免疫組化技術(shù)實(shí)用篇培訓(xùn)課件

1、免疫組化技術(shù)實(shí)用篇免疫組化技術(shù)實(shí)用篇 臨床病理診斷中常用的抗體簡介 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇2 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇2人體組織細(xì)胞分類上皮細(xì)胞：包括鱗狀上皮，腺上皮，尿路上皮。間葉組織：包括脂肪，肌肉，血管，纖維結(jié)締組織，骨和軟骨組織，間皮。神經(jīng)組織：神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)纖維。淋巴造血：淋巴細(xì)胞，粒細(xì)胞，漿細(xì)胞，單核細(xì)胞。內(nèi)分泌和神經(jīng)內(nèi)分泌組織：甲狀腺，腎上腺，垂體，胰腺的內(nèi)分泌腺，各器官的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞等其他：黑色素細(xì)胞，性腺免疫組化技術(shù)實(shí)用篇3人體組織細(xì)胞分類上皮細(xì)胞：包括鱗狀上皮，腺上皮，尿路上皮。免常用上皮性標(biāo)記物 細(xì)胞角蛋白（cytokeratin,CK）上皮膜抗原（epithelial

2、membrane antigen, EMA）癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）其他：villin，Moc-31，MUC（粘蛋白）系列等免疫組化技術(shù)實(shí)用篇4常用上皮性標(biāo)記物 細(xì)胞角蛋白（cytokeratin,CKCytokeratin（keratin或CK）上皮細(xì)胞的骨架形成蛋白（中間絲），維持上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能分為I型和II型(酸性和堿性或中性），編碼基因分別位于17q21.2和12q13.13，共54個(gè)基因表達(dá)方式與組織類型和細(xì)胞分化程度有關(guān)，具有高度的特異性蛋白具有不同的分子量和等電點(diǎn)細(xì)胞中keratin常成對出現(xiàn)（酸性和堿性配對出現(xiàn)）免疫組化技術(shù)實(shí)用

3、篇5Cytokeratin（keratin或CK）上皮細(xì)胞的骨 根據(jù)氨基酸序列，將Keratin按分子量和等電點(diǎn)進(jìn)行二維分類免疫組化技術(shù)實(shí)用篇6 根據(jù)氨基酸序列，將Keratin按分子量和等電點(diǎn)進(jìn)CK抗體廣譜的細(xì)胞角蛋白抗體特殊的細(xì)胞角蛋白抗體免疫組化技術(shù)實(shí)用篇7CK抗體廣譜的細(xì)胞角蛋白特殊的細(xì)胞角蛋白免疫組化技術(shù)實(shí)用篇7常用的CK抗體AE1/AE3:（CK pan）最常用，胞漿呈細(xì)絲狀陽性正常上皮細(xì)胞陽性表達(dá)，肝細(xì)胞陰性。在其他腫瘤，如小細(xì)胞癌，尿路上皮癌，室管膜瘤，胸腺瘤，間皮瘤，上皮樣肉瘤，上皮樣血管內(nèi)皮瘤，平滑肌肉瘤，滑膜肉瘤等常呈陽性表達(dá)免疫組化技術(shù)實(shí)用篇8常用的CK抗體AE1/AE

4、3:（CK pan）免疫組化技術(shù)實(shí)常用的CK抗體CK7和CK20：分子量為54KD,正常乳腺，肺，尿路上皮陽性表達(dá)，胃腸道，肝細(xì)胞，前列腺陰性表達(dá)主要用于乳腺癌，肺腺癌與胃腸道癌的診斷與鑒別診斷胰腺癌，膽管癌，卵巢和子宮內(nèi)膜腺癌，尿路上皮癌陽性表達(dá)。卵巢粘液性癌，前列腺癌，肝癌陰性表達(dá)與CK20和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價(jià)值。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇9常用的CK抗體CK7和CK20：免疫組化技術(shù)實(shí)用篇9常用的CK抗體CK7和CK20：分子量46KD，正常胃腸道，尿路上皮，Merkel細(xì)胞陽性表達(dá)，肝細(xì)胞，乳腺，肺陰性表達(dá)主要用于胃腸道腺癌，卵巢粘液性癌，Merkel細(xì)胞癌的診斷鱗癌，甲狀

5、腺腫瘤，胸腺瘤陰性表達(dá)膽道和胰管的腺癌，小腸類癌，前列腺和間皮陽性表達(dá)與CK7和其他抗體合用對判斷腺癌的來源具有重要價(jià)值。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇10常用的CK抗體CK7和CK20：免疫組化技術(shù)實(shí)用篇10常用的CK抗體CK5/CK6：分子量為58KD和56KD的角蛋白，存在于鱗狀上皮、導(dǎo)管上皮的基底細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞和間皮細(xì)胞，腺上皮不表達(dá)用于鱗癌和腺癌別，間皮瘤和腺癌的鑒別導(dǎo)管上皮良惡性增生的鑒別免疫組化技術(shù)實(shí)用篇11常用的CK抗體CK5/CK6：免疫組化技術(shù)實(shí)用篇1134BE12（CKH）: 高分子量細(xì)胞角蛋白，前列腺基底細(xì)胞標(biāo)記，用于前列腺癌的診斷。CK19: 40KD的角蛋白，在單層上皮和間皮

6、中表達(dá)，在肝細(xì)胞不表達(dá)，用于鑒別肝細(xì)胞癌和膽管細(xì)胞癌；甲狀腺腫瘤中，甲狀腺乳頭狀癌常陽性表達(dá)，良性和其他癌很少表達(dá)。CK14：50KD的角蛋白，在復(fù)層上皮表達(dá)，是鱗狀上皮的主要標(biāo)記物。常用的CK抗體免疫組化技術(shù)實(shí)用篇1234BE12（CKH）: 高分子量細(xì)胞角蛋白，前列腺基底細(xì)胞 間葉組織的標(biāo)記物 波形蛋白（vimentin， VIM）肌組織標(biāo)記物：Desmin（結(jié)蛋白）, actin（肌動(dòng)蛋白）, myogenin（肌漿蛋白），MyoD1（肌調(diào)節(jié)蛋白）等脈管標(biāo)記：血管內(nèi)內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物：CD34,CD31,淋巴管D2-40組織細(xì)胞的標(biāo)記物：CD68, CD163,等間皮細(xì)胞的標(biāo)記物：calr

7、etinin，mesothelial等用于鑒別軟組織腫瘤的來源免疫組化技術(shù)實(shí)用篇13 間葉組織的標(biāo)記物 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇13淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記 淋巴造血組織，尤其淋巴細(xì)胞在其發(fā)育和分化過程中能形成許多分化性抗原，應(yīng)用這些分化性抗原的特異性單克隆抗體能區(qū)分出免疫表型不同的細(xì)胞系，而且還能區(qū)分出同一細(xì)胞系的不同亞型和不同分化階段的細(xì)胞群，因此可以利用此特性來診斷和分類惡性淋巴瘤和白血病。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇14淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記 淋巴造血組織，尤其淋巴細(xì)胞在其發(fā)淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記白細(xì)胞共同抗原（leucocyte common antigen,LCA,CD45）免疫球蛋白(immunoglobul

8、in Ig)全B細(xì)胞標(biāo)記物:CD20, CD79a, PAX5, Bob1等全T細(xì)胞標(biāo)記物：CD3, CD43, CD5, CD7,CD2等T淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)記物：CD4,CD8粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物:MPO, CD34,CD68等漿細(xì)胞標(biāo)記：CD38，CD138其他：CD30,TDT,CD15，CD56，ALK，MUM1免疫組化技術(shù)實(shí)用篇15淋巴造血系統(tǒng)的標(biāo)記白細(xì)胞共同抗原（leucocyte com神經(jīng)組織標(biāo)記物 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 (glial fibrillary acidic protein GFAP) S-lOO蛋白(S100 Protein) 神經(jīng)元特異性烯醇酶 (Neuro

9、n Specific Enolase，NSE)髓磷脂堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)免疫組化技術(shù)實(shí)用篇16神經(jīng)組織標(biāo)記物 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 (glial fibri神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)標(biāo)記物 NSE(Neuron Specific Enolase,神經(jīng)元特異性烯醇酶)CgA(chromogranin A 嗜鉻顆粒蛋白A)Syn(synaptophysin 突觸囊泡蛋白)CD56免疫組化技術(shù)實(shí)用篇17神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)標(biāo)記物 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇17器官或組織特異性抗原標(biāo)記物 前列腺標(biāo)記物： PSA， PSAP，PSMA，P504s甲狀腺標(biāo)記物：TG，CT，TTF-1甲狀旁腺：P

10、TH黑色素細(xì)胞標(biāo)記物：MB45，S100，MelanA肺腺癌的標(biāo)記物：TTF-1，SP-A和B， Napsin A肝細(xì)胞癌標(biāo)記物：Hep-1乳腺： Mammaglobio，GCDFP15結(jié)腸： CDX2，B-catenin宮頸癌：P16免疫組化技術(shù)實(shí)用篇18器官或組織特異性抗原標(biāo)記物 前列腺標(biāo)記物： PSA， PSA病原體的標(biāo)記 EBVHPVHBsAg 和HBCAgMCV 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇19病原體的標(biāo)記 EBV免疫組化技術(shù)實(shí)用篇19與腫瘤預(yù)后相關(guān)的標(biāo)記物Ki67：核陽性，與腫瘤增殖相關(guān)，細(xì)胞周期中除G0期細(xì)胞外，其余細(xì)胞均表達(dá)。腫瘤陽性細(xì)胞數(shù)越高，預(yù)后越差。P53：核陽性，腫瘤抑制基因，突

11、變型P53蛋白穩(wěn)定表達(dá)，P53蛋白陽性表明腫瘤預(yù)后差。nm23：胞漿陽性，抗轉(zhuǎn)移基因，其表達(dá)降低與腫瘤的高轉(zhuǎn)移能力，復(fù)發(fā)相關(guān)。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇20與腫瘤預(yù)后相關(guān)的標(biāo)記物Ki67：核陽性，與腫瘤增殖相關(guān)，細(xì)胞與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物Her-2ERCC1PRM1BRCA1作用機(jī)制抗凋亡，參與調(diào)節(jié)P13K/AK途徑和MAPK激活途徑過表達(dá)使停滯在G2/M期的損傷DNA迅速恢復(fù)DNA修復(fù)的限速酶，吉西他濱的結(jié)合位點(diǎn)高表達(dá)使細(xì)胞修復(fù)能力增強(qiáng)陽性部位胞膜胞核胞漿胞漿/核判斷標(biāo)準(zhǔn) +耐藥藥物環(huán)磷酰胺三苯氧胺氨甲喋呤順氯氨鉑吉西他濱/順鉑順鉑免疫組化技術(shù)實(shí)用篇21與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物Her-2ERC

12、C1PRM1BRC與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物MDR1GSTTSMDM2作用機(jī)制藥泵作用解毒作用解毒作用轉(zhuǎn)化作用陽性部位胞膜和漿胞漿胞漿胞漿判斷標(biāo)準(zhǔn) +10%耐藥藥物恩環(huán)類紫衫類長春花堿（新堿）順鉑恩環(huán)類氮芥環(huán)磷酰胺5-FU多藥耐藥免疫組化技術(shù)實(shí)用篇22與腫瘤多藥耐藥相關(guān)的標(biāo)記物MDR1GSTTSMDM2作用機(jī)與腫瘤靶向藥物有關(guān)的免疫標(biāo)記物作用靶點(diǎn)腫瘤類型Tratugumab(赫賽?。〩ER2乳腺癌和胃癌Cetuximab（艾比妥）EGFR結(jié)腸癌，非腺癌Bevacizumab（阿瓦斯?。￢EGF轉(zhuǎn)移性大腸癌，腎癌Lmatinib（格列衛(wèi)）C-Kit胃腸道間質(zhì)瘤，慢粒Rituximab（美羅華）C

13、D20淋巴瘤免疫組化技術(shù)實(shí)用篇23與腫瘤靶向藥物有關(guān)的免疫標(biāo)記物作用靶點(diǎn)腫瘤類型Tratugu免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用免疫組化技術(shù)實(shí)用篇24免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用免疫組化技術(shù)實(shí)用篇24免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用惡性腫瘤性質(zhì)?癌組織的起源?良性還是惡性?腫瘤是原位還是侵襲性?腫瘤分類?癌的預(yù)后（包括分期）決定治療的靶向其它方面 .免疫組化技術(shù)實(shí)用篇25免疫組織化學(xué)在外科病理診斷中的應(yīng)用惡性腫瘤性質(zhì)?免疫組化技術(shù)未分化惡性腫瘤的性質(zhì)?最佳首選的抗體組合方案：CK-pan（如MNF-116），或雞尾酒調(diào)制的CK抗體 （上皮性腫瘤）LCA（淋巴瘤）S100蛋白（惡性黑色素

14、瘤，雖然一些癌會(huì)陽性表達(dá)）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇26未分化惡性腫瘤的性質(zhì)?最佳首選的抗體組合方案：免疫組化技術(shù)實(shí)惡性腫瘤的性質(zhì)LCACytokeratinS100淋巴瘤+*-癌-+-/+惡性黑色素瘤-+肉瘤-（有時(shí) +）-/+ 一些淋巴瘤 LCA 陰性表達(dá), 尤其是間變性大細(xì)胞性淋巴瘤和淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇27惡性腫瘤的性質(zhì)LCACytokeratinS100淋巴瘤+*兒童小圓細(xì)胞腫瘤的性質(zhì)淋巴瘤/白血病: LCA+, CD99+/橫紋肌肉瘤: Desmin+, MyoD1+, myogenin+Ewing肉瘤/PNET: CD99+, Syn /+神經(jīng)母細(xì)胞瘤: CD99, S

15、yn+, NB84a+促結(jié)締組織生成性小細(xì)胞腫瘤: CK +, Desmin+, WT1+免疫組化技術(shù)實(shí)用篇28兒童小圓細(xì)胞腫瘤的性質(zhì)淋巴瘤/白血病: LCA+, CD99癌可能的起源較常見的臨床情況：淋巴結(jié)或其它部位不明起源的轉(zhuǎn)移癌卵巢腺癌，懷疑為胃腸道癌轉(zhuǎn)移膀胱腺癌，懷疑為侵犯/轉(zhuǎn)移的前列腺癌或結(jié)腸癌有結(jié)腸癌病史的患者肺部有一孤立性結(jié)節(jié)：結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移還是新的肺原發(fā)性腫瘤？免疫組化技術(shù)實(shí)用篇29癌可能的起源較常見的臨床情況：免疫組化技術(shù)實(shí)用篇29不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物甲狀腺：Thyroglobulin（在100% 濾泡和乳頭狀癌+）TTF-1 Calcitonin（在90

16、% 髓樣癌+）前列腺: PSA女性生殖道：CA125（黏液型常常陰性；間皮瘤和有時(shí)肺、乳腺及胰膽管腺癌會(huì)表達(dá)陽性）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇30不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物免疫組化技術(shù)實(shí)用不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物肺：TTF-1（80% 腺癌陽性）乳腺：BRST-2/GCDFP-15（50% 病例陽性；但涎腺和汗腺也會(huì)陽性）肝：HEP-1（90%陽性）腸：CDX-2 （100%一致性強(qiáng)陽性）膀胱：Uroplakin（50%陽性）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇31不明起源癌的免疫組織化學(xué)應(yīng)用器官特異性標(biāo)記物免疫組化技術(shù)實(shí)用應(yīng)用特殊的CK抗體：不明起源的腺癌CK7 和 CK20 都是

17、非器官特異性標(biāo)記物，但對腺癌的起源判斷十分有用 CK 7CK20免疫組化技術(shù)實(shí)用篇32應(yīng)用特殊的CK抗體：不明起源的腺癌CK7 和 CK20 都CK7+ CK20+- 女性生殖道黏液腺癌- 一些胃癌-胰腺癌-膽管癌CK7+ CK20 - 各種腺癌- 肺癌- 乳腺癌- 女性生殖道癌CK7 CK20+- 胃腸腺癌CK7 CK20 - 前列腺癌- 腎細(xì)胞癌- 肝細(xì)胞癌免疫組化技術(shù)實(shí)用篇33CK7+ CK20+CK7+ CK20 CK7 CK2舉例：CK7和CK20聯(lián)合應(yīng)用： 35歲女性，左頸淋巴結(jié)腫大，活檢提示為轉(zhuǎn)移性腺癌，CT掃描未發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶，免疫組化標(biāo)記顯示腫瘤細(xì)胞表達(dá)CK7（-），CK20(+

18、)，CDX2（+），提示結(jié)直腸來源，腸鏡檢查在橫結(jié)腸發(fā)現(xiàn)12mm的病灶，活檢證實(shí)為腺癌。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇34舉例：CK7和CK20聯(lián)合應(yīng)用：免疫組化技術(shù)實(shí)用篇34不明起源的鱗癌或鱗樣癌中的免疫組織化學(xué)應(yīng)用因?yàn)椴煌课坏镊[狀細(xì)胞或鱗狀細(xì)胞癌并不顯示其獨(dú)特的免疫表型，鑒別較困難CD5：陽性支持胸腺起源CK20：陽性提示為膀胱的移行細(xì)胞癌免疫組化技術(shù)實(shí)用篇35不明起源的鱗癌或鱗樣癌中的免疫組織化學(xué)應(yīng)用因?yàn)椴煌课坏镊[不明起源的小細(xì)胞癌中免疫組織化學(xué)的應(yīng)用CK20：Merkels 細(xì)胞癌陽性表達(dá)TTF-1：90% 肺小細(xì)胞癌陽性表達(dá)，但在肺外的小細(xì)胞癌也會(huì)陽性（40%）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇36不明起源

19、的小細(xì)胞癌中免疫組織化學(xué)的應(yīng)用CK20：Merke卵巢腺癌：原發(fā)還是腸起源?卵巢起源腸起源CK7+CK20 (但常會(huì)黏液腺癌陽性表達(dá))+CDX-2 (但黏液型可以陽性)+免疫組化技術(shù)實(shí)用篇37卵巢腺癌：原發(fā)還是腸起源?卵巢起源腸起源CK7+CK20膀胱活檢腺癌： 原發(fā)，前列腺還是結(jié)直腸起源?膀胱腺癌前列腺癌結(jié)直腸腺癌CK7+ (65-80%)CK20+ (50-85%)+PSA+CDX-2+ (80%)+-catenin (細(xì)胞核)+免疫組化技術(shù)實(shí)用篇38膀胱活檢腺癌： 原發(fā)，前列腺還是結(jié)直腸起源?膀胱腺癌前列腺肺腺癌：原發(fā)還是結(jié)直腸起源?肺起源結(jié)直腸起源CK7+CK20+TTF-1+CDX-

20、2+免疫組化技術(shù)實(shí)用篇39肺腺癌：原發(fā)還是結(jié)直腸起源?肺起源結(jié)直腸起源CK7+CK2腫瘤良惡性鑒別在以下一些情況形態(tài)學(xué)診斷困難：在活檢組織中擠壓變形的細(xì)胞是癌細(xì)胞還是正常的淋巴細(xì)胞?黏膜活檢中藏有癌細(xì)胞嗎?增殖的細(xì)胞是良性增生還是惡性腫瘤?免疫組化技術(shù)實(shí)用篇40腫瘤良惡性鑒別在以下一些情況形態(tài)學(xué)診斷困難：免疫組化技術(shù)實(shí)用人為擠壓的活檢標(biāo)本有些活檢（如支氣管活檢）顯示人為擠壓或燒灼（小細(xì)胞癌常見）：不能確認(rèn)失常的細(xì)胞是否為癌細(xì)胞若 CK 陽性的非正常上皮細(xì)胞存在于一定的部位（如間質(zhì)）或以某種組織結(jié)構(gòu)（如浸潤性條索）存在則可診斷為癌不需再次活檢就可作出診斷免疫組化技術(shù)實(shí)用篇41人為擠壓的活檢標(biāo)本有

21、些活檢（如支氣管活檢）顯示人為擠壓或燒灼鼻咽部活檢：有沒有癌?對部分鼻咽癌（NPC）病例診斷較難，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞被大量的淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞所掩蓋（淋巴上皮癌樣）CK-pan 染色: 仔細(xì)觀察異常的陽性表現(xiàn)，如在完整的黏膜組織中有不規(guī)則的島狀、帶狀或單個(gè)分散的陽性細(xì)胞（正常僅表面及隱窩上皮細(xì)胞CK+）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇42鼻咽部活檢：有沒有癌?對部分鼻咽癌（NPC）病例診斷較難，因胃活檢：是彌漫型癌?胃活檢可能有不易察覺的彌漫性癌；對印戒細(xì)胞癌和黏液細(xì)胞癌的鑒別可能困難CK-pan染色：存在于固有膜中異常部位（正常沒有CK+的細(xì)胞）和以異常結(jié)構(gòu)（單個(gè)或索狀細(xì)胞）存在的腫瘤細(xì)胞可被來辯認(rèn)出來免疫組化技

22、術(shù)實(shí)用篇43胃活檢：是彌漫型癌?胃活檢可能有不易察覺的彌漫性癌；對印戒細(xì)漿膜腔積液或活檢：異常細(xì)胞是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞?漿膜腔積液或活檢中的一些異常細(xì)胞很難確定是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞免疫組織化學(xué)的應(yīng)用：BerEP4 或 MOC-31：陽性傾向?yàn)榘㏕TF-1：肺癌表達(dá)陽性Calretinin：陽性傾向?yàn)殚g皮細(xì)胞免疫組化技術(shù)實(shí)用篇44漿膜腔積液或活檢：異常細(xì)胞是癌細(xì)胞還是反應(yīng)性間皮細(xì)胞?漿膜反應(yīng)性淋巴組織增生還是淋巴瘤?診斷一個(gè)淋巴瘤須符合以下條件：異常免疫結(jié)構(gòu)侵襲性/破壞性的依據(jù)異常的免疫表型免疫組化技術(shù)實(shí)用篇45反應(yīng)性淋巴組織增生還是淋巴瘤?診斷一個(gè)淋巴瘤須符合以下條件：正常免疫結(jié)構(gòu)

23、 （反應(yīng)性淋巴組織：淋巴結(jié)或結(jié)外）B 淋巴細(xì)胞(CD20+) 形成的結(jié)節(jié)T 淋巴細(xì)胞(CD3+)；僅孤立的小群細(xì)胞或小群 CD20+細(xì)胞免疫組化技術(shù)實(shí)用篇46正常免疫結(jié)構(gòu) （反應(yīng)性淋巴組織：淋巴結(jié)或結(jié)外）B 淋巴細(xì)胞表明 B 細(xì)胞淋巴瘤的異常免疫結(jié)構(gòu)B 淋巴細(xì)胞濾泡 （CD20+）彌漫成片CD20+ 的B淋巴細(xì)胞*異常免疫表型不適用于T細(xì)胞淋巴瘤,因?yàn)榉磻?yīng)性病變會(huì)有成片的T淋巴細(xì)胞免疫組化技術(shù)實(shí)用篇47表明 B 細(xì)胞淋巴瘤的異常免疫結(jié)構(gòu)B 淋巴細(xì)胞濾泡 （CD2異常的免疫表型：B 淋巴細(xì)胞免疫球蛋白限制性輕鏈正常不表達(dá)或只表達(dá)少數(shù)B細(xì)胞的標(biāo)記的異常表達(dá)CD5CD43Cyclin D1Bcl-2

24、 在生發(fā)中心細(xì)胞表達(dá)未成熟細(xì)胞標(biāo)記物（TdT）陽性表達(dá)屬異常免疫表型，須與 CD3染色結(jié)果比較相比較免疫組化技術(shù)實(shí)用篇48異常的免疫表型：B 淋巴細(xì)胞免疫球蛋白限制性輕鏈屬異常免疫表異常的免疫表型：T 淋巴細(xì)胞T細(xì)胞亞型的異常表達(dá)：CD4+ CD8+ 或 CD4 CD8 全T細(xì)胞標(biāo)記的丟失 CD2、CD3、CD5、CD7正常不表達(dá)或僅少數(shù)T細(xì)胞表達(dá)的標(biāo)記的表達(dá)： ALK、CD56、-T 細(xì)胞受體未成熟細(xì)胞標(biāo)記物（TdT）陽性表達(dá)免疫組化技術(shù)實(shí)用篇49異常的免疫表型：T 淋巴細(xì)胞T細(xì)胞亞型的異常表達(dá)：CD4+ 乳腺：導(dǎo)管增生或?qū)Ч茉话?導(dǎo)管增生與DCIS很難鑒別-這對病人的治療非常關(guān)鍵在芯針穿

25、刺中更加困難免疫組化方法：高分子量 CK（如 34E12）在良性病變強(qiáng)陽性表達(dá)，但在 DCIS 通常陰性ER 在良性病變中通常呈局灶性陽性表達(dá)，而在低度DCIS 呈彌漫強(qiáng)陽性表達(dá)，提示為克隆（腫瘤）性過程免疫組化技術(shù)實(shí)用篇50乳腺：導(dǎo)管增生或?qū)Ч茉话?導(dǎo)管增生與DCIS很難鑒別-原位癌或浸潤性癌?在腺管周圍有基底或肌上皮細(xì)胞的器官，此問題已能夠解決，如乳腺、前列腺、涎腺在原位病變中，仍然有完整的基底或肌上皮細(xì)胞圍繞，雖然有時(shí)拉長或稀疏了，而浸潤性病變周圍缺乏這些細(xì)胞免疫組化技術(shù)實(shí)用篇51原位癌或浸潤性癌?在腺管周圍有基底或肌上皮細(xì)胞的器官，此問題乳腺的原位癌或浸潤性癌?Actin、calpo

26、nin 或 p63能清晰地顯示乳腺肌上皮細(xì)胞硬化性腺病與小管癌的鑒別小葉癌化的導(dǎo)管內(nèi)癌/硬化性腺病還是真正的浸潤性癌?免疫組化技術(shù)實(shí)用篇52乳腺的原位癌或浸潤性癌?Actin、calponin 或 p前列腺原位癌還是浸潤性癌?34E12、CK14或 p63能清晰地顯示基底細(xì)胞PIN還是前列腺浸潤性癌? 擁擠或看上去不尋常的腺泡病灶：良性（如硬化性腺病或腺病）還是前列腺癌免疫組化技術(shù)實(shí)用篇53前列腺原位癌還是浸潤性癌?34E12、CK14或 p63能淋巴瘤的分類由于現(xiàn)代淋巴瘤分類需要免疫組織化學(xué)支持，因此應(yīng)該應(yīng)用免疫組化染色標(biāo)記 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇54淋巴瘤的分類由于現(xiàn)代淋巴瘤分類需要免疫組織化

27、學(xué)支持，因此應(yīng)該B祖細(xì)胞前B細(xì)胞未成熟的B細(xì)胞成熟的B細(xì)胞激活的 B 細(xì)胞漿細(xì)胞前體細(xì)胞; 非抗原依賴型初始 B細(xì)胞; 非抗原依賴型生發(fā)中心和標(biāo)志; 抗原依賴型TdTCD20, CD22CD19, PAX5CD79aCD10Bcl-6CD138細(xì)胞漿 CD22免疫組化技術(shù)實(shí)用篇55B祖細(xì)胞前B細(xì)胞未成熟的B細(xì)胞成熟的B細(xì)胞激活的 B 細(xì)胞淋巴瘤分類CD20 和 CD3 組合CD20+B細(xì)胞淋巴瘤;必要時(shí)增加其它標(biāo)記物染色CD3+T或NK細(xì)胞淋巴瘤;如需要可增加其它標(biāo)記物染色（如CD56, CD30）CD20- CD3-非淋巴造血系統(tǒng)腫瘤?漿細(xì)胞瘤?漿母細(xì)胞性淋巴瘤?T 細(xì)胞淋巴瘤?淋巴母細(xì)胞性

28、淋巴瘤?免疫組化技術(shù)實(shí)用篇56淋巴瘤分類CD20 和 CD3 組合CD20+B細(xì)胞淋巴瘤;內(nèi)分泌腫瘤的分類檢測激素產(chǎn)物胰島細(xì)胞瘤：分泌胰島素的腫瘤很少為惡性，而分泌胃泌素或胰高血糖素的腫瘤常為惡性垂體腺瘤：高泌乳素血癥是由泌乳素瘤（腫瘤細(xì)胞prolactin +）還是由于泌乳素抑制因子紊亂刺激泌乳素分泌的另一類腫瘤免疫組化技術(shù)實(shí)用篇57內(nèi)分泌腫瘤的分類檢測激素產(chǎn)物免疫組化技術(shù)實(shí)用篇57軟組織腫瘤的分類標(biāo)記物是有限的纖維組織細(xì)胞瘤沒有可靠的標(biāo)記物S100：神經(jīng)鞘膜腫瘤 (良性：彌漫；惡性：片狀或甚至陰性)EMA：神經(jīng)外周細(xì)胞瘤, 滑膜肉瘤Actin，desmin：肌和肌纖維母細(xì)胞腫瘤Cytoke

29、ratin：滑膜肉瘤、上皮樣肉瘤、橫紋肌樣瘤免疫組化技術(shù)實(shí)用篇58軟組織腫瘤的分類標(biāo)記物是有限的免疫組化技術(shù)實(shí)用篇58軟組織腫瘤的分類CD31：血管腫瘤CD34：血管腫瘤、孤立性纖維性腫瘤、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管周細(xì)胞瘤、梭形細(xì)胞脂肪瘤、上皮樣肉瘤CD99：Ewings肉瘤/PNETHMB45：血管周上皮樣細(xì)胞腫瘤重要的特異性標(biāo)記物，如血管平滑肌脂肪瘤、淋巴管肌瘤病、糖瘤免疫組化技術(shù)實(shí)用篇59軟組織腫瘤的分類CD31：血管腫瘤免疫組化技術(shù)實(shí)用篇59肝臟腫瘤的分類是肝細(xì)胞肝癌（HCC）還是上皮樣血管平滑肌脂肪瘤HCC最好的標(biāo)記物是HEP-1（陽性 90%）HMB-45標(biāo)記上皮樣血管平滑肌脂肪瘤

30、免疫組化技術(shù)實(shí)用篇60肝臟腫瘤的分類是肝細(xì)胞肝癌（HCC）還是上皮樣血管平滑肌脂肪性腺腫瘤的分類支持性索腫瘤診斷的幾種標(biāo)記物：InhibinCD99 Melan-A/MART-1 生殖細(xì)胞腫瘤標(biāo)記物：PLAPc-kit/CD117免疫組化技術(shù)實(shí)用篇61性腺腫瘤的分類支持性索腫瘤診斷的幾種標(biāo)記物：免疫組化技術(shù)實(shí)用胸膜起源的惡性腫瘤分類鑒別間皮瘤與腺癌非常困難支持間皮瘤診斷的標(biāo)記Calretinin高分子量CK（如CK5/6）WT1支持腺癌診斷的標(biāo)記BerEP4（盡管在間皮瘤中偶爾也有陽性表達(dá)）MOC-31TTF-1（肺源性腺癌）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇62胸膜起源的惡性腫瘤分類鑒別間皮瘤與腺癌非常困難

31、免疫組化技術(shù)實(shí)腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子激素受體，如 ER/PR+ 在乳腺癌中提示良好預(yù)后增殖標(biāo)記物（Ki67）是某些類型腫瘤的預(yù)后因子癌基因及抑癌基因產(chǎn)物，c-erbB2, Rb, p16, p21, p27, ALK1免疫組化技術(shù)實(shí)用篇63腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子激素受體，如 ER/PR+ 在乳腺癌腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子在某些淋巴瘤中，免疫組化標(biāo)記可以提供預(yù)后信息高Ki67表達(dá)與套細(xì)胞淋巴瘤的不良預(yù)后有關(guān)間變性大細(xì)胞淋巴瘤：ALK+者預(yù)后好于ALK-者免疫組化技術(shù)實(shí)用篇64腫瘤的預(yù)后判斷：預(yù)后因子在某些淋巴瘤中，免疫組化標(biāo)記可以提供原發(fā)性系統(tǒng)性 ALCL的總體生存率(Falini et a

32、l, 1999)0510年ALCL, ALK+100%50%ALCL, ALK-免疫組化技術(shù)實(shí)用篇65原發(fā)性系統(tǒng)性 ALCL的總體生存率(Falini et a腫瘤預(yù)后因素：病變范圍 由于有些腫瘤呈彌漫性生長方式而且細(xì)胞較小（與間質(zhì)細(xì)胞相似），因此很難確定其病變范圍，如彌漫性胃癌、乳腺小葉癌。CK-pan能夠顯示所有腫瘤細(xì)胞免疫組化技術(shù)實(shí)用篇66腫瘤預(yù)后因素：病變范圍 由于有些腫瘤呈彌漫性生腫瘤預(yù)后因素：病變范圍在腫瘤切除標(biāo)本中，由于切緣燒灼后的出現(xiàn)的假象，很難判斷切緣擠壓的細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞還是炎癥細(xì)胞，標(biāo)記CK-pan可以解決這一問題免疫組化技術(shù)實(shí)用篇67腫瘤預(yù)后因素：病變范圍在腫瘤切除標(biāo)本中

33、，由于切緣燒灼后的出現(xiàn)腫瘤預(yù)后因素：隱匿性轉(zhuǎn)移的分期淋巴結(jié)和骨髓微轉(zhuǎn)移通常提示預(yù)后差對形態(tài)學(xué)上陰性的前哨淋巴結(jié)，應(yīng)常規(guī)應(yīng)用免疫染色：乳腺癌使用 CK黑色素瘤使用 S100 或 HMB45前哨淋巴結(jié)陽性提示應(yīng)進(jìn)行淋巴結(jié)清掃免疫組化技術(shù)實(shí)用篇68腫瘤預(yù)后因素：隱匿性轉(zhuǎn)移的分期淋巴結(jié)和骨髓微轉(zhuǎn)移通常提示預(yù)后確定治療的靶分子針對腫瘤細(xì)胞已知畸變或特異性的生物學(xué)特征的靶向治療方法日益增多靶向治療費(fèi)用常常較高，所以判斷腫瘤是否會(huì)對治療有反應(yīng)是非常重要的需要明確是否有相關(guān)靶分子的表達(dá)免疫染色的可靠性和可重復(fù)性至關(guān)重要（陽性/陰性和染色強(qiáng)度）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇69確定治療的靶分子針對腫瘤細(xì)胞已知畸變或特異性的

34、生物學(xué)特征的靶確定治療的靶分子乳腺癌：激素受體（ER, PR）激素（如 Tamoxifen）用于乳腺癌治療已有相當(dāng)長的時(shí)間了ER/PR陽性表達(dá)的腫瘤比陰性更敏感免疫組化技術(shù)實(shí)用篇70確定治療的靶分子乳腺癌：激素受體（ER, PR）免疫組化技術(shù)確定治療的靶分子抗-CD20（Rituximab）：愈來愈多地用于 B 細(xì)胞淋巴瘤和結(jié)節(jié)性淋巴細(xì)胞為主型Hodgkins淋巴瘤的治療只有表達(dá) CD20有反應(yīng)治療后，殘余或復(fù)發(fā)的腫瘤會(huì)出現(xiàn) CD20 失表達(dá)（抗-CD20 不再有效）免疫組化技術(shù)實(shí)用篇71確定治療的靶分子抗-CD20（Rituximab）：愈來愈多確定治療的靶分子 抗c-erbB2（Herce

35、ptin, Trastuzumab）已在表達(dá)、尤其是強(qiáng)陽性表達(dá)c-erbB2 的乳腺癌病人有效。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇72確定治療的靶分子 抗c-erbB2（Hercep確定治療的靶分子STI-571（Gleevec, Imatinib），是酪胺酸激酶受體抑制劑，對胃腸間質(zhì)瘤治療有效顯然在進(jìn)行治療前須確證c-kit/CD117的陽性表達(dá)腫瘤學(xué)家常要求病理學(xué)家對各種肉瘤進(jìn)行 c-kit 染色，希望對陽性病例進(jìn)行 STI-571 治療免疫組化技術(shù)實(shí)用篇73確定治療的靶分子STI-571（Gleevec, Imati免疫組化技術(shù)實(shí)用篇培訓(xùn)課件證實(shí)診斷 有時(shí)根據(jù)形態(tài)學(xué)特征已確定或幾乎確定診斷，但因?yàn)椴∽兒?/p>

36、見或必需免疫組織化學(xué)證實(shí)時(shí)，要做一些有針對性、有限的免疫組化染色。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇75證實(shí)診斷 有時(shí)根據(jù)形態(tài)學(xué)特征已確定或幾乎確定診斷，但證實(shí)診斷某些病變的診斷可得以證實(shí):Rosai-Dorfman 疾?。⊿100 蛋白）郎格罕氏細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥（S100 蛋白, CD1a）胃腸道間質(zhì)瘤（c-kit/CD117）類癌（Syn/CgA）感染, 如 CMV, 皰疹, 肺孢子囊蟲, 弓形蟲免疫組化技術(shù)實(shí)用篇76證實(shí)診斷某些病變的診斷可得以證實(shí):免疫組化技術(shù)實(shí)用篇76病例1 女，36歲，臨床有輕度接觸性出血癥狀，宮頸活檢，外院懷疑低分化鱗形細(xì)胞癌免疫組化技術(shù)實(shí)用篇77病例1 免疫組化技術(shù)實(shí)用篇77

37、診斷：（宮頸活檢）：慢性宮頸炎伴淋巴濾泡形成，局灶性鱗狀上皮呈CIN改變，建議臨床隨訪。 免疫標(biāo)記：“異型細(xì)胞”表達(dá)CK(-), LCA(+), P16(-), Syn(-), CgA(-), CD56(-)。 免疫組化協(xié)助診斷，明確良惡性免疫組化技術(shù)實(shí)用篇78診斷：免疫組化協(xié)助診斷，明確良惡性免疫組化技術(shù)實(shí)用篇78病例2女，50歲，左乳腺腫塊，行腫塊切除。巨檢：帶皮組織一塊，大小8cm5.5cm3cm，皮下見一腫塊，最大徑4.5cm，灰紅色，質(zhì)中，邊界不清。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇79病例2女，50歲，左乳腺腫塊，行腫塊切除。免疫組化技術(shù)實(shí)用篇診斷： （左乳腫塊）：乳腺皮膚隆突性纖維肉瘤，最大徑4.5cm，腫瘤近靠外側(cè)切緣，標(biāo)本上切緣，下切緣，內(nèi)側(cè)切緣及基底切緣未見腫瘤組織殘存。 免疫組化：腫瘤細(xì)胞表達(dá)