第五部分非特異性免疫功能測(cè)定一、中性粒細(xì)胞趨化功能

1、 第五部分 非特異性免疫功能測(cè)定一、中性粒細(xì)胞趨化功能： 瓊脂糖凝膠板法原理：中性粒細(xì)胞在瓊脂糖凝膠內(nèi)向有趨化因子存在的方向移動(dòng)，通過(guò)測(cè)定其移動(dòng)距離，判定中性粒細(xì)胞趨化功能。試劑：趨化因子（酵母多糖活化人血清），白細(xì)胞懸液，培養(yǎng)基（RPMI1640培養(yǎng)基），15.0g/L瓊脂糖。方法：1.制備瓊脂糖凝膠板；2.打孔；3,中央孔加白細(xì)胞懸液，左側(cè)孔加趨化因子，右測(cè)孔加陰性對(duì)照；4.孵育；5.固定、染色；6.鏡檢。12結(jié)果： A(白細(xì)胞向趨化因子孔移動(dòng)的距離) 趨化指數(shù) = B(白細(xì)胞向陰性對(duì)照孔移動(dòng)的距離)參考值：新生兒趨化指數(shù)為2.02.5，成人為3.0 3.5。臨床意義：白細(xì)胞趨化功能缺陷見(jiàn)

2、于Chediak-Higashi綜合癥、遲鈍白細(xì)胞綜合癥、肌動(dòng)蛋白功能不全癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病等。3二、中性粒細(xì)胞吞噬功能測(cè)定 1： 硝基藍(lán)四氮唑試驗(yàn)原理：中性粒細(xì)胞代謝中產(chǎn)生的氫與吞噬的硝基藍(lán)四 氮唑(nitroblue tetrazolium，NBT)反應(yīng)，生 成藍(lán)黑色甲攢(formazan)顆粒，沉積胞漿，計(jì) 數(shù)一定數(shù)量的中性粒細(xì)胞和含甲攢顆粒細(xì)胞 (NBT細(xì)胞)所占的百分率。步驟： 待檢血加入等量的NBT孵育； 取一滴推片、染色，計(jì)數(shù)NBT陽(yáng)性細(xì)胞百分 率。正常參考值：外周血NBT陽(yáng)性百分率7154 臨床意義：（1） NBT陽(yáng)性率 ：慢性肉芽腫?。?） 慢性發(fā)熱原因鑒別： 細(xì)菌感染：NBT陽(yáng)性率 病毒感染：不增高，或增高不明顯5 三、中性粒細(xì)胞吞噬功能測(cè)定 2 ： 金葡菌吞噬試驗(yàn)步驟：無(wú)菌采血加金葡菌懸液孵育涂片染色 油鏡計(jì)數(shù)吞噬率 = X 100正常參考值：吞噬率為915.7吞噬細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)(X個(gè))計(jì)數(shù)的細(xì)胞總數(shù)(200個(gè))6四、巨噬細(xì)胞功能： 溶菌酶測(cè)定溶菌酶（lysozyme , LSZ），能與細(xì)菌牢固結(jié)合，并使其裂解，主要由單核巨噬細(xì)胞釋放。步驟：1 融化瓊脂，和靶細(xì)菌混勻，澆注于無(wú)菌平皿內(nèi)2 打孔，加待檢樣品和LSZ3 孵育4 測(cè)量溶菌環(huán)直徑，制作