9微生物生理生化反應(yīng)

1、微生物生理生化反應(yīng)糖發(fā)酵試驗(yàn)、IMVIC試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私馓前l(fā)酵、IMVIC反應(yīng)的原理掌握通過(guò)糖發(fā)酵、IMVIC反應(yīng)鑒別不同微生物的方法 實(shí)驗(yàn)原理糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)。在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。 大多數(shù)細(xì)菌都利用糖類(lèi)作為碳源和能 源，但是他們?cè)诜纸馓穷?lèi)物質(zhì)的能力上有很大的差異。有些細(xì)菌能分解某種糖產(chǎn)生有機(jī)酸（如：乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫氣、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)當(dāng)某種細(xì)菌能利用某種糖產(chǎn)酸時(shí)，加入到培養(yǎng)基中的溴甲酚紫指示劑可由紫色（PH 6.8）變?yōu)辄S色（PH 5.2）。氣體的產(chǎn)生可由放入試管培養(yǎng)基中的倒置的德漢氏小管（小發(fā)

2、酵管）中有無(wú)氣泡產(chǎn)生來(lái)證明 。葡萄糖、乳糖：各2支大腸桿菌、2支變形桿菌觀察各培養(yǎng)基顏色變化及杜氏小管中有無(wú)氣泡。IMVIC試驗(yàn) IMViC試驗(yàn)是吲哚、甲基紅、伏普（V-P）、檸檬酸鹽四個(gè)試驗(yàn)的簡(jiǎn)稱(chēng)。以上四個(gè)試驗(yàn)主要是用來(lái)快速鑒別大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌，多用于水的細(xì)菌學(xué)檢查。大腸桿菌雖非致病菌，但在飲水中若超過(guò)一定數(shù)量，表示受糞便污染。產(chǎn)氣腸桿菌也廣泛存在與自然界中，因此檢查水時(shí)要將兩者分開(kāi) 。吲哚試驗(yàn) 某細(xì)菌色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸 吲哚丙酮吲哚試劑產(chǎn)氣腸桿菌陰性無(wú)色 大腸桿菌陽(yáng)性玫瑰紅色吲哚 大腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌甲基紅試驗(yàn) 當(dāng)細(xì)菌代謝糖產(chǎn)生酸時(shí)，使加入培養(yǎng)基的甲基紅指示劑由橘紅色(PH 6

3、.3)變?yōu)榧t色(PH 4.2)即甲基紅反應(yīng)。 大腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌早期有機(jī)酸(PH4.0)后期大腸桿菌陽(yáng)性仍維持酸性PH 4 產(chǎn)氣腸桿菌陰性轉(zhuǎn)化為非酸性末端產(chǎn)物(乙醇，丙酮酸PH6左右) 大腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌伏普試驗(yàn) 是用來(lái)測(cè)定某些細(xì)菌利用葡萄糖產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力可加肌酸使反應(yīng)更明顯 丙酮酸 縮合 脫羧 乙酰甲基甲醇 二乙酰 產(chǎn)氣桿菌陽(yáng)性生成紅色化合物 O2 堿性條件 精氨酸的胍基 大腸桿菌陰性伏普試驗(yàn)大腸桿菌產(chǎn)氣腸桿菌接種培養(yǎng)基GG乳乳甲甲vpvpinin菌種010201020103010301033001：大腸桿菌3002：普通變形桿菌3003：產(chǎn)氣腸桿菌實(shí)驗(yàn)材料 培養(yǎng)基菌種：大腸桿菌（3001）、產(chǎn)氣桿菌（3002）、（3003） 思考題：（1）討論IMVIC試驗(yàn)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)上的意義（2）為什么大腸桿菌是甲基紅陽(yáng)性反應(yīng)，而產(chǎn)氣桿菌為陰性？這個(gè)試驗(yàn)與伏普試驗(yàn)最初與最終產(chǎn)物有何異同？為什么會(huì)