實驗酵母細胞的固定化

1、關(guān)于實驗酵母細胞的固定化第1頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三一、 實驗?zāi)康暮鸵罅私夤潭ɑ毎脑?。掌握用海藻酸鈉制備固定化酵母細胞的方法。第2頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三二、 實驗原理工業(yè)上常用包埋法固定微生物細胞。根據(jù)包埋劑的特性，海藻酸鈉在水相中加熱溶解呈溶液狀。將細胞加入混勻，滴入氯化鈣溶液中，由于離子的轉(zhuǎn)移作用而凝固，形成凝膠顆粒，凝膠顆粒中的微小空格將細胞固定。海藻酸鈣凝固的顆粒能反復(fù)使用，細胞在空格中可新陳代謝（固定活細胞），也可以利用細胞中的酶進行酶促反應(yīng)（固定死細胞）。本實驗利用海藻酸鈣凝膠包埋酵母生長細胞。第3頁，共

2、10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三 固定化細胞材料2.5海藻酸鈉溶液20mL，加熱助溶，冷至45備用。 配制50mL 1.5CaCl2。 20毫升注射器，150ml燒杯和50ml燒杯各一個、三角瓶、玻璃棒、溫度計、鑷子三、 實驗材料和儀器第4頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三酵母細胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml 3638的溫水中活化1520分鐘，酵母細胞活化時體積會變大，活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細胞的活化液溢出容器外。四、 實驗方法和步驟第5頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三酵母細胞的固定化在冷卻至4

3、550左右海藻酸鈉溶液中，加入5mL預(yù)熱至35的酵母培養(yǎng)液，混合均勻。將混合液裝入注射器中，裝上大好針頭，以緩慢而穩(wěn)定的速度將其滴入1.5CaCl2溶液中，邊滴邊搖動三角瓶，即可制得直徑為3mm左右的凝膠珠。在CaCl2溶液中鈣化30min，即可使用。四、 實驗方法和步驟第6頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三 加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)一定要溶解徹底，在溶解過程中不斷攪拌，在降溫過程中不能低于45 ，否則會凝固。 五、注意事項第7頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三 海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細胞的質(zhì)量如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)目少，影響實驗效果。 五、注意事項第8頁，共10頁，2022年，5月20日，22點18分，星期三 剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，以便形 成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu) 檢驗?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。二是在實驗桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。 五、注意事項第9頁，共10頁，