溶瘤病毒產(chǎn)品的研發(fā)和申報(bào)

1、溶瘤病毒產(chǎn)品的研發(fā)和申報(bào)1、溶瘤病毒的作用機(jī)理 現(xiàn)在普遍認(rèn)為，大部分溶瘤病毒主要通過(guò)以下兩種機(jī)制抗腫瘤：1）激發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)： 通過(guò)抗原（病毒自身和腫瘤）激活機(jī)體的天然免疫和繼發(fā)性免疫反應(yīng)，殺 死腫瘤；2）裂解腫瘤細(xì)胞： 通過(guò)選擇性的在腫瘤細(xì)胞中大量復(fù)制，使腫瘤細(xì)胞裂解死亡。圖 1 溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞中的選擇性復(fù)制那么溶瘤病毒為什么如此“鐘愛(ài)”腫瘤細(xì)胞？1）首先，大多數(shù)腫瘤細(xì)胞較正常細(xì)胞的抗病毒活性差，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞更容 易感染病毒；2）其次，腫瘤細(xì)胞由于自身高代謝和復(fù)制活躍的內(nèi)環(huán)境給病毒復(fù)制提供了 更好的環(huán)境；3）最后，人類通過(guò)基因工程手段使得病毒對(duì)腫瘤細(xì)胞具有選擇性，例如針 對(duì)特定的腫瘤細(xì)

2、胞表面受體改造病毒。圖 2 溶瘤病毒的綜合作用機(jī)理可以看出溶瘤病毒療法最核心要素就是病毒本身，溶瘤病毒大致可以分為 兩類：在自然界里存在的，這一類不是特別的多；經(jīng)過(guò)基因改編的病毒，對(duì)腫瘤細(xì)胞更加具有選擇性，目前常見(jiàn)的溶瘤病 毒均屬于這一類。如何對(duì)溶瘤病毒進(jìn)行基因工程改造？一方面可以直接創(chuàng)造一個(gè)多樣性的病毒庫(kù)，從中篩選具有選擇性的病 毒；另一方面可以通過(guò)研究病毒的基因，改變相應(yīng)的基因達(dá)到具有選擇性的 目的；結(jié)合以上兩種方法先從庫(kù)中選擇具有選擇性的病毒，再通過(guò)基因改造使 其更具選擇性。2、溶瘤病毒的局限性雖然溶瘤病毒療法已有兩款產(chǎn)品上市，但是市場(chǎng)表現(xiàn)一直不理想，主要在 于該技術(shù)還存在著以下局限性

3、:1) 因?yàn)椴《臼峭庠葱晕镔|(zhì)，人體會(huì)產(chǎn)生抗體清除病毒，使其不能發(fā)揮作用2) 病毒的穩(wěn)定性：病毒進(jìn)入人體會(huì)不斷的復(fù)制，經(jīng)過(guò)幾代復(fù)制之后發(fā)生可能 突變導(dǎo)致無(wú)效；給藥方式：目前主要有兩種方式，直接注射腫瘤部位或者通過(guò)靜脈給藥， 比較大的腫瘤可以直接注射，但是比較小的腫瘤如何給藥還存在問(wèn)題。病毒脫落：病毒最終會(huì)去哪里。溶瘤病毒的生產(chǎn)、提純、運(yùn)輸這些都是非常困難。 除了以上局限性，有效性仍是目前溶瘤病毒最大的問(wèn)題，目前單用溶瘤病 毒的治療腫瘤的效果不是很理想，但是目前臨床研究表明溶瘤病毒和免疫監(jiān)測(cè) 點(diǎn)抑制劑聯(lián)用效果比較好，原因在于溶瘤病毒能夠?qū)?冷 腫瘤變 熱，提高腫 瘤細(xì)胞對(duì)免疫監(jiān)測(cè)點(diǎn)抑制劑的反應(yīng)。一

4、項(xiàng) 2 期臨床研究表明病毒 T-VEC( Tailmogene laherparepvec )聯(lián)合 Ipilimumab (伊匹單抗)和單獨(dú)使用 Ipilimumab (伊匹單抗)單獨(dú)治療黑色素 瘤，聯(lián)合用藥可以顯著提高治療效果。所以未來(lái)溶瘤病毒的聯(lián)用會(huì)成為研究的 一個(gè)熱點(diǎn)，這也正說(shuō)明了上藥啟動(dòng)安柯瑞再上市計(jì)劃的原因。溶瘤病毒的局限性和溶瘤病毒在聯(lián)合用藥的前景是企業(yè)在溶瘤病毒產(chǎn)品研 發(fā)中需要認(rèn)真考慮的問(wèn)題。3、溶瘤病毒產(chǎn)品的申報(bào)針對(duì)溶瘤病毒這一新興的領(lǐng)域， FDA尚未出臺(tái)專門(mén)針對(duì)溶瘤病毒的指導(dǎo)原則， 但是有兩個(gè)相關(guān)的指導(dǎo)原則可以供企業(yè)參考：1) 環(huán)境評(píng)估( Environmental Asse

5、ssments )：病毒是否會(huì)隨排泄物進(jìn)入生態(tài)環(huán)境，治療過(guò)程中會(huì)不會(huì)傳染給周?chē)巳?護(hù)士，家人)，企業(yè)需要評(píng)估溶瘤病毒對(duì)環(huán)境影響的可能性，影響程 度，以及緩解措施等。2) 病毒脫落研究( Shedding Study )：FDA指南對(duì)病毒脫落研究進(jìn)行了詳細(xì)的論述，其中包含了如何對(duì)脫落研 究臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)，脫落數(shù)據(jù)的采集和分析。并指出脫落研究最好是在 1 期爬坡完成之后開(kāi)展，因?yàn)榈蛣┝坎荒軠?zhǔn)確反映高劑量的情況。除了以上兩點(diǎn) FDA規(guī)定需要考慮的因素之外，作為企業(yè)，研發(fā)申報(bào)溶瘤病 毒還需要注重考慮以下幾點(diǎn)：1) 安全性因?yàn)槿梭w時(shí)刻暴露在各種病毒環(huán)境下，所以安全性問(wèn)題目前并不是主要考 慮的問(wèn)題，目前

6、上市的 2 款產(chǎn)品，安全性都沒(méi)有太大的問(wèn)題。2) 臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)主要需要考慮給藥劑量、病毒的 PK/PD，生物標(biāo)記物和機(jī)體免疫反應(yīng)造成的 耐藥。CMC部分 主要涉及工藝穩(wěn)定性，產(chǎn)品的運(yùn)輸(運(yùn)輸過(guò)程中突發(fā)事件的處理)，以及 使用過(guò)程中的穩(wěn)定性(比如容器開(kāi)啟之后多長(zhǎng)時(shí)間需要輸注完畢等)。給藥途徑 產(chǎn)品通過(guò)何種方式給藥，是否需要特殊裝置進(jìn)行給藥，以及病毒和裝置的 相容性問(wèn)題。4、案例分析下面以 Amgen的 IMLYGIC?產(chǎn)品為例，對(duì)以上幾點(diǎn)進(jìn)行解釋。IMLYGIC?( talimogene laherparepvec )是一種對(duì)單純皰疹病毒進(jìn)行改造 而得的病毒，主要用于治療晚期黑色素瘤。圖 3

7、IMLYGIC?產(chǎn)品的作用機(jī)理從臨床三期開(kāi)始，F(xiàn)DA花了 7 年時(shí)間才將其批準(zhǔn)上市，可見(jiàn) FDA對(duì)于第款溶瘤病毒產(chǎn)品的評(píng)審還是相當(dāng)謹(jǐn)慎。1) 臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)IMLYGIC?的 3 期臨床試驗(yàn)是隨機(jī)開(kāi)放多中心臨床試驗(yàn)，入組 436名患者；主要 臨床終點(diǎn)為持續(xù)緩解率( DRR，durable response rate )( WHO定義 : 在治療 開(kāi)始后的 12 個(gè)月內(nèi)起效，并且效果維持超過(guò) 6 個(gè)月)，結(jié)果顯示試驗(yàn)組 DRR顯 著高于應(yīng)用粒細(xì)胞和巨細(xì)胞集落刺激因子的對(duì)照組( 16.3% vs 2.1% )，但是總 生存期并沒(méi)有顯著性差異( 22.9mvs19.0m)。安全性方面， 31.9%的患者出現(xiàn) 3 級(jí)不良反應(yīng)， 4.5%的患者發(fā)生 4 級(jí)不良反應(yīng)， 藥物相關(guān)嚴(yán)重不良反應(yīng)，試驗(yàn)組要高于對(duì)照組( 25.9% vs 13.4% )。另外， IMLYGIC?有限的病毒脫落數(shù)據(jù)使得 FDA難以充分評(píng)估 IMLYGIC傳播給醫(yī) 療服務(wù)提供者和患者家屬的風(fēng)險(xiǎn)，因此， FDA迫使 Amgen做一個(gè)上市后的單臂 臨