海洋產(chǎn)電菌講解

1、海洋產(chǎn)電菌講解課件第1頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四研究海洋產(chǎn)電菌 Shewanella marisflavi EP1脫色特性的實驗 實驗原理1 實驗材料2 實驗方法 3 實驗結果與討論4第2頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四產(chǎn)電菌（嗜陽極細菌） 具有胞外電子代謝途徑，能將代謝產(chǎn)生的一部分電子傳遞給位于細胞外的最終電子受體。 功能：可用于微生物電池產(chǎn)電在染料的降解脫色等方面有某些優(yōu)勢 第3頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四Geobacter屬： 嚴格厭氧菌(主要以乙酸為碳源)Shewanella屬：兼性厭氧菌（碳源利用

2、比較廣）產(chǎn)電菌第4頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四 Shewanella廣泛分布于沉積物液固分界面等氧化還原電位變化比較頻繁的微型生境中。這類微生物易獲得和培養(yǎng)，并在偶氮染料廢水的解方面有重要的應用價值。 But，目前在國內此類微生物的菌種資源還比較少，來自于海洋的能產(chǎn)電的Shewanella菌更少。Shewanella第5頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四實驗材料菌種：海洋產(chǎn)電菌 Shewanella marisflavi EP1染料 : 單偶氮染料麗春紅2R 雙偶氮染料剛果紅 蒽醌類染料活性艷藍KN-R 三苯基甲烷染料孔雀綠 直接染料直接黃

3、（DY)培養(yǎng)基: 改進的2216E（1L):(蛋白胨5g ，酵母膏1g， 海水1000ml pH7.0） 脫色培養(yǎng)基（RM）第6頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四 實驗方法EP1對不同燃料的脫色能力初步確定 150ml血清瓶：裝入2216E培養(yǎng)基100ml， 接種2%過夜培養(yǎng)的EP1菌， 通入高純氮氣（除氧） 將其密封恒溫20度至瓶內顏色基本不變測始末染料特征吸收峰的吸光度，對比標準曲線 凈脫色染料質量第一步第7頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四 實驗方法EP1細胞干重測量方法： 離心管 105烘干，m （約2h） 取不同OD 濃度細菌培養(yǎng)液V

4、離心（8000r/min，10min） 棄上清液 去離子水淋洗菌體 離心（得沉淀） 測恒重，m 16002單位菌濁度單位體積的菌體細胞干重：（m m ）/（V*OD ）21600 每個樣品取3個平行樣，得OD600與菌體細胞干重的關系曲線第二步第8頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四 實驗方法脫色影響因素研究： 選擇溫度、pH、碳源以及NaCl作為考慮因素第三、四步脫色率的計算方法： 實驗組：去除菌體的反應液 對照組：未接菌的染料培養(yǎng)液 取實驗組中的上清液在200nm-800nm進行紫外-可見光譜掃描，根據(jù)XP2R最大吸收波長507nm處吸光度，按以下公式計算其脫色能力：

5、r（%）=(A0-At)/A0 *100%（A0、At指初始時刻和t時刻后上清液吸光度；r為脫色率）第9頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四實驗結果與討論EP1的廣譜脫色特征2nd3rd4thpH和溫度對脫色性能的影響 不同碳源對脫色性能的影響Nacl濃度對脫色性能的影響1st5th脫色機理分析第10頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四EP1的廣譜脫色特征雙偶染料類RB19MGXP2R925363蒽醌類三苯基甲烷類單偶氮類CR100156第11頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四pH和溫度對脫色性能的影響第12頁，共18頁，20

6、22年，5月20日，12點39分，星期四不同碳源對脫色性能的影響第13頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四Nacl濃度對脫色性能的影響第14頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四脫色機理分析 細菌脫色機理主要包括生物吸附和生物降解。當細菌以生物吸附的方式脫色時，吸附過程不同點的掃描光譜曲線將比例下降；當以生物降解的方式脫色，則只有一些特征峰有明顯變化第15頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四結論EP1對實驗中提到的幾種染料均有較好脫色能力。EP1能在較寬的PH(6-10),較寬的溫度范圍(15-40)，以及較高的鹽度(高達8%的N

7、acl),以降解脫色方式分解偶氮染料。產(chǎn)電菌EP1不能利用葡萄糖、蔗糖產(chǎn)電，但卻能利用它們降解脫色，說明脫色與產(chǎn)電在細胞外電子傳遞機制方面既有相似，又有一些差別。第16頁，共18頁，2022年，5月20日，12點39分，星期四意義染料生發(fā)展快，覆蓋廣，導致染料廢水排放量大，處理困難，危害嚴重，用常規(guī)方法很難進行污水處理，所以找到一種行之有效地途徑來處理染料污水十分重要。而本實驗研究了海洋產(chǎn)電菌 Shewanella marisflavi EP1關于幾種染料的脫色能力及脫色機制，得出其脫色所需PH、溫度，鹽度等范圍，不僅證明EP1有較好處理實際染料廢水的潛力，為利用EP1等進行染料污水處理的方法提供有利條件，