《腫瘤病理學(xué)》講義課件

1、腫瘤病理學(xué)概論腫瘤病理學(xué)概論第一部分：腫瘤病理學(xué)總論一。腫瘤的定義、命名和分類二。腫瘤病理學(xué)的常用術(shù)語三。腫瘤的組織發(fā)生及基本形態(tài)特征四。腫瘤的良、惡性及對機(jī)體的影響五。腫瘤病理的診斷規(guī)范及注意事項六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素七?，F(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用第一部分：腫瘤病理學(xué)總論一。腫瘤的定義、命名和分類一、腫瘤的定義、分類和命名（1）（一） 腫瘤的定義： 是機(jī)體局部組織的細(xì)胞在各種內(nèi)在和外界的致瘤因素長期作用下，逐漸發(fā)生的過度而不協(xié)調(diào)生長所形成的異常新生物（neoplasm）；它是由正常細(xì)胞獲得了新的生物學(xué)遺傳特性轉(zhuǎn)化而來，并伴有分化和調(diào)控的異常；其誘發(fā)的刺激因素消除后，仍繼續(xù)其與機(jī)

2、體不相協(xié)調(diào)的過度生長。*真性腫瘤（Tumor):一、腫瘤的定義、分類和命名（1）（一） 腫瘤的定義： 一、腫瘤的定義、分類和命名（2）（二）腫瘤的分類依據(jù)： （1）生物學(xué)特性： 良性腫瘤 交界性腫瘤 惡性腫瘤 （2）組 織 來 源： 癌 肉瘤 （3）功 能： 按淋巴細(xì)胞亞群分類： B細(xì)胞性、 T細(xì)胞性（抑制/輔助）、內(nèi)分泌性腫瘤 （4）分 化程 度： 分化型、未分化型 一、腫瘤的定義、分類和命名（2）（二）腫瘤的分類依據(jù)：一、腫瘤的定義、分類和命名（3）（三）腫瘤的命名（1）：*良性腫瘤命名原則： XX 部位 + XX 組織 + 瘤 如：背部脂肪瘤，結(jié)腸腺瘤*惡性腫瘤(Cancer)命名原則：

3、 癌（Carcinoma): 來源于上皮組織的惡性腫瘤； 肉瘤 (Sarcoma): 來源于間葉組織的惡性腫瘤。*交界性腫瘤：如：卵巢交界性乳頭狀粘液性囊腺瘤一、腫瘤的定義、分類和命名（3）（三）腫瘤的命名（1）：*良一、腫瘤的定義、分類和命名（4）（三）腫瘤的命名（2）- 特殊命名：*以人名命名：如：Hodgkin 病; Kaposi 肉瘤; Bowen 病 *以細(xì)胞形態(tài)命名： 如：燕麥細(xì)胞癌，印戒細(xì)胞癌 等 *以解剖學(xué)名稱命名：如：胸腺瘤、松果體瘤、顱咽管瘤 *以分泌激素或功能命名：胰島素瘤、胃泌素瘤、APUD瘤*復(fù)合性命名：如：血管脂肪瘤、纖維腺瘤、骨軟骨瘤*以細(xì)胞嗜色特性命名：嗜銀細(xì)胞

4、癌、嗜鉻細(xì)胞癌 等一、腫瘤的定義、分類和命名（4）（三）腫瘤的命名（2）- 二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（1）* 瘤樣病變（Tumor-like lesion): 是一大組與腫瘤相似的增生性病變，其本質(zhì) 不是真性腫瘤，而是一種組織的畸形。如血管瘤、 錯構(gòu)瘤等。*有些組織的瘤樣病變可轉(zhuǎn)變成真性腫瘤，如色素 性絨毛結(jié)節(jié)性滑膜炎可變?yōu)榛と饬觯?應(yīng)視為癌前病變處理。 二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（1）* 瘤樣病變（Tumor-lik二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（2）* 錯構(gòu)瘤（Hamartoma): 為先天發(fā)育障礙所致的局部組織生長過多，結(jié)構(gòu) 錯亂的一類瘤樣病變。基本特征：1）介于畸形與真性腫瘤之間，不同程度兼有兩者

5、特征；2）瘤中各種組織雖增生過度，但細(xì)胞分化成熟，一般無異常分化表現(xiàn)，只是結(jié)構(gòu)紊亂；3）生長緩慢，到一定程度即停止生長，與機(jī)體生長相協(xié)調(diào)。*先天性全身性纖維瘤病、脂肪瘤病、 血管瘤、淋巴管瘤、色素痣等。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（2）* 錯構(gòu)瘤（Hamartoma)二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（3） 一般指組織細(xì)胞的增多，同時常伴有細(xì)胞的肥大，但無異形性。它是在某種刺激（如理化、生物的）因子作用下，引起組織與細(xì)胞的生理性或病理性變化。一旦刺激因子去除，可恢復(fù)到正常狀態(tài)。 *被覆上皮：上皮組織增厚，細(xì)胞增多。 *間葉組織：細(xì)胞增多，排列緊密等。* 增生(Hyperplasia):二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（3

6、） 一般指組織細(xì)胞的二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（4-1）* 不典型增生(Atypical hyperplasia;Dysplasia)： 屬于癌前病變。指上皮細(xì)胞的異型增生，即增生的細(xì)胞大小、形態(tài)、排列等方面均有異于其正常的成熟細(xì)胞，尤以細(xì)胞核的異形性最突出。其處于一種不穩(wěn)定狀態(tài)，在某種因素繼續(xù)作用下可轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤；如去除某些因素，又可恢復(fù)至正常狀態(tài)。（一）概念：二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（4-1）* 不典型增生(Atypic二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（4-2）* 不典型增生（Atypical hyperplasia;Dysplasia): (二）分類： 1）炎性：一般不發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，為DNA二倍體；

7、2）瘤性：可發(fā)生惡變，是真正的癌前病變，多為 DNA非整倍體。應(yīng)密切隨訪觀察。（三）分級：I 級：輕度，病變位于上皮全層的下 1/3；II 級：中度。病變位于上皮全層的 2/3；III 級：重度。異形上皮細(xì)胞幾乎累及全層。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（4-2）* 不典型增生（Atypic二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（5） * 原位癌（Carcinoma in situ): 又稱上皮內(nèi)癌、浸潤前癌、本位癌等。重度不典型增生的上皮細(xì)胞已累及上皮全層，但未侵犯基底膜。其是最早期的癌，是不可逆轉(zhuǎn)的。 *癌細(xì)胞核形不規(guī)則，核膜增厚，染色質(zhì)增粗， 核仁突出，核漿比例增大，有絲分裂增多。 *癌細(xì)胞 DNA 分析主要為增

8、殖倍體及較多 非整倍體。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（5） * 原位癌（Carcinoma二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（6）* 分化（Differentiation): 在腫瘤病理學(xué)中是指腫瘤細(xì)胞與其發(fā)生部位的成熟細(xì)胞的相似程度。腫瘤細(xì)胞分化越好，與其相應(yīng)的起源組織越近似；分化越差，成熟程度越低，則偏離正常越遠(yuǎn)；反映在形態(tài)學(xué)上與相應(yīng)的起源組織差異越大，腫瘤的惡性程度越高。 *分化與腫瘤的生長增殖潛能和 惡性程度成反比。 二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（6）* 分化（Differentia二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（7）* 間變(Anaplasia): 在腫瘤病理學(xué)中指細(xì)胞缺乏分化，與其起源的正常細(xì)胞差異很大，表現(xiàn)為顯

9、著的異形性、幼稚性和生長活躍性。間變?yōu)橐环N分化未成熟且同時伴有異常分化，即間變的腫瘤細(xì)胞不僅原始幼稚分化低，而且在分化過程中偏離常軌，發(fā)生了質(zhì)的變化。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（7）* 間變(Anaplasia):* 隱匿癌： 指原發(fā)癌非常小，臨床上未能發(fā)現(xiàn)，首先發(fā)現(xiàn)的是轉(zhuǎn)移性癌。* 如：甲狀腺隱匿性乳頭狀癌，直徑 1 CM，但 40%病例術(shù)前已有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（8）* 隱匿癌： 指原發(fā)癌非常小，臨床上未能發(fā)現(xiàn)二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（9）* 化生（Metaplasia): 通常指一種組織或細(xì)胞，在某些因素作用下，由一種組織轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N組織。一般認(rèn)為，組織的化生通常為器官或組

10、織的保護(hù)性反應(yīng)。 *子宮頸管柱狀上皮或腺上皮的鱗狀上皮化生； *支氣管假復(fù)層纖毛柱狀上皮的鱗狀上皮化生。 *胃粘膜上皮的腸上皮化生；二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（9）* 化生（Metaplasia)二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（10）* 早期癌： 指原位癌伴有早期浸潤（微灶浸潤），可伴有或不伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。*早期胃癌（EGC）：局限于粘膜層或粘膜下層的胃癌，伴或不伴有轉(zhuǎn)移。二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（10）* 早期癌： 指二、腫瘤病理學(xué)常用術(shù)語（11）* 微小癌(Micro-cancer)：指體積很小的癌。各種器官的微小癌的標(biāo)準(zhǔn)不一。*肝微小癌：單個癌結(jié)節(jié)或相鄰兩個癌結(jié)節(jié)的直徑 之和 &=3cm， 小 肝 癌

11、：直徑 5 cm 兩者臨床上多無癥狀，又稱亞臨床肝癌。 *胃微小癌：直徑 0.5 cm 小 胃 癌：直徑 3 LN（+）：5年生存率 35。8%六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（1）（1）淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：各種六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（2）（2）脈管內(nèi)瘤栓：與患者預(yù)后有關(guān)乳腺癌（826例）：淋巴管瘤栓（+）： 5年：51% 10年：30% 淋巴管瘤栓（-）： 5年：64% 10年：46.6%胃 癌（516例）：淋巴管瘤栓（+）： 5年：10.3% （-）： 5年：25.6% 血管瘤栓（+）：5年生存率 10% （-）：5年生存率 20.4%六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（2）（2）脈管內(nèi)瘤

12、栓：與患六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（3）（3）腫瘤浸潤范圍：癌瘤浸潤范圍對患者預(yù)后 是十分重要的。食道癌（271例）：癌局限于食道內(nèi)，5年生存率 40。4% 癌穿透肌層， 5年生存率 24。4%胃 癌（514例）：癌累及淺肌層，5年生存率 54。2% 癌累及深肌層，5年生存率 29。5% 癌累及漿膜層，5年生存率 17。8% 癌累及漿膜外，5年生存率 10。2%六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（3）（3）腫瘤浸潤范圍：癌六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（4） （4）腫瘤的生長方式：對患者預(yù)后有意義， 與腫瘤的浸潤生長能力密切相關(guān) 團(tuán)快狀生長：預(yù)后好于巢狀和彌漫性生長者； 巢 狀 生長：預(yù)

13、后介于團(tuán)快狀和彌漫性生長者之間； 彌漫性生長：預(yù)后最差六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（4） （4）腫瘤的生長方式六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（5）（5）腫瘤大?。簩︻A(yù)后有一定意義食管癌（524例）：1 - 3 cm: 5年生存率 27.4% 3.1-5 cm: 5年生存率 25.8% 5.1 cm: 5年生存率 24.6%胃 癌（967例）： 2 cm: 各組間5年生存率無差異肺 癌（200例）： 5 cm: 5年生存率 23.2% (p0.05)六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（5）（5）腫瘤大?。簩︻A(yù)后六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（6）（6）腫瘤的間質(zhì)反應(yīng)：反應(yīng)成分：（1）瘤床的

14、淋巴細(xì)胞（TIL）、漿細(xì)胞反應(yīng) （2）瘤床的結(jié)締組織反應(yīng)（纖維包裹）意 義：（1）淋巴細(xì)胞反應(yīng)程度與患者預(yù)后呈正相關(guān) （2）腫瘤纖維包裹明顯者預(yù)后好于無明顯包 裹者。六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（6）（6）腫瘤的間質(zhì)反應(yīng)：六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（7）（7）引流區(qū)淋巴結(jié)內(nèi)淋巴組織增生：竇組織細(xì)胞增生（SH）： 增生程度與預(yù)后有一定關(guān)系； 胃癌（371例): 5年：(-):1.7%；(+)：25.9%；(+)：26.3%；濾泡中心細(xì)胞增生（FH）：增生程度與預(yù)后有一定關(guān)系； 胃癌（371例）：5年：(-):10.5%; (+):21.6%; (+):37.5%副皮質(zhì)區(qū)增生（PH）：

15、與預(yù)后關(guān)系不明確。六。影響腫瘤患者預(yù)后的形態(tài)學(xué)因素（7）（7）引流區(qū)淋巴結(jié)內(nèi)淋七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用 （一）電鏡技術(shù) （Electronic microscopy) （二）免疫組織化學(xué) (Immunohistochemistry) （三）腫瘤細(xì)胞動力學(xué)及DNA分析 (Cytokinesis and DNA) （四）腫瘤的自動化診斷 (Autodiagnosis) （五）核仁組成區(qū)技術(shù) (nucleolar organizer regions) （六）原位雜交技術(shù) (Insitu hybridization)七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用 （一）電鏡技術(shù) （七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理

16、診斷中的應(yīng)用（3）FCM提供的腫瘤細(xì)胞生物學(xué)信息：1。顯示S期細(xì)胞在細(xì)胞周期中所占比值，直觀反映瘤細(xì) 胞的增殖活性。（G0+G1期、S期、G2+M期）2?？蓪⒛[瘤按DNA倍體類型分為2倍體和異倍體腫瘤： 2倍體（Diploid)腫瘤：所有良性病變均為2倍體 異倍體（Aneuploid)腫瘤：提示異常DNA干系存在。 大多數(shù)實體惡性腫瘤的DNA倍體為非整倍 體或多倍體。 * DNA倍體類型可反映腫瘤的惡性程度及生物學(xué)行為。七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（3）FCM提供的腫瘤細(xì)胞七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1）（一）電鏡技術(shù)：主要解決腫瘤的組織學(xué)類型及 組織發(fā)生等問題。（1）癌與肉瘤的

17、鑒別：（2）鱗癌與腺癌的鑒別：（3）小圓細(xì)胞腫瘤：（4）黑色素瘤：（5）神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤：（6）軟組織腫瘤：七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1）（一）電鏡技術(shù)：主要七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-1）（1）癌與肉瘤的鑒別： 癌 肉瘤（1）常有基底膜 有粘多糖物質(zhì)稱為外板（2）有連接復(fù)合體 無連接復(fù)合體（3）鱗癌有典型橋粒 絕不能有典型的橋粒 無張力微絲（一）電鏡技術(shù)在腫瘤病理學(xué)診斷中的應(yīng)用（1-1）七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-1）（1）癌與肉瘤的七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-2）（一）電鏡技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-2）：（2）鱗癌與腺癌的鑒別：鱗 癌 腺

18、癌有角質(zhì)小體 可見細(xì)胞內(nèi)腔（內(nèi)囊）或外腔（外囊）張力纖維 微絨毛較發(fā)達(dá)橋粒發(fā)育良好 有連接復(fù)合體（如緊密連接、中間連 接 、 橋粒） 胞漿內(nèi)常有粘液分泌顆粒七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-2）（一）電鏡技術(shù)在七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-3）（一）電鏡技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-3）：（3）小圓細(xì)胞腫瘤的鑒別：惡性淋巴瘤：神經(jīng)母細(xì)胞瘤： 細(xì)胞器少， 無細(xì)胞間連接尤文瘤： 未分化癌： 細(xì)胞器豐富，有連接，特別是有橋粒 及張力纖維等七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-3）（一）電鏡技術(shù)在七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-4）（一）電鏡技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-

19、4）： （4）黑色素瘤：胞漿內(nèi)可見黑色素小體或前黑色素小體。 （ 5）神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（APUD瘤）：胞漿內(nèi)見豐富的軸狀 神經(jīng)分泌顆粒（多為圓形，也可呈珠狀、 點狀、啞鈴狀或卵原形，直徑 120-180 nm; 中心為 致密的軸心，被膜所包裹） （6）軟組織腫瘤：橫紋肌肉瘤可見Z線； 平滑肌肉瘤可見肌原纖維和致密小體；七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（1-4）（一）電鏡技術(shù)在 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-1）（二）免疫組化在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-1）：*應(yīng)用范圍： 腫瘤抗原的定性與定位（診斷和鑒別診斷）。（1）常見腫瘤抗原標(biāo)志：上 皮 性 腫 瘤： 角蛋白、上皮細(xì)胞膜抗原（EM

20、A）惡 性 淋 巴 瘤： 白細(xì)胞共同抗原（LCA；CD系列） T系統(tǒng)：Leu1（T細(xì)胞共同抗原） Th: Leu3 (OKT4)； Ts: Leu2 (OKT8)神經(jīng)脊來源的腫瘤：S-100（黑色素瘤、神經(jīng)纖維瘤等）APUD瘤（類癌）： S-100；NSE（神經(jīng)特異性酰醇化酶） 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-1）（二）免疫組七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-2）（二）免疫組化在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-2）（2）常用的免疫組化方法： PAP 法：辣根過氧化物酶-抗辣根過氧化物酶 (Peroxidase-antiperoxidase) ABC 法：生物素-卵蛋白復(fù)合物 (Avid

21、in-biotin-peroxidase complex) S P 法：過氧化酶標(biāo)記的鏈酶卵白素 (Streptavidin/Peroxidase)七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-2）（二）免疫組化在七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-3）（二）免疫組化技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-3）：（3）ABC免疫組化染色的主要操作步驟： 1）脫蠟切片水化 2）0.3%H2O2 甲醇封閉內(nèi)源性過氧化物酶 20-30 分鐘；水洗； 3）抗原修復(fù)（微波爐、高溫高壓、蛋白酶等），入PBS； 4）正常血清作用 10-15 分鐘，棄掉血清； 5）特異性一抗孵育 60 分鐘，PBS洗 3 次（3/次）

22、； 6）生物素標(biāo)記的二抗作用 30-60 分鐘，PBS 洗 3次（3/次） 7）生物素-卵白素復(fù)合物（ABC）作用 30-60 分鐘，PBS 洗； 8）DAB/AEC 呈色（流水沖洗） 9）蘇木素/甲基綠復(fù)染，脫水、透明、封片。七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-3）（二）免疫組化技七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-4）（二）免疫組化技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-4）（4）免疫組化技術(shù)在腫瘤病理診斷中的實際應(yīng)用：目的 主要應(yīng)用于腫瘤的鑒別診斷（組織起源）、功能分類、 病因、發(fā)病機(jī)理研究和指導(dǎo)臨床治療等。1。腫瘤組織中相關(guān)抗原和癌基因編碼產(chǎn)物的測定：CEA、AFP、p212。腫瘤組織

23、中受體的測定：ER、PR、凝集素等；3。腫瘤細(xì)胞中病毒抗原的檢測：乙肝病毒表面抗原、EB病毒等；4。惡性淋巴瘤的分型和鑒別診斷：B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞亞類 5。內(nèi)分泌腫瘤的功能分類（確定激素類型）：HCG、促生長激素、 降鈣素、*嗜鉻顆粒素(chromograinin A) 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-4）（二）免疫組化技七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-5）（二）免疫組化在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-5）：（5）目前免疫組化工作中存在的問題：1）抗體的特異性較差：如：McAb-S100在部分腺癌和 鱗癌中也陽性；2）技術(shù)操作不嚴(yán)格： 抗體濃度、孵育時間、顯色時間、 陽性/陰

24、性對照不當(dāng)?shù)龋?）缺乏免疫病理的基本知識：結(jié)果的判定、分級誤差等。七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（2-5）（二）免疫組化在七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（3）（三）腫瘤的細(xì)胞動力學(xué)及DNA分析：（1）自顯影術(shù) ( Autoradiography)：（2）流式細(xì)胞術(shù) * (Flow cytometry)：（3）顯微分光光度計技術(shù) (Microspectro-cytometry)：七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（3）（三）腫瘤的細(xì)胞動力流式細(xì)胞技術(shù)（Flow Cytometry ，F(xiàn)CM) 通過激光照射，快速自動掃描熒光染色的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本（通常檢查2000個細(xì)胞），顯示被測細(xì)胞的DSNA

25、分布特點與細(xì)胞周期，借以揭示瘤細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)特點，對研究腫瘤的發(fā)生、腫瘤的診斷與預(yù)后的估計以及指導(dǎo)制定合理的治療方案，均具有較大的實用價值。 優(yōu)點：簡便易行，操作簡單，可快速出結(jié)果； 缺點：不能分析每個細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點。七?，F(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理學(xué)研究中的應(yīng)用（3）流式細(xì)胞技術(shù)（Flow Cytometry ，F(xiàn)CM) 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（4）（四）腫瘤的自動化診斷（Autodiagnosis):基本原理： 數(shù)學(xué)病理學(xué)或計量形態(tài)學(xué)。 以圖象分析手段，采用多因素的綜合分析方法，如采用計算機(jī)手段分析細(xì)胞的大小、形態(tài)直徑、周徑、染色質(zhì)及核分裂以及瘤組織的排列、厚度及基底膜的長度、完整程

26、度等，綜合分析瘤組織的特點，借以闡明瘤組織的良惡性及惡性程度。 優(yōu)點：較單純形態(tài)分析更為客觀全面。* 仍不能完全代替光鏡診斷，只能作為輔助診斷手段之一。七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（4）（四）腫瘤的自動化診 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（5-1）（五）核仁組成區(qū)技術(shù) (NOR): (Nucleolar Organizer Regions)基本原理：核仁組成區(qū)是細(xì)胞核中的核糖體DNA（rDNA)的環(huán)，具有核糖體RNA(rRNA)基因，銀染技術(shù)與rRNA相關(guān)的酸性蛋白相結(jié)合，這些蛋白將使DNA維持在一種伸展的狀態(tài)，或具有某些控制rRNA基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)功能。 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中

27、的應(yīng)用（5-1）（五）核仁組成 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（5-2）（五）核仁組成區(qū)技術(shù)（NORs):應(yīng)用范圍及意義：NORs: 其數(shù)目的增加，可能與細(xì)胞的增殖、染色體的倍體 數(shù)、轉(zhuǎn)錄活力的增加有關(guān)。AgNORs（Ag-stained NORs): 檢測結(jié)果可用來作為判斷細(xì)胞良惡性的標(biāo)準(zhǔn)之一。 組織細(xì)胞壞死性淋巴結(jié)炎：NORs: 1.42 + 0.10 非何杰金淋巴瘤：NORs: 6.08 + 1.36 ( p0.01 ) 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（5-2）（五）核仁組成七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（6-1）（六）原位分子雜交（In situ hybridization

28、)（1）: 基本原理： 原位分子雜交技術(shù)就是在細(xì)胞水平上的DNA-DNA或DNA-RNA雜交。將組織細(xì)胞 DNA 在切片上或平皿中與探針DNA同時變性解旋變?yōu)閱捂淒NA，當(dāng)溫度提高達(dá)復(fù)性溫度（100 C）時，探針DNA與細(xì)胞內(nèi)同源的DNA堿基配對形成新的雙鏈DNA，這樣含有同位素或生物素標(biāo)記的探針即可經(jīng)過放射自顯影或DAB底物顯色便可顯示出雜交顆粒。七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（6-1）（六）原位分子雜 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（6-2）（二）原位分子雜交(In situ hybridization）（2）： 應(yīng)用：（1）在細(xì)胞水平檢測多種結(jié)構(gòu)蛋白、功能酶、激素、受體的編碼基因

29、，mRNA的分布部位、復(fù)制狀態(tài)及基因編碼產(chǎn)物水平之間的相互關(guān)系等； （2）在細(xì)胞水平了解癌基因的位置、表達(dá)水平，及其同癌細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系； （3）在染色體水平可見出易位的染色體片段，也能檢出單拷貝的癌基因或整和的病毒基因。 七、現(xiàn)代技術(shù)在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用（6-2）（二）原位分第二部分：專 題1。惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理 的研究進(jìn)展 2。胃癌前病變的研究進(jìn)展3。腫瘤的早期診斷 專題第二部分：專 題1。惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理專題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展主要內(nèi)容：（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（二）惡性腫瘤的生物學(xué)特征（三）腫瘤細(xì)胞的侵襲（惡性浸潤）（四）惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的

30、研究進(jìn)展主要內(nèi)容：（一）腫瘤的生長、發(fā)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸：（1）腫瘤細(xì)胞群體的組成（2）人類腫瘤的增殖動力學(xué)特點（3）原發(fā)性及轉(zhuǎn)移性人類腫瘤的倍增時間（4）腫瘤細(xì)胞的丟失（凋亡）（5）惡性腫瘤的演變與轉(zhuǎn)歸專題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（1-1）：專題（1）腫瘤細(xì)胞群體的構(gòu)成： 1）周期細(xì)胞（G1 S G2 M） 干細(xì)胞：具無限增殖能力。過度細(xì)胞：有限增殖 2）G0期細(xì)胞（靜止期細(xì)胞） 3）終末分化細(xì)胞（不再進(jìn)行分裂而注定要死亡的） * 細(xì)胞群體動力學(xué)： 在空間

31、上占有一定位置，在形態(tài)、功能上類似的細(xì)胞群體的由增生、分化、停滯和死亡（丟失）的不斷運(yùn)動、變化的過程。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（1-2）（2）人類腫瘤的增殖動力學(xué)特點：腫瘤干細(xì)胞1 腫瘤細(xì)胞起源于不同分化階段的正常細(xì)胞的干細(xì)胞： 低分化干細(xì)胞-低分化腫瘤；高分化干細(xì)胞-高分化腫瘤。2 腫瘤干細(xì)胞的特征是多能性和具有自我維持的能力： 干細(xì)胞的增殖、分化結(jié)果是產(chǎn)生不同分化程度的功能性細(xì)胞。 腫瘤細(xì)胞群體中這種分化序列是細(xì)胞更新?lián)Q代持續(xù)生長的保證。3 腫瘤干細(xì)胞在腫瘤的增殖生長過程中處于核心位置： 干細(xì)胞

32、終末細(xì)胞是一個等級分化過程，各部分細(xì)胞量在逐漸 增加的同時，細(xì)胞分化程度增高，增殖能力逐步喪失。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（1-2）（2）人類腫瘤的增殖動力學(xué)特點：腫瘤干細(xì)胞4腫瘤干細(xì)胞的異質(zhì)性：同一腫瘤隨時間遷延，所含干細(xì)胞 克隆亞群也逐漸增多。共同存在的多個干細(xì)胞之間，不同轉(zhuǎn)移 灶之間以及同一瘤塊上不同部位之間細(xì)胞克隆性生長情況不同， 對抗癌藥物的反應(yīng)也不同，這種亞群之間生物學(xué)性質(zhì)上的差異 并不獨立，克隆間具有相互調(diào)節(jié)作用。5腫瘤干細(xì)胞在腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中起重要作用。6原癌基因c-my

33、c、c-myb、bcl-1等與腫瘤干細(xì)胞的發(fā)生、 發(fā)展有密切關(guān)系。DNA去甲基化作用與干細(xì)胞自我更新 密切相關(guān)。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（3）（3）原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性人類腫瘤的倍增時（舉例）：腫瘤類型 原發(fā)瘤倍增時 肺轉(zhuǎn)移瘤倍增時結(jié)直腸癌 632（天） 95（天）乳腺癌 96（天） 73（天）骨肉瘤 63（天） 30（天）*人類腫瘤的倍增時在不同病人（即使同一組織類型）的腫瘤之間變化很大；轉(zhuǎn)移瘤的倍增時較其原發(fā)瘤明顯縮短（轉(zhuǎn)移瘤生長速度增快）。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長

34、、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（4）腫瘤細(xì)胞的丟失：（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（4-1）： 在細(xì)胞增殖的三個參數(shù)中，細(xì)胞丟失是最難以估計的。以往認(rèn)為：增殖失控是引起惡性腫瘤生長的唯一原因。新近研究表明：細(xì)胞也有控制其何時死亡的內(nèi)部通路。在惡性腫瘤，細(xì)胞死亡的通路可能受到抑制，致使其壽命延長。目前有觀點認(rèn)為：癌癥可能是細(xì)胞應(yīng)死而未死亡的后果，即細(xì)胞凋亡受到抑制的后果。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（4）腫瘤細(xì)胞的丟失：（腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（4-2）細(xì)胞凋亡(Apoptosis)概念: 指細(xì)胞衰老、死亡的一種形式。由于凋亡按一

35、定程序進(jìn)行，故又稱為細(xì)胞程序性死亡（Programmed Cell Death, PCD). 在正常生理條件下，凋亡負(fù)責(zé)清除生理上不需要的細(xì)胞以維持組織的自我穩(wěn)定性。在細(xì)胞增殖活躍的腫瘤組織中，主要表現(xiàn)為凋亡抑制。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（一）腫瘤的生長、發(fā)展與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（4-3）凋亡的形態(tài)學(xué)改變：（1）凋亡細(xì)胞以分散的單個細(xì)胞出現(xiàn)。 （2）早期核染色質(zhì)致密和分離，形成花紋狀、細(xì)顆粒狀及團(tuán)塊狀分散到核膜處，胞漿濃縮。隨后，核離散并為雙層膜所包繞，通過出芽形成凋亡小體(Apoptostic body)。（3）凋亡小體很快被鄰近細(xì)胞吞噬

36、、降解。參與降解過程的細(xì)胞種類很多（如上皮細(xì)胞等）。凋亡小體從被吞噬致完全降解不過幾個小時。（4）凋亡與壞死同樣會使細(xì)胞死亡，但其形態(tài)變化和發(fā)生機(jī)理明顯不同，凋亡不引起周圍組織的炎癥反應(yīng)。專題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（4-4）：凋亡的分子生物學(xué)變化：凋亡細(xì)胞核DNA變化為核小體 (Nucleosome) 之間連接區(qū)的雙鏈DNA被切割成由 180-200堿基對組成的 DNA 片段?？捎铆傊悄z電泳檢測，表現(xiàn)為特征性的梯形條帶(Ladder).參與凋亡調(diào)控的基因：凋亡誘導(dǎo)基因：c-fos; c-m

37、yc. 凋亡抑制基因：bcl-2。 P53 基因：WT-p53：誘導(dǎo)或促進(jìn)凋亡； MT-p53：抑制凋亡、促進(jìn)增殖。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）專題（一）腫瘤的生長、發(fā)展與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（5-1）：（5）腫瘤的演變與轉(zhuǎn)歸 (Grandual progress)：1。致癌過程（啟動 、促進(jìn) 、 演進(jìn)多階段）： 專題 致癌因子 促癌因子正常細(xì)胞 細(xì)胞持續(xù)增生 腫 瘤 （癌前病變） 腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（5-2）（5）腫瘤的演變與轉(zhuǎn)歸（Gradual p

38、rogress)：2。癌變后的演變轉(zhuǎn)歸：癌細(xì)胞癌細(xì)胞分化成熟 惡性程度降低 腫瘤消退不同惡性程度亞群不同轉(zhuǎn)移能力亞群不 同 耐 藥 亞 群惡性程度增加專題侵襲、轉(zhuǎn)移宿主死亡腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理研究進(jìn)展（一）（一）腫瘤的生長、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸（腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（二）專題（二）惡性腫瘤的生物學(xué)特征（1-1）：（1）增殖與分化調(diào)控失調(diào)：原癌基因在正常情況下對細(xì)胞的生長、發(fā)育和分化起重要的作用。各基因產(chǎn)物之間協(xié)同作用形成一個有序的細(xì)胞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。當(dāng)原癌基因遭到外來因子干擾被激活而異常表達(dá)時，破壞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)平衡，使依賴外來生長因子刺激而增殖的細(xì)胞變?yōu)樽晕掖碳どL的細(xì)胞，分化程度停留在較原始的干細(xì)胞水平

39、。這些細(xì)胞惡變的特征可能都與在正常細(xì)胞生長中起重要作用的原癌基因發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能的改變有關(guān)。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（二）專題（二）惡性腫瘤的生物學(xué)特腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（二）專題（二）惡性腫瘤的生物學(xué)特征（1-2）：（2）侵襲性與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移：是細(xì)胞增殖與分化調(diào)控失調(diào) 所導(dǎo)致的后果，是惡性腫瘤最重要的生物學(xué)特征之一。侵襲：包括侵犯、占領(lǐng)和破壞的含義，指瘤細(xì)胞從原發(fā)瘤 直接向鄰近組織侵犯，占領(lǐng)及破壞鄰近宿主組織。轉(zhuǎn)移：指瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫離，沿淋巴道或血道到達(dá)遠(yuǎn)隔 適應(yīng)部位或器官，在那里形成轉(zhuǎn)移灶，即繼發(fā)瘤形 成，該過程稱為轉(zhuǎn)移。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（二）專題（二）惡性腫瘤的生物學(xué)特腫瘤

40、侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1986年 Liotta 提出的腫瘤侵襲（浸潤）三步假說第一步： 粘 附 瘤細(xì)胞由特異性細(xì)胞表面 受體介導(dǎo)粘附于基質(zhì) （LR-LN；FR-FN）第二步： 降解基質(zhì) 瘤細(xì)胞釋放多種水解酶 金屬蛋白酶抑制物減少第三步： 游 走 瘤細(xì)胞在降解的基質(zhì)中 運(yùn)動游走，完成浸潤專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1986年 Liotta 腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（三）腫瘤侵襲：（1）腫瘤侵襲的基本過程（2）腫瘤侵襲的方式與特點（3）腫瘤侵襲的機(jī)理和影響因素腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（三）腫瘤侵襲：（1）腫腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（1）侵襲的基本

41、過程（1-1）：1）腫瘤細(xì)胞與基底膜或其它細(xì)胞外間質(zhì)粘連；2）腫瘤細(xì)胞分泌組織蛋白酶抑制物明顯減少，使組織 中水解酶活性明顯增高，導(dǎo)致基底膜或其它細(xì)胞外 基質(zhì)降解；3）腫瘤細(xì)胞以阿米巴樣運(yùn)動突破基底膜進(jìn)入組織間隙；4）在基質(zhì)內(nèi)增殖，進(jìn)而侵襲局部淋巴管、小血管，或 落入體腔，繼而形成腫瘤轉(zhuǎn)移。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（1）侵襲的基本過程（1腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（1）腫瘤侵襲的基本過程（1-2）：* 按侵襲程度分為：1）浸潤前癌（原位癌）：癌細(xì)胞尚未突破基底膜。2）早期浸潤癌：癌細(xì)胞突破基底膜屏障，侵入上皮下 細(xì)胞外基質(zhì)。3）浸潤癌： 癌細(xì)胞釋放的蛋白酶破壞周圍組織，使

42、 癌細(xì)胞在降解了的基質(zhì)中移動，導(dǎo)致浸 潤性生長。腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（1）腫瘤侵襲的基本過程腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（2）腫瘤侵襲的方式與特點（2-1）：* 腫瘤的侵襲方式：1）局部直接蔓延2）淋巴管滲透3）血管滲透4）漿膜及粘膜面蔓延腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（2）腫瘤侵襲的方式與特腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素：1）腫瘤細(xì)胞的自主性增殖和細(xì)胞接觸性抑制喪失；2）腫瘤細(xì)胞表面負(fù)電荷密度增大；細(xì)胞連接發(fā)育缺陷；3）腫瘤細(xì)胞的粘附性異常（同質(zhì)型粘附、異質(zhì)型粘附）；4）細(xì)胞外基質(zhì)成分對腫瘤侵襲的作用（支架、限制）;5）腫瘤細(xì)

43、胞產(chǎn)生的降解酶類增加及組織金屬蛋白酶抑制 物明顯減少；細(xì)胞外基質(zhì)降解增加；6）腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動性（原位運(yùn)動、異位運(yùn)動）；7）腫瘤的血管形成腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）專題（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1。局部直接蔓延：瘤細(xì)胞從原發(fā)部位出發(fā)，持續(xù)地、 不間斷地沿著組織間隙、淋巴管、血管或神經(jīng)周圍 間隙侵入鄰近的組織或器官稱為直接蔓延。 2。淋巴管滲透：瘤細(xì)胞侵入局部淋巴管，沿淋巴管 連續(xù)生長蔓延，淋巴管滲透可導(dǎo)致腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移。 淋巴管癌?。耗[瘤在淋巴管內(nèi)連續(xù)性生長以致擴(kuò)張 的淋巴管形成白色條狀細(xì)網(wǎng)，稱之為淋巴管癌病。 尤見于晚期腫瘤淋巴回流受阻時。（三）腫瘤的侵襲方

44、式與特點（2-1）：專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1。局部直接蔓延：瘤細(xì)胞從原腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（三）腫瘤侵襲的方式與特點（2-2）3。血管滲透：腫瘤細(xì)胞侵入局部毛細(xì)血管或小靜脈， 沿血管壁生長蔓延，并可在血管內(nèi)形成瘤栓（瘤細(xì) 胞與血栓的混合物）。瘤栓脫落可導(dǎo)致腫瘤的血道 轉(zhuǎn)移。4。漿膜及粘膜面蔓延：指腫瘤沿漿膜或粘膜面連續(xù) 性生長蔓延的情況，如子宮頸癌向?qū)m腔蔓延。 （需注意與腫瘤的轉(zhuǎn)移和腫瘤多中心發(fā)生相區(qū)別）專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（三）腫瘤侵襲的方式與特點（腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-1）1）腫瘤細(xì)胞的自主性增殖與

45、接觸性抑制喪失腫瘤細(xì)胞自主性增殖的原因：1。自分泌機(jī)制：某些癌基因產(chǎn)物本身就是生長因子或其類似物，它 們可通過自分泌機(jī)制刺激自身細(xì)胞增殖（如癌基因 c-sis產(chǎn)物 P28 具有血小板生長因子PDGF樣活性）；2。某些癌基因產(chǎn)物可模擬生長因子受體的功能，即使在沒有生長因 子的刺激下，也可向細(xì)胞發(fā)出生長信號（如癌基因c-erbB的蛋白 產(chǎn)物c-erbB具有生長因子受體EGFR的功能）；3。某些癌基因產(chǎn)物可模擬細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)中的某些調(diào)節(jié)成分， 使細(xì)胞接收異常的生長信號（如ras基因產(chǎn)物 p21可能具有GTPase /ATPase活性，參與cAMP/cGMP水平的調(diào)節(jié)）。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研

46、究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1）腫瘤細(xì)胞自主性增殖與接觸性抑制喪失：密度接觸性抑制喪失：指正常細(xì)胞在增殖過程中，當(dāng)與周圍細(xì) 胞相接觸時就停止分裂的現(xiàn)象。腫瘤細(xì)胞雖彼此密切接觸但仍 能繼續(xù)分裂增殖（自主性增殖）。運(yùn)動接觸性抑制喪失：指正常細(xì)胞（如纖維母細(xì)胞）具有運(yùn)動 能力，當(dāng)其與其它細(xì)胞接觸時即停止運(yùn)動的現(xiàn)象。 腫瘤細(xì)胞在 與周圍其它細(xì)胞接觸時仍保持運(yùn)動能力，繼續(xù)游走、遷移。* 接觸性抑制喪失與瘤細(xì)胞內(nèi)cAMP含量和 微管、微絲等細(xì)胞骨架活動有關(guān)。（3）腫瘤侵襲的機(jī)理與影響因素（3-1）專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）1）腫瘤細(xì)胞自主性增殖與接觸

47、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-2）2）瘤細(xì)胞間排斥力增強(qiáng)、粘附力下降：1。惡性腫瘤細(xì)胞表面負(fù)電荷增加，使瘤細(xì)胞間排斥力增 強(qiáng)，負(fù)電荷增加可使瘤細(xì)胞與Ca+的結(jié)合能力下降；2。腫瘤細(xì)胞間的連接發(fā)育缺陷，使瘤細(xì)胞間粘附力下降 橋粒連接（粘和斑）：鱗癌細(xì)胞發(fā)育缺陷 緊密連接（閉合帶）：腺癌細(xì)胞發(fā)育缺陷 中間連接（粘著小帶）：腺癌細(xì)胞發(fā)育缺陷3。瘤細(xì)胞表面存在較多微絨毛和足突，影響細(xì)胞的彼此 接觸。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-3） 3）腫瘤細(xì)胞的粘附性：同質(zhì)性

48、粘附：指相同細(xì)胞之間的粘附，如瘤細(xì)胞與瘤細(xì)胞之間的 粘附。由細(xì)胞表面粘附分子介導(dǎo)。 *E-Cadherin CAM、DCC、CEA。異質(zhì)性粘附：指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞和宿主基質(zhì)細(xì)胞的粘附，包括 宿主細(xì)胞外基質(zhì)、在血管內(nèi)與白細(xì)胞、血小板和內(nèi) 皮細(xì)胞的粘附等，由細(xì)胞表面粘附分子介導(dǎo)與宿主 細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞等表面配體結(jié)合而發(fā)生粘附。 * Integrin, 67kDLN-R, CD44, Ig超家族專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤的侵襲機(jī)理及影響因素（3-3） E-Cadherin (E-鈣依賴粘附素）: 是 Cadherin

49、（鈣依賴粘附素）家族成員之一。它們是依賴細(xì)胞外Ca+的細(xì)胞粘附分子，介導(dǎo)Ca+依賴性的同質(zhì)細(xì)胞之間的粘附。目前認(rèn)為E-Cadeherin 屬于侵襲抑制分子，E-Cadherin 基因也可能為轉(zhuǎn)移抑制基因，其可能通過促進(jìn)同質(zhì)細(xì)胞之間的粘附，使瘤細(xì)胞之間保持密切接觸，難以脫離原發(fā)瘤進(jìn)入周圍正常組織和脈管系統(tǒng)。 * 癌細(xì)胞同質(zhì)型粘附力與侵襲轉(zhuǎn)移能力呈負(fù)相關(guān)，即侵襲轉(zhuǎn)移能力高者，其同質(zhì)型粘附力低（E-Cadherin 表達(dá)低調(diào)）。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤的侵襲機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-3）3）腫瘤細(xì)胞的粘附性： 67 kd

50、LN-R（67kd-層粘連蛋白受體） 是一種介導(dǎo)細(xì)胞與基底膜主要成分層粘連蛋白（LN）特異性結(jié)合的跨膜受體蛋白。其廣泛存在于正常上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、周圍神經(jīng)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及大部分腫瘤細(xì)胞表面。正常細(xì)胞表面的LN-R集中在細(xì)胞基底面，使細(xì)胞粘附于基底膜上。腫瘤細(xì)胞的LN-R則散布于整個細(xì)胞表面，數(shù)量增多，為腫瘤細(xì)胞的粘附和侵襲過程提供了分子基礎(chǔ)。67 kd LN-R表達(dá)水平與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-3）CD44（細(xì)胞表面粘附分子）：基因結(jié)構(gòu) CD44是分布極為廣泛

51、的細(xì)胞表面跨膜蛋白，主要參與細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-間質(zhì)之間的異質(zhì)性粘附過程。人CD44基因位于第11號染色體短臂上。完整基因組在染色體DNA上約跨越 50kb，有20個高度保守的外顯子和10個組成型外顯子。僅含有組成型外顯子的CD44轉(zhuǎn)錄子稱為標(biāo)準(zhǔn)型CD44（CD44s）；在基因組第5、6組成型外顯子之間有10個V區(qū)外顯子，其通過連續(xù)和跳躍方式拼接可產(chǎn)生多種CD44變異體。 含有V區(qū)外顯子的CD44轉(zhuǎn)錄子統(tǒng)稱為變異型CD44（ CD44v）。目前已發(fā)現(xiàn)10余種 CD44v。其中多數(shù)與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三

52、） 標(biāo)準(zhǔn)型CD44（CD44s）的生理功能：1 介導(dǎo)淋巴細(xì)胞與后毛細(xì)血管小靜脈的內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合，使淋巴 細(xì)胞穿過血管壁回到淋巴結(jié)（歸巢受體）；2 參與淋巴細(xì)胞的激活過程；3 能與細(xì)胞外基質(zhì)中的透明質(zhì)酸、纖粘蛋白(FN),膠原蛋白、層 粘蛋白(LN)結(jié)合，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的異質(zhì)型粘附過程;4 能與細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞偽足形成，與細(xì)胞的遷移 運(yùn)動有關(guān)。（3）腫瘤侵襲機(jī)理及影響因素（3-3）專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三） 標(biāo)準(zhǔn)型CD44（CD4腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（3-3） 變異型CD44（CD44v）與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移：1 CD44v蛋白在

53、腫瘤細(xì)胞植入淋巴結(jié)、定居及突發(fā)性快速生長過程 中起決定作用，mAb-CD44v可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移； 2 CD44v8-v10 在伴肝臟轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌組織中高頻率表達(dá)，而正常 結(jié)腸粘膜和正常肝臟組織僅有少量表達(dá)；3 CD44v8-v10 的 cDNA 在轉(zhuǎn)染小鼠纖維肉瘤細(xì)胞之后能使纖維 肉瘤細(xì)胞產(chǎn)生轉(zhuǎn)移能力，推測其與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)；4 CD44v6 表達(dá)與胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝臟轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，與胃癌 患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理與影響因素（4）4）細(xì)胞外基質(zhì)成分對腫瘤侵襲的作用

54、：1。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的主要組成成分 基底膜：層粘連蛋白（Laminin, LN)： 纖粘連蛋白（Fibronectin, FN)：基膜型 IV 型膠原 （Collagen IV）： 間質(zhì)纖維結(jié)締組織：基質(zhì)型 FN I、II、III型膠原2。細(xì)胞外基質(zhì)對腫瘤侵襲主要起支架作用，纖維結(jié)締 組織包裹對腫瘤侵襲也起一定的限制作用。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理與影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（5）5）細(xì)胞外基質(zhì)降解增加的原因：1。腫瘤細(xì)胞分泌降解酶類增加：主要相關(guān)酶類有 *基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloprotein

55、ase, MMP）： 間質(zhì)膠原酶、IV型膠原酶、基質(zhì)溶解素 纖維蛋白溶解酶原激活因子（PA）、 組織蛋白酶 D 等；2。組織金屬蛋白酶抑制物（IMMP）分泌減少：專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（6）6）腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動性：原位運(yùn)動（非位移運(yùn)動） 包括細(xì)胞分裂和伸出偽足， 瘤組織外層的瘤細(xì)胞向周圍微環(huán)境伸出細(xì)胞突起，如 葉狀、泡狀及絲狀偽足，瘤細(xì)胞利用偽足與宿主組織 與細(xì)胞牢固粘附，異位運(yùn)動 腫瘤細(xì)胞在細(xì)胞間隙中移動。影響因素 自泌移動因子（AMF）、分散因子（SF） 、 移動刺激因子（MSF） 等專

56、 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）7）腫瘤的血管生成：（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7）1 腫瘤血管生成的基本過程2 腫瘤的新生血管及其形態(tài)結(jié)構(gòu)3 腫瘤血管的機(jī)能4 腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)5 腫瘤血管生成與腫瘤的生長和侵襲轉(zhuǎn)移6 研究腫瘤血管的意義專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）7）腫瘤的血管生成：（3）腫 腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7-1）腫瘤血管生成是一個復(fù)雜的過程，主要包括以下步驟：1 血管內(nèi)皮基底膜溶解2 內(nèi)皮細(xì)胞向腫瘤組織遷移3 內(nèi)皮細(xì)胞在遷移前沿增殖4 內(nèi)皮細(xì)胞管道化、分支形成血

57、管環(huán)5 形成新的基底膜腫瘤血管生成過程是腫瘤細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞與其微環(huán)境 相互影響的結(jié)果。專題（7）腫瘤血管生成 1 腫瘤血管生成的基本過程 腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7-2）7）腫瘤的血管生成： 2 腫瘤新生血管的形態(tài)結(jié)構(gòu)血管來源 宿主組織（宿主血管）主要變化 血管生成因子直接或間接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，毛細(xì) 血管和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖，引起血管膨脹、內(nèi) 皮細(xì)胞變形、毛細(xì)血管芽向腫瘤組織生長，并利用內(nèi) 皮細(xì)胞產(chǎn)生的一種蛋白封閉新生血管開口端，使之成 為完整的管壯結(jié)構(gòu)。血管特點 內(nèi)皮細(xì)胞分化不成熟，血管形態(tài)異常，

58、分布紊亂。 血管基底膜不完整, 內(nèi)皮細(xì)胞間隙大, 管壁通透性高。生長速度 快； （病變性質(zhì)：無炎癥反應(yīng)）專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7-3）7）腫瘤的血管形成 3 腫瘤血管的機(jī)能特點：通透性明顯增加 腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接疏松并有明 顯損傷，內(nèi)皮細(xì)胞退化速度比正?？斓枚唷?腫瘤新生血管的生長常伴有火焰狀出血。反應(yīng)性明顯下降 腫瘤微血管對外界高溫、舒血管和縮血管 藥物的反應(yīng)均降低；供氧機(jī)能差 腫瘤組織中血管相當(dāng)豐富，其中10-40%由血管 內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，但腫瘤組織卻常因缺血、缺氧而壞死。 對

59、腫瘤血流量和腫瘤氧代謝的測定發(fā)現(xiàn)，腫瘤血管組 織學(xué)特點并無相應(yīng)的營養(yǎng)血流，腫瘤組織 對氧的利用率也很低。專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三） 7)腫瘤的血管生成 4 腫瘤血管生成的調(diào)節(jié) 腫瘤組織的血管生成是腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的一種病理失衡，從無血管狀態(tài)到微血管生成和網(wǎng)絡(luò)化可能是由于局部區(qū)域多種血管生成因子產(chǎn)生和積累，或者是由于血管生成因子由失活狀態(tài)轉(zhuǎn)化為活性狀態(tài)。 已證實有多種活性物質(zhì)參與調(diào)節(jié)血管生成，如：血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、血小板生長因子（PDGF）、纖維細(xì)胞生長因子（FGF）、上皮生長因子（EGF）、血管生成營養(yǎng)素、I

60、L-1、 IL-8 及一些小分子脂類、核苷酸及維生素等。 拮抗血管生成因子能有效抑制腫瘤組織的血管生成，從而抑制腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。(3)腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7-4）專 題腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三） 7)腫瘤的血管生成 腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)理的研究進(jìn)展（三）（3）腫瘤侵襲的機(jī)理及影響因素（7-4） 7）腫瘤的血管形成 4- 腫瘤血管生成因子1 血管內(nèi)皮生長因子 VEGF2 血小板生長因子 PDGF3 表皮細(xì)胞生長因子 EGF4 纖維母細(xì)胞生長因子 FGF 酸性 aFGF 堿性 bFGF 5 轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長因子 TGF *腫瘤細(xì)胞可釋放血管生成因子刺激血管內(nèi)皮生長和移行，誘導(dǎo) 血管生成。