動(dòng)物細(xì)胞工程918751228

1、植物物細(xì)胞工工程常用用的技術(shù)術(shù)有哪些些？2、植物物組織培培養(yǎng)的過過程？3、植物物組織培培養(yǎng)的理理論基礎(chǔ)礎(chǔ)？4、植物物體細(xì)胞胞雜交的的過程和和理論基基礎(chǔ)？復(fù)習(xí)：動(dòng)物細(xì)胞胞工程專題2細(xì)細(xì)胞工工程動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞胞融合生產(chǎn)單克克隆抗體體動(dòng)物細(xì)胞胞核移植植動(dòng)物細(xì)胞胞工程常常用技術(shù)術(shù)動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)是是其他細(xì)細(xì)胞工程程技術(shù)的的基礎(chǔ)思考與回回憶：1.動(dòng)物物細(xì)胞全全能性特特點(diǎn)？隨著細(xì)胞胞分化程程度的提提高而逐逐漸受到到限制，，分化潛潛能變窄窄。細(xì)胞胞核仍具具有全能能性。2.能否否用植物物組織培培養(yǎng)的方方法使動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞胞發(fā)育成成動(dòng)物個(gè)個(gè)體？不能。動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞胞和組織織在體外外培養(yǎng)的的過程中中，伴隨隨一定的的組織分分化，不不管采用用什么手手段和培培養(yǎng)條件件，由于于細(xì)胞的的運(yùn)動(dòng)、、變化，，細(xì)胞發(fā)發(fā)生結(jié)構(gòu)構(gòu)功能變變異，結(jié)結(jié)果長時(shí)時(shí)間的培培養(yǎng)只能能使單一一類型的的細(xì)胞保保存下來來，最終終成了簡簡單的細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)和和本節(jié)內(nèi)容容：一、動(dòng)物物細(xì)胞培培養(yǎng)情境：在治療燒燒傷病人人時(shí)，通通常采用用的方法法是取燒燒傷病人人的健康康皮膚進(jìn)進(jìn)行自體體移植。。但對(duì)一一個(gè)大面面積燒傷傷的病人人來說，，自身健健康皮膚膚有限，，使用他他人皮膚膚來源不不同，而而且會(huì)產(chǎn)產(chǎn)生排異異反應(yīng)。。那么，，怎樣能能獲得大大量的自自體健康康皮膚呢呢？1.動(dòng)物物細(xì)胞培培養(yǎng)的概概念：動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)就就是從動(dòng)動(dòng)物有機(jī)機(jī)體中取取出相關(guān)關(guān)的組織織,將它它分散成成單個(gè)細(xì)細(xì)胞,然然后,放放在適宜宜的培養(yǎng)養(yǎng)基中,讓這些些細(xì)胞生生長和增增殖.思考：動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)的的目的是是什么？？與植物物組織培培養(yǎng)目的的相同嗎嗎？動(dòng)物的細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)的理論論依據(jù)（（原理））？細(xì)胞增殖殖2.動(dòng)物物細(xì)胞培培養(yǎng)的原原理：細(xì)細(xì)胞增殖殖定義：人們通常常將動(dòng)物物組織消化后的初次培養(yǎng)養(yǎng)稱為原代代培養(yǎng)。。胰蛋白酶酶處理取出組織織胚胎或幼幼齡動(dòng)物物器官組組織剪碎單個(gè)細(xì)胞胞細(xì)胞懸液液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)養(yǎng)瓶內(nèi)培培養(yǎng)（（貼壁生長長長成單層層細(xì)胞。。有接觸抑制制現(xiàn)象）。①原代培養(yǎng)養(yǎng)3：過程程圖示原代培養(yǎng)細(xì)胞懸液液CO2培養(yǎng)箱強(qiáng)調(diào)一：：細(xì)胞貼貼壁過程程■細(xì)胞貼壁壁：在培養(yǎng)瓶瓶懸液中中分散的的細(xì)胞很很快就貼貼附在瓶瓶壁上，，稱為細(xì)細(xì)胞貼壁壁。■培養(yǎng)瓶或或培養(yǎng)皿皿壁要求求：表面光滑滑、無毒毒、易于于帖附。?！霎?dāng)貼壁細(xì)細(xì)胞分裂裂生長到到表面相相互接觸觸時(shí),細(xì)細(xì)胞就會(huì)會(huì)停止分分裂增殖殖，這種種現(xiàn)象稱稱為細(xì)胞胞的接觸觸抑制。。強(qiáng)調(diào)二：：接觸抑抑制定義：當(dāng)原代培培養(yǎng)的細(xì)細(xì)胞處于于接觸抑制制后,用胰蛋白酶酶處理,使細(xì)胞從從瓶壁上上脫離下來,然后加入入新的培培養(yǎng)液,將細(xì)胞分分離稀釋釋,并從原培養(yǎng)養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)接到新新的培養(yǎng)養(yǎng)瓶內(nèi),這個(gè)過過程稱傳代培養(yǎng)養(yǎng).（分瓶培養(yǎng)養(yǎng)的過程程）②傳代培培養(yǎng)▲細(xì)胞株：：傳代細(xì)細(xì)胞一般般能傳到到40-50代代，遺傳物質(zhì)質(zhì)一般不不會(huì)發(fā)生生改變，叫細(xì)胞胞株。強(qiáng)調(diào)：細(xì)細(xì)胞系、、細(xì)胞株株▲細(xì)胞系：：傳代50代以以后不能能再傳下下去，部部分細(xì)胞胞遺傳物質(zhì)質(zhì)發(fā)生了了改變，能連續(xù)續(xù)傳代，，獲得不不死性，，叫細(xì)胞胞系。細(xì)胞株和和細(xì)胞系系的區(qū)別別：細(xì)胞系的的遺傳物物質(zhì)改變變，具有有癌細(xì)胞胞的特點(diǎn)點(diǎn)，失去去接觸抑抑制，容容易傳代代培養(yǎng)。。3.總結(jié)結(jié)：動(dòng)物物細(xì)胞培培養(yǎng)過程程動(dòng)物胚胎胎或幼齡齡動(dòng)物的的組織、、器官細(xì)胞懸浮浮液剪碎用胰胰蛋白酶酶處理10代細(xì)細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)養(yǎng)瓶40-50代細(xì)細(xì)胞傳代培養(yǎng)養(yǎng)無限傳代代單個(gè)細(xì)胞胞加培養(yǎng)液液稀釋傳代10代以內(nèi)內(nèi)，遺傳物質(zhì)質(zhì)不改變變，保持持正常二二倍體核核型。傳代10-50代左右右，增長長緩慢以以至于完完全停止止，部分細(xì)胞胞核型可可能發(fā)生生變化（遺傳物物質(zhì)可能能改變）為什么用用胰蛋白白酶處理理？原代培養(yǎng)養(yǎng)特點(diǎn)：：細(xì)胞貼壁壁、接觸觸抑制繼續(xù)傳代代培養(yǎng)少少部分細(xì)細(xì)胞獲得不死死性，細(xì)胞突變變，遺傳物質(zhì)質(zhì)已經(jīng)改改變，等同于癌癌細(xì)胞。原代培養(yǎng)養(yǎng)4.動(dòng)物物細(xì)胞培培養(yǎng)的條條件:1）無菌菌無毒的的環(huán)環(huán)境：適宜的溫溫度：人和哺乳乳動(dòng)物細(xì)細(xì)胞最適適溫度為為36.5±0.5℃℃。適宜的酸酸堿度：：PH：7.2-7.4液體合成成培養(yǎng)基基：（糖、氨基基酸）、、促生長長因子、、（無機(jī)機(jī)鹽、微微量元素素）等；通常常還需加加入血漿、血血清等天然成分分。4）氣體體環(huán)境：：2）營養(yǎng)養(yǎng)：3）溫度度和pH：“95％％空氣+5％CO2”的混合氣氣體培養(yǎng)養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞胞代謝必必須的；；CO2維持培養(yǎng)養(yǎng)液的PH。對(duì)培養(yǎng)液液和所有有培養(yǎng)用用具無菌處理理；培養(yǎng)液中中添加抗生生素防止培養(yǎng)養(yǎng)過程中中污染；；定期更換換培養(yǎng)液液以清除代代謝產(chǎn)物物，防止止對(duì)培養(yǎng)養(yǎng)細(xì)胞造造成危害害。主要有：：營養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)（糖、、氨基酸酸、無機(jī)機(jī)鹽、微微量元素素、促生生長因子子）動(dòng)物血清清（10%～20%））等培養(yǎng)液（（液體培培養(yǎng)基））的成分分血清如：小牛牛血清等等血漿如：雞血血漿等組織浸出出液可用雞胚胚胎浸出出液,水解乳蛋蛋白由乳白蛋蛋白質(zhì)經(jīng)經(jīng)水解得得到淡黃黃色粉末末,一般般可配制制成0.5%溶溶液。天然培養(yǎng)養(yǎng)基小資料根據(jù)細(xì)胞胞的生理理生化代代謝特點(diǎn)點(diǎn),人工配制制而成,為為細(xì)胞提提供一個(gè)個(gè)近似體體內(nèi)生存存環(huán)境,又便于于控制和和標(biāo)準(zhǔn)化化操作基本成分分各種碳水水化合物物(糖)、氨基基酸、維維生素、、無機(jī)鹽鹽、生長長因子、、激素等等常用培養(yǎng)養(yǎng)液幾十種人工合成成培養(yǎng)基基小資料問題3：：為什么么用胰蛋蛋白酶處處理？問題1：：為什么么選用動(dòng)動(dòng)物胚胎胎或幼齡齡個(gè)體的的器官或或組織做做動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)材料？？因?yàn)槠浼?xì)細(xì)胞生命命力旺盛盛，分裂裂能力強(qiáng)強(qiáng)，分化化程度低低。問題2:為為什么么培養(yǎng)養(yǎng)前要要將組組織細(xì)細(xì)胞分分散成成單個(gè)個(gè)細(xì)胞胞？擴(kuò)大細(xì)細(xì)胞與與培養(yǎng)養(yǎng)液的的接觸觸面積積，利利與細(xì)細(xì)胞吸吸收營營養(yǎng)。。動(dòng)物組組織細(xì)細(xì)胞間間隙中中含有有一定定量的的彈性性纖維維等蛋蛋白質(zhì)質(zhì)，胰蛋白酶酶處理理動(dòng)物物組織織，可可以使使動(dòng)物物組織織細(xì)胞胞間的的蛋白白質(zhì)和和細(xì)胞外外的其其他成成分酶酶解，，獲得得單個(gè)個(gè)細(xì)胞胞。問題4：為為什么么用胰胰蛋白白酶處處理而而不用用胃蛋蛋白酶酶？動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)的的最適適PH值為為7.2-7.4，，胰蛋蛋白酶酶作用用的適適宜PH為為7.2-8.4，，胃蛋蛋白酶酶適宜宜PH為2.胃胃蛋白白酶在在PH為7.2-7.4的動(dòng)動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)中中無活活性。。問題5：用用胰蛋蛋白酶酶處理理不會(huì)會(huì)把所所培養(yǎng)養(yǎng)的細(xì)細(xì)胞消消化掉掉嗎？？控制好好時(shí)間間！長長時(shí)間間處理理當(dāng)然然會(huì)損損傷細(xì)細(xì)胞。。問題6:動(dòng)動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)液液的主主要成成分是是什么么？較較植物物組培培培養(yǎng)養(yǎng)基有有何獨(dú)獨(dú)特之之處？？問題7:動(dòng)動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)能能否像像綠色色植物物組織織培養(yǎng)養(yǎng)那樣樣最終終培養(yǎng)養(yǎng)成新新個(gè)體體？主要成成分：：（葡葡萄糖糖、氨氨基酸酸）、、（水水、無無機(jī)鹽鹽）、、維生生素和和動(dòng)物物血清清等。。獨(dú)特特之處處有：：1、、液體體培養(yǎng)養(yǎng)基2、、成分分中有有動(dòng)物物血清清等不能，，動(dòng)物物細(xì)胞胞培養(yǎng)養(yǎng)只能能使細(xì)細(xì)胞數(shù)數(shù)目增增多，，不能能發(fā)育育成新新的動(dòng)動(dòng)物個(gè)個(gè)體問題8:動(dòng)動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)的的原理理：細(xì)胞增增殖。。問題9:目目前使使用的的或冷冷凍保保存的的正常常細(xì)胞胞通常常在10代代以內(nèi)內(nèi)，為為什么么？10代代以內(nèi)內(nèi)的細(xì)細(xì)胞遺傳物物質(zhì)不不改變變，保保持正正常二二倍體體核型型。5.動(dòng)動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)技技術(shù)的的應(yīng)用用:1.蛋蛋白質(zhì)質(zhì)生物物制品品的生生產(chǎn)如病毒毒疫苗苗、干干擾素素、單單克隆隆抗體體2.應(yīng)應(yīng)用于于基因因工程程主要用用于作作為受受體細(xì)細(xì)胞3.檢檢測(cè)有有毒物物質(zhì)，，判斷斷某種種物質(zhì)質(zhì)的毒毒性4.細(xì)細(xì)胞的的生理理、藥藥理、、病理理研究究如用于于篩選選抗癌癌藥物物植物組組織培培養(yǎng)和和動(dòng)物物細(xì)胞胞培養(yǎng)養(yǎng)的比比較：：比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖促--動(dòng)物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白取材植物幼嫩部分或花藥胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織其他條件無菌無毒，適宜條件無菌無毒，適宜條件去核核注核核重組細(xì)細(xì)胞二、動(dòng)動(dòng)物體體細(xì)胞胞核移移植技技術(shù)和和克隆隆動(dòng)物物1、概念：：動(dòng)物核核移植植是將將動(dòng)物物的一個(gè)細(xì)細(xì)胞的的細(xì)胞胞核,移入入一個(gè)個(gè)已經(jīng)經(jīng)去掉細(xì)細(xì)胞核核的卵卵母細(xì)細(xì)胞中中.使其其重組組并發(fā)發(fā)育成成一個(gè)個(gè)新的胚胚胎,這個(gè)個(gè)新的的胚胎胎最終終發(fā)育育為動(dòng)物個(gè)個(gè)體.2、原理：：動(dòng)物細(xì)細(xì)胞核核具有有全能能性比較以以下細(xì)細(xì)胞的的全能能性：：受精卵卵、二二分裂裂球的的子細(xì)細(xì)胞囊胚細(xì)細(xì)胞、、多能能造血血干細(xì)細(xì)胞單能造造血干干細(xì)胞胞、水螅的的消化化細(xì)胞胞、人人的消消化細(xì)細(xì)胞細(xì)胞具具有全全能性性多能細(xì)細(xì)胞單能細(xì)細(xì)胞高度分分化的的體細(xì)細(xì)胞3、分類：：胚胎核核移植植、體體細(xì)胞胞核移移植。。胚胎細(xì)細(xì)胞分分化程程度低低，恢恢復(fù)其其全能能性相相對(duì)容容易。。動(dòng)物體體細(xì)胞胞分化化程度度高，，恢復(fù)復(fù)其全全能性性十分分困難難4、體體細(xì)胞胞核移移植過過程---示動(dòng)動(dòng)物克克隆---無性性繁殖殖1.））克隆隆羊多多利培培育過過程：：黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎胚胎移植另一頭頭綿羊羊的子子宮妊娠、出生克隆羊多利◆特別注注意：：克隆動(dòng)動(dòng)物性性狀與與供體體動(dòng)物物完全全一樣樣嗎？？不可能能！因?yàn)椋海阂弧⒐┕w動(dòng)動(dòng)物只只提供供細(xì)胞胞核，，而細(xì)細(xì)胞質(zhì)質(zhì)中的的遺傳傳物質(zhì)質(zhì)（如如線粒粒體DNA）來來自于于受體體卵母母細(xì)胞胞.二、生生物的的性狀狀不僅僅與遺遺傳物物質(zhì)有有關(guān)，，還受受環(huán)境境的影影響。。供體受體代孕受體黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核a重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎b另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利1、寫寫出AB所所代表表細(xì)胞胞工程程名稱稱：a表示示：b表示示:2、實(shí)實(shí)施細(xì)細(xì)胞工工程時(shí)時(shí)，所所需受受體細(xì)細(xì)胞大大多采采用卵卵母細(xì)細(xì)胞的的原因因：體積大大，易易操作作。含含有促促使細(xì)細(xì)胞核核表達(dá)達(dá)全能能性的的物質(zhì)質(zhì)和營營養(yǎng)條條件。。3、多多利面面部毛毛色是是：根據(jù)遺遺傳學(xué)學(xué)原理理說明明判斷斷依據(jù)據(jù)。4、若若黑面面綿羊羊的基基因型型為AA,白面面綿羊羊的基基因型型為aa，，則克克隆羊羊的基基因型型為核移植植胚胎移移植白色多利全全部的的核基基因都都來自自白面面綿羊羊aa◆取供體體細(xì)胞胞傳代代培養(yǎng)養(yǎng)10代以以內(nèi)的的細(xì)胞胞.為為什么么？◆用的是是去核核的減減數(shù)第第二次次分裂裂中期期細(xì)胞胞（MⅡ中期）為什什么？？◆激活方方法：：◆激活目目的：：◆促融方方法：：電刺刺激◆胚胎移移植至至代孕孕受體體內(nèi)妊娠、、分娩娩2.））核移移植流流程供體：：優(yōu)質(zhì)質(zhì)高產(chǎn)產(chǎn)奶牛牛受體：：普通通奶牛牛（卵卵母細(xì)細(xì)胞的的采集集與培培養(yǎng)））1.體體積大大，易易操作作。2.含含有促促使細(xì)細(xì)胞核核表達(dá)達(dá)全能能性的的物質(zhì)質(zhì)和營營養(yǎng)條條件。。有人說說它三三個(gè)母母親，，對(duì)嗎嗎？核移植植流程程:1、供供體細(xì)細(xì)胞的的采集集與培培養(yǎng)5、用用物理理或化化學(xué)方方法激激活受受體細(xì)細(xì)胞，，使其其完成成減數(shù)數(shù)分裂裂進(jìn)程程。6電刺刺激促促融使使供體體核進(jìn)進(jìn)入受受體卵卵母細(xì)細(xì)胞，，構(gòu)建建重組組胚胎胎。4、將將供體體細(xì)胞胞注入入去核核卵母母細(xì)胞胞3、顯顯微操操作去去除卵卵母細(xì)細(xì)胞中中的核核2、受受體卵卵母細(xì)細(xì)胞的的采集集與體體外培培養(yǎng)7、胚胚胎移移植入入代孕孕母牛牛體內(nèi)內(nèi)8、妊妊娠分分娩與與供體體遺傳傳物質(zhì)質(zhì)基礎(chǔ)礎(chǔ)相同同的犢犢牛。。胚胎分分割：：受精卵卵二等分分四等分分把每等等份分分別移移植到到母體體子宮宮內(nèi)，，迅速速繁殖殖出大大批性性狀相相似的的個(gè)體體。動(dòng)物的的基因因組中中，一一類基基因是是維持持生存存的，，在各各種細(xì)細(xì)胞中中都處處于活活動(dòng)的的狀態(tài)態(tài)。另另一類類基因因隨著著組織織器官官和發(fā)發(fā)育階階段不不同而而選擇擇性表表達(dá)。。分化的的細(xì)胞胞內(nèi)基基因的的活動(dòng)動(dòng)很不不完全全，因因此很很難像像受精精卵那那樣發(fā)發(fā)揮細(xì)細(xì)胞全全能性性。胚胎細(xì)細(xì)胞克克隆比比高度度分化化的體體細(xì)胞胞克隆隆要容容易得得多。。動(dòng)物難以克克隆的原因因5.體細(xì)胞胞核移植技技術(shù)的應(yīng)用用前景6.體細(xì)胞胞核移植技技術(shù)存在的的問題看書P49-50頁定義：指用自然或或人工方法法，使兩個(gè)個(gè)或多個(gè)不不同的細(xì)胞胞融合成一一個(gè)細(xì)胞的的過程。不同基因型型的細(xì)胞之之間的融合合就是細(xì)胞雜交。。三、動(dòng)物細(xì)細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融融合誘導(dǎo)融合的的因素：生物法：滅滅活的仙臺(tái)臺(tái)病毒誘導(dǎo)導(dǎo)融合。利用滅活仙仙臺(tái)病毒是是動(dòng)物細(xì)胞胞融合所特特有的。這是由于病病毒的磷脂脂外衣與動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞的的膜十分相相似的緣故故。病毒外外殼上的某某些糖蛋白白可能還有有促進(jìn)細(xì)胞胞融合的功功能。化學(xué)法：聚聚乙二醇誘誘導(dǎo)融合因?yàn)榫垡叶家椎?、、簡便，且且融合效果果穩(wěn)定，是是目前應(yīng)用用最廣泛的的方法。物理法：離心、振動(dòng)動(dòng)、電刺激激動(dòng)物細(xì)胞融融合技術(shù)的的應(yīng)用遺傳學(xué)上：：基因定位位由于細(xì)胞雜雜交中染色色體容易丟丟失，因此此利用雜交交細(xì)胞檢測(cè)測(cè)特定染色色體丟失與與特定基因因產(chǎn)物（蛋蛋白質(zhì)）減減少的對(duì)應(yīng)應(yīng)關(guān)系，可可以進(jìn)行基基因定位。。例如：人-鼠雜交細(xì)細(xì)胞通常丟丟失人的染染色體，可可以進(jìn)行人人類基因的的定位（如如由于1號(hào)號(hào)染色體丟丟失導(dǎo)致尿尿苷單磷酸酸激酶活性性喪失，可可知該基因因位于1號(hào)號(hào)染色體上上）免疫學(xué)上：：利用雜交交瘤技術(shù)，，制備單克克隆抗體。。用途誘導(dǎo)方法細(xì)胞融合的方法植物細(xì)胞全能性細(xì)胞融合的原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物物細(xì)胞融合合的比較細(xì)胞膜的流流動(dòng)性細(xì)胞膜的流流動(dòng)性去除細(xì)胞壁壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體體融合使細(xì)胞分散散后誘導(dǎo)細(xì)胞融融合物理（離心心、振動(dòng)、電刺激）化學(xué)（聚乙乙二醇）物理、化學(xué)學(xué)方法（同左）滅活的病毒毒獲得雜種植植株主要用于制制備單克隆抗體體回憶：1、抗體的的化學(xué)本質(zhì)質(zhì)？球蛋白2、抗體是是由何種細(xì)細(xì)胞產(chǎn)生的的？效應(yīng)B細(xì)胞3、抗體主主要分布在在哪？血清4、抗原的的特異性取取決于什么么？抗原決定簇簇5、抗原決決定簇的種種類和數(shù)目目是否相同同？不同動(dòng)物細(xì)胞融融合的成功功應(yīng)用———單克隆抗體體的制備一種抗原只只能與相應(yīng)應(yīng)的抗體發(fā)發(fā)生特異性性結(jié)合。6、抗原與與抗體的關(guān)關(guān)系？一個(gè)抗原可可以與多個(gè)個(gè)抗體特異異結(jié)合4脾臟4種效應(yīng)B細(xì)胞B1B2B3B4抗原B1B2B3B4Ab1Ab2Ab3Ab44種特異性性抗體問題情境1：長期以來，，人們?yōu)榱肆双@得抗體體，采用的的就是把某某種抗原反反復(fù)注射到到動(dòng)物體內(nèi)內(nèi)，然后從從動(dòng)物血清清中分離出出所需抗體體的方法。。你認(rèn)為這種種做法有什什么弊端？？產(chǎn)量低，而而且機(jī)體會(huì)會(huì)產(chǎn)生多種種抗體，抗抗體純度低低，反應(yīng)不不夠靈敏，，這種情況況給臨床醫(yī)醫(yī)學(xué)的診斷斷與治療帶帶來諸多不不便。問題情境2：每個(gè)漿細(xì)胞胞只分泌一一種特異性性抗體，要要想獲得大大量專一性性抗體，你能利用前前面學(xué)習(xí)過過的動(dòng)物細(xì)細(xì)胞工程的的有關(guān)技術(shù)術(shù)來解決問問題嗎？（1）用單單個(gè)特定B淋巴細(xì)胞胞進(jìn)行無性性繁殖，形形成大量的的細(xì)胞群體體，即克隆。（2）如此此克隆出的的B淋巴細(xì)細(xì)胞遺傳特特性高度一一致，由它它們分泌的的抗體化學(xué)學(xué)性質(zhì)單一一、特異性性強(qiáng)，叫做做單克隆抗體體。質(zhì)疑：（動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)）在體外培養(yǎng)養(yǎng)條件下，，一個(gè)B淋淋巴細(xì)胞可可能無限增增殖嗎？那么怎樣才才能獲得大大量單克隆隆抗體呢？？科勒米爾斯坦1984年年諾貝爾醫(yī)醫(yī)學(xué)和生理理學(xué)獎(jiǎng)1975年年研究單克克隆抗體的的制備過程程獲得成功功為什么先注注射特定抗抗原？特定抗原獲得的B細(xì)細(xì)胞會(huì)是同同種的嗎？？已免疫的B細(xì)胞細(xì)胞融合第一次篩選選（多種）雜交瘤細(xì)胞胞存活HAT培養(yǎng)養(yǎng)基篩選：：1、淋巴細(xì)細(xì)胞合成DNA有D和S兩條條途徑，其其中D途徑徑能夠被氨氨基嘌呤阻阻斷。但是是一般不分分裂增殖。。2、骨髓瘤瘤細(xì)胞是特特殊選擇的的代謝缺陷陷型細(xì)胞，，其DNA合成過程程只具有D途徑，能能被氨基嘌嘌呤阻斷。。3、雜交瘤瘤細(xì)胞則既既可無限增增殖，又具具備DNA合成途徑徑。雜交瘤細(xì)胞胞（多種）細(xì)胞培養(yǎng)多孔培養(yǎng)板板第二次篩選選選出能產(chǎn)生生特定抗體的細(xì)胞群，，繼續(xù)培養(yǎng)養(yǎng)。（專一抗體體檢驗(yàn)陽性性細(xì)胞）克隆陽性細(xì)細(xì)胞體外培養(yǎng)單克隆抗體體單克隆抗體體從小鼠腹水水中提取1、單克隆隆抗體作為為診斷試劑,在臨床生生化診斷、、病理組織織定位、體體內(nèi)腫瘤的的定位等,與常規(guī)抗抗體相比,具有特異性強(qiáng),靈敏度高高等特點(diǎn).2、單克隆隆抗體上連連接抗癌藥藥物,治療療癌癥等疾疾病(生物