自身抗體檢測(cè)及應(yīng)用推選課件

1、自身抗體的檢測(cè) 及應(yīng)用自身抗體的檢測(cè) 及應(yīng)用一、概述自身免疫耐受。自身免疫autoimmunity）自身抗體autoantibody或自身致敏淋巴細(xì)胞自身免疫性疾病一、概述自身免疫耐受。二、自身抗體的檢測(cè)（一抗核抗體 （antinuclear antibody，ANA） 泛指抗各種細(xì)胞核成分DNA，RNA，蛋白質(zhì)和酶的抗體。二、自身抗體的檢測(cè)（一抗核抗體 （antinuclea1、ANA的類型（1抗核蛋白抗體（2抗DNA抗體抗雙鏈DNA抗體抗dsDNA）抗單鏈DNA抗體抗ssDNA）。（3抗ENA抗體 可提取性核抗原extractable nuclear antigens，ENA）1、ANA的

2、類型（1抗核蛋白抗體2、ANA的檢測(cè)方法間接免疫熒光法用小鼠肝切片或印片作為細(xì)胞核基質(zhì)，還可用核質(zhì)豐富的培養(yǎng)細(xì)胞如Hep-2，作為抗原。用熒光顯微鏡觀察ANA熒光著染強(qiáng)度和免疫熒光圖形。稀釋待檢血清可檢測(cè)ANA效價(jià)。2、ANA的檢測(cè)方法間接免疫熒光法用小鼠肝切片或印片作為細(xì)幾乎僅出現(xiàn)在PSS進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病患者體內(nèi)，是PSS的特征抗體RF的檢測(cè)最常用IgG致敏的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比濁法，但只能檢測(cè)IgM類的RF。APLA包括一組自身抗體，如抗心磷脂抗體ACLA），抗磷脂酸抗體APAA和抗磷脂酰絲氨酸抗體等。分胞質(zhì)型cANCA和核周型pANCA）。常用間接免疫熒光分析檢測(cè)。是自身免疫

3、性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志性抗體?？剐牧字贵wanti-phospholipid antibody，APLA）最常見于多發(fā)性肌炎PM患者。自身抗體的檢測(cè) 及應(yīng)用幾乎僅出現(xiàn)在PSS進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病患者體內(nèi)，是PSS的特征抗體分胞質(zhì)型cANCA和核周型pANCA）。2、抗ENA抗體的主要類型及 臨床意義抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 （anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）可提取性核抗原extractable nuclear antigens，ENA）APLA包括一組自身抗體，如抗心磷脂抗體ACLA），抗磷脂酸抗體APAA和抗磷脂酰絲氨酸抗體等。3.常見的ANA圖形及

4、臨床意義均質(zhì)型homogeneous，H）幾乎僅出現(xiàn)在PSS進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病患者體內(nèi)，是PSS的斑點(diǎn)型speckled，S）斑點(diǎn)型speckled，S）核膜型membranous，M）核膜型membranous，M）核仁型nucheolar，N）核仁型nucheolar，N）4.抗dsDNA的檢測(cè)常用間接免疫熒光法檢測(cè)，常用的抗原基質(zhì)是馬疫錐蟲或綠蠅短膜蟲。4.抗dsDNA的檢測(cè)常用間接免疫熒光法檢測(cè)，常用的抗原基質(zhì)（二抗ENA抗體譜不同的自身免疫病可產(chǎn)生不同的抗ENA抗體。通過檢測(cè)抗ENA抗體的類型及其組合，可綜合診斷自身免疫病的類型。（二抗ENA抗體譜不同的自身免疫病可產(chǎn)生不同的抗ENA

5、抗體 1、檢測(cè)方法雙向免疫擴(kuò)散對(duì)流免疫電泳斑點(diǎn)酶免疫技術(shù)免疫印跡技術(shù) 1、檢測(cè)方法雙向免疫擴(kuò)散免疫印跡技術(shù)最常用）先將ENA混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區(qū)帶，然后把這些區(qū)帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維膜上，加入待檢血清，最后用酶標(biāo)抗體使相應(yīng)的抗原帶顯色免疫印跡技術(shù)最常用）先將ENA混合抗原作凝膠電泳，分離開不自身抗體檢測(cè)及應(yīng)用推選課件2、抗ENA抗體的主要類型及 臨床意義（1抗Sm抗體 抗Sm是SLE的特異性標(biāo)志之一2、抗ENA抗體的主要類型及 （2抗核RNP抗體抗nRNP抗體又稱抗U1RNP抗體。 抗U1RNP抗體是診斷混合性結(jié)締組織?。?MCTD的重要血清學(xué)依據(jù)，是MCTD的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。 （3抗S

6、SA/Ro和抗SSB/La 這兩種抗體是干燥綜合癥SS患者最常見的兩種自身抗體（3抗SSA/Ro和抗SSB/La（4抗J0 -1抗體 最常見于多發(fā)性肌炎PM患者。（4抗J0 -1抗體 （5抗Scl-70抗體 幾乎僅出現(xiàn)在PSS進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病患者體內(nèi)，是PSS的特征抗體（5抗Scl-70抗體 免疫印跡技術(shù)最常用）自身抗體的檢測(cè) 及應(yīng)用這兩種抗體是干燥綜合癥SS患者最常見的兩種自身抗體先將ENA混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區(qū)帶，然后把這些區(qū)帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維膜上，加入待檢血清，最后用酶標(biāo)抗體使相應(yīng)的抗原帶顯色抗心磷脂抗體anti-phospholipid antibody，APLA）幾乎僅出

7、現(xiàn)在PSS進(jìn)行性系統(tǒng)性硬皮病患者體內(nèi)，是PSS的特征抗體抗Sm是SLE的特異性標(biāo)志之一自身免疫autoimmunity）可提取性核抗原extractable nuclear antigens，ENA）（三類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）是自身免疫性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志性抗體。泛指抗各種細(xì)胞核成分DNA，RNA，蛋白質(zhì)和酶的抗體。（5抗Scl-70抗體與成年型重癥肌無力有關(guān)。（四其他自身抗體 1.抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 （anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）不同的自身免疫病可產(chǎn)生不同的抗ENA抗體。（三類風(fēng)濕因子（rheumatoi

8、d factor，RF）RF是以變性IgG為靶抗原的抗體，它能與人或動(dòng)物的變性IgG結(jié)合，而不與正常IgG結(jié)合，RF主要出現(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者。免疫印跡技術(shù)最常用）（三類風(fēng)濕因子（rheumato RF的檢測(cè)最常用IgG致敏的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比濁法，但只能檢測(cè)IgM類的RF。IgG類，IgA類和IgE類RF需ELISA等方法檢測(cè)。 RF的檢測(cè)最常用IgG致敏的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)，或速度散射比（四其他自身抗體 1.抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 （anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA） 以人中性粒細(xì)胞胞質(zhì)為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病有關(guān)。分胞質(zhì)

9、型cANCA和核周型pANCA）。可用ELISA或間接免疫熒光法測(cè)定。（四其他自身抗體 1.抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 （anine2.抗心磷脂抗體anti-phospholipid antibody，APLA）靶抗原是血漿中的磷脂結(jié)合蛋白。APLA包括一組自身抗體，如抗心磷脂抗體ACLA），抗磷脂酸抗體APAA和抗磷脂酰絲氨酸抗體等。2.抗心磷脂抗體anti-phospholipid ant3.抗平滑肌抗體anti-smooth muscle antibody，ASMA） 是自身免疫性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志性抗體。常用間接免疫熒光分析檢測(cè)。3.抗平滑肌抗體anti-smooth muscle an4.抗角蛋白抗體anti-keratin antibody，AKA）主要見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，對(duì)于早期診斷RA有重要意義?？捎瞄g接免疫熒光法檢測(cè)。但敏感性較低。與RF不平行。4.抗角蛋白抗體anti-keratin antibody5.抗乙酰膽堿受體抗體是重癥肌無力的標(biāo)志性自身抗體，對(duì)重癥肌無力的診斷有特異性