藥物對(duì)機(jī)體的作用發(fā)生改變。根據(jù)藥物相互作用的臨床結(jié)果，可以將其分為有益相互 作用與不良相互作用。有益相互作用可以被臨床積極利用，以提高療效、降低不良反應(yīng)和藥 物治療費(fèi)用。不良相互作用可導(dǎo)致療效降低或毒性增加。7、替代作用：一種藥物造成另一種藥物與血漿蛋白結(jié)合下降稱為替代作用。產(chǎn)生替代作用 必須滿足兩個(gè)條件：A.在沒有替代藥時(shí)，藥物的蛋白結(jié)合率要高；B.替代藥必須占據(jù)大多數(shù) 蛋白結(jié)

4、合位點(diǎn)。8、藥物代謝相互作用：兩種或兩種以上藥物在同時(shí)或前后序貫用藥時(shí)，在代謝環(huán)節(jié)發(fā)生相 互作用，結(jié)果是療效增強(qiáng)甚至產(chǎn)生不良反應(yīng)，或療效減弱甚至治療失敗。由于代謝是大多數(shù) 藥物藥動(dòng)學(xué)的重要環(huán)節(jié)，因此，藥物代謝相互作用具有重要的臨床作用。藥物代謝相互作用 分為酶抑制作用和酶誘導(dǎo)作用。9、促變藥：在藥物相互作用中，促使其他藥物作用改變的藥物。10、受變藥：在藥物相互作用中，被改變的藥物。11、競爭性抑制：抑制劑和底物對(duì)游離酶的結(jié)合有競爭作用，互相排斥，酶分子結(jié)合底物就 不能結(jié)合抑制劑，酶分子結(jié)合抑制劑就不能結(jié)合底物。其動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)：當(dāng)有抑制劑存在時(shí)， Km增大而Vm不變，Km/Vm也增大。表觀Km隨

5、抑制劑濃度的增加而增大。抑制程度與 抑制劑濃度成正比，而與底物濃度成反比。12、非競爭性抑制：底物和抑制劑與酶的結(jié)合完全的互不相關(guān)，既不排斥，也不促進(jìn)。其動(dòng) 力學(xué)特點(diǎn)：當(dāng)有抑制劑存在時(shí)，Km不變而Vm減小，Km/Vm增大。表觀Km隨抑制劑濃 度的增加而減小。抑制程度只與抑制劑濃度成正比，而與底物濃度成無關(guān)。13、反競爭性抑制：抑制劑不與游離酶結(jié)合，卻和酶-底物中間復(fù)合體結(jié)合，但酶-抑制劑- 底物不能釋放出產(chǎn)物。其動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)：當(dāng)有抑制劑存在時(shí)，Km和Vm都減小，而Km/Vm 不變。表觀Km和表觀Vm都隨抑制劑濃度的增加而減小。抑制程度既與抑制劑濃度成正比， 也與底物濃度成正比。14、遺傳藥理學(xué)：

6、研究藥物處置和反應(yīng)個(gè)體差異遺傳機(jī)制的一門新興學(xué)科。由制劑因素或機(jī) 體病理狀態(tài)引起的反應(yīng)異常不是遺傳藥理學(xué)的研究內(nèi)容。15、雙硫侖樣反應(yīng)：雙硫侖可阻止乙醛代謝，使血中乙醛蓄積而引起惡心嘔吐，顏面潮紅、 頭痛、腹痛、出汗、呼吸困難、低血壓及心動(dòng)過快。許多藥物都能抑制乙醛脫氫酶，使乙醇 得氧化代謝反應(yīng)受阻于乙醛階段，導(dǎo)致體內(nèi)乙醛蓄積，出現(xiàn)雙硫侖樣反應(yīng)。出現(xiàn)這樣的反應(yīng) 后繼續(xù)飲酒，即可發(fā)生嚴(yán)重乙醛中毒。16、治療窗(therapeutic window，TW)： 一般當(dāng)患者的血藥濃度低于最低有效濃度時(shí)，就無 法產(chǎn)生治療作用；而當(dāng)血藥濃度超出最大安全濃度時(shí)，藥物將呈現(xiàn)較大的毒副作用。在最低 有效濃度至最

7、大安全濃度區(qū)間的濃度范圍常被稱為該藥物的治療窗，也稱為治療濃度范圍。 在這個(gè)濃度范圍內(nèi)，人們所希望的臨床反應(yīng)概率相對(duì)較高，而毒性反應(yīng)的概率相對(duì)較低。17、時(shí)辰藥代動(dòng)力學(xué)：研究藥物及其代謝物在體內(nèi)過程中的節(jié)律性變化和機(jī)制的科學(xué)。是介 于時(shí)辰生物學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)之間的一種新的分支學(xué)科。時(shí)辰藥動(dòng)學(xué)主要研究藥物濃度-時(shí)間 規(guī)律及由此得出的各種藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。18、群體藥代動(dòng)力學(xué)：即藥物動(dòng)力學(xué)的群體分析法，是將經(jīng)典藥物動(dòng)力學(xué)基本原理和統(tǒng)計(jì)學(xué) 方法相結(jié)合，研究藥物體內(nèi)過程的群體規(guī)律的藥物動(dòng)力學(xué)分支學(xué)科。其主要優(yōu)勢體現(xiàn)在兩個(gè) 方面：分析變異能力；分析稀疏數(shù)據(jù)能力。19、生物等效性：指一種藥物的不同制劑在相同的

8、試驗(yàn)條件下，給以相同劑量，反映吸收程 度和速度的主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。20、藥學(xué)等效性：如果兩個(gè)制劑含等量的相同活性成分，具有相同的劑型，符合同樣的或可 比較的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，則可認(rèn)為是藥學(xué)等效的。21、治療等效性：如果兩個(gè)制劑含有相同活性成分，并具有臨床上顯示具有具有安全性和有 效性，可以認(rèn)為兩制劑具有治療等效性。22、基本相似藥物：如果兩個(gè)制劑具有等量且符合統(tǒng)一質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的藥物活性成分，具有相同 的劑型，并且經(jīng)過證明具有生物等效性，則可認(rèn)為兩個(gè)制劑是基本相似藥物。問答題部分（5*10）藥物吸收過程的相互作用？（P75）（一）直接理化作用：形成螯合物，吸附，滅活（二）間接作用：影響胃液PH

9、,影響胃腸蠕動(dòng)，誘導(dǎo)/抑制腸壁轉(zhuǎn)運(yùn)體。食物藥物相互作用（P109）食物對(duì)藥物吸收的影響：包括進(jìn)食和飲料對(duì)藥物吸收影響。食物可顯著減小某些藥物的 吸收，使C max下降，Tmax增大，且AUC和生物利用度下降；而對(duì)有些藥物，食物能顯 著增加其吸收，提高其生物利用度。食物對(duì)藥物代謝的影響：（1）食物中主要營養(yǎng)素對(duì)藥物代謝的影響：主要取決于飲食中的糖、蛋白質(zhì)、微量元素和維生素等營養(yǎng)成分。（2）烹調(diào)方法（3）特殊食物藥物兩大轉(zhuǎn)運(yùn)體系（藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白）（P118）（一）攝入轉(zhuǎn)運(yùn)體：有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽，有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體，有機(jī)陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)體。（二）外排系統(tǒng)：多藥耐藥蛋白，多藥耐藥相關(guān)蛋白，乳腺癌耐藥蛋白，膽鹽外

10、排泵。哺乳期用藥藥物的乳汁分泌（P138）（一）藥物的脂溶性。脂溶性高的藥物易透過生物膜進(jìn)入乳汁。（二）藥物分子大小。分子越小越容易倍生物膜轉(zhuǎn)運(yùn)。（三）藥物的蛋白結(jié)合率。乳母體內(nèi)游離藥物濃度越高，被動(dòng)擴(kuò)散越容易。（四）乳母體內(nèi)的藥物濃度。乳母服藥劑量越大，療程越長，體內(nèi)濃度越高，促進(jìn)藥物向乳 汁中轉(zhuǎn)運(yùn)。（五）血漿與乳汁的PH差。乳汁PH低于血漿，分子量小，弱堿性藥物在乳汁中的含量高。飲酒者的臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)（P142）（一）乙醇對(duì)藥物代謝的影響乙醇的藥酶誘導(dǎo)作用：乙醇慢性中毒者肝內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生，CYP2E1數(shù)量和活性增加，使 同時(shí)服用的藥物代謝加快，半衰期縮短，藥效降低。乙醇的藥酶抑制作用：短時(shí)

11、間內(nèi)大量飲酒，乙醇通過直接競爭性結(jié)合CYP2E1而產(chǎn)生 藥酶抑制作用；長期大量狂飲者形成脂肪肝或肝硬化，肝內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生脫粒現(xiàn)象，導(dǎo)致肝藥酶 含量下降。乙醇抑制非微粒體酶系。（二）乙醇影響藥物的清除乙醇可降低甲硝唑，四環(huán)素的消除，延長其在體內(nèi)的作用時(shí)間。肝臟功能異常時(shí)人體臨床藥物動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)（P146）CYP含量和活性降低2.肝清除率下降3.藥物與血漿蛋白結(jié)合率降低肝血流量減少5.首關(guān)效應(yīng)低血和生物利用度增加時(shí)辰藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究在臨床藥物治療方面的意義（P182）（一）有助于調(diào)整給藥時(shí)間，使之與疾病節(jié)律相適應(yīng)。（二）發(fā)現(xiàn)百余種藥物的體內(nèi)過程有節(jié)律性，為臨床合理用藥和設(shè)計(jì)給藥方案提出新問題和 方法，

12、也為新藥研究提出了新問題。（三）有助于探討合并用藥時(shí)合用藥物對(duì)主要藥物體內(nèi)過程的節(jié)律變化的影響。（四）有助于闡明藥物療效和毒性節(jié)律變化的可能機(jī)制。時(shí)辰藥物代謝動(dòng)力學(xué)的應(yīng)用（P184）（一）指導(dǎo)臨床合理用藥（二）指導(dǎo)藥物新劑型的開發(fā)TDM的藥物范圍（P192）基本條件：1）血藥濃度與藥效學(xué)之間有明確的量效關(guān)系2）臨床上缺少及時(shí)的，易觀察的，可量化的療效指標(biāo)。幾種情形：1）治療指數(shù)低的藥物2）在治療濃度范圍內(nèi)存在非線性藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征的藥物。3）藥物濃度個(gè)體差異大的藥物，如地高辛，他克莫司等。4）患者的某種病理狀況（如肝腎功能損傷，蛋白質(zhì)水平降低）導(dǎo)致體內(nèi)過程發(fā) 生顯著改變的藥物。5）需要長期使

13、用的藥物。6）合并用藥產(chǎn)生相互作用導(dǎo)致藥物代謝動(dòng)力學(xué)特征改變。7）懷疑藥物中毒。尤其是藥物中毒癥狀與劑量不足癥狀相似，臨床難以區(qū)分 的情況。新藥臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究的目的和內(nèi)容？ （P206）目的：在于闡明新藥在體內(nèi)的吸收，分布，代謝和排泄過程變化規(guī)律，研究成果成為臨 床上制定用藥方案和個(gè)體化給藥的科學(xué)依據(jù)。內(nèi)容（1）1期臨床階段，常以健康受試者為研究對(duì)象，研究單次給藥和多次給藥后的 藥物代謝動(dòng)力學(xué)行為以及飲食對(duì)口服藥物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)影響，意義在于闡明藥物在人體 的吸收，分布，代謝和排泄動(dòng)力學(xué)特征，以及飲食是否影響口服藥物吸收行為。（2）ii期和m期臨床階段，是以特殊人群為研究對(duì)象進(jìn)行藥物

14、代謝動(dòng)力學(xué)研究。 如老年或兒童患者，肝腎受損患者，為他們的合理用藥提供依據(jù)。臨床試驗(yàn)應(yīng)遵循臨床試驗(yàn)規(guī)范，目的在于（1）確保受試者的隱私和權(quán)益不受損害。（2） 確保研究結(jié)果精確可信。生物利用度及生物等效性試驗(yàn)原則和方法？ （P219）受試者的選擇。除常用男性外，其他與臨床藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究要求相同.特殊情況用女 性受試者（用于女性藥物）和患者受試者（抗腫瘤藥物）。受試者的例數(shù)。一般制劑要求18-24例，個(gè)體差異大的藥物增加受試者例數(shù)。參比制劑的選擇。絕對(duì)生物利用度研究時(shí)，選靜脈注射為參比制劑。相對(duì)生物利用度研 究時(shí)，首選已上市的相同劑型的制劑或原創(chuàng)藥為參比制劑。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。（1）受試者分組。通常采

15、用雙交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以消除試驗(yàn)周期的影響。（2）取樣點(diǎn)的設(shè)計(jì)。一般在吸收相和平衡相各有2-3個(gè)取樣點(diǎn)，消除相有4-5個(gè)取樣點(diǎn)。（3）服藥劑量確定。服藥劑量應(yīng)于臨床常用量一致。（4）研究方法。受試者禁食過夜，次日早上空腹服用受試制劑和參比制劑。（5）臨床觀察。受試者服藥后至少在觀察室停留一段時(shí)間，并在醫(yī)生監(jiān)護(hù)之下，隨時(shí)觀 察記錄受試者的耐藥性和藥物不良反應(yīng)情況。（6）醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。數(shù)據(jù)分析。（1）藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)求算。用鉅量法（2）生物利用度比較方法。絕對(duì)生物利用度，相對(duì)生物利用度，利用尿藥濃度數(shù)據(jù)，代 謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)，多劑量研究。體內(nèi)藥物分析填空題常見的生物樣品有血液，尿液，唾液，組織，頭發(fā)

16、。最常用的樣本為血漿和血清，其中選 用最多的為血漿。最常用的抗凝劑：肝素組織處理的一般方法：勻漿化法、沉淀蛋白法、酸水解或堿水解、酶水解微量元素在前額部位的頭發(fā)中含量最低，枕部含量最高。為獲得較好的準(zhǔn)確度，應(yīng)以枕部 取樣。毛發(fā)中藥物的提取法：直接用甲醇提取、酸水解、堿水解、酶水解。兩種最重要的內(nèi)源性物質(zhì)：葡萄糖醛酸、硫酸 去除蛋白質(zhì)方法：（1）加入與水相混溶的有機(jī)溶劑（2）加入中性鹽（3）加入強(qiáng)酸（4）加入含鋅鹽及銅鹽的沉淀劑（5）超濾法 （6）酶水解法（7）加熱法生物樣品分離純化常用：液-液萃取法，固相萃取法。綴合物的水解方法：酸水解，堿水解，溶劑解。在線生物樣品制備方法：柱切換高效液相色譜

17、法，限制進(jìn)入固定相與HPLC儀器聯(lián)用的 在線固定相萃取技術(shù)，微誘析技術(shù)與HPLC、HPCE、GC、MS的聯(lián)用平衡后血漿中藥物總濃度（Ct）分為兩部分：與血漿蛋白結(jié)合的藥物濃度（Cb）；游離藥 物濃度（Cf）。Cb /Cf的百分比即為藥物的血漿蛋白結(jié)合率，大于90%的藥物為高蛋白結(jié)合 率，小于20%者，則與血漿蛋白結(jié)合率很低。體內(nèi)藥物分析穩(wěn)定性包括:方法穩(wěn)定性，生物樣品穩(wěn)定性名詞解釋萃取回收率：從生物樣本基質(zhì)中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的響應(yīng)值的百 分比。特異性：在樣品中存在干擾組分的情況下，分析方法能準(zhǔn)確專一地測定分析物的能力。限進(jìn)填料（RAM）在色譜填料的疏水層上覆蓋一層親水層，親

18、水層允許小分子物質(zhì) 如藥物自由出入于固定相的疏水層，而大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)不能滲透進(jìn)入疏水層，限制其與 固定相的疏水層發(fā)生相互作用。精密度：在確定的分析條件下，相同介質(zhì)中相同濃度樣品的一系列測量值的分散程度。穩(wěn)定性：一種分析物在確定條件下，一定時(shí)間內(nèi)在給定介質(zhì)中的化學(xué)穩(wěn)定性。標(biāo)準(zhǔn)曲線：試驗(yàn)響應(yīng)值與分析濃度間的關(guān)系。7、介（基）質(zhì)效應(yīng)：用于藥品中存在干擾物質(zhì)，對(duì)響應(yīng)造成的直接或間接影響。8、標(biāo)準(zhǔn)樣品：在空白生物介質(zhì)中加入已知量分析物配制的樣品，用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算 質(zhì)控樣品和未知樣品中分析物的濃度。9、質(zhì)控樣品：在空白生物介質(zhì)中加入已知量分析物配制的樣品，用于監(jiān)測生物分析方法的 重復(fù)性和評(píng)價(jià)每一

19、分析批中未知樣品分析結(jié)果的正確性。10、生物利用度：藥物吸收進(jìn)入體循環(huán)的速度和程度。11、綴合物：藥物或其代謝物與體內(nèi)的內(nèi)源性物質(zhì)結(jié)合生成的產(chǎn)物稱為綴合物12、柱切換HPLC技術(shù)：指那些能夠由閥來改變流動(dòng)相走向和流動(dòng)相系統(tǒng)，從而使洗脫液 在特定時(shí)間內(nèi)從預(yù)處理柱進(jìn)入分析柱的技術(shù)。13、生物介質(zhì)：一種生物來源物質(zhì)，能夠以可重復(fù)的方式采集和處理。例如全血、血漿、 血清、各種組織等。14、分析批：包括待測樣品、適當(dāng)數(shù)目的標(biāo)準(zhǔn)樣品和質(zhì)控樣品的完整系列。一天內(nèi)可以完 成幾個(gè)分析批，一個(gè)分析批也可以持續(xù)幾天完成。15、手性藥物：當(dāng)藥物分子結(jié)構(gòu)中某個(gè)碳原子上連接的4個(gè)原子或基團(tuán)互不相同時(shí)，該原 子就稱為手性中

20、心或不對(duì)稱中心或手性碳原子。相應(yīng)的藥物則稱為手性藥物。問答題體內(nèi)藥物分析的任務(wù)（P3）進(jìn)行分析方法學(xué)研究，提供最佳分析條件；評(píng)定各種分析方法的靈敏度、專屬性和準(zhǔn)確度； 探討各種方法應(yīng)用于體內(nèi)藥物分析的規(guī)律性問題。為藥物體內(nèi)研究提供數(shù)據(jù)為臨床治療藥物監(jiān)測提供準(zhǔn)確的血藥濃度測定值，并對(duì)血藥濃度進(jìn)行具體分析和合理解 釋，提供藥學(xué)情報(bào)和信息，參與指導(dǎo)臨床科學(xué)用藥、確定最佳劑量、制定藥物治療方案。內(nèi)源性物質(zhì)的測定與研究濫用藥物的檢測體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)（P5）干擾物多樣品量一般較少，且多數(shù)在特點(diǎn)條件下采集，不易重新獲得。由于藥物濃度較低，對(duì)分析方法的靈敏度及專屬性要求較高。有時(shí)由于被監(jiān)測藥物濃度較低，需要

21、測定其綴合物及其代謝產(chǎn)物。藥物濃度監(jiān)測的分析方法，要求簡便、快速，以便迅速為臨床用藥及中毒解救提供數(shù)據(jù)和 情報(bào)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)擁有可以進(jìn)行復(fù)雜樣品分析的設(shè)備。工作量大，測定數(shù)據(jù)的處理和結(jié)果的闡明有時(shí)不太容易。生物樣品預(yù)處理的目的？ （P17）（1）使藥物從綴合物及結(jié)合物中釋放出來，以測定藥物的總濃度。（2）生物樣品介質(zhì)組成復(fù)雜，干擾多，而藥物組分是微量的，必須先經(jīng)預(yù)處理，使純化富 集。（3）為了適應(yīng)和符合測定方法的靈敏度。（4）為了防止分析儀器被污染劣化，提高靈敏度，準(zhǔn)確度，精密度，選擇性。生物樣品預(yù)處理應(yīng)考慮的問題？（P18）（1）藥物的理化性質(zhì)和存在形式。（2）待測藥物的濃度范圍（3）藥物測定的

22、目的（4）選用的生物樣品類型（5 ）樣品預(yù)處理與分析技術(shù)的關(guān)系離線生物樣品制備方法（P19）經(jīng)有機(jī)破壞的方法五.1.濕法破壞2.干法破壞3.氧瓶燃燒法去除蛋白質(zhì)1.加入與水相相混溶的有機(jī)溶劑5.加入含鋅鹽或銅鹽的沉淀劑分離、純化與濃集1.液-液萃取綴合物的水解 1.酸水解法2.加入中性鹽6.酶水解法2.固相萃取2.酶水解法3.加入強(qiáng)酸7.加熱法4.超濾法六.七.化學(xué)衍生法（三）硅烷化 2.酰化 3.烷基化化7.生成非對(duì)映異構(gòu)體衍生化液-液萃取法的優(yōu)缺點(diǎn)（P24）優(yōu)點(diǎn)：1.通過萃取可將被測組分自大量內(nèi)源性物質(zhì)中分離出來，減少雜質(zhì)對(duì)測定的干擾。2. 操作簡單快速、經(jīng)濟(jì)實(shí)用3.可將萃取液蒸發(fā)，使組分

23、富集。4.可一次進(jìn)行多個(gè)樣品的萃取 缺點(diǎn)：1.易產(chǎn)生乳化現(xiàn)象2.有機(jī)溶劑易揮發(fā)、有毒性、污染環(huán)境及不能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。補(bǔ)充：消除乳化現(xiàn)象的方法：1.在萃取前于水相中加入適量固體Nacl,可減輕乳化程度2. 發(fā)生輕微乳化時(shí)，可經(jīng)適當(dāng)轉(zhuǎn)速離心，使水相和有機(jī)相完全分開3.發(fā)生嚴(yán)重乳化時(shí)，可置 低溫冰箱中使水相快速凍凝，破壞乳化層，再融化后離心。固相萃取法優(yōu)缺點(diǎn)（P28）優(yōu)點(diǎn)：1.引入雜質(zhì)少2.完全避免乳化的形成3.在優(yōu)化條件下有較高的萃取率，重現(xiàn)性也較 好4.可以用較少量的樣品5.柱子為可棄性柱，無污染5.使用的溶劑大多可與水混合，易于 自動(dòng)化。缺點(diǎn)：1.價(jià)格昂貴2.技術(shù)要求高3.批與批之間有差異4.柱子易阻塞，影響分離效果，樣品 需經(jīng)預(yù)處理。GC法化學(xué)衍生化法的目的及主要的衍生化法（P30）目的：1.使極性藥物變成非極性的，易于揮發(fā)的藥物，使具有能被分離的性質(zhì)2.增加藥物的 穩(wěn)定性3.提高對(duì)光學(xué)異構(gòu)體的分離能力方法：1.烷基化2.醛基化3.硅烷化4.生成非對(duì)映異構(gòu)體衍生化法柱前衍生化法和柱后衍生化法的概念及其優(yōu)缺點(diǎn)（詳見P32）4.紫外衍生化5.熒光衍生化6.電化學(xué)衍生液相色譜柱切換法的優(yōu)點(diǎn)？（P42）（1）含蛋白樣品可直接進(jìn)樣，在線凈化樣品，使預(yù)處理過程自動(dòng)化。（2）分析結(jié)果精密度高，分辨率和選擇性高，一般無需內(nèi)標(biāo)。（3）適于不穩(wěn)定樣品，全部過程在