臨床免疫學檢驗：第10章 生物素-親和素放大技術

1、第十章 生物素-親和素放大技術(Chapter 10 Biotin-Avidin Immune Amplification Technique)臨床免疫學檢驗第十章 生物素-親和素放大技術 生物素-親和素系統（biotin-avidin system）：是基于生物素和親和素既能偶聯抗原/抗體分子，又能偶聯酶、熒光素等示蹤物質。 BAS具有特異、敏感、穩(wěn)定、靈活等多種優(yōu)勢，其高親和力和多級放大效應，賦予傳統標記免疫分析更高的檢測敏感度。第一節(jié) 生物素-親和素系統(Section 1 Biotin-Avidin System)一、組成常從含量較高的卵黃和肝組織中提取；又稱維生素H；環(huán)為咪唑酮環(huán)，結

2、合親和素；環(huán)為噻吩環(huán)，戊酸側鏈末端羧基標記抗體或其他分子。1生物素（B）一、組成1生物素（B）第一節(jié) 生物素-親和素系統一、組成又稱抗生物素蛋白，常從卵白蛋白中提??；由4個相同亞基組成的四聚體，可結合4個親和素分子的環(huán)；pH913中性質穩(wěn)定、耐熱、耐多種蛋白水解酶作用；鏈霉親和素屬弱酸性蛋白，分子結構中不含任何糖基，與固相材料、組織細胞基質非特異結合較低。2親合素（A）第一節(jié) 生物素-親和素系統二、特點極高的親合力而呈現高度特異性和穩(wěn)定性，明顯降低或避免了非特異性結合。1高特異性第一節(jié) 生物素-親和素系統二、特點1高特異性2高敏感性1:4生物素化形成許多“觸手”的多價制劑，使整個反應體系出現多

3、級放大效應，賦予檢測系統極高的敏感性。第一節(jié) 生物素-親和素系統二、特點1高特異性2高敏感性3強穩(wěn)定性高親合力，解離常數很小，呈不可逆反應；酸、堿、變性劑、蛋白水解酶等不影響其結合；穩(wěn)定性強，干擾因素少，提高檢測的精密度。第一節(jié) 生物素-親和素系統二、特點1高特異性2高敏感性3強穩(wěn)定性4強實用性可與多種示蹤物質聯合，用于多種生物學反應體系；高工作效價，可降低抗體用量，節(jié)約成本；生物素化標記物穩(wěn)定性好，有效期長。第一節(jié) 生物素-親和素系統第二節(jié) 生物素-親和素系統的應用(Section 2 Application of Biotin-Avidin System)一、應用于固相載體的包被環(huán)節(jié)第二節(jié) 生物素-親和素系統的應用二、應用于檢測系統的信號放大（一）生物素-親合素-生物素模式（BAB）ABC-ELISA檢測原理示意圖第二節(jié) 生物素-親和素系統的應用二、應用于檢測系統的信號放大（二）生物素-親合素模式（BA）LAB-ELISA檢測原理示意圖化學發(fā)光免疫測定的臨床應用靈敏度高，特異性強；線性范圍寬；標記物穩(wěn)定，試劑有效期長；自動化程度高，檢測菜單齊全。思考題1生物素和