生物技術(shù)概論復(fù)習(xí)重點(diǎn)

1、1、生物技術(shù)：生物技術(shù)有時(shí)也稱(chēng)生物工程，是指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為根底，結(jié)合其他根底學(xué)科的科學(xué)原理，承受先 進(jìn)的工程技術(shù)手段，依據(jù)預(yù)先的設(shè)計(jì)改造生命體或加工生物原料，為人類(lèi)生產(chǎn)出所需的產(chǎn)品或到達(dá)某種目的。2DNA體外重組技術(shù)應(yīng)用人工的方法把生物的遺傳物質(zhì)通常是DNDNA 細(xì)胞或個(gè)體中大量表達(dá)已獲得基因產(chǎn)物。3、細(xì)胞工程：是指以細(xì)胞為根本單位，在體外進(jìn)展培育、生殖，或人為地使細(xì)胞的某些生物學(xué)特性按人們的意愿發(fā)生 轉(zhuǎn)變，從而到達(dá)改進(jìn)生物品種或制造品種；或加速繁育動(dòng)植物個(gè)體；或獲得某些有用的物質(zhì)的過(guò)程包括動(dòng)植物細(xì) 胞的體外培育技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞器移植技術(shù)、克隆技術(shù)和干細(xì)技術(shù)等4、發(fā)酵工程：利用微

2、生物生長(zhǎng)速度快、生長(zhǎng)條件簡(jiǎn)潔以及代謝過(guò)程特別等特點(diǎn)，在適合的條件下，通過(guò)現(xiàn)代化工程技 術(shù)手段，由微生物的某種特定功能生產(chǎn)出人類(lèi)所需的產(chǎn)品。5包括酶的固定化技術(shù)、酶反響器的設(shè)計(jì)及應(yīng)用、酶制劑的制備催化功能，對(duì)酶進(jìn)展修飾改造，并借助生物反響器來(lái)生產(chǎn)人類(lèi)所需產(chǎn)品的一項(xiàng)技術(shù)。6、蛋白質(zhì)工程：是指在基因工程的根底上，結(jié)合蛋白質(zhì)結(jié)晶學(xué)、計(jì)算機(jī)關(guān)心設(shè)計(jì)和蛋白質(zhì)化學(xué)等的學(xué)科根底學(xué)問(wèn)，通 過(guò)對(duì)基因的人工定向改造等手段，對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)展修飾、改造和拼接以生產(chǎn)能滿(mǎn)足人類(lèi)需要的型蛋白質(zhì)的技術(shù)。7、連接酶：能夠催化雙鏈DNA 3、5末端形成磷酸二酯鍵的酶。8、目的基因：在基因工程設(shè)計(jì)和操作中，被用于基因重組、轉(zhuǎn)變受體細(xì)胞性

3、狀和獲得預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物的基因成為目的基 因。9、細(xì)菌質(zhì)粒載體：是存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的一類(lèi)獨(dú)立位于染色體外的能夠進(jìn)展自主復(fù)制的遺傳成分。10、噬菌體載體：把特地感染了細(xì)菌的病毒稱(chēng)為噬菌體載體，由DNA頭部和蛋白質(zhì)尾部組成。11、溶源：假設(shè)噬菌體侵入宿主細(xì)胞后并不裂解宿主細(xì)胞，而是把自身的DNA 整合到宿主細(xì)胞DNA 中，并隨著宿主細(xì)胞分裂而增殖。12、裂解：假設(shè)噬菌體侵入宿主細(xì)胞后，可以利用宿主細(xì)胞的酶以及底物合成的噬菌體，然后裂開(kāi)細(xì)胞釋放出子代噬 菌體并再次感染其他宿主。13、基因重組：利用限制性?xún)?nèi)切酶和其他一些酶類(lèi)，切割和修飾載體DNA 和目的基因，將兩者連接起來(lái)，使目的基因插入于可以自我復(fù)制

4、的載體內(nèi)，再轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，以期這種外源性的目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)得到正確表達(dá)。14宿主細(xì)胞是指能夠攝取外源DN，并使其穩(wěn)定擴(kuò)增以及表達(dá)的細(xì)胞。15、薩瑟恩DNA 印跡雜交：依據(jù)毛細(xì)作用的原理，使在電泳凝膠中分別得DNA 片段，轉(zhuǎn)移并結(jié)合在適當(dāng)?shù)臑V膜上，然后通過(guò)標(biāo)記好的DNA 或RNA 探針的雜交作用，來(lái)檢測(cè)這些轉(zhuǎn)移的DNA 片段。16、細(xì)胞融合技術(shù)：是指承受自然或人工方法使兩個(gè)或兩個(gè)以上的不同細(xì)胞或原生質(zhì)體融合為一個(gè)細(xì)胞，不經(jīng)過(guò)有性 過(guò)程而到達(dá)雜種細(xì)胞的方法。17、細(xì)胞拆合技術(shù)細(xì)胞重組技術(shù)：是指從活細(xì)胞中分別出細(xì)胞器或其組分，然后將不同來(lái)源的細(xì)胞器在體外條件 下進(jìn)展重組，使其重裝配成具有生物活性

5、的細(xì)胞或細(xì)胞器的一種試驗(yàn)技術(shù)。18、細(xì)胞培育技術(shù)：是指動(dòng)物、植物或微生物的細(xì)胞在體外無(wú)菌條件下的保存和生長(zhǎng)。19、生能細(xì)胞：是指能夠表達(dá)生物體基因組的任何一種基因，并能分化該物體內(nèi)任何一種細(xì)胞，并進(jìn)而發(fā)育成為一個(gè) 完全生物體的細(xì)胞。20、外殖體：指植物組織培育中用來(lái)進(jìn)展無(wú)菌培育的離體材料。21、原生質(zhì)體：除去了全部細(xì)胞壁的細(xì)胞。22、胚狀體：指組織培育中起源于非核子細(xì)胞，經(jīng)過(guò)胚胎發(fā)生與胚胎發(fā)育而形成的胚狀構(gòu)造具有根芽?jī)晒?jié)23、繼代培育：指愈傷組織在培育基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，由于養(yǎng)分缺乏、水分散失、代謝產(chǎn)物積存等緣由，需將這些 組織轉(zhuǎn)移到的培育基上，這種轉(zhuǎn)移稱(chēng)為繼代培育后傳代培育。24、植物細(xì)胞培

6、育：指在離體條件下，將愈傷組織或其他易分散的組織接種到培育基，通過(guò)培育使細(xì)胞增殖，從而獲 得大量的細(xì)胞群體的技術(shù)。25、組織培育：是在無(wú)菌和人為把握外因的條件下，培育和爭(zhēng)辯植物組織，器官，甚至進(jìn)而從中分化，發(fā)育出整體植 物的技術(shù)。26、人工種子：外面包裹有一層有機(jī)薄膜的胚狀體。27、自然選育：不經(jīng)過(guò)人工處理，直接利用微生物的自然突變進(jìn)展選育短波輻射、低劑量使用、四種堿基磷間互變 異構(gòu)、宇宙射線(xiàn)28、固定化酶：通過(guò)物理或化學(xué)的方法將酶束縛在肯定的空間里，將酶制成仍具有催化活性的衍生物。29、蛋白質(zhì)組學(xué)：是指一個(gè)細(xì)胞或組織所包含的全部的蛋白質(zhì)，現(xiàn)將其定義為基因組表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。30、生物芯片：通

7、過(guò)微電子、微加工技術(shù)在平方厘米大小的固相基質(zhì)外表構(gòu)建的一個(gè)微型分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)組織細(xì) 胞中的DNA、蛋白質(zhì)以及其他生物組分進(jìn)展快速、高效、敏感的高級(jí)分析。31、基因芯片：將大量的探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷虾?，與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)展雜交，通過(guò)對(duì)雜交信號(hào)檢測(cè)分析，獵取 樣品的分子的數(shù)量和序列信息。32、蛋白質(zhì)芯片：將大量的蛋白質(zhì)有規(guī)章的固定到某種介質(zhì)載體上，利用蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)酶與底物、蛋白質(zhì)與其他小 分子之間的相互作用，檢測(cè)分析蛋白質(zhì)的技術(shù)。33、人類(lèi)基因組打算：目的是測(cè)定22 1 3109 34 萬(wàn)個(gè)基因組成的全DNA序列。34“路標(biāo)”，以遺傳學(xué)的距離為“圖距”的基因組圖，它是基于遺傳功能而建立的圖

8、譜。35、物理圖譜：是指以一段的核苷酸序列的DNA 片段為標(biāo)志，所做出的基因組的DNA 的分析。36、轉(zhuǎn)錄圖譜：又叫轉(zhuǎn)錄圖，指具有表達(dá)力量的DNA 轉(zhuǎn)錄圖37、序列圖譜：是分子水平上的一個(gè)物理圖譜.38、載體DNA 與外源基因連接的方法有：粘性末端連接法、平末端連接法。39PCRDNA體內(nèi)復(fù)制過(guò)程的體外DNADNAd-NTP引物和DNA 聚合酶，通過(guò)變性、退火、延長(zhǎng)三個(gè)溫度的不斷循環(huán)，使目標(biāo)DNA 得到快速大量的復(fù)制，需要兩條合成的寡核苷酸片斷和耐熱的DNA聚合酶。40、什么是生物技術(shù)，它包括那些根本內(nèi)容？其內(nèi)容之間如何聯(lián)系？ 概念略。它包括基因工程，細(xì)胞工程，酶工程，發(fā)酵工程，蛋白質(zhì)工程。關(guān)

9、系：這五項(xiàng)技術(shù)并不是各自獨(dú)立的，他們之間是彼此聯(lián)系，相互滲透的。其中基因工程技術(shù)是核心技術(shù)，他能帶動(dòng) 其他技術(shù)的進(jìn)展。41、簡(jiǎn)要說(shuō)明生物技術(shù)的進(jìn)展史以及現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)生物技術(shù)的關(guān)系。進(jìn)展史：傳統(tǒng)的生物技術(shù)從史前時(shí)代起就始終為人們所開(kāi)發(fā)利用，首先是發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，證明白發(fā)酵是由微生物引 起的，并建立了微生物的純種培育技術(shù)。在發(fā)酵工程的帶動(dòng)下，發(fā)酵業(yè)和酶制劑業(yè)大量涌現(xiàn)。由于遺傳學(xué)的建立及其 應(yīng)用，細(xì)胞學(xué)的理論被運(yùn)用于細(xì)胞工程。但這些發(fā)面的進(jìn)展不具備高技術(shù)的要素，被稱(chēng)為傳統(tǒng)生物技術(shù)。現(xiàn)代生物 20 60 DNA 重組技術(shù)的建立為標(biāo)志的。它說(shuō)明白DNA 是遺傳信息的攜帶者。提醒了DNA 編碼的DN

10、A 愿獲得所需產(chǎn)品。形成了具有劃時(shí)代意義和戰(zhàn)略?xún)r(jià)值的現(xiàn)代生物技術(shù)。關(guān)系：現(xiàn)代生物技術(shù)是從傳統(tǒng)生物技術(shù)中進(jìn)展而來(lái)的。在傳統(tǒng)細(xì)胞工程的根底上，運(yùn)用高技術(shù)實(shí)現(xiàn)了基因的改造現(xiàn)代生物技術(shù)。42、簡(jiǎn)述一下內(nèi)切酶和連接酶的作用機(jī)理內(nèi)切酶：類(lèi)型、：都有甲基化，依靠于 ATP，限制性?xún)?nèi)切酶活性。型酶在識(shí)別部位進(jìn)展切割很簡(jiǎn)潔從底物上解離。型酶是隨機(jī)切割，識(shí)別部位不等于切割部位，能長(zhǎng)生不同的末端。類(lèi)型的特點(diǎn)：識(shí)別部位不等于切割部位1在 DNA 雙鏈特異性識(shí)別部位進(jìn)展切割產(chǎn)生特定的DNA 2兩個(gè)單鏈部位在DNA 分子上不是彼此相對(duì)的3DNA 片段往往具有互補(bǔ)的單鏈延長(zhǎng)末端。連接酶：能夠催化雙鏈DNA 3-OH 5-P

11、 末端形成磷酸二脂鍵，使倆末端相連。用DNA連接酶連接具有互補(bǔ)的粘性末端片段用T4DNA連接酶將末平端片段連接段片段加上連接頭或人工合成的連桿使之成為粘性末端后用DNA 連接酶連接。43、比較基因工程中常用的DNA 聚合酶的催化酶活性有什么不同？DNA DNA 聚合酶特點(diǎn)：a、5-3b、5-3外切酶活性 c、5-3為且酶活性大腸桿菌DNAa聚合酶活性b5外切酶活性T4噬菌體DNAT7DNA聚合酶DNA 鏈比其他的長(zhǎng)耐熱DNA 聚合酶7080PCR 中DNA 聚合酶依靠于RNA 的DNA 聚合酶末端轉(zhuǎn)移DNA 聚合酶將平末端修飾為粘性末端T4 噬菌體多核苷酸聚合酶S1 核酸酶降解雙鏈DNA，單鏈

12、RNABa13 核酸酶具有高度的、特異的、脫氧核苷酸內(nèi)切酶活性堿性磷酸酶細(xì)菌堿性BE(DAP)去除 5端磷酸提高重組率44、基因工程常用的載體有哪些性質(zhì)？1能在宿主細(xì)胞中進(jìn)展獨(dú)立的穩(wěn)定的DNA 自我復(fù)制。2已于從寄主細(xì)胞中分別并進(jìn)展純化。3)在其 DNA 序列中具有適當(dāng)?shù)南拗菩詢(xún)?nèi)切酶位點(diǎn)。4具有能夠觀(guān)看的表形特征。45、簡(jiǎn)述質(zhì)粒、噬菌體、柯斯質(zhì)粒載體的特性？質(zhì)粒：1具有復(fù)制起點(diǎn)。2帶有可供選擇的標(biāo)記。3含假設(shè)干限制酶的帶一位點(diǎn)。4)分子量小。5拷貝數(shù)高。噬菌體：1具有雙鏈的復(fù)制型 DNA，可如質(zhì)粒一樣進(jìn)展遺傳操作。2對(duì)大腸桿菌有很強(qiáng)的感染力。3DNA 的整合是可逆的，原噬菌體可從宿主DNA中切

13、出，進(jìn)入溶菌性方式的生殖?？滤官|(zhì)粒載體：1)具有質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)和藥物抗性基因。2 噬菌體載體的COS 位點(diǎn)。3分子量小，但有高容量的克隆力量。4具有與質(zhì)粒同源徐磊的質(zhì)粒進(jìn)展重組的力量。46、簡(jiǎn)述外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞的途徑。1導(dǎo)入原核細(xì)胞受體的方法：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、三親本雜交。DNA 分子的生理狀態(tài)的細(xì)胞。轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體或真核病毒為載體構(gòu)建的重組分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法。轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)重組分子先進(jìn)展體外包裝，然后導(dǎo)入 受體細(xì)胞。三親本雜交：當(dāng)重組DNA 分子不能直接轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)化時(shí)，將含有DNA 分子的供體菌，含有被轉(zhuǎn)化的受體菌，含有關(guān)心質(zhì)粒的關(guān)心菌，三者共同培育。在關(guān)心菌的作用下，將供體菌導(dǎo)入到受體菌中。 2導(dǎo)

14、入真核細(xì)胞受體的方法; 用鋰鹽進(jìn)展處理，細(xì)胞能夠允很多元基因的進(jìn)入2導(dǎo)入植物細(xì)胞中主要承受致癌膿桿菌制導(dǎo)下的以T2 質(zhì)粒為載體構(gòu)成重組分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法3導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞：有物理、化學(xué)方法,，和生物方法。47、植物組織培育的或許步驟。5 個(gè)階段：預(yù)備階段 (1)選擇適宜的外植體，一般以幼嫩的組織器官為宜2除去病原菌及雜菌， 外植體自來(lái)水屢次漂洗消毒劑處理無(wú)菌水反復(fù)沖洗無(wú)菌濾紙吸干3配置適宜的培育基。由于物種的不同培育基也多種多樣。 誘導(dǎo)去分化階段：就是讓外植體去分化，使各細(xì)胞處于旺盛有絲分裂的分生狀態(tài)。繼代增值階段：愈傷組織長(zhǎng)出后經(jīng)過(guò)幾周的快速分裂，原有的培育基中的水分及養(yǎng)分物質(zhì)多以耗失，細(xì)胞

15、的有害代謝 物已在培育基中積存，因此必需進(jìn)展移植切割成數(shù)塊后繼代增值。生根發(fā)芽階段：通常愈傷組織要移植于含有適量細(xì)胞分裂素，沒(méi)有或僅有少量生長(zhǎng)素的分化培育基中，才能誘導(dǎo)胚狀 體的產(chǎn)生。移栽成活階段：生長(zhǎng)于人工照明玻璃瓶中小苗，要移栽到室外以利成長(zhǎng)。此時(shí)的幼苗還格外幼嫩，移栽應(yīng)在能保證適度的光、溫、濕條件下進(jìn)展。48、植物細(xì)胞大量培育承受什么方法？在培育過(guò)程中有哪些影響因素？ 承受懸浮細(xì)胞培育系統(tǒng)。1遺傳特性，細(xì)胞本身，內(nèi)因，影響植物細(xì)胞蛋白質(zhì)培育。2培育條件，外因光照：愈傷組織和細(xì)胞生長(zhǎng)不需要光照，但光照會(huì)影響次生代謝產(chǎn)物的合成和積聚。溫度： 細(xì)胞生長(zhǎng)速率與培育溫度親熱相關(guān)。攪拌與混合，通氣養(yǎng)

16、分鹽PH 值前體和調(diào)整因子。49、原生質(zhì)的融合過(guò)程和結(jié)果。12化學(xué)融合，在無(wú)菌條件下按比例混合雙親原生質(zhì)體滴加 PEG 溶液，搖勻，靜止滴加高鈣高PH 溶液，搖勻，靜止滴加原生質(zhì)體培育液洗滌數(shù)次離心獲得原生質(zhì)體細(xì)胞團(tuán)篩選鑒定再生雜合細(xì)胞3接通肯定的交變電場(chǎng)。原生質(zhì)體極化后順著電場(chǎng)排列成嚴(yán)密的珍寶串裝。此時(shí)，瞬間施以適當(dāng)強(qiáng)度的電脈沖，使原生 質(zhì)體質(zhì)膜被擊穿而發(fā)生融合。原核細(xì)胞和真菌原生質(zhì)體的融合分別培育帶遺傳標(biāo)志的雙親本菌株至指數(shù)生長(zhǎng)中期，此時(shí)細(xì)胞壁最簡(jiǎn)潔被降解。2(3)混合雙親本，參加適量溶菌 酶，作用 2030 分鐘。(4)高速離心后去上清液得原生質(zhì)體，用少量高滲培育基制成菌懸浮液。(5)參

17、加 10 貝體積的聚乙二醇促使原生質(zhì)體分散、融合。結(jié)果：在融合后的一個(gè)細(xì)胞內(nèi)有二核同時(shí)存在的異核體，但隨之進(jìn)展同期的核分裂，進(jìn)展核的融合，得到雜種細(xì)胞系。50、單倍體植株形單體弱，為何還要誘發(fā)單倍體植株？單倍體生物是指僅含一組染色體的個(gè)體。此類(lèi)植物與正常二倍體植物相比，他們：1可以縮短雜交育種時(shí)間，抑制雜種分別的困難2顯著提高選育效率3抑制遠(yuǎn)緣雜交不親和性，制造型 品種。51、人工種子包括哪幾局部？如何制備?人工種子的構(gòu)造：人工種皮、人工胚乳、胚狀體人工種皮：包裹在人工種皮最外層的膠質(zhì)化合物薄膜。人工胚乳：指人工配置的能夠保證胚狀體正常發(fā)育的養(yǎng)分物質(zhì)。胚狀體：是指由組織培育產(chǎn)生的具有胚芽，胚根

18、和類(lèi)似自然種子胚的構(gòu)造。人工種子的制備：1胚狀體的誘導(dǎo) 2包裹制種 3發(fā)芽試驗(yàn)52、發(fā)酵工程的進(jìn)展經(jīng)受了那幾個(gè)時(shí)期？自然發(fā)酵階段發(fā)酵技術(shù)的第一個(gè)轉(zhuǎn)折時(shí)期純培育技術(shù)其次個(gè)轉(zhuǎn)折時(shí)期通氣攪拌技術(shù)的建立，抗生素發(fā)酵開(kāi)頭。工業(yè)化，現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)的開(kāi)端。第三轉(zhuǎn)折時(shí)期代謝把握發(fā)酵技術(shù)，谷氨酸發(fā)酵菌的產(chǎn)生。第四個(gè)轉(zhuǎn)折時(shí)期基因工程技術(shù)53、列舉發(fā)酵工程的應(yīng)用范疇。微生物菌體的發(fā)酵，以微生物菌體細(xì)胞為產(chǎn)品酵母、菌體蛋白、疫苗微生物發(fā)酵微生物種類(lèi)多，產(chǎn)酶多，本錢(qián)低微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵產(chǎn)量最多利用微生物細(xì)胞的酶或酶系把一種化合物轉(zhuǎn)化成構(gòu)造相關(guān)的更具有價(jià)值的化合物的生化反響 。如抗生素的生物轉(zhuǎn)換現(xiàn)代生物技術(shù)中生物細(xì)胞的發(fā)酵

19、微生物處理廢水以及其他發(fā)面的發(fā)酵。54、發(fā)酵工程包括那幾個(gè)階段？菌種的選育上游技術(shù)、微生物發(fā)酵生產(chǎn)中游、產(chǎn)品下游加工55、發(fā)酵液預(yù)處理的方法和技術(shù)有哪些？Ca+/Fe+等，參加草酸或草酸鈉。去除雜蛋白質(zhì)，參加三氯乙酸鹽。去除有色雜質(zhì)，參加活性炭。技術(shù)：承受分散絮凝技術(shù)分散：在中性鹽作用下，由于雙電層排斥作用降低使膠體體系穩(wěn)定。絮凝：再某些高分子絮凝劑存在下，形成絮凝團(tuán)。物理作用收集液相，產(chǎn)品在液相中。提取胞內(nèi)產(chǎn)物先要對(duì)細(xì)胞進(jìn)展 裂開(kāi)。56、發(fā)酵工程下游加工的四個(gè)階段：發(fā)酵液預(yù)處理和固液分別提取精制成品加工發(fā)酵工程下游中提取和精巧的方法是什么？提?。撼恋矸?、萃取法、離子交換法、吸附法、超濾法。精巧：層析法，吸附層析，凝膠層析，離子交換層析、聚焦層析、疏水層析、親和層析57、在生產(chǎn)酶的過(guò)程中承受什么樣的方法提高酶產(chǎn)量？1添加誘導(dǎo)物2添加促進(jìn)劑3把握阻遏物的濃度：代謝終產(chǎn)物、分解代謝產(chǎn)物58、