生物選修1基礎(chǔ)知識填空

生物選修1基礎(chǔ)知識填空生物選修1基礎(chǔ)知識填空生物選修1基礎(chǔ)知識填空V:1.0精細(xì)整理，僅供參考生物選修1基礎(chǔ)知識填空日期：20xx年X月高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵谷氨酸發(fā)酵·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要)分裂生殖孢子生殖4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。反應(yīng)式：5、在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。反應(yīng)式：6、℃左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在呈性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是型,生殖方式為二分裂9、當(dāng)、都充足時，醋酸菌將分解成醋酸；當(dāng)缺少時，醋酸菌將變?yōu)?，再將變?yōu)榇姿帷７磻?yīng)式：10、控制發(fā)酵條件的作用①醋酸菌對的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最適生長溫度為℃，控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短，又減少雜菌污染的機(jī)會。③有兩條途徑生成醋酸：直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程：挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒（→醋酸發(fā)酵→果醋）12、酒精檢驗：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用來檢驗。在酸性條件下，與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)色。先在試管中加入發(fā)酵液2ｍL，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止。開口向下的目的是有利于的排出。使用該裝置制酒時，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制時，應(yīng)該充氣口連接氣泵，輸入。 疑難解答（1）你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗為什么

應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會。（2）你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進(jìn)行酒精消毒；每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。（3）制葡萄酒時，為什么要將溫度控制在18～25℃制葡萄醋時，為什么要將溫度控制在30～35℃溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20℃左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30～35℃，因此要將溫度控制在30～35℃專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題一微生物的實驗室培養(yǎng)·培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落?！づ囵B(yǎng)基的化學(xué)成分包括、、、、生長因子等?！ぬ荚矗耗転槲⑸锏拇x提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機(jī)碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源?！さ矗耗転槲⑸锏拇x提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO3-、NH4+（無機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至，培養(yǎng)是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供的條件·無菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止的入侵，要注意以下幾個方面：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、和等器具進(jìn)行滅菌。③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在附近進(jìn)行。④實驗操作時應(yīng)避免處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用，（對于一些不耐高溫的液體）還有（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有滅菌、滅菌、滅菌。滅菌方法： ①接種環(huán)、接種針、試管口等使用滅菌法； ②玻璃器皿、金屬用具等使用滅菌法，所用器械是滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用滅菌法，所用器械是滅菌鍋。 ④表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法，所用器械是紫外燈。比較項理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（1）方法步驟：、稱量、溶化、、。（2）倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上?！さ蛊桨宀僮鞯挠懻?.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎為什么

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌（1）微生物接種的方法最常用的是法和法。（2）法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將的菌種分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子，這就是。（3）法是將菌液進(jìn)行一系列的，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列操作和操作兩步。（4）用法和法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便于菌種。（5）平板劃線法操作步驟：①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。③將試管口通過火焰。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將的劃線與相連。⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！て桨鍎澗€操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎為什么答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。（6）涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有的燒杯中。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。菌種的保存（1）對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。①臨時保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管放入℃的冰箱中保藏。以后每3～6個月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。②缺點：這種方法保存的時間，菌種容易。（2）對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－℃的冷凍箱中保存。課題二土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成脲酶尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的 篩選菌株（1）實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于生長的條件（包括、、等），同時其他微生物生長。（2）選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作。（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計菌落數(shù)目（1）測定微生物數(shù)量的常用方法有和。（2）稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般設(shè)置3～5個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，并。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。采用此方法的注意事項：1.一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計數(shù)2.為了防止菌落蔓延，影響計數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入TTC3.本法僅限于形成菌落的微生物設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實驗，其作用是比照試驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。實驗設(shè)計實驗設(shè)計包括實驗方案，所需儀器、材料、用具和藥品，具體的實施步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。（1）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長。從富含有機(jī)物、潮濕、pH≈7的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約3～8cm的土壤層取樣。（2）樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104105106測定放線菌的數(shù)量，一般選用103104105測定真菌的數(shù)量，一般選用102103104（3）微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細(xì)菌30~37℃放線菌25~28℃5~7天霉菌25~28每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色疑難解答（1）如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？

統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計3個平板，計算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數(shù)在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的將尿素分解成了。使培養(yǎng)基的增強(qiáng)，PH。在以尿素為唯一的培養(yǎng)基中加入指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PH，指示劑將變。專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題一菊花的組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的基本過程細(xì)胞分化：在生物個體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。離體的植物組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)了一段時間以后，會通過細(xì)胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的，或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體。·細(xì)胞分化是一種持久性的變化，它有什么生理意義？

使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。比較根尖分生組織和愈傷組織的異同組織類型組織類型細(xì)胞來源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織受精卵正方形無液泡緊密分化成多種細(xì)胞組織愈傷組織高度分化細(xì)胞無定形高度液泡化疏松再分化成新個體相同點都通過有絲分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖影響植物組織培養(yǎng)的條件材料：不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關(guān)系到試驗的成敗。植物的種類、材料的和的長短等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。一般來說，容易進(jìn)行無性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。選取生長旺盛嫩枝進(jìn)行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。營養(yǎng)：離體的植物組織和細(xì)胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是，微量元素是，有機(jī)物有、煙酸、肌醇、維生素、等。激素：植物激素中和是啟動細(xì)胞分裂、和的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)趨勢。在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素，其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用提高生長素／細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促根分化，抑芽形成比值低時促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)生長環(huán)境條件：PH、溫度、光等環(huán)境條件。不同的植物對各種條件的要求往往不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將pH控制在左右，溫度控制在℃，并且每日用日光燈照射h.操作流程配制MS固體培養(yǎng)基：配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液（培養(yǎng)基母液）。·使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計算用量，并加蒸餾水稀釋。·配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升?！ぴ诰栈ńM織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易?！缇翰扇〉臏缇椒ㄊ?。·MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么與肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)。外植體的消毒外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。選取菊花莖段時，要取。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為的酒精中搖動2~3次，持續(xù)6~7s，立即將外植體取出，在中清洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的溶液中1~2min。取出后，在無菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。注意：對外植體進(jìn)行表面消毒時，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力。接種：接種過程中插入外植體時形態(tài)學(xué)上端朝上，每個錐形瓶接種7～8個外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似，操作步驟相同，而且都要求操作。培養(yǎng)：應(yīng)該放在中進(jìn)行，并定期進(jìn)行，保持適宜的溫度（℃）和光照（h）移栽：栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的等環(huán)境中生活一段時間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。栽培將幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗生長情況，適時澆水、施肥，直至開花。專題4酶的研究與應(yīng)用課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用一、果膠與果膠酶的作用1.果膠是植物及的主要組成成分之一，由聚合而成的一種高分子化合物，不溶于。2．果膠酶（1）果膠酶的作用是分解變成可溶性的。（2）果膠酶不是特指某一種酶，而是分解的一類酶的總稱，包括酶、酶和酶等；果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，也能被蛋白酶水解掉；（3）膠酶具有酶的通性：只改變反應(yīng)，不改變反應(yīng)的平衡點。二、酶的活性與影響酶活性的因素1．酶的活性是指酶一定化學(xué)反應(yīng)的能力，其高低用一定條件下酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的來表示。酶反應(yīng)速度用內(nèi)，中反應(yīng)物的或產(chǎn)物的表示。2．影響酶活性的因素常提的是、和酶的抑制劑等。3.探究溫度和pH對酶活性的影響及探究果膠酶用量的兩個實驗都要注意實驗的基本原則：原則和原則，理解實驗中溫度梯度或pH梯度的變化在分析問題時也要用原則分析。三、果膠酶的用量生產(chǎn)果膠時．為了使果膠酶得到充分利用，控制好酶的用量，用量多少常通過手段探究。四、實驗設(shè)計1.探究溫度和PH對果膠酶活性的影響（1）實驗六成熱那個包括、設(shè)置具有一系列梯度的和、加入果膠酶反應(yīng)一段時間、。（2）該實驗的自變量事或，因變量是，檢測因變量是通過測定果汁的或來實現(xiàn)的。思考1：為什么在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理？

提示：將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理，可以保證底物和酶在混合時的溫度是相同的，避免了果泥和果膠酶混合時影響混合物的溫度，從而影響果膠酶活性的問題。思考2：為什么能夠通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶活性的高低？

提示：果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反應(yīng)了果膠酶的催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大。2.探究果膠酶的用量（1）該實驗的自變量是，除此之外，影響果汁產(chǎn)生的因素還有、PH、、蘋果泥等無關(guān)變量。（2）判斷的思路是：如果隨著酶的用量增加，過濾到果汁的體積也增加，說明，如果當(dāng)酶的用量增加到某個值后，再增加酶的用量，過濾到的果汁的體積不再改變，說明。專題五ＤＮＡ和蛋白質(zhì)技術(shù)課題6血紅蛋白的提取和分離一、實驗原理蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì)：形狀、大小、和多少、溶解度、、親和力等千差萬別，由此各種蛋白質(zhì)。1．凝膠色譜法（法）：（1）原理：是根據(jù)的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程，流動；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部，路程，流動。（原因是由于作用進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部而被滯留。）（2）凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。（3）分離過程：混合物上柱→→大分子流動、小分子流動→收集分子→收集分子：從色譜柱上端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。（4）作用：分離蛋白質(zhì)，測定生物大分子分子量，蛋白質(zhì)的脫鹽等。2．緩沖溶液（1）原理：由弱酸和相應(yīng)的強(qiáng)堿弱酸鹽組成（如H2CO3－NaHCO3，NaH2PO4/Na2HPO4等），調(diào)節(jié)酸和鹽的用量，可配制不同pH的緩沖液。（2）緩沖液作用：抵制外界對溶液的干擾而保持穩(wěn)定。3．電泳法：（1）原理：不同蛋白質(zhì)的以及分子本身的不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動和運(yùn)動不同。（2）分離方法：電泳、電泳等。（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電；加入帶負(fù)電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)－SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。二、實驗步驟1．樣品處理紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是，采集的血樣要及時采用離心分離紅細(xì)胞，然后用膠頭吸管吸出上層透明的，將下層暗紅色的倒入燒杯，再加入體積的生理鹽水，緩慢攪拌min，離心，如此重復(fù)洗滌三次，直至，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。②血紅蛋白的釋放在和作用下，紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。注：加入蒸餾水后紅細(xì)胞液體積與原血液體積要相同。加入甲苯的目的是溶解，有利于血紅蛋白的釋放和分離。2．粗分離①分離血紅蛋白溶液將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為層。第一層為無色透明的，第2層為白色薄層固體，是，第3層是紅色透明液體，這是的水溶液，第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾，除去之溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后，分出下層的紅色透明液體。②透析取1mL的血紅蛋白溶液裝入中，將放入盛有300mL的物質(zhì)的量的濃度為20mmol/L的，透析12h。透析可以去除樣品中的雜質(zhì)，或用于更換樣品的。3．純化調(diào)節(jié)緩沖液面：打開色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝↓膠面平齊，關(guān)閉出口。加入蛋白質(zhì)樣品：用吸管將透析后的樣品沿管壁環(huán)繞移動加到色譜柱的頂端。加樣后，∣打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)，等樣品完全滲入凝膠層后，↓關(guān)閉出口。調(diào)節(jié)緩沖液面：加入20mmol/L的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度↓洗脫：連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口，進(jìn)行洗脫?！占盅b蛋白質(zhì)：待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集。4.純度鑒定------SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（選做）三、注意事項電泳技術(shù)電泳技術(shù)就是在電場的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。2.紅細(xì)胞的洗滌如果分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。此外，離心速度過高和時間過長，會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。3．如何檢測凝膠色譜柱的裝填是否成功由于凝膠是一種半透明的介質(zhì)，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。此外，還可以加入大分子的有色物質(zhì)，觀察色帶移動的情況。如果色帶均勻、狹窄、平整，說明凝膠色譜柱的性能良好。如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時要重新裝柱。4．為什么凝膠的裝填要緊密、均勻？

如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過，攪亂洗脫液的流動次序，影響分離的效果。5．沸水浴處理加入洗脫液的濕凝膠的目的不但節(jié)約時間，還能除去凝膠中可能帶有的微生物和排除凝膠內(nèi)的空氣。6．G-75“G”代表凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5g。7．裝填完后，立即用洗脫液洗脫的目的：使凝膠裝填緊密8．加入檸檬酸鈉有何目的為什么要低速、短時離心為什么要緩慢攪拌防止血液凝固；防止白細(xì)胞沉淀；防止紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。9．與其他真核細(xì)胞相比，紅細(xì)胞的特點及這一特點對進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離的意義哺乳動物及人的成熟的紅細(xì)胞是雙面凹圓餅狀，沒有