免疫學(xué)技術(shù)原理

1、關(guān)于免疫學(xué)技術(shù)原理第一張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（一）抗原抗體反應(yīng)的原理 抗原抗體反應(yīng):指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。 抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補(bǔ)結(jié)合 抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合 抗原抗體之間的結(jié)合力 親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體 物質(zhì)基礎(chǔ):第二張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月體內(nèi)：表現(xiàn)為溶菌、殺菌、促進(jìn)吞噬或中和毒素或引起免疫病理的損傷體外：凝集、沉淀、細(xì)胞溶解和補(bǔ)體結(jié)合等反應(yīng)第三張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)特異性 可逆性比例性 階段性第四張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月特異性：抗原與抗體結(jié)合反

2、應(yīng)的專一性抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性（1）特異性第五張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)交叉反應(yīng)（cross reactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖Ag B第六張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2)可逆性可逆性：抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性 影響因素： 抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親合力親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離 環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響pH、離子強(qiáng)度 第七張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月前帶(p

3、rezone)：抗體過(guò)量后帶(postzone)：抗原過(guò)量等價(jià)帶(equivalence zone)： 抗原抗體比例合適 抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖比例性：抗原與抗體發(fā)生可見(jiàn)反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系(3)比例性第八張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見(jiàn) 第二階段：反應(yīng)可見(jiàn)階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、 沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象 (4)階段性第九張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月A.抗原、抗體反應(yīng)物的自身因素環(huán)境因素（三） 影響抗原抗體反應(yīng)的因素抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目抗體:來(lái)源、特異性、親和性、效價(jià)第十張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月B.

4、環(huán)境因素電解質(zhì): 生理鹽水或緩沖液酸堿度: pH6pH9溫 度: 1540，37最適第十一張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷凝集反應(yīng)直接凝集試驗(yàn)觀察凝集現(xiàn)象間接凝集試驗(yàn)同上抗球蛋白試驗(yàn)同上沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀，檢測(cè)濁度免疫電泳技術(shù)觀察掃描沉淀峰、沉淀弧補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)觀察測(cè)定溶血現(xiàn)象補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)同上(四）免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的類型第十二張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷中和反應(yīng)病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)病毒感染性毒素中和試驗(yàn)檢測(cè)外毒素毒性標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色發(fā)光免

5、疫技術(shù)檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度金免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀第十三張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月按實(shí)際用途分為:e免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry techniqu,IHCT)免疫測(cè)定(immunoassay)標(biāo)記免疫技術(shù)：用熒光物質(zhì)、放射性核素、酶或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等標(biāo)記抗原或抗體，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)后，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物對(duì)抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量分析第十四張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月按測(cè)定反應(yīng)體系的物理狀態(tài)分為: 均相免疫測(cè)定(homogenous immunoassay）非均相免疫測(cè)定(heterogenous immunoassay) 按檢測(cè)現(xiàn)象分為: 放

6、射免疫技術(shù) 熒光免疫技術(shù)酶免疫技術(shù) 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)金免疫技術(shù)第十五張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1什么是抗原抗體反應(yīng)？ 抗原抗體反應(yīng)的原理是什么？ 2.抗原抗體反應(yīng)有哪些特點(diǎn)？ 3.如何理解抗原抗體反應(yīng)的特異性？4什么是抗原抗體反應(yīng)的可逆性？有何應(yīng)用？5抗原抗體反應(yīng)體系中為何要確定抗原、抗體的最適比例？ 6抗原抗體反應(yīng)有哪些影響因素？7基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)有哪些？思考題第十六張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月小結(jié) 抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。 抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)是特異性、可逆性、比例性和階段性。 第十七張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于

7、2022年6月 影響抗原抗體反應(yīng)的因素包括反應(yīng)物的自身因素和環(huán)境因素。免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫學(xué)技術(shù)有凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)、中和反應(yīng)和標(biāo)記免疫反應(yīng)五種類型。 第十八張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月抗原抗原排斥抗原抗體Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY 顆粒性抗原（細(xì)菌、紅細(xì)胞等）與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，稱為凝集反應(yīng)。第二節(jié) 凝集反應(yīng)第十九張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 分類直接凝集反應(yīng)- 顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。細(xì)胞性抗原：細(xì)菌和紅細(xì)胞第二十張，PPT

8、共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月凝集原(agglutinogen)：凝集反應(yīng)中的抗原。凝集素(agglutinin)：凝集參與反應(yīng)的抗體第二十一張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月顆粒性抗原凝集素 直接凝集反應(yīng)第二十二張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、玻片凝集反應(yīng): 已知抗原+未知抗體凝集團(tuán)塊 混濁?2、試管凝集反應(yīng)： 定量抗原+系列稀釋抗體不同程度的凝集反應(yīng)YES NO確定抗體的滴度第二十三張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。試管凝集試驗(yàn)第二十四張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二

9、十五張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鮮血者紅細(xì)胞受血者血清O型(抗A、抗B)A型(抗B)B型(抗A)AB型(無(wú))O型-A型+-+-B型+-AB型+- 注:“+”表示有凝集反應(yīng), “-”表示無(wú)凝集反應(yīng)第二十六張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月間接凝集反應(yīng)(indirect agglutination): 將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象.第二十七張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒 間接凝集試驗(yàn)示意圖第二十八張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 載體種類

10、及其處理方法紅細(xì)胞： 新鮮紅細(xì)胞吸附蛋白質(zhì)的能力差。一般先醛化后應(yīng)用。聚苯乙烯膠乳顆粒： 可物理吸附蛋白質(zhì)；常制備帶有化學(xué)活性基團(tuán)的顆粒第二十九張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1.正向間接凝集試驗(yàn)2.反向間接凝集試驗(yàn)3.間接凝集抑制試驗(yàn)間接凝集反應(yīng)的類型第三十張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月用抗原致敏載體-檢測(cè)抗體正向間接凝集試驗(yàn)第三十一張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月反向間接凝集試驗(yàn)用抗體致敏載體-檢測(cè)抗原第三十二張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月間接凝集抑制試驗(yàn)用抗原致敏載體-檢測(cè)抗原第三十三張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月間接血凝試驗(yàn)第三十四張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月間接乳膠凝集試驗(yàn)概念金黃色葡萄球菌協(xié)同凝集試驗(yàn)第三十五張，PPT共三十八頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用抗原的檢測(cè) 反向間接凝集試驗(yàn)可用于檢測(cè)病原體的可溶性抗原，也可用于檢測(cè)各種蛋白質(zhì)成分?？贵w的檢測(cè)檢測(cè)細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)等感染后產(chǎn)生的抗體。 第三十六張，PPT共