超高壓液相色譜 (2)2

1、超高壓液相色譜第1頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三第2頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三基本內(nèi)容概述 原理 特點(diǎn) 應(yīng)用 4223145 不足第3頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三超高壓液相色譜（UPLC） 超高壓液相色譜（UPLC）是指一種采用小粒徑填料色譜柱(100MPa)的新型液相色譜技術(shù)，可顯著改善色譜的分離度和檢測靈敏度，同時(shí)大大縮短分析周期，特別適用于微量復(fù)雜混合物的分離和高通量研究。 組成：進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)第4頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三第5頁

2、，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三原理 UPLC保持了傳統(tǒng)HPLC的基本原理，但其分 離效能和分析速度卻得到了全面提升，這歸功于其獨(dú)特的小顆粒色譜填料技術(shù)。在HPLC的速率理論中，Van Deemter方程可簡化為： H=A +Bv + Cv (1) 其中： H理論塔板高度 v流動(dòng)相的平均線速第6頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三A、B、C均為常數(shù)，其中：A渦流擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)B分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)C傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)各項(xiàng)均與固定相粒度(dp)相關(guān)如僅考慮dp對(duì)H的影響，(1)式可表示為：H=a(dp)+bv+c(dp) 2v (2)第7頁，共13頁，2022年，

3、5月20日，10點(diǎn)38分，星期三 由（2） H=a(dp)+bv+c(dp) 2v 可知： 在相同線速度下，填料粒徑（dp）越小，理 論塔板高度越小，柱效越高。 小顆粒填料的另一個(gè)重要特征是：當(dāng)增加流量(線速度)時(shí)塔板高度沒有明顯的增大，且維持在一定范圍內(nèi)，即在較大流量范圍內(nèi)保持較高的柱效。因此，可以通過增加流量來加快分離速度，同時(shí)維持較高的柱效和良好的分離效果。第8頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三特點(diǎn)與其他液相色譜相比較，UPLC具有以下幾個(gè)特點(diǎn)：1、填料粒徑小，壓力大 UPLC HPLC 粒徑 100MPa 3060MPa2 、檢測靈敏度高，重現(xiàn)性好。如采用UPL

4、CMS MS分析大鼠血漿中的混合藥物時(shí)靈敏度提高了倍。第9頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三3、快速、高效、高分辨的色譜模式4、進(jìn)樣系統(tǒng) 一般常采用靜態(tài)切割、壓力平衡（采用一強(qiáng)一弱的雙溶劑進(jìn)樣）和自動(dòng)進(jìn)樣三種方式；5、輸液系統(tǒng) 具有耐壓性能、各部分之間要有良好的密封；6、檢測系統(tǒng) 使用高頻檢測器（短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的許多色譜峰需要更快的數(shù)據(jù)采集速率相適應(yīng)； 需要降低樣品在檢測池內(nèi)的駐留時(shí)間）。第10頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三應(yīng)用 超高壓液相色譜（UPLC）是一種新型的色譜分析技術(shù)，可以單獨(dú)使用，也可以和其他色譜如質(zhì)譜聯(lián)用（UPLCMS）。主要應(yīng)用有： 中藥復(fù)雜成分的分析，環(huán)境監(jiān)測，農(nóng)藥殘留物的檢測及蛋謝組學(xué)等領(lǐng)域，且具有很好的推廣價(jià)值。第11頁，共13頁，2022年，5月20日，10點(diǎn)38分，星期三一、壓力高，溶劑的粘度會(huì)上升，流量降低（可根據(jù)設(shè)定的流量與實(shí)際流量進(jìn)行流量補(bǔ)償）二、流動(dòng)相以較高速度流過固定相時(shí)，因摩擦可產(chǎn)生熱量，加之流動(dòng)相和固定相的導(dǎo)熱性能較差，可導(dǎo)致溫度梯度的出現(xiàn)，造成峰展寬和柱效的下降（流動(dòng)相預(yù)冷）。三、在超高壓下運(yùn)行的色譜柱可能發(fā)生液體噴射和管壁迸裂。（不常發(fā)生）四、分析中藥的柱子容易堵柱，而化學(xué)藥則很少出