動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體

1、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第1頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合雜種細(xì)胞組織培養(yǎng)雜種植株去細(xì)胞壁物理法篩選第2頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞的差別：無細(xì)胞壁全能性受限制，不能發(fā)育成雜種動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞雜交與植物細(xì)胞雜交的不同：不需去除細(xì)胞壁不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體第3頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一一、動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）1、概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2、結(jié)果：形成單核的雜交細(xì)胞3、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性4、誘導(dǎo)方式

2、物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒第4頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一5、過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再從中篩選雜交細(xì)胞第5頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一6、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。7、應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體第6頁，共14頁，2022年，

3、5月20日，21點(diǎn)10分，星期一二、單克隆抗體傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？B淋巴細(xì)胞每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群1975，米爾斯坦和柯勒 雜交瘤技術(shù)第7頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一1、原理：雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)親本的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數(shù)量的單一抗體。2、過程B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B-B細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（ B-瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體第8頁，共14頁，2022年，5月20日，2

4、1點(diǎn)10分，星期一3.單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大 作為診斷試劑：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合 優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速用于運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療第9頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一總結(jié)一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一種新細(xì)胞滅活病毒雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大的優(yōu)勢(shì)第10頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去

5、除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第11頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細(xì)胞融合的是（ ） A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)第12頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一2.動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是-（ ）A.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和 B. 制備單克隆抗體 C.培育新品種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞 AD第13頁，共14頁，2022年，5月20日，21點(diǎn)10分，星期一4. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是-（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合 B.由小鼠一個(gè)B淋巴細(xì)胞誘