外源化學(xué)物致癌作用 (3)講稿

1、外源化學(xué)物致癌作用 (3)第一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月主要內(nèi)容第一節(jié) 概述第二節(jié) 化學(xué)致癌過程第三節(jié) 化學(xué)致癌機(jī)制第四節(jié) 有關(guān)化學(xué)致癌的分子事件第五節(jié) 化學(xué)致癌物的分類第六節(jié) 化學(xué)致癌物的基本篩查方法第二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月掌握基本概念；化學(xué)致癌物的代謝活化；直接和間接致癌物；體細(xì)胞突變；癌基因、抑癌基因；化學(xué)致癌多階段過程熟悉IARC致癌物的分類、化學(xué)致癌性的判別；短期致癌實驗、動物致癌實驗和人群流行病學(xué)的觀察。了解致癌作用的影響因素；化學(xué)致癌物的危險評價學(xué)習(xí)目標(biāo)第三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company LogoWorld C

2、ancer Report 2014第四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company LogoChina第五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Why？第六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月基本概念化學(xué)致癌作用(chemical carcinogenesis)：化學(xué)物質(zhì)引起正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并發(fā)展成腫瘤的過程。-化學(xué)致腫瘤作用化學(xué)致癌物(chemical carcinogen)是指具有化學(xué)致癌作用的化學(xué)物質(zhì)。 第七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月外源性化學(xué)物致癌過程的認(rèn)識煤焦油和煙灰陰囊癌燃料膀胱癌多環(huán)芳烴皮膚癌聯(lián)苯胺膀胱癌1775189519221

3、945PottRehnKenne- awayCase第八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)致癌過程腫瘤（Tumor），指有分裂潛能的細(xì)胞受致癌因素的作用后發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化和克隆性增生所形成的新生物，在人體任何部位、任何組織都可以發(fā)生腫瘤。癌癥（Cancer) ，亦稱惡性腫瘤（Malignant neoplasm），由控制細(xì)胞生長增殖機(jī)制失常而引起的疾病。第九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月癌癥發(fā)生發(fā)展過程營養(yǎng)調(diào)控修復(fù)增殖分化健康凋亡內(nèi)源、外源性化學(xué)物調(diào)控-修復(fù)-啟動細(xì)胞固定腫瘤癌啟動階段促進(jìn)階段惡性進(jìn)展階段第十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月癌癥發(fā)生發(fā)展過程-

4、引發(fā)階段引發(fā)階段：指致癌劑誘導(dǎo)細(xì)胞的基因突變或表觀遺傳變異，導(dǎo)致異常增生的單個克隆癌細(xì)胞的生成，從而引發(fā)致癌過程。特征： （1）遺傳改變的不可逆性； （2）啟動細(xì)胞的表型可能正常，不具備自主生長性。第十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月腸癌發(fā)生的各個階段和腫瘤相關(guān)基因的異常結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展過程第十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展過程涉及多種基因改變第十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月促進(jìn)階段：是單克隆的癌細(xì)胞在一種或多種促癌物質(zhì)的不斷作用下，表型發(fā)生改變，惡性腫瘤細(xì)胞的各種性狀得以表達(dá)的過程。癌癥發(fā)生發(fā)展過程-促進(jìn)階段Promotion: t

5、he accumulation of mutations in cell growth or proliferation-related genes 第十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月特征：1.在基因表達(dá)和細(xì)胞水平上有可逆性2.持續(xù)給予促長劑可維持促長細(xì)胞群3.對衰老、飲食和激素因子敏感4.內(nèi)源性促長劑可引起自發(fā)促長作用5.劑量反應(yīng)關(guān)系顯示有可測定的閾值和最大作用6.以能否有效擴(kuò)大引發(fā)細(xì)胞群來確定促長劑的強(qiáng)度癌癥發(fā)生發(fā)展過程-促進(jìn)階段第十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月進(jìn)展階段：是指良性腫瘤轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤，并進(jìn)一步演變成更具惡性表型或具有侵襲特性的腫瘤的過程。細(xì)胞

6、表現(xiàn)出高增殖率和低凋亡率。癌癥發(fā)生發(fā)展過程-進(jìn)展階段Progression: a gain in tumor mass through increased rates of cell proliferation and/or reduced rates of apoptosis第十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月特征：1.不可逆性2.核型不穩(wěn)定導(dǎo)致細(xì)胞基因組結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)改變3.在進(jìn)展階段早期，已改變的細(xì)胞對環(huán)境因子敏感4.在進(jìn)展階段可觀察到良性或惡性腫瘤5.進(jìn)展劑使已促長的細(xì)胞進(jìn)入此期癌癥發(fā)生發(fā)展過程-進(jìn)展階段第十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月 體細(xì)胞基因組突變（

7、自發(fā)、環(huán)境因素、化學(xué)品、輻射、病毒）腫瘤基因激活（促進(jìn)增殖）細(xì)胞凋亡調(diào)控基因改變（增加存活）腫瘤抑制基因激活（促進(jìn)增殖和存活）異常蛋白質(zhì)的表達(dá)和生長負(fù)調(diào)控蛋白表達(dá)的缺失克隆增殖體細(xì)胞突變的積累惡性腫瘤（癌癥）癌癥發(fā)生發(fā)展過程第十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月腫瘤抑制基因腫瘤基因第十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月不死性遷移性失去接觸抑制生長信號的自給自足對程序性細(xì)胞死亡的逃逸第二十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月每個人身上都有癌細(xì)胞？第二十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)致癌機(jī)制-腫瘤相關(guān)基因原癌基因：被激活或者異常表達(dá)后可使細(xì)胞發(fā)生

8、惡性轉(zhuǎn)化的基因。抑癌基因：正常細(xì)胞分裂生長的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，其編碼蛋白質(zhì)能降低細(xì)胞分裂活性，對細(xì)胞的生長、增殖、分化起負(fù)性調(diào)節(jié)作用?；瘜W(xué)致癌機(jī)制與致突變有關(guān)，且致癌模式可以分為損傷-修復(fù)-突變-腫瘤模式。第二十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞癌變的多階段學(xué)說化學(xué)致癌作用多因素、多基因參與的多階段過程致癌過程有多個與癌有關(guān)的基因參與不同器官來源、不同組織類型、臨床階段以至同一種腫瘤在不同地區(qū)所見的遺傳變化是不同的多種環(huán)境致癌物、致癌因子或條件可協(xié)同作用個體的不同遺傳背景對腫瘤的發(fā)生發(fā)展有重要影響第二十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo第二十四張

9、，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月多階段致癌的形態(tài)學(xué)和生物學(xué)特征第二十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo化學(xué)致癌機(jī)制化學(xué)致癌機(jī)制其中最經(jīng)典的是體細(xì)胞突變學(xué)說或稱遺傳損傷機(jī)制學(xué)說.與之對應(yīng)的是非突變致癌學(xué)說，泛指所有不涉及堿基序列改變的致癌機(jī)制。目前普遍認(rèn)為致癌物誘導(dǎo)腫瘤的形成是上述兩種機(jī)制共同作用的結(jié)果。第二十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月體細(xì)胞突變學(xué)說致癌物代謝活化后生成的DNA加合物誘導(dǎo)基因突變癌基因的突變以及抑癌基因的突變或缺失在腫瘤中普遍存在，并且可以傳遞給子代細(xì)胞大多數(shù)致癌物在致突變試驗中呈陽性DNA修復(fù)缺陷可以導(dǎo)致腫瘤發(fā)生

10、發(fā)生染色體畸變基因組不穩(wěn)定腫瘤細(xì)胞來源于單細(xì)胞克隆理論依據(jù)第二十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company LogoDNA的改變成了體細(xì)胞突變機(jī)制的分子基礎(chǔ)第二十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月非突變致癌機(jī)制Company Logo基因結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變而是其調(diào)控出現(xiàn)異常。 有些致癌物對細(xì)胞DNA并無致突變作用。 因此，有學(xué)者提出非突變致癌學(xué)說或表觀遺傳致癌學(xué)說。第二十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月非突變致癌機(jī)制第三十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月表觀遺傳變異表觀遺傳現(xiàn)象：是指基因表達(dá)發(fā)生改變但不涉及DNA序列的變化， 能夠在代與代之間

11、傳遞。表觀遺傳變異包括基因沉默、DNA甲基化、核仁顯性、休眠轉(zhuǎn)座子激活和基因組印記等方面，周圍的環(huán)境也很重要?；虮磉_(dá)模式第三十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA甲基化DNA甲基化是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團(tuán)，生成m5CpG。DNA的不同甲基化狀態(tài)(過甲基化與去甲基化)與基因的活性和功能有關(guān)。 第三十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月CpG島位于多種動物已知基因轉(zhuǎn)錄起始位點周圍、由胞嘧啶(C)和鳥嘧啶(G)組成的串聯(lián)重復(fù)序列。在結(jié)構(gòu)基因的5端調(diào)控區(qū)域, CpG二連核苷常常以成簇串聯(lián)形式排列，這種富含C

12、pG二連核苷的區(qū)域稱為CpG島(CpG islands)，其大小為500-1000bp，約56%的編碼基因含該結(jié)構(gòu)。啟動子區(qū)中CpG島的未甲基化狀態(tài)是基因轉(zhuǎn)錄所必需的。 第三十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)基因序列發(fā)生改變基因序列不發(fā)生改變，可遺傳第三十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月表觀遺傳變異特點可遺傳的，即這類改變通過有絲分裂或減數(shù)分裂，能在細(xì)胞或個體世代間遺傳；可逆性的基因表達(dá)調(diào)節(jié)，也有較少的學(xué)者描述為基因活性或功能的改變；沒有DNA序列的改變或不能用DNA序列變化來解釋第三十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月表觀遺傳學(xué)機(jī)制第

13、三十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月DNA甲基化和腫瘤Company Logo甲基化甲基化第三十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞異常增生腫瘤是正常細(xì)胞在致癌因素長期作用下，出現(xiàn)過度增生或異常分化而形成的新生物。與正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞具有超常的增生能力。反復(fù)炎癥刺激可使良性增生發(fā)展成異常增生，臨床研究證實細(xì)胞增生是許多癌前病變的共同特征。第三十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月免疫抑制研究發(fā)現(xiàn)，某些腫瘤細(xì)胞能通過自分泌或旁分泌形式分泌免疫抑制因子，如轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和前列腺素E（PGE2）等，能抑制機(jī)體對腫瘤細(xì)胞的

14、殺傷。第三十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月內(nèi)分泌激素失衡長期使用激素可以導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EEDs):存在于環(huán)境中并能干擾體內(nèi)天然激素的合成、分泌、運輸、結(jié)合、作用、代謝及消除的外源性化學(xué)物質(zhì)，表現(xiàn)出擬天然激素或抗天然激素的作用，通過干擾機(jī)體的內(nèi)分泌功能而致病。Company Logo第四十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo世界衛(wèi)生組織早在2002年就指出EEDs污染呈現(xiàn)全球性EEDs三大特點-分布廣泛第四十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company LogoEEDs三大特點-種類繁多第四十二張，PPT共一百零四

15、頁，創(chuàng)作于2022年6月EEDs三大特點-危害嚴(yán)重危害嚴(yán)重：生殖與發(fā)育毒性、致癌、神經(jīng)毒性、免疫毒性等。已知的EDCs和相關(guān)腫瘤乳腺癌：雙酚A、雌二醇、二噁英、DTT、毒殺芬、鄰苯二甲酸酯前列腺癌：雙酚A、鎘、雌二醇、乙烯雌酚睪丸癌：鄰苯二甲酸酯、鎘陰道癌、卵巢癌：乙烯雌酚 第四十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)致癌相關(guān)事件基因突變基因異常表達(dá)干擾細(xì)胞凋亡端粒調(diào)控異常細(xì)胞周期紊亂化學(xué)致癌相關(guān)事件第四十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月基因突變原癌基因抑癌基因凋亡相關(guān)基因腫瘤易感基因活化為癌基因，與膜有關(guān)的G蛋白ras基因、核轉(zhuǎn)錄因子的myc基因失活，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的Rb

16、基因，錯配DNA修復(fù)的hMLH1基因促凋亡基因：myc、P53、Bax抗凋亡基因：Ras、Bcl-2、Rb主要見于乳腺癌患者家屬：BRCA1和BRCA2TEXT轉(zhuǎn)移相關(guān)基因特定轉(zhuǎn)移基因Mst1為代表；一些癌基因：Ras 、myc第四十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月端粒調(diào)控與細(xì)胞永生化Company Logo端粒（telomere）：是真核細(xì)胞染色體末端的一個特殊的DNA-蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，其DNA由5TTAGGG-3六個堿基的重復(fù)序列組成，能穩(wěn)定和保護(hù)染色體，在每次細(xì)胞分裂后，該重復(fù)序列都要縮短50-100bp，最終導(dǎo)致細(xì)胞衰老、死亡。端粒酶（telomerase): 是一種核糖核酸

17、蛋白酶，能在染色體末端合成端粒序列，以維持端粒的長度。端粒酶的活性存在于生殖細(xì)胞、永生細(xì)胞、癌細(xì)胞及活化的淋巴細(xì)胞中，大多數(shù)人原發(fā)腫瘤中含有端粒酶活性。 第四十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo熒光原位雜交顯示的端粒和端粒序列第四十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月端粒酶具有逆轉(zhuǎn)錄功能，能以自身為RNA為模板合成端粒DNA，從而維持端粒長度。被稱為細(xì)胞分裂計時器，在細(xì)胞永生化過程中起著重要的作用。 第四十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞周期調(diào)控紊亂細(xì)胞周期（cell cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的

18、全過程，分為間期與分裂期兩個階段第四十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo細(xì)胞周期調(diào)控的核心成員：細(xì)胞周期素（cyclin），周期素依賴性蛋白激酶（cyclin dependent kinase，CDK）和CDK抑制蛋白（CDK inhibitor）第五十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company LogoG1-S轉(zhuǎn)換和G2-M轉(zhuǎn)換關(guān)卡；細(xì)胞周期監(jiān)控：DNA損傷感應(yīng)、細(xì)胞生長阻滯、DNA修復(fù)和細(xì)胞凋亡啟動。第五十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞凋亡與腫瘤發(fā)生細(xì)胞凋亡（apoptosis）：細(xì)胞在一定的生理或病理條件下，受內(nèi)在遺

19、傳機(jī)制的控制自動結(jié)束生命的過程，是一種自然的生理過程。細(xì)胞壞死（Necrosis): 在種種不利因素下，由于細(xì)胞正常代謝活動受損或中斷引起的細(xì)胞死亡。 第五十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死區(qū)別Company Logo第五十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞凋亡過程促進(jìn)細(xì)胞凋亡基因：p53、Rb、p16;抑制細(xì)胞凋亡基因：c-Myc、Ras、Bcl-2第五十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞凋亡檢測方法-Tunel第五十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞凋亡檢測方法-FACS第五十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2

20、022年6月證據(jù)缺乏致癌性致癌證據(jù)不足致癌證據(jù)不足致癌證據(jù)充分無結(jié)果提示致癌性或者無相關(guān)研究數(shù)據(jù)無法明確化學(xué)物與致癌作用的關(guān)系部分動物誘癌實驗陽性腫瘤發(fā)生率高，并有劑量-反應(yīng)關(guān)系化學(xué)致癌物的分類-4級（IARC）第五十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月根據(jù)對人和動物致癌作用分類107582495121明確致癌性可能致癌性可能致癌性現(xiàn)有證據(jù)不足可能非致癌物第五十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月按化學(xué)致癌作用模式分類直接致癌物間接致癌物促癌劑不需要代謝活化即具有親電子活性，能與大分子物質(zhì)共價結(jié)合形成加和物：內(nèi)酯類、氮芥、鎳、鎘、砷需要代謝活化后才具有致癌作用：芳香烴、亞硝

21、胺類、煙草、酒精、苯并蒽等單獨作用不致癌，卻可使啟動的突變細(xì)胞克隆擴(kuò)增，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展：DDT、多氯聯(lián)氨、二噁英其他分類方法：引發(fā)物、促癌物和催展物第五十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月化學(xué)致癌物篩查的基本方法定量構(gòu)-效關(guān)系分析遺傳毒性實驗細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化實驗哺乳動物致癌實驗哺乳動物長期致癌實驗促癌劑的檢測轉(zhuǎn)基因或基因敲除動物在致癌篩查中的應(yīng)用人群腫瘤流行病學(xué)研究短期實驗第六十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月定量構(gòu)象關(guān)系分析QSAR（quantitative structure-activity relationship)是利用理論計算和統(tǒng)計分析工具研究化和物與其生物學(xué)效

22、應(yīng)之間的定量關(guān)系。該方法是集生物、化學(xué)和統(tǒng)計學(xué)為一體的一項綜合技術(shù)，它的理論基礎(chǔ)是影響化學(xué)反應(yīng)速率的能力將體現(xiàn)為不同的活性指數(shù)或可量化的響應(yīng)指數(shù)。Company Logo第六十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Hansch方法：以生理活性物質(zhì)的半數(shù)有效量作為活性參數(shù)，以分子的電性參數(shù)、立體參數(shù)和疏水參數(shù)作為線性回歸分析的變量。Free-Wilson方法：方法均是將分子作為一個整體考慮其性質(zhì)，并不能細(xì)致地反應(yīng)分子的三維結(jié)構(gòu)與生理活性之間的關(guān)系，因而又被稱作二維定量構(gòu)效關(guān)系Company Logo第六十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月優(yōu)點：快速、經(jīng)濟(jì)、有效，是人類最早的合

23、理藥物設(shè)計方法之一。QSAR缺點：物理意義模糊，且在分析是沒有涉結(jié)合“生物學(xué)因素”，精準(zhǔn)度收到質(zhì)疑因此，必須建立高效、精準(zhǔn)且功能強(qiáng)大的分析系統(tǒng)第六十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月遺傳毒性實驗許多化學(xué)致癌物具有誘導(dǎo)突變的作用，因此目前致突變實驗是毒理學(xué)安全評價應(yīng)用最多的實驗?；蛲蛔冊囼灒菏髠抽T氏菌回復(fù)突變試驗(Ames試驗);染色體畸變試驗：體外細(xì)胞系細(xì)胞遺傳學(xué)分析，小鼠骨髓微核試驗，大鼠骨髓染色體畸變試驗;原發(fā)性DNA損傷：DNA加合物，DNA鏈斷裂，DNA修復(fù)誘導(dǎo)試驗；體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化：敘利亞地鼠胚胎細(xì)胞，Balb/c 3T3細(xì)胞。 第六十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2

24、022年6月優(yōu)點：簡單、快速、費用低廉、無需特殊檢測儀器缺點：無法檢出非遺傳毒性致癌物。致突變實驗陽性陰性遺傳毒性致癌物 具有致突變性的非致癌物 非致突變性的非致癌物 非致突變性的致癌物第六十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化實驗細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化（ cell malignant transformation) 是指外源性因素對體外培養(yǎng)的細(xì)胞所誘發(fā)的惡性表型改變，包括細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞增殖速度、生長特性、染色體畸變等變化，目的在于揭示體外培養(yǎng)細(xì)胞在接觸受試物后，細(xì)胞生長自控能力的喪失，接觸抑制消失，細(xì)胞排列紊亂或呈灶狀生長。觀察終點：細(xì)胞惡性變，可以篩查遺傳毒性致癌物質(zhì)，也可檢測

25、非遺傳毒性致癌物。Company Logo第六十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞系1）細(xì)胞株，敘利亞倉鼠胚胎細(xì)胞（SHE），最早應(yīng)用的原代細(xì)胞系；2）細(xì)胞系，C3H/10T1/2、BALB/C-3T3；3）病毒感染的Bhas 42細(xì)胞系，將v-Ha-ras癌基因轉(zhuǎn)染的BALB/c 3T3細(xì)胞，被認(rèn)為是已經(jīng)啟動的了的細(xì)胞，可以直接檢測促癌劑Company Logo第六十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo結(jié)果分析方法光鏡電鏡SEM其他：RT-PCR，WBHE&ICH評價方法轉(zhuǎn)化灶細(xì)胞密集堆積，周圍交叉排列；集落中有圓形細(xì)胞，外圍少數(shù)交叉；整個擊

26、落均可見交叉排列和重疊生長。第六十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo軟瓊脂克隆法細(xì)胞轉(zhuǎn)化分析CytoSelect第六十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月哺乳動物短期致癌動物短期致癌實驗（limited in vivo bioassay):實驗觀察不是終身而是在有限的時間范圍內(nèi)，而且觀察的靶器官限定為一個而不是全部。國內(nèi)外常用的有以下四種： 1、小鼠腫瘤誘發(fā)實驗 2、雌性SD大鼠誘發(fā)實驗 3、大鼠肝轉(zhuǎn)變灶實驗 4、小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)實驗觀察終點：癌前病變?nèi)缦倭?、瘤性增生結(jié)界Company Logo第七十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月小鼠

27、腫瘤誘發(fā)實驗-肺烏拉坦i.p injection30 w氨基甲酸乙酯在體內(nèi)的代謝途徑至少有三種：超過90%的它可被分解為乙醇，氨和淡水化合物。約0.5%的它被細(xì)胞色素P450氧化成DNA加聚物，造成DNA雙鏈破壞，可導(dǎo)致癌變。約0.1%的它被細(xì)胞色素P450氧化為N-羥基-氨基甲酸乙酯，后者能誘導(dǎo)銅離子調(diào)控的DNA損傷第七十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo大鼠腫瘤誘發(fā)實驗第七十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月小鼠皮膚誘發(fā)腫瘤實驗Company Logo 哺乳動物短期致癌試驗：于小鼠皮膚局部連續(xù)涂抹受試物，以觀察皮膚瘤和癌的發(fā)生；一般20周可結(jié)

28、束實驗，較敏感的小鼠為SENCAR小鼠。此試驗也可設(shè)計為檢測受試物的引發(fā)活性或促長活性。典型的引發(fā)劑為致癌性多環(huán)芳烴，促長劑為佛波醇酯(TPA)，巴豆油。第七十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月大鼠肝轉(zhuǎn)化灶實驗對大鼠進(jìn)行肝大部切除，給以受試物，二乙基亞硝胺(DEN)，促長劑為苯巴比妥(PB)。一般可在814周結(jié)束實驗，觀察肝轉(zhuǎn)化灶生成。轉(zhuǎn)化灶可用組織化學(xué)或免疫化學(xué)方法鑒定。此試驗也可設(shè)計為檢測受試物的引發(fā)活性或促長活性。第七十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月何時應(yīng)考慮進(jìn)行致癌性評價When and Why ?人體可能長期暴露于該化學(xué)物；該化學(xué)物或其代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與已

29、知致癌物相似；反復(fù)染毒毒性試驗提示該化學(xué)物可能產(chǎn)生癌前病變。通常應(yīng)該在申請上市之前進(jìn)行第七十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月哺乳動物長期致癌實驗動物選擇：斷乳或斷乳不久的大鼠和小鼠，雌雄各半。動物數(shù)量：每組至少有雌雄各50只動物，共100只。在出現(xiàn)第一個腫瘤時，每組還應(yīng)有不少于50只動物染毒途徑和時間：原則上試驗期限要求長期或終生，一般小鼠1.5年，大鼠2年。第七十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo劑量：致癌試驗一般設(shè)三個試驗組。ICH(1995)提出，高劑量選擇可以根據(jù)：毒性終點，即最大耐受劑量(MTD);藥代動力學(xué)終點，嚙齒動物血漿AUC(

30、時量曲線下面積)為人的25倍；選擇吸收飽和劑量;藥效學(xué)終點，不應(yīng)產(chǎn)生生理學(xué)和內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂;最大可行劑量，受試物在飼料中最高含量為5。限制劑量為1500mg(kg體重d)。 第七十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo劑量：致癌試驗一般設(shè)三個試驗組。ICH(1995)提出，高劑量選擇可以根據(jù)：毒性終點，即最大耐受劑量(MTD);藥代動力學(xué)終點，嚙齒動物血漿AUC(時量曲線下面積)為人的25倍；選擇吸收飽和劑量;藥效學(xué)終點，不應(yīng)產(chǎn)生生理學(xué)和內(nèi)穩(wěn)態(tài)紊亂;最大可行劑量，受試物在飼料中最高含量為5。限制劑量為1500mg(kg體重d)。 第七十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作

31、于2022年6月中及低劑量組則按等比級數(shù)下推，如分別為上一個劑量水平的1/2或1/3。低劑量組應(yīng)不影響動物的正常生長、發(fā)育和壽命，即不產(chǎn)生任何毒性效應(yīng)。但低劑量組應(yīng)高于人的接觸劑量，一般不低于高劑量的10。中劑量組介于高、低劑量之間，如有可能按受試物的毒物動力學(xué)性質(zhì)來確定。Company Logo第七十九張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果觀察、分析和評定-腫瘤發(fā)生率腫瘤發(fā)生率（）（實驗結(jié)束時患腫瘤動物總數(shù)有效動物總數(shù)）100，有效動物總數(shù)指最早發(fā)現(xiàn)腫瘤時存活動物總數(shù)。第八十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果觀察、分析和評定-腫瘤多發(fā)性腫瘤多發(fā)性：是指一個動物出現(xiàn)多個

32、器官腫瘤或一個器官出現(xiàn)多個腫瘤。一般計算每一組的平均腫瘤數(shù)和每一組中出現(xiàn)2、3個或多個腫瘤的動物數(shù)或比例。第八十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月腫瘤潛伏期即從攝入受試物起到發(fā)現(xiàn)腫瘤的時間，因為內(nèi)臟腫瘤不易覺察，通常將腫瘤引起該動物死亡的時間定為發(fā)生腫瘤的時間。應(yīng)對試驗結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)的統(tǒng)計學(xué)分析，并研究劑量反應(yīng)關(guān)系結(jié)果觀察、分析和評定-潛伏期第八十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo致癌試驗陽性的判定標(biāo)準(zhǔn)陽性4321對于對照組也出現(xiàn)的一種或數(shù)種腫瘤，試驗組腫瘤發(fā)生率增加；試驗組發(fā)生對照組沒有的腫瘤類型；與對照組比較，試驗組每個動物的平均腫瘤數(shù)增加。試

33、驗組腫瘤發(fā)生早于對照組第八十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月人群流行病學(xué)研究Company Logo（一）接觸標(biāo)記 （二）生物效應(yīng)標(biāo)記 （三）敏感性標(biāo)記 流行病學(xué)調(diào)查時確定人類致癌物的唯一手段。第八十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌篩查中的應(yīng)用Company Logo1轉(zhuǎn)癌基因小鼠。與轉(zhuǎn)錄啟動子連接的癌基因轉(zhuǎn)入后可直接在某些特定的組織中高效表達(dá)，使該組織細(xì)胞處于引發(fā)狀態(tài)，這類轉(zhuǎn)基因動物是研究化學(xué)物致癌作用的敏感體系。攜帶癌基因的轉(zhuǎn)基因動物可用于致癌試驗，試驗周期僅3個月左右，有希望發(fā)展成代替長期動物致癌試驗的試驗系統(tǒng)。這些攜帶有癌基因的轉(zhuǎn)基因動物，可

34、用來研究外源化學(xué)物與腫瘤相關(guān)基因的作用及外源化學(xué)物在致癌不同階段中的作用機(jī)制。第八十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月2腫瘤抑制基因敲除小鼠。在P53-/-小鼠，腫瘤(特別是淋巴肉瘤)的發(fā)生比正常小鼠(P53+/+)增加而且提前。由于P53-/-小鼠的腫瘤發(fā)生具有組織特異性，進(jìn)一步研究這些腫瘤的遺傳學(xué)基礎(chǔ)有助于鑒定P53基因的功能。而半合子小鼠(P53+/-)在出生后6個月內(nèi)自發(fā)癌發(fā)生率低，但在之后發(fā)生淋巴瘤和軟組織肉瘤，其中大部分丟失P53野生型等位基因。這種小鼠對遺傳毒性致癌物敏感性并不增加。這種半合子小鼠也可用于鑒定致癌過程中的協(xié)作基因。而且缺P53小鼠加速形成惡性腫瘤，提示

35、此基因主要在進(jìn)展階段起作用。P53在腫瘤發(fā)生中的作用有待進(jìn)一步研究。 第八十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Company Logo癌癥可以預(yù)防第八十七張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Nutrition in Cancer PreventionDiets contain both inhibitors and enhancers of carcinogenesisAnimal studies also test the effect of food and nutrition on cancer and provide guidance for epidemiolog

36、ical studies第八十八張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Carbohydrate and Glycemic IndexHigh glycemic-index diet associated with increased risk of cancers including ovarian, endometrial, breast, colorectal, pancreas, and lungLimit processed foods and refined sugars and emphasize whole grains and low GI foods第八十九張，PPT共

37、一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月Fruits and VegetablesFruits and vegetables found to be associated with lower risk in 128 of 156 dietary studiesIncreased consumption of fruits and vegetables is associated with lower risk of cancers of the oral cavity, esophagus, stomach, colon, rectum, and bladderEvidence less stron

38、g for hormone-related (類激素相關(guān)）cancers such as breast and prostate cancer第九十張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月1. BroccoliMost attention as a breast cancer prevention foodResearch has shown it blocks tumor growth, preventing the further spread of cancer if it does occur anti-cancer benefit from other cruciferous v

39、eggies, including cauliflower, cabbage, Brussels sprouts, and kale - eat one or more of these vegetables every day第九十一張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月2. GarlicGarlic seems to have an impact on cell cycling (process by which a normal, healthy cell might become cancerous) Credit for regulating this goes to the

40、component of garlic called allyl sulfide Allyl sulfides are found throughout the onion familyPrevents breast cancer第九十二張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月2. GarlicGarlic seems to have an impact on cell cycling (process by which a normal, healthy cell might become cancerous) Credit for regulating this goes to the

41、 component of garlic called allyl sulfide Allyl sulfides are found throughout the onion familyPrevents breast cancer第九十三張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月3. ApplesAn apple a day may keep cancer away but theres a catch. Peeling apple-tossing away a rich source of fiber, antioxidants, and other compounds needed f

42、or anti-cancer nutrition. Lab studies show that apple peel can actually fight the spread of cancer cells. 第九十四張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月4. PomegranatesEarly stages research Cell culture study suggests that the fruit contains a compound that might help fight cancers growth especially estrogen-dependent c

43、ancers (breast, endometrium). Also help fight heart disease and prostate cancer.第九十五張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月5. WalnutsWalnuts contain many helpful nutrients and healthy -3 fatty acids, which help your body fight inflammationResearch also suggests that walnuts may actually slow the growth of breast can

44、cer tumors, so this tasty nut could play a role in breast cancer management even after diagnosis第九十六張，PPT共一百零四頁，創(chuàng)作于2022年6月6. FishGreat sources of -3 fatty acids include certain fish and fish oil (salmon, mackerel, sea bass, and tuna)Smart protein source since nutrition recommendations include limiting intake of red meat and processed meats, such