重金屬?gòu)U水處理實(shí)驗(yàn)材料及方法

1、重金屬?gòu)U水處理實(shí)驗(yàn)材料及方法試驗(yàn)中所用陶林為染因工徨值巨皿蝴宙山西農(nóng)料院葉倍物質(zhì)蜻究院創(chuàng)就芬 老師惠膀)，讀是韓彩云等以從用樹(shù)的洲A文庫(kù)中暴需的基因郛E I-UT為模極. 用FC?方法擴(kuò)增出MT基因225bp特異片，招其亞克隆入pfrluBsqiptl I站T戕體， 用限制性內(nèi)切醴Hsil I利llind 11【分別酶切顧組PBLi-esciPL|SK F質(zhì)一和原詼表花載 悻PENHa .然后將時(shí)基因片斑和表達(dá)我體PET留H十遇過(guò)1迎皿 連接前距 晉理向姓接用限舸性內(nèi)切酶FI網(wǎng)H 1神ind扣醇切熟PCW方法戒重建定重組表達(dá)頂粒.2JJ.2試削及2-1主妥試割衛(wèi)卻.觀潺及富應(yīng)產(chǎn)廠家lble 1

2、- i Eixperiu-rnml meiensk覘格生FT黛硝贛鉛(Phdh)沈陽(yáng)市?;決化I市新光氟化他舊m , SZ2HQ)分折蜿沈陽(yáng)W新光化工廠統(tǒng)域鋅(而*為, 7H10)天泮市火茂此學(xué)沽劑rr限公司研酸徑險(xiǎn)詁廠出涕天津市大帶學(xué)試刑有限奩司帝雌翅劇謳6 - 6HjO)分析蛆天可市K荏化保試-劑打陽(yáng)以切枝酸餉匚昭皿 5H20j山奴鑿虛址王化丁有照公司正鹿茹WgfNUOJ分析飩江蘇酒靠興山化學(xué)試齊廠就化怕(NaCI)分析純大津全匯A亞化學(xué)試劑布限公司弱化鈣(CaCl： 2H.0)分忻純天津金匯太帝.化學(xué)試劑有限公訶破岫Mg% HQ)分析純天泮布興焜化工有陽(yáng)公司氮一舌霉素(AHipicilK

3、n)分析純西恪丹吏德里奇(中國(guó)上海)有區(qū)公司F 邯需素(kanamyciq)分析純四輅丹嬰彼里奇(中國(guó)上海)仃限公詞EDTA_ 餉 (Na3EDTA-2IhO分析她仙胳瑪奧修牛窗(中國(guó)上海)有限公司異內(nèi)基0D .旋代毗哺半貌糖 1T ( IPT(j)分析純大連寶生物公司2.L1.3培養(yǎng)基(1液體培養(yǎng)基A 2-2基 OOOml.)Tabic 2-2MJS medium 100m L)成分規(guī)格用岸生產(chǎn)廠家NaCI分析純50 mM天津金匯太亞化學(xué)試劑有限公司KI (40分析純20 mM大津市人茂化學(xué)忒劑有限公司KCI分橋純ImM天津布大茂化學(xué)試劑有限公司MgClz分析純)n)M天律小大茂化學(xué)試劑有限

4、公司CaCh分析純0.1 mM天津市大茂化學(xué)試劑有隕公司MnC!2分析姓0.0S eM天律幣大茂化學(xué)試劑有隕公司HEPES(2拜乙星咚嘍乙磺 酸 ciha 心 ulfbnic生物試劑12.5 mM (P1I7.I)amrescoacid )水解餡2JH狙地酸生物試劑0.8%上海卒瑞住物料技有眼公司甘油生物試劑0.4%濟(jì)南林?；び邢薰揪S生案同生物試制0.0005%北京囂康源科技發(fā)展有限公司獲23 LB液體玲養(yǎng)基(10。也)Table 2*3 Liquid LB medium (lOOniL)成分規(guī)格用星生產(chǎn)廠家NeCl分析純1.0g天泮金匯太亞化學(xué)試劑有限公司生物試劑05 ?唐山綠仙生物神技

5、藥阪公司蛋白膊生物試劑l.Og上海市躍遂區(qū)療器械T PVX.DI1（2）固體培養(yǎng)基A 2-4 LB 回養(yǎng)基（1 OOnL ）Table 2-4 Mid LB incdiuni ( lOOnil.)成分視格生產(chǎn)廠家NaCl分折純1.0g天津金匯太亞化學(xué)試劑有限公司生物試劑05 g唐山綠仙牛伽；技有限公司很白藤生物試劑1.0g上海市，進(jìn)醫(yī)疔攜械一廠PYX-DHS瓊脂粉生物試劑1.5.2.0 g鄭州仁誠(chéng)化一戶出ff隈公司2-1.1-4溶潦的配制指準(zhǔn)貯備溶液的配制按下列方法制備的標(biāo)推貯備溶液,貯存于聚乙墉瓶中，臨使用禰將標(biāo)準(zhǔn)溶液的原 液置于合適容枳的量瓶?jī)?nèi)，按精確的件積1/10、1/100、1/100

6、0稀釋，即制得稀標(biāo)準(zhǔn)溶 液。汞（1札溶液含有Img Hg）稱取L62g硝酸汞（Hgg,）,加（M硝酸溶液（1+9）溶解,移入lOOOmLft瓶中, 稀樣至刻度，混勻.鈕（mL溶液含有1噸Pb）稱取1.6傀硝酸鉛何佃山），加KM硝酸溶液39）溶解,移入lOOOmL t瓶中,稀釋至刻度，混句。偏（imL溶液含有ImM Cd）稱取2.03，兼（CdCh - 5/2H10）,溶于札 移入lOOOroL址瓶牝 稀釋至刻度, 混勻.鋅（岫溶液含有l(wèi)ing Zn）稱取4.40g硫酸鋅（ZnS07出0）,洛于水,移入lOOOmL量曲中.稀樣至刻度.混 勻。鉉（帆溶液含有hug血）禰取3.0麾硫酸S（MnSOi

7、 -H,G）,溶于水，移入1000M量瓶中，稀秤至刻度.混勻.候（imL溶液含有Img Ni）禰取4_48g硫酸襟（NiS0,6H舟）,溶水，移入lOOOmL量瓶中.稀樣至刻度,混 勻.惆（帆溶液含有腿Cu）耕取3.93g硫酸銅（CuSO,5偵）溶于水，移入1000ml瓶中，稀釋至刻度，混勻-鈉（帆溶液舍有Img Na稱2.54g于I05P干燥2h的氮化鈉（NaCl）,溶于水，移入】OOOnL fitU中，稀釋 至刻座，混勻.鈣（】mL溶液含有Img i稱取3,67g級(jí)化鈣（CaCb-211,0）,溶于水，移入1 OOOnL量瓶中“稀釋至刻度.混 勻。鎂（】mL溶液含有Img Mg）稱取 戚1

8、4g硫酸鎂地SO,加0）,浴于水，移入lOOOmL S瓶中,稀釋至刻度.混 勻。（2）其他試劑的配制a.敏節(jié)音毒素（AropiciLlin）姐分濃度：100 rag/mL配苴垃；Z mL配制方法；L秤取200碾的Ampicillin置于2 mlL的小型料離心管中，加1此無(wú)茵水，充分混合溶M之后定容至2 mL.用0. 22 p m濾腰過(guò)濾除菌，小價(jià)分裝口 ml,/管）后.置于-201保存試驗(yàn)中使用濃度為50U g/ml-卡那寄素（kanaraycin）組分濃度：100 mg/ml.配置量；2 mL配制方法：秤取200 mg的kanamycin置于2nL的小塑料離心管中,：如mL無(wú)菌水，充分混合溶

9、解之后定容至加用Q22M濾膜沮濾除調(diào)，小價(jià)分裝（ImL/管）后，首于-2（TC保存a試驗(yàn)中使用濃度為50y/mL異丙基-6-D晚代此喃半乳糖昔（1PTG）組分濃度:24 mgZmL配曾最：2 mL配制方法；秤職48 %的1PTG置于2d.的小塑料離心管中.加&L無(wú)菌水，充分混合溶解之后定容至2m用0.22s濾膜過(guò)濾除菌,小份分裝（】ml./管）后,置于-2（TC保存.EDTA溶液組分濃度:0. 5M配置最:100 mL配制方法；m 6比的 Na;EDTA 2H0 置于 10（）燒杯中.加入80 mL的去離子水，置于秘力攪擇器I：充分?jǐn)嚢?用NaOH調(diào)節(jié)pH值至8.0 （約2gNaOH）.當(dāng)pH

10、接近8. 0時(shí)，EDTA方可完全滴解，加 入去離子水定容至10。mb.小份分裝后，高混高壓滅尚，室溫保存。2.1.1.5實(shí)驗(yàn)儀器及用途實(shí)驗(yàn)儀器用途及其生產(chǎn)廠家如表2-5所示R2-5寶軫僅窩名你.星號(hào)及生產(chǎn)廠家Table 2-5 1-xpcriinaiul apparatuses儀器名林用途生產(chǎn)廠涼原子吸收分光光段計(jì)TAS-986胡定金屬元素北京普析通用儀器有限公司天平TG328A (S)剝量敘隔上海旃密科學(xué)儀器有限公司水浴怛溫標(biāo)該器SHY-2A保持沮度江蘇金壇市金城國(guó)用實(shí)毆儀器廠陸密酸度沸PHS-3C測(cè)定pH值上海大譜儀囂有限公司電建嵌鳳干燥箱101烘干藥品及玻璃卷皿北京市永光明醫(yī)療儀器廠電蔚

11、攪拌器JM促進(jìn)試劑溶并江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)轉(zhuǎn)儀器廠紫外可見(jiàn)分光光度討UV190I/I902測(cè)量菌體濃度上海風(fēng)展儀器右限公司離心機(jī)TGL-I6分離偏休金壇市梅香儀器有限公，隔水式恒疽培養(yǎng)箱PYX-DJIS微生物培養(yǎng)11海市躍適醫(yī)獰浴械一廠生化培舞箱SPX微生物培芥寧渡東雨儀器有限公司高壓滅菌鍋Vs-840-2玻靖儀空滅中上海迅博醫(yī)療設(shè)備廠戡璃儀器第駛約品及溶液四川蜀中玻璃儀器有限公砰2.1.1.6玻璃儀器的處理由于玻埼儀器對(duì)痕最的金屬離子有定的吸附作用.會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生很大的影 響,因此，每次實(shí)驗(yàn)前將實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所用到的所有的玻璃儀器均放入15%-2（代的浦酸溶 液中浸泡24小時(shí)以上，取出后再用蒸

12、悔水洗海，晾干待用.2.2實(shí)驗(yàn)方法2. 2.1細(xì)菌的活化及細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定實(shí)驗(yàn)在培養(yǎng)皿上，用無(wú)菌牙簽,挑取單個(gè)的工程菌pGEX-ZjMT-B菌落，放入20 mL浪 度為5叩序mL的含氛節(jié)有群素抗性的液體I.B培養(yǎng)基中，封好管口怛小要轉(zhuǎn)緊。然后，在 水浴忸溫振蕩器中，以37C、220 r/min爽蕩培養(yǎng)過(guò)夜，即為活化細(xì)菌.取O.SmL已經(jīng)過(guò)活化培養(yǎng)的菌液,加入到50 mL濃度為50 p g/nL的含氮青毒素 抗性的新鮮W培養(yǎng)基中,同時(shí)，記卜移入侑體的時(shí)間，并測(cè)量初始的。1扁值-以后每 隔一定的時(shí)間取樣，測(cè)定ODg值，并記滎相應(yīng)的取樣時(shí)間.2. 2.2細(xì)菌細(xì)胞干重的洌量實(shí)驗(yàn)首先，測(cè)毋工程pGEX

13、-ZjMI-B 體懸浮液的0瞄值，然后，取該懸浮液100 nL, 用離心機(jī)以10000rpm的轉(zhuǎn)速分離削札 經(jīng)洗滌、烘干宜至恒重后，將出lOOrnL的懸浮 液所含緬曲的F也，經(jīng)公式換算，可知相應(yīng)的Ww=l Ht,每升有鄉(xiāng)少塞克的細(xì)苗。2 2.3不同重金屬離子對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響以Pb.對(duì)細(xì)前生長(zhǎng):的影響為例.取0.5mL已經(jīng)過(guò)活化培弈的謝液，如入到50 mL濃 度為50雄ml,的含蘇節(jié)背禪素抗性的新鮮LB培養(yǎng)基中，同時(shí)，記下移入南體的時(shí)問(wèn)，并 測(cè)量初始的0IU,值，在水浴恒溫振蕩器中，以37V, 220 r/min 蕩培養(yǎng)。每隔一定的 時(shí)間取樣，測(cè)嵬。瞄值，當(dāng)000.5左右時(shí)，加入IPTG使其終濃

14、度為0. Iraki,并加入 Pb，使其濃度為1 OOmg/L記錄取樣時(shí)間，以后每隔一定的時(shí)間，取樣測(cè)定ODm值， 并記下取樣的時(shí)間.其它Mn2 Hg2 C的實(shí)驗(yàn)方法同Pb二經(jīng)過(guò)以上實(shí)驗(yàn)的篩選，確定Pb Mn Cd u g Zn?.六種虞金屬 進(jìn)行 卜面重金屆離了的濃度對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)影響的實(shí)驗(yàn)2.2.4丞金屬離子的濃度對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響以Pb”的濃度對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)實(shí)輪為例，W. 5mL己經(jīng)過(guò)活化培養(yǎng)的菌液，加入到SOmL 的新鮮LB培養(yǎng)基中，記下移入南體的時(shí)間.同時(shí)，測(cè)量初始的01板.值，在水浴恒溫撮蕩 器中，以37*C 220 r/min振蕩培養(yǎng)，每隔一定的時(shí)間取樣，測(cè)量嘰值，當(dāng)05.5左 右時(shí),加

15、AIPTG使其終濃度為0.1 mM,并加入Pb七使其終濃度分別為0、50、100. 200. 400、800、1000mg/L.在不同濃度條件下，每隔一定的時(shí)間取樣,測(cè)定0M佰，并記下 瑕樣的時(shí)間c觀察細(xì)窗生長(zhǎng)曲綾的變化情況。其它細(xì)二CdL Cu- W、擠的實(shí)驗(yàn)方 法同PbL經(jīng)過(guò)以匕蟲(chóng)驗(yàn)的篩選,確定時(shí)、Cd* Ni M四種重金屬離子，進(jìn)行下面細(xì)菌的 富集實(shí)姓.2.2.5細(xì)菌的富集試驗(yàn)2.2.5.1富集速率曲線的測(cè)定.以Pb的富集速率實(shí)驗(yàn)為例：移取ImL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，肯于OOmL容量瓶中,用去離子水稀釋后，加入2禮0D心值約為0.7的菌體后，再用去離子水定容至lOOtL 搖勻后分別倒入已泡過(guò)峭酸

16、的250mL的雄形瓶中（做兩個(gè)平行樣）右的濃度為L(zhǎng)Omg/l,。 將推形瓶放入水浴恒溫振蕩器中，以37C. 160 r/min振蕩,分別于第I min、5 min、 10 min. 15 min、30 min, 60 min、3h、6 h、%、12h時(shí)取樣，用離心機(jī)以 lOOOOrpm 離心10 min,取上消液用1%的HNQ稀釋后,放入試管中待測(cè)（每瓶取3個(gè)平行樣）一將 待測(cè)水樣用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)質(zhì)阡的濃度，測(cè)出的結(jié)果即為第Imin、5 min. 10 min. 15 min、30 min、60 min. 3h、6 h、9h, 12h 時(shí) Pb”的濃度，以相同實(shí)驗(yàn)方法測(cè) Cd?，, Ki

17、 M廣在各時(shí)間的濃度值。2.25.2平衡富集實(shí)驗(yàn)以P廣的平衡富集實(shí)驗(yàn)為乳 分別移取0.5ml., lml 2dL. 3此、5 ml,、8mU lOmL Pb”標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,說(shuō)于lOOnL容量瓶中，用去離亍水稀釋后，加入2mLOD仙約為0.7 的菌體后.再用去離子水定容至lOOmL,搖勻后分別倒入7個(gè)己泡過(guò)帝酸的250ml錐形 瓶中（各做兩個(gè)平行樣，其中Pb濃度分別為5、10、20、30、50、80和IOOmg/Lr 將7個(gè)錐形瓶均放入水浴恒溫振器中.以37-C, 160 r/min 蕩過(guò)夜，取樣后用離心 機(jī)以lOOOOrpm離心10 min,取上清液用1%的HN03稀樣后,放入試管中待測(cè)（每瓶

18、取3 個(gè)平行作.將侍測(cè)水樣用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)檢P1Z濃度，若實(shí)凝數(shù)據(jù)顯示未達(dá)平衡, 則增加Pb的濃度，重夏上述實(shí)驗(yàn)，直到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示達(dá)到平衡為止.以劇同實(shí)驗(yàn)方法 測(cè)量CdL Ni氣 跖*的濃度值.經(jīng)過(guò)富集速率實(shí)輸和平衡富萊實(shí)驗(yàn)的篩選,確定Pb如Cd”兩率單金例杰于迪仃卜 也不同因素的影響實(shí)登。2.2,6不同因素對(duì)細(xì)菌富集試驗(yàn)的影響2 2. 6 1 PH值對(duì)富集PbL Cct的影響以PH值對(duì)Pb”的踱響為例、移取5ml P標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,置干IOObiL容堡瓶中.用 去離子水稀釋后，加入ornLOD.：值約為0.7的茵體后，再用去高子冰定容至1（KJ.nL,搖 勻后倒入己泡過(guò)鞘酸的250mL的

19、錐形瓶中，Pb”的濃度為50噸兒，沸缺其原始的PH依 為3.25,以同樣的方法，配制濃度為50 mg/L的IV.標(biāo)準(zhǔn)溶液，用HC1和VaOH調(diào)斥其 PH值分別為2、5、7、9、11 （各做兩個(gè)平行樣）,播勻后依次電樣,用離心機(jī)以lOOOOrpai 離心10 min,取上清液用代的11X03稀釋后放入試管中，用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)量時(shí) 的初始濃度（每舫取3個(gè)平行樣）然后將錐形粒放入水浴恒涅振蕩梏中，以37 -C. 180 r福小振蕩過(guò)夜，同樣方法取祥、離心、稀樣后測(cè)景Pb”的終濃度。PH值對(duì)Cd的影響 實(shí)驗(yàn)方法同上2. 2.6.2水中常見(jiàn)離子N時(shí)、Ca”f 對(duì)富集Pb”、CcT的影響以M對(duì)富集P

20、b”的影響為例:分別移取5mLPb標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于5個(gè)lOQmL 容量瓶中,再分別移取2札、5mL、8mL、施、20mL Na,標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于以上容量 瓶中，用去離子水稀祥后，加入5頑擁00值約為0.7的茵體后，再用去離子水定容至 lOOmL,搖勻后分別倒入5個(gè)已泡過(guò)硝酸的Z50mL的推形瓶中搖勻，其中P濃度均為 50 n）g/L, Na.濃度分別為20、50、80, 120和200 mg/L.然后將推形瓶放入水浴恒溫爽 蕩港中.以37 C, 160 Main振贛過(guò)夜，取樣用離心機(jī)以lOOOOrpm離心10 min,取上 清液用國(guó)的M03稀樣后，放入試管中待測(cè)（每瓶取3個(gè)平行樣K將待測(cè)水

21、樣用原子吸 收分光光度計(jì)測(cè)最Pb*濃度，CK 噂對(duì)富集Pb；的影響實(shí)驗(yàn)同板。Na、CaL M廣對(duì) 富集C此的影響實(shí)驗(yàn)方法同上.2 2. 6. 3重金屬離子對(duì)富集Pb”、C、12低、20ml. Cu*標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)缶溶波，置于以上容量瓶 中，用去離子水稀祥后，加入5mLOD-（fi約為0.7的菌體后,再用去離子水定容至lOOmL, 搖勻后分別倒入5個(gè)己泡過(guò)硝酸的25OnL的惟形瓶中搖勾，其中Pb：濃度均為50 rnp/L, Cu”濃度分別為20、50、80、120和200mg/L,將推形瓶放入水浴恒溫振蕩器中，以37 r, 160r/min振蕩過(guò)夜，取樣用離心機(jī)以JOOOOrpni離心lOmin.取上清

22、液用C的HM）3 稀釋后，放入試管中待測(cè)（每瓶取3個(gè)平行樣，將待那水樣用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)量 Ph濃度，其它重金屆離子Zn MMn”對(duì)富集Pb*的影響實(shí)驗(yàn)同Cu重金屬離子3、 Zn、Ni伽.對(duì)富集Cd”的影響史驗(yàn)方法同上。2. 2. 6.4絡(luò)合劑對(duì)富集Pb Cd”的影以檸株酸鈉對(duì)富集Pb的影響為的分別移取訊Pb柝準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，對(duì)于5個(gè)I 容量瓶中，再分別移取2ml.、5mL、8ml.、12mL、20nL檸檬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液.置F以 上容曩瓶中,用去離子水稀釋后,加入SmLOiU值約為。,7的菌體后,再用人離子水定 容至10（hnL.擒勻后分別倒入5個(gè)已泡過(guò)硝酸的250ml. W錐形瓶中搖勻，其

23、中Pb的濃 度均為50 mg/L,檸株酸鈉的濃度分別為20、50、80. 120 200 ng/L-將錐形瓶放入 水浴恒溫振蕩器中，以37 *C, 160 r恒in振糖過(guò)夜,取樣用離心機(jī)以lOOOOrp同心10 min.取上消液用遙的HN03稀釋后,放入試管中待測(cè)（每瓶取3個(gè)平行樣）.將待測(cè)水樣 用原門(mén)吸收分光光度計(jì)測(cè)星PV濃度，EDTA對(duì)富集Pb的甥響實(shí)驗(yàn)同檸檬酸鈉。空合制 檸棵酸鈉、EDTA對(duì)富集Cd的影響實(shí)驗(yàn)方法同上。2 2. 6 5營(yíng)弄物康對(duì)富集PbL Cd的影響以乳糖對(duì)富集Ph”的影響為例：分別枷僅5mL!V標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于5個(gè)1（）0此容 量瓶中，用去禹了水稀樣后加入2mUX）咐

24、值約為0.7的菌體后,再用去離了水定容至 100ml.搖勻后倒入5個(gè)己泡過(guò)碑酸的250mL的惟形瓶中，P成濃度均為50 mg/L,然后 向4個(gè)錐形瓶中分別加入10、20. 30、4的乳斯，另外設(shè)不加乳糖的空白樣作為對(duì) 照，將錐形瓶放入水浴恒湖振蕩器中，以37 *0, 160 r/nin振蕩過(guò)夜,取樣用離心機(jī) 以LOOOOrpfli離心10 min,取上清液用盜的HN03稀秣后，故入試管中待測(cè)（每瓶取3個(gè) 平行樣）。將待測(cè)冰樣用貌K吸收分光光及計(jì)測(cè)量呷.濃度.匍蜀擄對(duì)壽集Ph”的影響實(shí) 蔬同乳 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)葡萄舫、乳對(duì)對(duì)富集Cd”的影響實(shí)輪方法同上。2 2.6.6菌休圣對(duì)富集PbL Ccf的影響以菌體量對(duì)富集陽(yáng).的影響為例:分別移取4份1 OmLPb、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于4個(gè) lOOnL容最瓶中.用去離子水稀釋后，分別加入2ntL、5此、lOmL. iSaiLOtffi約為0.7 的菌體后,再用去離子水定睿至lOOml,搖勻后倒入已泡過(guò)硝酸的250mL的錐形瓶中, Pb”的初始濃度均h 100 mg/L,將錐形瓶放入水浴恒溫振蕩器中，以37 C 160 r/nin 振蕩過(guò)夜，依次取作用離心機(jī)以lOOOOrpm離心10m