胺類藥物分析

1、分類按化學結(jié)構(gòu)可分為： *脂肪胺類：*芳胺類:氨基直接與苯環(huán)相連.包括酰胺類、對氨基苯甲酸酯類。*芳烴胺類:指氨基在烴基側(cè)鏈上，包括苯乙胺類 .芳氧丙醇胺類季銨鹽類磺酰胺類第一頁，共五十六頁。一、對氨基苯甲酸酯類具有對氨基苯甲酸酯基本結(jié)構(gòu)。具有游離的芳伯氨基。1結(jié)構(gòu)特點：第一節(jié) 芳胺類藥物的分析第二頁，共五十六頁。代表藥物有： 鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因第三頁，共五十六頁。2性質(zhì)：具有芳香第一胺結(jié)構(gòu)，發(fā)生重氮化或重氮化-偶合反應，或與芳醛縮和；生成希夫堿；易氧化變色的特性（鹽酸丁卡因除外）堿性具有脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子弱堿性（非水溶劑滴定），能與生物堿沉淀試劑發(fā)生反應。第四頁，共五十六頁。

2、 具有酯的結(jié)構(gòu)，容易水解。 紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。第五頁，共五十六頁。1.結(jié)構(gòu)特點： 苯胺?；苌铮０坊徫换?qū)ξ挥腥〈?。二、酰胺類第六頁，共五十六頁。代表藥物有：對乙酰氨基酚鹽酸利多卡因第七頁，共五十六頁。2性質(zhì)：利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解） 水解后可發(fā)生重氮化反應具有酰胺結(jié)構(gòu)共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應。第八頁，共五十六頁。 堿性利多卡因側(cè)鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應。 與FeCl3反應具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對 乙酰氨基酚

3、），可與FeCl3作用呈色。 紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。第九頁，共五十六頁。三、鑒別反應(一)、重氮化-偶合反應具有芳伯氨基藥物，如鹽酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應，再與堿性-萘酚偶合產(chǎn)生紅色偶氮化合物。具有潛在芳伯氨基，如對乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能發(fā)生類似反應。第十頁，共五十六頁。 鹽酸丁卡因（芳香第二胺結(jié)構(gòu)）與NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀。第十一頁，共五十六頁。(二)、三氯化鐵反應具有酚羥基（如對乙酰氨基酚），可 與FeCl3作用顯藍紫色。第十二頁，共五十六頁。(三)、與重金屬離子反應(1)與銅離子的反應(2)與鈷鹽反應第十三頁，共五

4、十六頁。(3)羥肟酸鐵的反應具有酰胺結(jié)構(gòu)，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟 酸與FeCl3反應生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即 變?yōu)榘底厣磷睾谏?。如鹽酸普魯卡因胺。具有酰胺結(jié)構(gòu)的藥物羥肟酸羥肟酸鐵第十四頁，共五十六頁。(四)、水解產(chǎn)物的反應（對氨基苯甲酸酯類）(1)苯佐卡因的鑒別試驗(4)與汞離子反應:鹽酸利多卡因+硝酸汞 黃色；對氨基苯甲酸酯顯紅色或橙黃色，以區(qū)別第十五頁，共五十六頁。(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗 第十六頁，共五十六頁。(五)紫外特征吸收光譜(六)紅外吸收光譜第十七頁，共五十六頁。四.特殊雜質(zhì)檢查(一)對乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查 對乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水

5、分、熾灼殘渣等一般雜質(zhì)外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)（對氯乙酰苯胺） 、對氨基酚等特殊雜質(zhì)。第十八頁，共五十六頁。對乙酰氨基酚以對硝基氯苯為原料合成。第十九頁，共五十六頁。(1)乙醇溶液的澄清度與顏色對乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質(zhì)存在。生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導致對乙酰氨基酚乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。 第二十頁，共五十六頁。（2）有關(guān)物質(zhì)（對氯乙酰苯胺） 副反應副副反應對硝基氯苯為原料合成對乙酰氨基酚時，如發(fā)生這樣的副反應就能夠引入對氯乙酰苯胺。副反應第二十一頁，共五十六頁。TLC法 樣品液

6、 對照液對氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml） 分離系統(tǒng)硅膠GF254氯仿-丙酮-甲苯（1352）第二十二頁，共五十六頁。 限量: 點樣量樣品液：200l 點于硅膠GF254薄層板上對照液：40l 判斷在254nm波長紫外燈下觀察，供試品與對照品主斑點Rf值相同的斑點比較,不得超過其大小與顏色。第二十三頁，共五十六頁。(3)對氨基酚制備中乙?；煌耆蛸A存不當發(fā)生水解都能引入對氨基酚檢查原理：對氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍色絡(luò)合物，與對照液比較判斷對氨基酚的限量。 第二十四頁，共五十六頁。檢查方法：限量：0.005%(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查第二十五頁，共五

7、十六頁。(二)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查方法：TLC 色譜條件：固定相：硅膠H 展開劑：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1:1:4） 顯色劑：對二甲氨基苯甲醛第二十六頁，共五十六頁。五、含量測定1亞硝酸鈉滴定法 原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進行測定。 第二十七頁，共五十六頁。第二十八頁，共五十六頁。 操作中的主要條件重氮化反應屬于分子反應滴定液NaNO2及反應生成的重氮 鹽都不穩(wěn)定反應速度受多種因素影響第二十九頁，共五十六頁。第一步反應速度比較慢，

8、而后兩步反應速度則比較快。反應速度與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系重氮化反應機制：第三十頁，共五十六頁。a. 當苯環(huán)上特別是氨基鄰位或?qū)ξ簧嫌形娀鶗r,如吸電基通過誘導效應使氨基 上電子云密度降低，從而堿 性降低，游離芳伯胺濃度增 大，所以反應速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應速度加快。第三十一頁，共五十六頁。b.當在苯環(huán)上有供電基時，則使反應速度降低。如 等。供電基能使氨基堿性增強，這樣氨 基成鹽的機會就增大，游離芳伯胺 的濃度就減小，所以反應速度就慢。第三十二頁，共五十六頁。反應速度與酸及酸度的關(guān)系a. 酸的種類重氮化反應在HBr、HCl、H2SO4中反應速度是 HBrHClH2SO4 K1比K2

9、大300倍 第三十三頁，共五十六頁。用HBr時，生成NOBr量大，反應速度快。但HBr價格貴，用鹽酸代替，為加快反應速度，需加入KBr（催化劑）。產(chǎn)生HBr與HNO2反應，可生成大 量NOBr，加快反應速度。第三十四頁，共五十六頁。b. 鹽酸的用量理論上: 芳胺鹽酸12mol 實際上: 芳胺鹽酸12.56mol原因：強酸性可加速反應重氮鹽在酸性下穩(wěn)定酸性下避免副反應發(fā)生。 第三十五頁，共五十六頁。如鹽酸量增加，則反應向左進行。如鹽酸濃度太大，反到會使游離芳伯氨的量減?。ǔ甥}），而影響重氮化反應速度，使反應速度減慢。如酸度不足則沒反應的芳胺與生成的重氮鹽產(chǎn)生偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果。第三十

10、六頁，共五十六頁。反應速度與滴定時溫度的關(guān)系一般，溫度升高反應速度加快。但重氮化反應所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結(jié)果。所以，重氮化反應應在低溫條件下進行。第三十七頁，共五十六頁。中國藥典規(guī)定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下 處進行滴定。在滴定時一邊攪拌一邊加入大部分標準溶液。到近終點時把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點。標準溶液在液面下加入，可避免NaNO2揮發(fā)。第三十八頁，共五十六頁。反應速度與滴定速度的關(guān)系重氮化反應屬分子反應，反應速度比較慢，滴定速度不能過快。尤其是近終點時，更要慢慢地滴定。近

11、終點時，游離芳伯胺濃度非常低，反應速度就更慢了。所以，每加一滴標準液后，要攪拌15分鐘后再判斷終點。第三十九頁，共五十六頁。 指示終點的方法重氮化滴定法指示終點的方法有: 永停法 電位法 外指示劑法 內(nèi)指示劑法我國藥典主要采用永停滴定法指示終點 第四十頁，共五十六頁。永停法原理：在被測溶液中插入兩個相同鉑電極，在兩個電極間加10200mV電壓，并且在回路中串聯(lián)一個靈敏的檢流計（10A9/格）。當用NaNO2滴定時，在終點前回路中沒有電流，電流計指針指零。當?shù)竭_滴定終點時，由于溶液中有微過量的NaNO2，使得在兩個電極上發(fā)生氧化還原反應第四十一頁，共五十六頁。 陽極:導致在兩電極間有電子流動，從

12、而回 路中有電流產(chǎn)生，使得電流計指針發(fā) 生偏轉(zhuǎn)并且不再返回零點。陰極：第四十二頁，共五十六頁。電位法在被測溶液中插入甘汞-鉑電極，到達滴定終點時，溶液中稍過量的NaNO2使電位產(chǎn)生突躍，從而指示終點。USP采用這個方法指示終點。第四十三頁，共五十六頁。外指示劑法淀粉-KI糊劑或試紙原理： 當達到滴定終點時，溶液中稍過量 的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2， I2遇淀粉顯藍色。第四十四頁，共五十六頁。使用方法：滴定時，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上劃，如果立即出現(xiàn)藍色即已到滴定終點。第四十五頁，共五十六頁。外指示劑法的缺點：由于滴定的溶液是強酸性，K

13、I遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達到終點時，就有可能呈現(xiàn)藍色，而造成誤判。由于經(jīng)常蘸取溶液進行試驗，可造成滴定液的損失而帶來誤差。方法難掌握。第四十六頁，共五十六頁。內(nèi)指示劑法內(nèi)指示劑法指示終點，操作簡便，但生成重氮鹽一般都帶有顏色，干擾指示劑顏色變化的觀察，尤其是顏色很深時，更是這樣。在重氮化滴定法中，內(nèi)指示劑法應用不是很廣泛。第四十七頁，共五十六頁。(二)非水溶液滴定法（鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因的含量測定(三)分光光度法（對乙酰氨基酚的測定，吸收系數(shù)法）(四) 高效液相色譜法（鹽酸普魯卡因注射液主成分及其降解產(chǎn)物的測定）第四十八頁，共五十六頁。第二節(jié) 苯乙胺類藥物分析一結(jié)構(gòu)特點具有烴

14、胺側(cè)鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數(shù)在苯環(huán)上有12個羥基取代基。如在苯環(huán)3、4位上有羥基取代，則為兒茶 酚胺類藥物。第四十九頁，共五十六頁。代表藥物 腎上腺素去甲腎上腺素第五十頁，共五十六頁。二性質(zhì)：1. 易被氧化鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，易被氧化呈色。3. 具有旋光性 具有手性碳原子，具有光學活性。2. 顯堿性 具有烴胺側(cè)鏈，顯弱堿性。能與酸成鹽。 第五十一頁，共五十六頁。三鑒別試驗 1.氧化反應區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。第五十二頁，共五十六頁。2、 三氯化鐵反應：酚羥基+Fe3+ 顯色（綠色）+ Fe3+ 堿性 紫色或紫紅色 例：腎上腺素在0.1mol/L鹽酸中與Fe3+顯翠綠色，加氨試液后，顯紫色或紫紅色3、與甲醛-硫酸反應: 生成醌式結(jié)構(gòu)顯色（紅色）4、紫外與紅外吸收光譜:5、與亞硝基鐵氰化鈉反應重酒石酸間羥胺（伯氨基）+亞硝基鐵氰化鈉試液+丙酮+碳酸氫鈉 加熱 顯紅紫色第五十三頁