十一章監(jiān)察制度和質(zhì)量檢驗

第十一章獸用生物制品的生產(chǎn)和質(zhì)量管理主要內(nèi)容：二、藥品生產(chǎn)管理與質(zhì)量檢驗標(biāo)準(zhǔn)一、獸用生物制品的管理體系三、獸用生物制品的質(zhì)量檢驗一、獸用用生物制制品的管管理體系系負(fù)責(zé)本行行政區(qū)域域內(nèi)的獸獸藥監(jiān)督督管理工工作國務(wù)院獸獸醫(yī)行政政管理部部門負(fù)責(zé)全國國的獸藥藥監(jiān)督管管理工作作縣級以上上地方政政府獸醫(yī)行政政管理部部門（一）行行政管理理部門和和機構(gòu)國家和地地方獸藥監(jiān)察察機構(gòu)國家和地地方獸醫(yī)衛(wèi)生生防疫部部門北京中關(guān)關(guān)村南大大街8號一、獸用用生物制制品的管管理體系系生產(chǎn)和質(zhì)質(zhì)量經(jīng)經(jīng)營和和使用生產(chǎn)和檢檢驗的技技術(shù)法規(guī)規(guī)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)行政手段段和許可可證（二）管管理的范范圍和措措施《獸藥管理理條例》2004年3月24日國務(wù)院院第45次常務(wù)會會議通過過，自2004年11月1日起施行行?！东F藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范》即“獸藥藥GMP”，2002年年3月19日經(jīng)農(nóng)業(yè)業(yè)部常務(wù)務(wù)會議審審議通過過，自2002年6月19日起施行行。《獸用生物物制品管管理辦法法》，2001年9月17日業(yè)經(jīng)農(nóng)農(nóng)業(yè)部常常務(wù)會議議審議通通過，自自2002年1月1日起施行行。《獸藥質(zhì)量量監(jiān)督抽抽樣規(guī)定定》，2001年12月8日經(jīng)農(nóng)業(yè)業(yè)部常務(wù)務(wù)會議審審議通過過，并發(fā)發(fā)布施行行。《獸藥注注冊辦法法》，2004年11月15日經(jīng)農(nóng)業(yè)業(yè)部常務(wù)務(wù)會議審審議通過過并發(fā)布布施行。。（三）管管理條列列、規(guī)范范、辦法法、規(guī)定定和規(guī)程程《中華人民民共和國國獸用生生物制品品規(guī)程》，農(nóng)業(yè)部部獸用生生物制品品規(guī)程委委員會編編。《獸用生物物制品注注冊分類類及注冊冊資料要要求》（農(nóng)業(yè)部部公告第第442號發(fā)布））（四）新獸用生生物制品品的研制制臨床前研研究（實實驗室階階段）：：包括菌菌毒種、、細(xì)胞株株、生物物組織等等起始材材料的系系統(tǒng)鑒定定、生產(chǎn)產(chǎn)工藝、、保存條條件、遺遺傳穩(wěn)定定性、實實驗室安安全、效效力試驗驗及免疫疫學(xué)的研研究等。。使用一類類病原微微生物還還要具備備國務(wù)院院獸醫(yī)行行政管理理部門規(guī)規(guī)定的條條件，并并在實驗驗室階段段前報國國務(wù)院獸獸醫(yī)行政政管理部部門批準(zhǔn)準(zhǔn)。臨床試驗驗分為兩兩個階段段，第一一階段包包括I、II、III期臨床試試驗，第第二階段段為IV期臨床試試驗。在在臨床試試驗前，，向國務(wù)務(wù)院獸醫(yī)醫(yī)行政管管理部門門提出申申請。提出新獸獸藥注冊冊申請時時，還要要提供菌菌（毒、、蟲）種種、細(xì)胞胞等有關(guān)關(guān)材料和和資料，，并由國國務(wù)院獸獸醫(yī)行政政管理部部門指定定的機構(gòu)構(gòu)保藏。。《獸藥非臨臨床研究究質(zhì)量管管理規(guī)范范》（GLP），2004年6月16日公布《獸藥臨床床試驗質(zhì)質(zhì)量管理理規(guī)范》（GCP），2005年7月27日公布根據(jù)《獸藥管理理條例》、《獸藥注冊冊辦法》、《新獸藥研研制管理理辦法》規(guī)定制定定：《獸用生物物制品通通用名命命名指導(dǎo)導(dǎo)原則》《獸用生物物制品安安全和效效力試驗驗報告編編寫指導(dǎo)導(dǎo)原則》《獸用生物物制品生生產(chǎn)用細(xì)細(xì)胞系試試驗研究究指導(dǎo)原原則》《獸用生物物制品菌菌（毒、、蟲）種種種子批批建立試試驗技術(shù)術(shù)指導(dǎo)原原則》《獸用生物物制品菌菌（毒、、蟲）種種毒力返返強試驗驗技術(shù)指指導(dǎo)原則則》《獸用生物物制品實實驗室安安全試驗驗技術(shù)指指導(dǎo)原則則》《獸用生物物制品實實驗室效效力試驗驗技術(shù)指指導(dǎo)原則則》《獸用生物物制品穩(wěn)穩(wěn)定性試試驗技術(shù)術(shù)指導(dǎo)原原則》《獸用生物物制品臨臨床試驗驗技術(shù)指指導(dǎo)原則則》《獸用診斷斷制品試試驗研究究技術(shù)指指導(dǎo)原則則》《獸用免疫疫診斷試試劑盒試試驗研究究技術(shù)指指導(dǎo)原則則》中華人民民共和國國農(nóng)業(yè)部部第683號公告（（2006年7月12日）每批獸用用生物制制品，在在出廠前前應(yīng)當(dāng)由由國務(wù)院院獸醫(yī)行行政管理理部門指指定的檢檢驗機構(gòu)構(gòu)審查核核對，并并在必要要時進行行抽查檢檢驗。強制免疫疫所需獸獸用生物物制品，，由國務(wù)務(wù)院獸醫(yī)醫(yī)行政管管理部門門指定的的企業(yè)生生產(chǎn)。我國對獸獸用生物物制品生生產(chǎn)實行行雙重許許可，即即生產(chǎn)許許可證制制度和產(chǎn)產(chǎn)品批準(zhǔn)準(zhǔn)文號制制度。生產(chǎn)許可可證制度度：生產(chǎn)產(chǎn)獸用生生物制品品的企業(yè)業(yè)必須獲獲得國務(wù)務(wù)院獸醫(yī)醫(yī)行政管管理部門門核發(fā)的的獸藥生生產(chǎn)許可可證，按照獸藥藥生產(chǎn)質(zhì)質(zhì)量管理理規(guī)范（（獸藥GMP）組織生產(chǎn)產(chǎn)。產(chǎn)品批準(zhǔn)準(zhǔn)文號制制度：所所生產(chǎn)的的產(chǎn)品必必須獲得得國務(wù)院院獸醫(yī)行行政管理理部門核核發(fā)的產(chǎn)產(chǎn)品批準(zhǔn)準(zhǔn)文號。。開辦獸用用生物制制品生產(chǎn)產(chǎn)企業(yè)（（含科研研、教學(xué)學(xué)單位的的生物制制品生產(chǎn)產(chǎn)車間和和三資企企業(yè)）的的單位必必須在立立項前提提出申請請，經(jīng)所所在地省省、自治治區(qū)、直直轄市人人民政府府獸醫(yī)行行政管理理部門提提出審查查意見后后報國務(wù)務(wù)院獸醫(yī)醫(yī)行政管管理部門門審批。。（五）獸用生物物制品的的生產(chǎn)二、生產(chǎn)產(chǎn)管理與與質(zhì)量檢檢驗標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)（一）基基本原則則——“朱蘭質(zhì)質(zhì)量螺旋旋曲線””模式二、生產(chǎn)產(chǎn)管理與與質(zhì)量檢檢驗標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)（二）《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范》（獸藥GMP）1.GMP的基本內(nèi)內(nèi)容我國1989年頒布了了《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范》。1994年又頒布布了《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范實施細(xì)細(xì)則》。2002年3月修訂發(fā)發(fā)布了《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范》。獸藥GMP是對獸醫(yī)醫(yī)生物制制品生產(chǎn)產(chǎn)全過程程的質(zhì)量量管理，，涉及人人員、廠廠房和設(shè)設(shè)備、原原料（采采購、入入庫、檢檢驗、發(fā)發(fā)料）、、加工、、半成品品檢驗、、分包裝裝、成品品檢定、、產(chǎn)品運運輸、銷銷售、用用戶意見見及使用用反應(yīng)處處理等在在內(nèi)的全全過程的的質(zhì)量管管理，可可概括為為人員、、廠房設(shè)設(shè)備和原原材料、、管理制制度和要要求三個個方面。。2.GMP的作用與與特點(1)實施涉及及兩個方方面政府獸醫(yī)醫(yī)藥政管管理部門門，從管管理角度度出發(fā)把把GMP看成是政政府對獸獸藥企業(yè)業(yè)提出的的最低要要求，并并作為獸獸藥藥政政管理部部門檢查查獸藥企企業(yè)和獸獸藥質(zhì)量量的依據(jù)據(jù)。獸藥企業(yè)業(yè)，應(yīng)把把GMP視為本企企業(yè)所必必須具備備的技術(shù)術(shù)水平，，包括生生產(chǎn)管理理、質(zhì)量量管理和和質(zhì)量監(jiān)監(jiān)測等。。(2)實施GMP的目的防止獸藥藥生產(chǎn)過過程中的的污染、、混淆或或其他事事故，根根除生產(chǎn)產(chǎn)上的不不良習(xí)慣慣，防患患于未然然，保證證產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量和安安全。2.GMP的作用與與特點(3)GMP是根據(jù)通通用的原原則性規(guī)規(guī)定，各各獸藥企企業(yè)應(yīng)按按GMP要求，制制訂更具具體的實實施細(xì)則則和條例例。(4)GMP強調(diào)有效效性的證證實，即即對一個個工序或或一件用用具或設(shè)設(shè)備在用用于生產(chǎn)產(chǎn)之前，，要經(jīng)過過驗證。。證明符符合要求求和有效效，以保保證產(chǎn)品品的質(zhì)量量。(5)GMP要求有生生產(chǎn)管理理部門和和質(zhì)量控控制部門門的權(quán)力力分立。。在組織織上，生生產(chǎn)部門門和質(zhì)控控部門的的地位平平行。實實行GMP管理的單單位，生生產(chǎn)部門門和質(zhì)控控部門負(fù)負(fù)責(zé)人不不能兼職職。(6)GMP強調(diào)人員員素質(zhì)、、衛(wèi)生要要求、無無菌要求求、核對對制度以以及質(zhì)量量監(jiān)督和和檢查制制度。3.GMP對人員的的基本要要求獸醫(yī)生物物制品生生產(chǎn)企業(yè)業(yè)應(yīng)配備備有和生生產(chǎn)品種種規(guī)模相相適應(yīng)的的具有適適宜素質(zhì)質(zhì)和數(shù)量量的各類類管理人人員、專專業(yè)技術(shù)術(shù)人員和和生產(chǎn)人人員。各類生產(chǎn)產(chǎn)人員、、管理人人員和專專業(yè)人員員應(yīng)有計計劃地進進行技術(shù)術(shù)培訓(xùn)和和質(zhì)量意意識的教教育，并并進行考考核，不不斷提高高其業(yè)務(wù)務(wù)能力和和技術(shù)水水平。3.GMP對人員的的基本要要求(1)負(fù)責(zé)生產(chǎn)產(chǎn)和質(zhì)量量管理的的企業(yè)領(lǐng)領(lǐng)導(dǎo)人必須具有有制藥或或相關(guān)專專業(yè)大專專學(xué)歷，，對獸藥藥生產(chǎn)及及質(zhì)量管管理應(yīng)具具有較豐豐富的實實踐經(jīng)驗驗，并經(jīng)經(jīng)過有關(guān)關(guān)專業(yè)領(lǐng)領(lǐng)域和基基礎(chǔ)理論論的培訓(xùn)訓(xùn)和學(xué)習(xí)習(xí)。(2)生產(chǎn)管理理和質(zhì)量量控制部部門的主主要負(fù)責(zé)責(zé)人與高高級技術(shù)術(shù)人員應(yīng)具有獸獸醫(yī)學(xué)或或藥學(xué)等等相關(guān)專專業(yè)知識識，經(jīng)過過有關(guān)專專業(yè)領(lǐng)域域和基礎(chǔ)礎(chǔ)理論的的培訓(xùn)和和學(xué)習(xí)，，有豐富富的實踐踐經(jīng)驗，，有能力力對生產(chǎn)產(chǎn)和質(zhì)量量或本專專業(yè)領(lǐng)域域中出現(xiàn)現(xiàn)的實際際問題作作出正確確的判斷斷和處理理。(3)其他各類類管理人人員、專專業(yè)技術(shù)術(shù)人員和和生產(chǎn)人人員應(yīng)具有與與本職工工作要求求相適應(yīng)應(yīng)的文化化程度和和專業(yè)知知識，或或經(jīng)過培培訓(xùn)，能能勝任本本崗位的的管理、、生產(chǎn)或或研究工工作。4.GMP硬件方面面的基本本要求(1)生產(chǎn)建筑筑、附設(shè)設(shè)建筑及及設(shè)施廠區(qū)周圍圍及廠區(qū)區(qū)內(nèi)環(huán)境境和分區(qū)區(qū)廠房和水水、電、、汽供應(yīng)應(yīng)生產(chǎn)區(qū)劃劃分潔凈凈等級環(huán)境控制制——溫度、濕濕度、壓壓差、送送風(fēng)量、、新鮮空空氣廠房內(nèi)的的管線隱隱藏、建筑表面面光滑工廠的下下水道應(yīng)應(yīng)分為兩兩個網(wǎng)系系——正常和廢廢水排水水網(wǎng)相應(yīng)儲存存?zhèn)}庫和和冷庫4.GMP硬件方面面的基本本要求(2)設(shè)備與設(shè)設(shè)施與其生產(chǎn)產(chǎn)規(guī)模相相適應(yīng)的的和足夠夠的設(shè)備備及設(shè)施施空氣處理理系統(tǒng)－－－集中中式和分分散式設(shè)備跨區(qū)區(qū)要密封封隔斷管道標(biāo)明明物料名名稱和流流向防止散毒毒和污物物處理設(shè)設(shè)施生產(chǎn)、檢檢驗設(shè)備備及器具具應(yīng)易于于清洗、、消毒，，便于生生產(chǎn)操作作、維修修和保養(yǎng)養(yǎng)，并能能防止差差錯和減減少污染染。制定使用用、維修修、清潔潔和保養(yǎng)養(yǎng)規(guī)程，，定期檢檢查、清清潔、保保養(yǎng)與維維修，并并由專人人進行管管理和記記錄，并并建立檔檔案。(3)物料和實實驗動物物實驗動物物用于生產(chǎn)產(chǎn)及檢定定用的普普通實驗驗動物，，應(yīng)符合合《實驗動物物管理規(guī)規(guī)程》要求。對對實驗動動物房的的設(shè)施及及飼養(yǎng)要要求均應(yīng)應(yīng)符合有有關(guān)規(guī)定定，特別別要制訂訂預(yù)防感感染的嚴(yán)嚴(yán)格制度度，確保保實驗動動物健康康。物料生產(chǎn)所需需的原料料、輔料料和包裝裝材料等等，包括括水、生生產(chǎn)用原原料、菌菌（毒、、蟲）種種、包裝裝材料。。它們的的質(zhì)量直直接影響響產(chǎn)品的的質(zhì)量，，必須予予以高度度重視，，對其管管理、檢檢驗和出出入庫應(yīng)應(yīng)制定完完善的制制度。5.GMP軟件方面面的基本本要求(1)衛(wèi)生及無無菌管理理衛(wèi)生管理理廠區(qū)、車車間、操操作室、、包裝室室、儲存存庫等必必須保持持整潔、、無堆積積廢物；；工作人人員保持持良好的的衛(wèi)生習(xí)習(xí)慣，定定期體檢檢，建立立健康檔檔案。無菌管理理生產(chǎn)無菌菌制品，，必須在在專用的的潔凈室室內(nèi)進行行。一切切接觸制制品的用用具、容容器及加加入制品品的材料料，用前前必須嚴(yán)嚴(yán)格滅菌菌。生產(chǎn)產(chǎn)用器具具或材料料，滅菌菌除菌前前和滅菌菌除菌后后作明顯顯標(biāo)志。。潔凈室（（區(qū)）應(yīng)應(yīng)定期消消毒，在在潔凈室室的工作作人員應(yīng)應(yīng)控制在在最少人人數(shù)，必必須嚴(yán)格格執(zhí)行無無菌操作作細(xì)則。。文件、制制度、細(xì)細(xì)則和記記錄藥政文件件：農(nóng)業(yè)部《獸用生物物制品管管理辦法法》、《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范》、《獸藥生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量管管理規(guī)范范實施細(xì)細(xì)則》等。生產(chǎn)管理理制度：：在實施GMP管理中，，應(yīng)制訂訂生產(chǎn)管管理制度度、質(zhì)量量管理制制度、衛(wèi)衛(wèi)生制度度、安全全制度、、核對制制度、質(zhì)質(zhì)量檢查查制度及及其它特特定制度度(如菌毒種種管理制制度)。標(biāo)準(zhǔn)操作作細(xì)則：：在實施GMP中，應(yīng)制制訂標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)操作細(xì)細(xì)則，包包括生產(chǎn)產(chǎn)操作細(xì)細(xì)則、檢檢定操作作細(xì)則、、儀器操操作及保保養(yǎng)細(xì)則則等。記錄：在實施GMP管理中，，必須認(rèn)認(rèn)真做好好生產(chǎn)記記錄、檢檢定記錄錄、銷售售記錄及及用戶意意見與不不良反應(yīng)應(yīng)記錄。。5.GMP軟件方面面的基本本要求(2)生產(chǎn)管理理包裝與標(biāo)標(biāo)簽只有經(jīng)質(zhì)質(zhì)量控制制部門檢檢定，符符合質(zhì)量量標(biāo)準(zhǔn)的的制品才才能進行行包裝和和貼簽。。所有檢檢驗用試試劑、生生產(chǎn)專用用溶液、、原液及及半成品品，都應(yīng)應(yīng)貼有標(biāo)標(biāo)簽，注注明品名名、批號號、日期期及效價價等。驗證與核核對驗證是一一個規(guī)定定的程序序，可提提供很高高的可信信度，使使某一特特定工藝藝過程能能穩(wěn)定地地生產(chǎn)符符合質(zhì)量量標(biāo)準(zhǔn)的的生物制制品。驗驗證的內(nèi)內(nèi)容包括括制造工工藝、檢檢驗方法法、原材材料、設(shè)設(shè)備、設(shè)設(shè)施及操操作人員員等。通通過驗證證，可以以考查工工藝、方方法及設(shè)設(shè)備的有有效性，，對生產(chǎn)產(chǎn)工藝提提出問題題，預(yù)防防生產(chǎn)事事故，保保證生產(chǎn)產(chǎn)質(zhì)量的的穩(wěn)定性性。GMP要求對生生產(chǎn)全過過程，包包括生產(chǎn)產(chǎn)流程及及記錄、、檢定方方法及結(jié)結(jié)果、半半成品及及成品轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移和成成品標(biāo)簽簽等進行行核對，，對制品品轉(zhuǎn)移記記錄及憑憑據(jù)和發(fā)發(fā)出制品品的檢驗驗報告等等關(guān)鍵步步驟及內(nèi)內(nèi)容應(yīng)進進行雙核核對。5.GMP軟件方面面的基本本要求(2)生產(chǎn)管理理(3)質(zhì)量管理理質(zhì)量管理理的組織織系統(tǒng)①主管管質(zhì)量的的企業(yè)負(fù)負(fù)責(zé)人②質(zhì)量量控制部部門③生產(chǎn)產(chǎn)管理部部門④三級級質(zhì)量監(jiān)監(jiān)督網(wǎng)⑤群眾眾性質(zhì)量量管理小小組質(zhì)量控制制部門及及其職權(quán)權(quán)企業(yè)設(shè)有有獨立的的質(zhì)量控控制部門門，直屬屬企業(yè)負(fù)負(fù)責(zé)人，，組織上上與生產(chǎn)產(chǎn)管理部部門平行行，業(yè)務(wù)務(wù)上接受受本企業(yè)業(yè)和中監(jiān)監(jiān)所雙重重領(lǐng)導(dǎo)，，國家對對獸用生生物制品品實行批批簽發(fā)制制度。質(zhì)量控制制部門的的主要職職責(zé)和權(quán)權(quán)限包括括質(zhì)量監(jiān)監(jiān)督管理理和質(zhì)量量檢定兩兩個方面面。5.GMP軟件方面面的基本本要求①質(zhì)量量監(jiān)督管管理審定質(zhì)量量管理文文件和制制訂質(zhì)量量監(jiān)督文文件；審審定制造造和檢驗驗操作細(xì)細(xì)則及有有關(guān)記錄錄負(fù)責(zé)菌毒毒種、標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品或或參考品品的申請請、分發(fā)發(fā)和管理理對工藝、、方法、、設(shè)備、、儀器、、儀表驗驗證及結(jié)結(jié)果監(jiān)督督檢查根據(jù)檢定定結(jié)果，，決定原原料、原原液和半半成品是是否允許許繼續(xù)加加工，決決定成品品可否使使用和簽簽發(fā)合格格證審定包裝裝材料、、標(biāo)簽、、說明書書及成品品容器可可否使用用組織或會會同有關(guān)關(guān)部門對對各類人人員進行行質(zhì)量意意識教育育及實施施GMP的技術(shù)培培訓(xùn)協(xié)助會同同生產(chǎn)管管理部門門對本企企業(yè)實施施GMP的檢查和和考核協(xié)助會同同有關(guān)部部門調(diào)查查處理與與制品不不良反應(yīng)應(yīng)或質(zhì)量量事故(3)質(zhì)量管理理②質(zhì)量檢定定制定制品品的抽樣樣辦法，，對每批批成品及及主要原原料的全全面質(zhì)量量檢定，，留樣觀觀察，簽簽發(fā)檢定定報告，，參與半半成品原原液的效效價測定定，評價價制品的的質(zhì)量及及穩(wěn)定性性。生產(chǎn)潔凈凈區(qū)及生生產(chǎn)用水水質(zhì)量監(jiān)監(jiān)測。對發(fā)生臨臨床不良良反應(yīng)或或用戶發(fā)發(fā)現(xiàn)質(zhì)量量問題制制品的實實驗室復(fù)復(fù)查。(3)質(zhì)量管理理③質(zhì)量自查查與用戶戶意見的的處理按《獸用新生生物制品品管理辦辦法》的有關(guān)規(guī)規(guī)，每批批成品有有銷售記記錄，其其內(nèi)容包包括品名名、規(guī)格格、批號號、數(shù)量量、收貨貨單位和和地址及及發(fā)貨日日期。記記錄應(yīng)保保存至制制品失效效期或負(fù)負(fù)責(zé)期后后一年。。按GMP要求定期期組織全全面質(zhì)量量檢查，，并接受受上級部部門的檢檢查和監(jiān)監(jiān)督。建建立產(chǎn)品品不良反反應(yīng)監(jiān)察察報告制制度，指指定專門門部門或或人員負(fù)負(fù)責(zé)管理理。對用戶的的產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量投訴訴和產(chǎn)品品不良反反應(yīng)作詳詳細(xì)的記記錄和調(diào)調(diào)查處理理，并連連同原投投訴材料料存檔備備查。對產(chǎn)品不不良反應(yīng)應(yīng)及時向向當(dāng)?shù)剞r(nóng)農(nóng)牧行政政管理部部門提出出書面報報告。產(chǎn)產(chǎn)品生產(chǎn)產(chǎn)出現(xiàn)重重大質(zhì)量量問題和和嚴(yán)重安安全隱患患時，應(yīng)應(yīng)立即停停止生產(chǎn)產(chǎn)，并及及時向當(dāng)當(dāng)?shù)剞r(nóng)牧牧行政管管理機關(guān)關(guān)報告。。(3)質(zhì)量管理理（三）《中華人民民共和國國獸用生生物制品品規(guī)程》I總則獸用生物物制品命命名原則則獸用生物物制品國國家標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品的制制備和標(biāo)標(biāo)定生產(chǎn)用菌菌（毒、、蟲）種種和標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品管理理規(guī)定防止散毒毒辦法生產(chǎn)、檢檢驗用動動物暫行行規(guī)定生產(chǎn)、檢檢驗用細(xì)細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)標(biāo)簽、說說明書與與包裝的的規(guī)定制品檢驗驗的有關(guān)關(guān)規(guī)定制品的貯貯藏、運運輸和使使用辦法法II滅活疫苗苗III活疫苗IV抗血清V診斷制品品VI附錄培養(yǎng)基制制造方法法溶液配制制——PBS、Tris緩沖液等等原料標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)——玻璃瓶、、瓶塞等等試驗方法法——HA、HI、中和試試驗法等等檢驗方法法——活菌計數(shù)數(shù)法、支支原體檢檢驗法測定方法法——甲醛、苯苯酚含量量測定法法等

這些方法法一般為為通用方方法。規(guī)定所用用種毒種毒標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)毒力含毒量安全性免疫原性性純凈特異性效檢用強強度標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)保存期生產(chǎn)用種種毒標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)半成品檢檢驗無菌檢驗驗病毒含量量測定成品檢驗驗物理性狀狀無菌檢驗驗支原體檢檢驗鑒別檢驗驗安全檢驗驗用雞胚檢檢驗用雞檢驗驗效力檢驗驗用雞胚檢檢驗用雞檢驗驗剩余水分分測定真空度檢檢驗規(guī)定所用用種毒同低毒力力活疫苗苗種毒鑒定定同低毒力力活疫苗苗半成品檢檢驗無菌檢驗驗毒價檢驗驗滅活檢驗驗成品檢驗驗物理性狀狀外形劑型成品檢驗驗物理性狀狀外形劑型穩(wěn)定性粘度無菌檢驗驗安全檢驗驗效力檢驗驗甲醛含量量測定三、獸用用生物制制品的質(zhì)質(zhì)量檢驗驗生物制品品的質(zhì)量量檢驗，，應(yīng)從用用于生產(chǎn)產(chǎn)的菌種種、毒種種、蟲種種和原材材料到半半成品的的檢查，，直至最最終的成成品檢驗驗，都屬屬于質(zhì)量量檢查范范圍，應(yīng)應(yīng)貫穿于于生產(chǎn)的的始終，，即全面面質(zhì)量管管理(TQC)。生物制品品質(zhì)量檢檢驗主要要包括物物理性狀狀檢驗、、無菌或或純粹檢檢驗、枝枝原體檢檢驗、鑒鑒別檢驗驗、活菌菌計數(shù)或或病毒含含量測定定、安全全檢驗及及外源病病原體檢檢驗、效效力檢驗驗(效價或恃恃異檢驗驗)、剩余水水分檢驗驗、真空空度測定定，以及及滅活劑劑、防腐腐劑的檢檢查等。。上述各項項檢驗項項目，主主要是指指成品檢檢驗，但但有的只只用于某某些制品品，如剩剩余水分分檢驗和和真空度度測定，，只用于于凍干制制品；活活菌計數(shù)數(shù)和病毒毒含量只只用于弱弱毒活疫疫苗等。。（一）無無菌檢驗驗或純凈凈檢驗生物制品品都不應(yīng)應(yīng)有外源源微生物物。滅活活疫苗不不得含有有活的本本菌或本本毒。活活疫苗只只含有疫疫苗菌和和疫苗毒毒，不含含有任何何其他微微生物。。1.抽樣應(yīng)隨機取取樣，樣樣品應(yīng)有有確切的的代表性性。按滅滅活菌苗苗及血清清批量：：50萬毫升以以下——每批抽樣樣5瓶50～100萬毫升——每批抽樣樣10瓶100萬毫升以以上——每批抽樣樣15瓶同批凍干干制品分分幾柜凍凍干應(yīng)以以柜為單單位，每每柜抽樣樣5瓶。診斷液每每批抽樣樣5瓶。效力檢驗驗同批分分為若干干組分裝裝時，應(yīng)應(yīng)逐組隨隨機抽樣樣檢驗，，抽取樣樣品數(shù)依依需要而而定。2.檢驗用培培養(yǎng)基厭氧及需需氧性細(xì)細(xì)菌檢驗驗——硫乙醇酸酸鹽培養(yǎng)養(yǎng)基(T.G)——酪蛋白胨胨瓊脂(G.A)菌及腐生生菌檢驗驗用——葡萄糖蛋蛋白胨培培養(yǎng)基(G.P)上述培養(yǎng)養(yǎng)基均須須用指定定的需氧氧菌菌株株、厭氧氧菌菌株株及霉菌菌菌株做做靈敏度度測定，，達(dá)到標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)后方方能使用用。3.檢驗及結(jié)結(jié)果判定定（1）含甲醛醛、苯酚酚、汞類類等防腐腐劑和抗抗生素的的制品用T.C培養(yǎng)基50m1，接種供供試品(凍于制品品先做10倍稀釋)1m1，置361C培養(yǎng)3天。自小瓶中中吸取培培養(yǎng)物，，分別接接種T.C小管和G.A斜面各2支，每支支0.2m1，1支置361C，1支置251C另取0.2m1接種1支G.P小管，置置251C，均培養(yǎng)養(yǎng)5天，應(yīng)無無菌生長長。（2）細(xì)菌性性活疫苗苗及不含含防腐劑劑、抗生生素的其其它制品品將供試品品(凍干制品品加稀釋釋液恢復(fù)復(fù)原量)接種T.G小管、G.A斜面或適適于本菌菌生長的的培養(yǎng)基基各2支，每支支0.2m1，1支置361C，1支置251C。另用1支G.P小管，接接種0.2m1，置25-361C，均培養(yǎng)養(yǎng)6天。細(xì)菌菌性活疫疫苗應(yīng)純純粹，即即無其它它菌生長長。3.檢驗及結(jié)結(jié)果判定定(3)血液制品品和混濁濁制品如未加防防腐劑或或抗生素素，可直直接用不不加瓊脂脂的T.G小管和G.A斜面，接接種量、、培養(yǎng)條條件、時時間和判判定標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)同2項。如加有防防腐劑或或抗生素素，檢驗驗方法和和判定同同1項。如培培養(yǎng)后混混濁不易易判定時時，可移移植培養(yǎng)養(yǎng)后再判判定。3.檢驗及結(jié)結(jié)果判定定（4）結(jié)果判判定每批抽檢檢的樣品品(除允許含含一定數(shù)數(shù)量非病病原者外外)應(yīng)全部無無菌或純純凈生長長。如發(fā)現(xiàn)個個別瓶有有雜菌或或結(jié)果可可疑時，，可重檢檢原瓶(如為安瓶瓶或凍干干制品，，可重抽抽樣品)，如無菌菌或無雜雜菌生長長，可作作無菌或或純粹通通過。如仍有雜雜菌，可可抽取加加倍數(shù)量量的樣品品重檢，，個別瓶瓶仍有雜雜菌，則則作為污污染雜菌菌處理。。3.檢驗及結(jié)結(jié)果判定定（1）雜菌計計數(shù)每批污染染制品至至少抽樣樣3瓶，用肉肉湯或蛋蛋白胨水水分別作作50倍稀釋，，接種于于含4％血清及及0.1％血紅素素的馬丁丁瓊脂(或G.A))平板上，，每個樣樣品接種種平板2個，置361C培養(yǎng)48小時后，，再移置置室溫24小時，數(shù)數(shù)雜菌菌菌落數(shù)(CFU)，然后分分別計算算雜菌數(shù)數(shù)。任何1瓶每克被被檢樣品品（或每每頭劑））的非病病原菌數(shù)數(shù)不應(yīng)超超過該規(guī)規(guī)程的規(guī)規(guī)定。如如污染霉霉菌時，，亦作為為雜菌計計算。4.雜菌計數(shù)數(shù)及其病病原性鑒鑒定（2）病原性性鑒定——檢查需氧氧性細(xì)菌菌將污染需需氧性雜雜菌管培培養(yǎng)物移移植1支T.G管或馬丁丁湯，置同條件件下培養(yǎng)培養(yǎng)養(yǎng)24小時。取培養(yǎng)物物用蛋白白胨水稀稀釋100倍，接種種體重18-20g的健康小小鼠3只，每只只皮下注注射0.2m1，觀察10天。4.雜菌計數(shù)數(shù)及其病病原性鑒鑒定（2）病原性性鑒定——檢查厭氧氧性細(xì)菌菌將生長有有雜菌管管延長培培養(yǎng)至96小時，取取出置65C水浴加溫溫30min后移植T.G管或厭氣氣肉肝湯湯1支，在同同樣條件件下培養(yǎng)養(yǎng)24～72小時。如有細(xì)菌菌生長，，將培養(yǎng)養(yǎng)物接種種體重350～450g的豚鼠之之只，每每只肌肉肉注射1m1，觀察10天。如發(fā)發(fā)現(xiàn)制品品同時污污染需氧氧性及厭厭氧性細(xì)細(xì)菌，則則按上述述要求同同時注射射小鼠及及豚鼠。。4.雜菌計數(shù)數(shù)及其病病原性鑒鑒定（2）病原性性鑒定——判定小鼠、豚豚鼠均應(yīng)應(yīng)健活。。如有死亡亡或局部部化膿壞壞死，證證明有病病原菌時時，該批批制品應(yīng)應(yīng)廢棄。。4.雜菌計數(shù)數(shù)及其病病原性鑒鑒定凡用普通通雞胚生生產(chǎn)的各各種弱毒毒疫苗，，將被檢檢物用劃劃線法接接種麥康康凱平板板或S.S瓊脂平板板，經(jīng)37C培養(yǎng)18～24小時后，，挑選無無色半透透明、邊邊緣整齊齊、表面面光滑并并稍突起起的菌落落2～3個，分別別接種于于三糖鐵鐵培養(yǎng)基基。方法是：：先在該該培養(yǎng)基基上層斜斜面涂布布，再穿穿刺至底底部，經(jīng)經(jīng)37C培養(yǎng)24小時后，，如培養(yǎng)養(yǎng)基下層層變黃，，斜面為為淡紅色色時，要要進一步步用多價價沙門氏氏因子血血清作玻玻片凝集集試驗，，如為陽陽性即證證明為沙沙門氏菌菌污染。。除此之外外，有些些生物制制品在需需要的情情況下，，還要進進行支原原體檢驗驗和衣原原體檢驗驗。5.禽沙門氏氏菌的檢檢驗（二）安安全檢驗驗生物制品品的安全全性是其其首要的的條件，，各種制制品都必必須經(jīng)過過安全檢檢驗合格格者方可可出廠。。1．安全檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容檢驗外源源性污染染滅活或脫脫毒效果果檢查殘余毒力力或毒性性物質(zhì)檢檢查檢查對胚胚胎的毒毒性（1）檢驗外外源性污污染不僅是因因為有致致病性細(xì)細(xì)菌的污污染，而而且即使使是非病病原菌，，如數(shù)量量過多，，其代謝謝產(chǎn)物也也會影響響安全。。另外，，外源性性的病毒毒及支原原體的污污染亦是是影響安安全的重重要方面面?；钜呙缭谠诓捎眉?xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)時，可可通過培培養(yǎng)病毒毒的組織織細(xì)胞帶帶來外來來的病毒毒，如：：豬瘟兔兔化弱毒毒疫苗采采用豬腎腎細(xì)胞培培養(yǎng)時，，有可能能帶入野野外豬瘟瘟強毒；；細(xì)胞培培養(yǎng)多用用犢牛血血清，血血清就可可能帶入入牛病毒毒性腹瀉瀉病毒。。使用雞胚胚則可能能帶入雞雞白血病病等，而而且除原原材料以以外，生生產(chǎn)環(huán)境境不佳及及操作不不嚴(yán)密，，亦可能能造成外外源性污污染。1．安全檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容（2）滅活或或脫毒效效果檢查查滅活疫苗苗都是以以致病微微生物加加入甲醛醛或其它它滅活劑劑滅活，，而類毒毒素則是是加入甲甲醛將毒毒素脫毒毒。但如滅活活不徹底底或脫毒毒不完全全，都影影響制品品安全性性。1．安全檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容（3）殘余毒毒力或毒毒性物質(zhì)質(zhì)檢查殘余毒力力是指生生產(chǎn)疫苗苗類制品品的菌(毒)種，本身身是活的的減毒株株或弱毒毒株，允允許有輕輕微毒力力的存在在，能在在接種的的機體內(nèi)內(nèi)表現(xiàn)出出來。這這種殘余余毒力的的大小，，按制品品不同而而有不同同的指標(biāo)標(biāo)要求，，測定和和制定方方法也不不一致。。如無毒炭炭疽芽孢孢苗菌種種的毒力力標(biāo)準(zhǔn)是是在注射射部位引引起劇烈烈水腫，，家兔不不死亡，，豚鼠可可死亡1/2，小鼠可可全部死死亡。又又如羊痘痘雞胚化化弱毒疫疫苗的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)是試試驗羊2/3可發(fā)生不不全經(jīng)過過型痘種種，持續(xù)續(xù)10天左右，，可有部部分體溫溫反應(yīng)。。毒性檢查查主要是是對死菌菌苗或類類毒素這這類制品品，這類類制品雖雖經(jīng)殺菌菌或脫毒毒，但其其本身的的某些成成分，當(dāng)當(dāng)接種時時可引起起有害反反應(yīng)，即即毒性反反應(yīng)。如如滅活疫疫苗某些些污染革革蘭氏陰陰性菌；；仔豬副副傷寒活活疫苗凍凍于后的的存活率率過低會會出現(xiàn)內(nèi)內(nèi)毒素反反應(yīng)。1．安全檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容（4）檢查對對胚胎的的毒性有的病毒毒致弱毒毒株雖對對免疫動動物已經(jīng)經(jīng)致弱，，但還能能通過孕孕畜影響響胚胎。。如國外豬豬瘟的某某些弱毒毒株，就就可通過過孕豬的的胎盤屏屏障傳給給胚胎以以致造成成死胎、、胎兒畸畸形或生生后發(fā)育育不良等等。因此此歐洲藥藥典中明明確規(guī)定定豬瘟病病毒應(yīng)經(jīng)經(jīng)過對胚胚胎毒性性的檢查查。檢查方法法是：選選10頭未免疫疫的母豬豬在懷孕孕25~35天時肌肉肉注射兩兩頭劑的的疫苗，，同時另另選10頭未免疫疫的同齡齡同源懷懷孕母豬豬注射等等量生理理鹽水，，然后觀觀察疫苗苗對胎兒兒或仔豬豬是否有有影響。。1．安全檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容疫苗和免免疫血清清的成品品安全檢檢驗方法法主要是是動物檢檢驗，劑劑量應(yīng)大大于使用用劑量。。能以小動動物作出出正確判判斷者，，多用實實驗小動動物。禽用疫苗苗苗則可可直接以以使用對對象動物物作安檢檢。無論使用用何種動動物，其其首要條條件是選選用敏感感的動物物。安全檢驗驗用動物物一般有有品種要要求，譬譬如：豬豬丹毒以以鴿和小小鼠比較較敏感；；而豬肺肺疫則以以家兔比比較敏感感。2．安全檢檢驗的方方法及要要點一般概念念敏感動動物是不不含母源源抗體的的，如以以豬檢查查豬瘟疫疫苗的安安全性，，就必須須檢查供供試豬是是否含有有母源豬豬瘟抗體體，無母母源抗體體者方可可使用。。除了動動物的敏敏感性外外，動物物的健康康狀況也也與安檢檢結(jié)果的的正確判判斷密切切相關(guān)。。2．安全檢檢驗的方方法及要要點（續(xù)續(xù)）同一種動動物不同同品系其其敏感性性也下一一樣，如如雞新城城疫的安安檢雞，，用我國國土種雞雞就不如如用來航航雞敏感感。又如如不同日日齡的小小鼠對豬豬丹毒的的敏感性性也下一一致，日日齡過大大敏感性性差。試驗期間間的飼養(yǎng)養(yǎng)管理也也會影響響安檢結(jié)結(jié)果的判判斷，安安檢動物物舍應(yīng)與與健康動動物和其其它試驗驗動物分分開。在在安檢期期間，如如安檢動動物有死死亡時，，必須及及時解剖剖明確原原因，在在整個安安檢期內(nèi)內(nèi)應(yīng)及時時觀察動動物健康康情況，，并予以以記錄。。3．安全檢檢驗的判判斷安檢期死死亡動物物經(jīng)解剖剖明確非非制品所所致者可可以重檢檢，如檢檢驗結(jié)果果可疑難難以判定定時，應(yīng)應(yīng)以加倍倍頭數(shù)該該種動物物重檢。。凡規(guī)定用用多種動動物進行行安檢的的制品，，如牛瘟瘟兔化綿綿羊化活活疫苗用用小鼠和和豚鼠兩兩種動物物檢驗，，兩種均均應(yīng)安全全合格。。用小動物物檢驗不不合格者者，有的的規(guī)定可可用使用用對象動動物重檢檢。但用用使用對對象動物物檢驗不不合格者者，不能能再以小小動物重重檢。（1）用于雞雞的活疫疫苗檢驗驗4．外源病病毒檢驗驗取樣品2～3瓶混合(如是細(xì)胞胞苗，須須用超聲聲波或3次凍融方方法破壞壞細(xì)胞)，用相應(yīng)應(yīng)含專一一特異性性抗體的的血清中中和后作作為檢品品。用雞作檢檢驗用動動物，被被檢樣品品不做處處理。如如對檢驗驗樣品中中病毒中中和不完完全，可可用高效效價血清清重做，，或用制制品使用用對象進進行檢驗驗。方法1：用9~11日齡SPF雞胚20個，分為為2組，每胚胚各以10個使用劑劑量接種種，第一一組10個胚接種種于尿囊囊腔內(nèi)；；第二組組10個胚接種種于絨毛毛尿囊膜膜上，在在37C培養(yǎng)，棄棄去在接接種后24小時內(nèi)死死亡的胚胚，但每每組胚須須存活6個以上。。7天后剖檢檢，胎兒兒應(yīng)發(fā)育育正常，，絨毛尿尿囊膜無無病變。。取雞胚胚液應(yīng)無無血凝價價。（1）用于雞雞的活疫疫苗檢驗驗——雞胚檢查查法方法2：用來自對對腦脊髓髓炎易感感雞群的的1~7日齡雞胚胚15只，每胚胚卵黃囊囊內(nèi)接種種0.2m1，繼續(xù)孵孵化直至至孵出雛雛雞。對對雛雞觀觀察15天，不應(yīng)應(yīng)出現(xiàn)運運動失調(diào)調(diào)，或呈呈現(xiàn)AE組織病理理變化的的死亡，，并至少少有9只胚孵出出小雞。。用雞胚胚檢查無無結(jié)果或或可疑時時，可用用雞檢1次。采用用補補體結(jié)合合(COFAL)試驗，即即用9～11日齡的SPF雞胚，制制成雞胚胚成纖維維細(xì)胞單單層，將將用特異異性血清清中和過過的疫苗苗(至少含50個使用劑劑量)接種于成成纖維細(xì)細(xì)胞單層層上，維維持培養(yǎng)養(yǎng)不少于于14天，在此此期間每每隔3~4天細(xì)胞繼繼代1次。培養(yǎng)養(yǎng)結(jié)束時時，做COFAL試驗檢查查細(xì)胞中中應(yīng)無雞雞白血病病病毒。。（1）用于雞雞的活疫疫苗檢驗驗——檢查禽白白血病病病毒用適于接接種本疫疫苗日齡齡的SPF雞20只，點眼眼、滴鼻鼻接種10個使用劑劑量，肌肌肉注射射100個使用劑劑量，接接種后21天，按上上述方法法重復(fù)接接種1次，第一一次接種種后42天采血，，進行有有關(guān)疫病病的血清清抗體檢檢驗。在42天內(nèi)，不不應(yīng)有疫疫苗引起起的局部部或全身身癥狀和和呼吸道道癥狀或或死亡。。如有死死亡，應(yīng)應(yīng)做病理理學(xué)檢驗驗，查明明是否由由于疫苗苗所致。。血清抗抗體檢驗驗，除本本疫苗所所產(chǎn)生的的特異性性抗體外外，不應(yīng)應(yīng)有其它它疫苗的的抗體存存在。（1）用于雞雞的活疫疫苗檢驗驗——用雞檢查查方法細(xì)胞制品品檢驗，，將3瓶樣品混混合，經(jīng)經(jīng)3次凍融后后，接種種細(xì)胞單單層培養(yǎng)養(yǎng)4天，傳第第二代，，取培養(yǎng)養(yǎng)物，分分別進行行丙酮固固定后，，以適宜宜的熒光光抗體進進行染色色。檢驗內(nèi)容容：豬細(xì)胞苗苗：BVDV、PRV、RV、PPV、HCV牛羊細(xì)胞胞苗：BVDV、RV、PRV、PPV、BTV馬細(xì)胞苗苗：馬傳傳染性貧貧血病病病毒犬細(xì)胞苗苗：RV、PRV、PPV、BVDV。(2)非禽源細(xì)細(xì)胞的活活疫苗檢檢驗——熒光抗體體檢查法法(2)非禽源細(xì)細(xì)胞的活活疫苗檢檢驗——熒光抗體體檢查法法檢驗方法法及判定定：確定被檢檢對象后后，取片片進行染染色與鏡鏡檢。若被檢樣樣出現(xiàn)任任何一種種特異熒熒光，為為不合格格；若陽性對對照組不不出現(xiàn)特特異熒光光或不明明顯為無無結(jié)果，，可以重重檢。若被檢組組出現(xiàn)不不明顯熒熒光，必必須重檢檢，重檢檢仍出現(xiàn)現(xiàn)不明顯顯熒光，，為不合合格。疫苗用相相應(yīng)特異異性血清清中和后后，用Vero細(xì)胞3個單層，，總面積積不少于于100cm2，每個單單層接檢檢品1ml，連傳2代，每代代7天，應(yīng)不不出現(xiàn)細(xì)細(xì)胞病變變，并無無紅細(xì)胞胞吸附因因子存在在及熒光光抗體檢檢查無特特異熒光光。(2)非禽源細(xì)細(xì)胞的活活疫苗檢檢驗——綠猴腎(Vero)傳代細(xì)胞胞檢查法法檢測外源源病毒時時，亦可可采用致致細(xì)胞病病變和(或)紅細(xì)胞吸吸附試驗驗。先用用相應(yīng)的的特異性性血清中中和后，，接種敏敏感的細(xì)細(xì)胞單層層進行培培養(yǎng)。A.致細(xì)胞病病變的檢檢測取經(jīng)傳代代后培養(yǎng)養(yǎng)至少7天的細(xì)胞胞單層(每個cm2)1個或多個個，用適適宜染色色液，對對細(xì)胞單單層進行行染色，，觀察細(xì)細(xì)胞單層層，檢查查包涵體體、巨細(xì)細(xì)胞的數(shù)數(shù)目異常常或其它它由外源源病毒引引起的細(xì)細(xì)胞病變變的出現(xiàn)現(xiàn)情況。。(3)用細(xì)胞單單層生產(chǎn)產(chǎn)的病毒毒性活疫疫苗檢驗方法法：取傳代后后培養(yǎng)7天以上的的細(xì)胞單單層(每個6cm2)至少1瓶，以PBS洗滌細(xì)胞胞單層數(shù)數(shù)次，加加入0.2%%紅細(xì)胞懸懸液適量量，覆蓋蓋整個單單層表面面。紅細(xì)胞懸懸液應(yīng)是是豚鼠紅紅細(xì)胞、、人O型紅細(xì)胞胞、雞紅紅細(xì)胞的的等量混混合懸液液，混合合或分分別滴加加于不同同的細(xì)胞胞單層上上。4C放置30min，用PBS洗滌，檢檢查紅細(xì)細(xì)胞吸附附情況。。若無明顯顯的紅細(xì)細(xì)胞吸附附現(xiàn)象可可重復(fù)一一次，在在細(xì)胞單單層加入入紅細(xì)胞胞懸液后后置20～25C培養(yǎng)30min，用PBS洗滌，再再次檢查查紅細(xì)胞胞吸附情情況。(3)用細(xì)胞單單層生產(chǎn)產(chǎn)的病毒毒性活疫疫苗——紅細(xì)胞吸吸附病毒毒的檢測測若出現(xiàn)外外源病毒毒所致的的特異性性細(xì)胞病病變或有有紅細(xì)胞胞吸附現(xiàn)現(xiàn)象，判判不合格格。若疑有外外源病毒毒污染，，但又不不能通過過其它試試驗排除除這種可可能性，，則作不不合格處處理。(3)用細(xì)胞單單層生產(chǎn)產(chǎn)的病毒毒性活疫疫苗——判定制品的效效力是指指它的使使用價值值。效力不好好的制品品，如為為疫苗和和類毒素素，則無無法有效效地控制制疫情。。治療用的的血清，，則無法法醫(yī)治病病畜，從從而使疫疫病蔓延延。診斷制品品，則影影響檢疫疫及診斷斷的正確確性。（三）效效力檢驗驗（三）效效力檢驗驗（1）免疫原原性菌(毒)種的免疫疫原性優(yōu)優(yōu)劣，決決定生物物制品質(zhì)質(zhì)量的重重要因素素，除其其作為免免疫原的的能力外外，還與與血清型型等經(jīng)諸諸多因素素有關(guān)，，是生物物制品菌菌(毒)種檢驗的的重要方方面。如制豬丹丹毒滅活活疫苗的的菌種應(yīng)應(yīng)選擇2型菌，因因為2型菌株免免疫原性性良好，，試驗證證明對其其它菌型型也有免免疫力。。又如流流感與口口蹄疫，，因其在在流行中中病原常常有型的的變化，，所以用用以制備備疫苗毒毒株的型型必須與與流行型型相對應(yīng)應(yīng)。否則則即使是是制品的的免疫原原性良好好，也收收不到免免疫效果果。1．效力檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容(2)制品的免免疫持續(xù)續(xù)期不同主動動制品免免疫持續(xù)續(xù)期各異異，理想想制品應(yīng)應(yīng)具有較較長的免免疫持續(xù)續(xù)期，免免疫持續(xù)續(xù)過短的的應(yīng)考慮慮增加免免疫接種種的次數(shù)數(shù)。免疫持續(xù)續(xù)期通常常是在選選育菌(毒)種時測定定。1．效力檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容(3)抗原的穩(wěn)穩(wěn)定性一般滅活活苗和血血清的熱熱穩(wěn)定性性較好，，弱毒疫疫苗較差差，但也也隨制品品的種類類而異，，制品熱熱穩(wěn)定性性也與制制品中所所加入的的穩(wěn)定劑劑或制備備工藝有有關(guān)。1．效力檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容(4)抗原量的的測定疫苗效力力取決于于接種動動物的抗抗原量，，即一定定量病毒毒(細(xì)菌)才能在體體內(nèi)增殖殖到一定定程度，，促使機機體產(chǎn)生生免疫應(yīng)應(yīng)答。若數(shù)量不不夠，則則達(dá)不到到免疫效效果。所所以，常常以測定定抗原量量來檢查查制品的的效力，，當(dāng)然實實驗室的的檢定指指標(biāo)應(yīng)和和使用效效果一致致。1．效力檢檢驗的內(nèi)內(nèi)容所用動物物依制品品而異，，但使用用敏感小小動物應(yīng)應(yīng)與使用用對象動動物有平平行關(guān)系系，禽用用疫苗一一般均使使用對象象動物作作檢驗。。當(dāng)小動物物檢驗如如遇有某某種原因因難以判判斷者，，可以改改用制品品使用對對象動物物檢驗。。使用對對象動物物檢驗不不合格者者，不能能再用小小動物重重檢。有有的制品品沒有相相應(yīng)小動動物，只只能用使使用對象象動物檢檢驗，如如抗豬瘟瘟血清與與羊痘活活疫苗只只能用豬豬和羊效效檢。動物保護護試驗的的方法有有多種，，但凡需需攻毒者者，均應(yīng)應(yīng)設(shè)立同同品種同同來源的的同批動動物作對對照組，，并必須須在特設(shè)設(shè)的隔離離強毒動動物舍內(nèi)內(nèi)進行。。2．成品的的效力檢檢驗（1）動物保保護力試試驗——使用動物物的原則則這種方法法是以待待檢品接接種動物物，經(jīng)2~3周后，用用相應(yīng)的的強毒攻攻擊。觀觀察動物物接種后后所建立立的主動動免疫抗抗感染水水平，即即以動物物的存活活或不受受感染的的情況來來判定制制品的效效力。（1）動物保保護力試試驗——定量強毒毒攻擊法法例如：豬丹毒活活疫苗效效檢，用用小鼠10只，每只只注射0.02個使用劑劑量豬丹丹毒活疫疫苗，14天以后連連同未接接種的小小鼠3只攻擊1000個小鼠MLD強毒，另另3只攻1個MLD。觀察10天，免疫疫組存活活8只以上，，攻1000MLD對照組全全死、攻攻1個MLD對照小鼠鼠至少死死亡2只為合格格。如以豬檢檢驗則用用易感豬豬10頭，其中中5頭接種疫疫苗，每每頭注射射1m1活疫苗，，14天后連同同對照組組5頭，每頭頭攻擊致致死量的的強毒，，免疫豬豬保護4頭以上，，對照豬豬全部發(fā)發(fā)病，并并有2頭以上死死亡，疫疫苗為效效力合格格。這種方法法是把動動物分為為兩大組組，一為為免疫組組，一為為對照組組，兩大大組又各各分為相相等的若若干小組組，每小小組動物物數(shù)相等等。免疫動物物均用同同一劑量量的制品品接種免免疫，經(jīng)經(jīng)一定時時間后，，與對照照組同時時用不同同稀釋倍倍數(shù)強毒毒攻擊，，比較免免疫組與與對照組組的存活活率。按LD50計算，如如對照組組攻10-5稀釋毒有有50%的動物死死亡，而而免疫組組攻10-3稀釋毒死死50%，即免疫疫組對強強毒的耐耐受力比比對照組組高100倍，亦即即免疫組組有100個LD50的保護力力。（1）動物保保護力試試驗——定量免疫疫變量攻攻擊法將疫苗稀稀釋為各各種不同同的免疫疫劑量接接種動物物，間隔隔一定時時間，各各免疫組組均用同同一劑量量強毒攻攻擊，觀觀察一定定時間，，用統(tǒng)計計學(xué)方法法計算能能使50%的動物得得到保護護的免疫疫劑量。。（1）動物保保護力試試驗——變量免疫疫定量攻攻擊法例如：雞新城疫疫油乳劑劑滅活苗苗檢驗，，用3~4周齡易感感雞35只，以1/25、1/50、1/100稀釋的疫疫苗0.5ml劑量，每每個稀釋釋度各皮皮下或肌肌肉注射射10只雞，另另5只不接種種作對照照。3~4周后，每每只雞肌肌肉注射射10-5ELD50的強毒，，觀察14天。記錄錄每組的的死亡數(shù)數(shù)，對照照應(yīng)全部部死亡，，最后算算出50%的保護劑劑量，以以PD50表示。每每一使用用劑量(0.5ml))的效價應(yīng)應(yīng)不低于于50個PD50。（1）動物保保護力試試驗——被動免疫疫抗體測測定變量量用高度免免疫的動動物抗病病血清注注射易感感動物，，經(jīng)一定定時間(一般1~3天)用相應(yīng)的的強毒攻攻擊，觀觀察血清清抗體被被動免疫疫所引起起的保護護作用。。例如：炭疽血清清檢驗，，用8只豚鼠，，每組4只，分別別注射被被檢血清清0.5和1ml，24小時后，，連同不不注血清清對照豚豚鼠4只攻擊致致死量的的炭疽芽芽孢液，，如對照照組7天內(nèi)全死死，兩組組免疫豚豚鼠共健健活6只以上；；或?qū)φ照战M死亡亡3/4，免疫組組全部健健活時，，血清為為合格有有效。有的疫苗苗也可用用這種方方法檢定定效力，，即用疫疫苗接種種免疫試試驗動物物后，然然后采取取免疫動動物的血血清測定定其抗體體效價，，來判定定疫苗的的免疫力力，如羊羊梭菌多多聯(lián)干粉粉滅活疫疫苗即用用此法。。某些活疫疫苗的菌菌數(shù)與保保護力之之間有著著密切而而穩(wěn)定的的關(guān)系，，因此，，可以不不用動物物來測保保護力，，只需要要進行細(xì)細(xì)菌計數(shù)數(shù)?；罹鷶?shù)能達(dá)達(dá)到使用用劑量規(guī)規(guī)定要求求者，即即可保證證免疫效效力。如無毒炭炭疽芽孢孢苗計活活芽孢數(shù)數(shù)，每毫毫升含活活芽孢數(shù)數(shù)應(yīng)在500萬～2000萬之間。。布魯氏氏菌活疫疫苗、仔仔豬副傷傷寒活疫疫苗也是是用計活活菌數(shù)測測定。（2）活菌計計數(shù)與病病毒量的的滴定——活菌計數(shù)數(shù)雞馬立克克氏病活活疫苗采采用蝕斑斑計數(shù)，，無論是是HVT還是“814”疫苗都采采用此法法，因為為火雞皰皰疹病毒毒與馬立立克病毒毒都能形形成蝕斑斑，蝕斑斑的數(shù)量量又與雞雞保護率率之間有有直接而而穩(wěn)定的的關(guān)系，，因此通通過蝕斑斑形成單單位(PFU)測定進行行檢驗。。豬瘟細(xì)胞胞苗測定定對兔的的發(fā)病量量，≥10-5為合格。。雞新城疫疫低毒力力活疫苗苗測其EID50，每頭份份EID50≥106為合格。。多種細(xì)胞胞苗用TCID50作為病毒毒滴度標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)。（2）活菌計計數(shù)與病病毒量的的滴定——蝕斑計數(shù)數(shù)或其它它滴定病病毒量的的方法在我國的的獸醫(yī)生生物制品品的成品品檢驗中中使用血血請學(xué)檢檢驗方法法，主要要用于診診斷用制制品。因因為絕大大多數(shù)診診斷制品品都是用用于血清清學(xué)試驗驗，所以以也必須須用血清清學(xué)方法法檢驗其其敏感性性和恃異異性。在在其它生生物制品品中也有有少數(shù)使使用血清清學(xué)方法法檢驗的的，如牛牛瘟活疫疫苗，在在效檢時時當(dāng)體溫溫反應(yīng)可可疑時可可用體溫溫可疑牛牛的血清清以免作作中和試試驗以判判定其效效力。又又如馬傳傳染性貧貧血病活活疫苗的的效檢，，是以安安全檢驗驗馬定期期作血清清學(xué)檢查查，凡血血清學(xué)陽陽轉(zhuǎn)2/3--3/4者，認(rèn)為為其效價價合格。。在獸醫(yī)生生物制品品效檢中中血清學(xué)學(xué)方法有有如下幾幾種：（3）血清學(xué)學(xué)試驗檢檢驗方法法A.凝集試驗驗?zāi)囼烌炗性嚬芄芊ㄅc平平板法兩兩種，前前者為布布魯氏茵茵試管凝凝集試驗驗抗原與與陰陽性性血清的的檢驗等等，后者者為布魯魯氏菌平平板試驗驗抗原檢檢驗等。。B.沉淀試驗驗沉淀試驗驗法有三三種：①①環(huán)狀沉沉淀反應(yīng)應(yīng)，如炭炭疽沉淀淀素血清清的檢驗驗；②瓊瓊脂擴散散反應(yīng)，，如馬傳傳染性貧貧血瓊擴擴抗原的的檢驗；；③培養(yǎng)養(yǎng)凝巢試試驗法，，如豬丹丹毒抗原原的檢驗驗。（3）血清學(xué)學(xué)試驗檢檢驗方法法C.中和試驗驗中和試驗驗用于獸獸醫(yī)生物物制品的的效力檢檢驗比其其它血清清學(xué)方法法應(yīng)用較較多，在在疫苗中中除牛瘟瘟與馬傳傳貧疫苗苗以外，，尚有小小鵝瘟活活疫苗，，一些梭梭菌屬滅滅活疫苗苗等。在在診斷液液的檢驗驗中也較較多用，，如牛鼻鼻氣管炎炎抗原、、產(chǎn)氣英英膜梭菌菌定型血血清等。。（3）血清學(xué)學(xué)試驗檢檢驗方法法D.補體結(jié)合合試驗這在很多多診斷用用制品中中常用，，如牛肺肺疫補體體結(jié)合試試驗抗原原、馬傳傳染性貧貧血補體體結(jié)合試試驗抗原原、布魯魯氏菌補補體結(jié)合合試驗抗抗原等。。E.抗毒素單單位的測測定抗毒素的的測定方方法仍然然是利用用抗原抗抗體反應(yīng)應(yīng)，但抗抗毒素血血清中所所含的抗抗毒素抗抗體，國國際上都都采用“單位”來表示它它的效價價，抗毒毒單位簡簡稱“AE”，是德文文Antitoxineinheit的縮寫。。例如：如破傷風(fēng)風(fēng)抗毒素素單位的的測定，，是將被被檢血清清不同倍倍數(shù)稀釋釋與定量量標(biāo)準(zhǔn)毒毒素中和和，同時時以標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)血清與與定量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)毒素素作對照照，用小小鼠來測測定，以以與對照照動物死死亡時間間相近的的最高稀稀釋度數(shù)數(shù)的一半半，即為為待檢血血清的抗抗毒單位位。每毫毫升被檢檢血清應(yīng)應(yīng)含1000AE以上，精精制的每每毫升含含2000AE以上。（3）血清學(xué)學(xué)試驗檢檢驗方法法F.類毒素單單位的測測定在獸醫(yī)生生物制品品中，破破傷風(fēng)類類毒素的的效檢用用免疫動動物攻標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)毒素素法。但但在分裝裝前必先先測定其其結(jié)合力力單位(EC))，并規(guī)定定混合后后的類毒毒素結(jié)合合力單位位應(yīng)不少少于250個EC。結(jié)合力單單位的測測定是利利用抗原原抗體反反應(yīng)原理理，并通通過動物物觀察類類毒素與與抗毒素素結(jié)合的的程度來來判斷類類毒素的的質(zhì)量。。（3）血清學(xué)學(xué)試驗檢檢驗方法法A.與標(biāo)準(zhǔn)品品(對照參考考品)同時注射射致敏動動物測定定反應(yīng)值值如結(jié)核菌菌素，被被檢菌素素用一個個與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)菌素相相當(dāng)?shù)南∠♂尪?如均稀釋釋為1:1000))，用致敏敏豚鼠測測定，兩兩者反應(yīng)應(yīng)面積比比值為10.1，即認(rèn)為為合格。。B.熱型反應(yīng)應(yīng)與發(fā)病病觀察如牛瘟活活疫苗，，用綿羊羊效檢，，規(guī)定應(yīng)應(yīng)有2/3羊為定型型熱反應(yīng)應(yīng)。豬瘟瘟兔化弱弱毒活疫疫苗觀察察接種兔兔熱型反反應(yīng)；羊羊痘雞胚胚化弱毒毒疫苗接接種易感感羊觀察察發(fā)痘情情況等。。（4）其它效效檢方法法(1)檢驗動物物的影響響效力檢驗驗?zāi)壳爸髦饕€是是以動物物保護試試驗為主主。動物物的品種種、健康康狀態(tài)和和飼養(yǎng)管管理等對對效力都都有明顯顯的影響響，即使使按照所所規(guī)定的的要求選選用檢驗驗動物，，動物個個體的差差異仍然然存在，，這對效效檢的正正確性有有一定的的影響。。因此實實驗動物物的規(guī)格格化，應(yīng)應(yīng)是生物物制品中中一個重重要問題題。(2)培養(yǎng)基的的影響使用的培培養(yǎng)基，，特別是是作活菌菌什數(shù)的的培養(yǎng)基基對計數(shù)數(shù)結(jié)果影影響更為為明顯。。有些獸獸用生物物制品菌菌數(shù)不僅僅是質(zhì)量量標(biāo)準(zhǔn)而而且是量量的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)，而培培養(yǎng)基質(zhì)質(zhì)量不一一致時，，菌數(shù)就就會出現(xiàn)現(xiàn)較大的的差異，，因此培培養(yǎng)基質(zhì)質(zhì)量規(guī)格格是影響響效驗的的另一因因素3.影響效力力檢驗的的因素與與應(yīng)注意意的問題題(3)增設(shè)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品對照照在我國獸獸醫(yī)生物物制品中中，除破破傷風(fēng)抗抗毒素、、雞馬立立克氏病病活疫苗苗和一些些診斷用用制品使使用標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品或參參照品作作為對照照外，其其它制品品還沒有有標(biāo)準(zhǔn)品品或參照照品作為為對照，，這對正正確評價價制品效效力會有有影響。。（四）其其它檢驗驗(1)一致性檢檢驗的定定義一致性檢檢驗(identitytest)，又名鑒鑒別檢驗驗，或同同一性試試驗。這這種試驗驗主要用用于：①生物制制品的試試驗，即即根據(jù)生生物制品品的性狀狀(生物學(xué)、、理化方方面等)進行核實實檢查。。②決定微微生物種種屬的試試驗，即即在生物物制品中中的應(yīng)用用，既可可屬于效效力檢驗驗的范圍圍，如抗抗原性的的變異、、毒力的的變化等等，亦可可屬于安安全檢驗驗的范圍圍。目前前我國規(guī)規(guī)程中有有不少制制品有此此檢驗規(guī)規(guī)定。1．一致性性檢驗(2)一致性檢檢驗方法法一般采用用已知特特異血清清(國家檢定定機構(gòu)發(fā)發(fā)給的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)血清清)或參考血血清和其其它適宜宜方法，，對制品品進行特特異鑒定定。不同同的制品品采用不不同的方方法，如如中和試試驗、凝凝集試驗驗、沉淀淀試驗、、間接血血凝試驗驗、血凝凝試驗、、抑制血血凝試驗驗