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文檔簡(jiǎn)介

羅非魚(yú)病毒病羅非魚(yú)病毒病1國(guó)內(nèi)羅非魚(yú)養(yǎng)殖一直被--------病困擾,但是真正的大老虎有可能真的要來(lái)了。國(guó)內(nèi)羅非魚(yú)養(yǎng)殖一直被--------病困擾,但是真正的大老虎2從2009年開(kāi)始,以色列、厄瓜多爾、埃及、泰國(guó)等國(guó)家先后暴發(fā)了羅非魚(yú)湖病毒(TilapiaLakeVirus,TiLV)感染引起的傳染病,導(dǎo)致大批野生和養(yǎng)殖羅非魚(yú)死亡,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

糧農(nóng)組織確認(rèn),羅湖病毒(TiLV)現(xiàn)已在三大洲5個(gè)國(guó)家得到確認(rèn):哥倫比亞、厄瓜多爾、埃及、以色列和泰國(guó)。雖然該病原體不會(huì)引起公共衛(wèi)生問(wèn)題,但可以導(dǎo)致受感染種群大量死亡。臺(tái)灣海南省文昌市潭牛鎮(zhèn)一羅非魚(yú)養(yǎng)殖池塘養(yǎng)殖戶(hù)

王老板從2009年開(kāi)始,以色列、厄瓜多爾、埃及、泰國(guó)等國(guó)家先后暴3羅非魚(yú)病毒病課件41羅湖病毒的流行情況和臨診癥狀1.1以色列全國(guó)發(fā)生羅非魚(yú)大量死亡事件2009年夏天,以色列在全國(guó)范圍內(nèi)陸續(xù)發(fā)生養(yǎng)殖場(chǎng)和野生羅非魚(yú)大量死亡事件。以色列基內(nèi)雷特湖(也稱(chēng)為加利利海)的野生羅非魚(yú)和國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)殖羅非魚(yú)突然大量死亡,死亡率高達(dá)70%?;鶅?nèi)雷特湖羅非魚(yú)產(chǎn)量從2005年的316噸,下降到2007年的51噸、2009年的8噸和2010年的45噸。羅非魚(yú)大量死亡事件發(fā)生在天氣炎熱的5—10月期間,其特點(diǎn)主要有以下三點(diǎn):一是病毒擴(kuò)散是從一個(gè)養(yǎng)殖池到另一個(gè)養(yǎng)殖池,波及不同生長(zhǎng)期階段的羅非魚(yú);二是發(fā)病和死亡僅限于尼羅羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)與奧利亞羅非魚(yú)(Oreochromisaureus)雜交產(chǎn)生的羅非魚(yú)品種,與羅非魚(yú)一起養(yǎng)殖的鯉魚(yú)和鯔魚(yú)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與羅非魚(yú)一樣的發(fā)病癥狀;三是一次羅非魚(yú)集中死亡之后,同一魚(yú)池不會(huì)再有大量魚(yú)死亡的事件發(fā)生。

病魚(yú)體色發(fā)黑,體表有潰爛,眼睛有明顯的病變,發(fā)病前期晶狀體渾濁,后期晶狀體破裂發(fā)炎,眼睛內(nèi)容物濃縮,失去正常視覺(jué)功能。羅非魚(yú)大量死亡的原因不明,常規(guī)的寄生蟲(chóng)監(jiān)測(cè)、細(xì)菌監(jiān)測(cè)、病毒監(jiān)測(cè)和毒素監(jiān)測(cè)均未見(jiàn)異常。1羅湖病毒的流行情況和臨診癥狀1.1以色列全國(guó)發(fā)生羅非魚(yú)5病原:Tilapialakevirus,TiLV病原:Tilapialakevirus,TiLV61.2厄瓜多爾養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2011年,厄瓜多爾發(fā)生羅非魚(yú)大量死亡事件。出現(xiàn)羅非魚(yú)大量死亡的養(yǎng)殖場(chǎng)中,本場(chǎng)培育的Chitralada品系羅非魚(yú)苗大量死亡,而從其他養(yǎng)殖場(chǎng)引進(jìn)的尼羅羅非魚(yú)大部分沒(méi)有感染。魚(yú)苗轉(zhuǎn)入育成池4~7d后開(kāi)始出現(xiàn)死亡。被感染的魚(yú)池中,Chitralada品系羅非魚(yú)存活率僅為20%,而尼羅羅非魚(yú)的存活率達(dá)到80%。病魚(yú)一般表現(xiàn)消瘦,體表發(fā)黑,腹部膨脹有積水,魚(yú)鱗突出,眼球突出。1.2厄瓜多爾養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2011年,厄瓜多71.3埃及養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2012—2016年的夏季,埃及當(dāng)?shù)厮疁剡_(dá)到25℃以上,羅非魚(yú)主要產(chǎn)區(qū)的中、大規(guī)格尼羅羅非魚(yú)每年出現(xiàn)不明原因的大量死亡,稱(chēng)為“夏季死魚(yú)事件”,其中2015年損失產(chǎn)量估計(jì)約98000噸(價(jià)值1億美金)。對(duì)埃及羅非魚(yú)主產(chǎn)區(qū)的68個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查表明,37%的養(yǎng)殖場(chǎng)(25個(gè))發(fā)生了“夏季死魚(yú)事件”,平均死亡率為9.2%(死亡率波動(dòng)區(qū)間為5%~15%)。發(fā)病率最高的是放養(yǎng)密度高的養(yǎng)殖場(chǎng)和大型養(yǎng)殖場(chǎng);其次是小型養(yǎng)殖場(chǎng)、鯔魚(yú)和羅非魚(yú)混養(yǎng)場(chǎng)(鯔魚(yú)15%和羅非魚(yú)85%);發(fā)病率最低的是單品種養(yǎng)殖的養(yǎng)殖場(chǎng)。38個(gè)僅養(yǎng)殖羅非魚(yú)的養(yǎng)殖場(chǎng)中,有3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病,而30個(gè)混養(yǎng)的養(yǎng)殖場(chǎng)中,有22個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病。病魚(yú)表現(xiàn)體表淺層出血、發(fā)炎、水腫等癥狀。1.3埃及養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2012—2016年的81病原學(xué)

羅非魚(yú)湖病毒病又稱(chēng)為羅非魚(yú)合胞體肝炎(syncyticalhepatitisoftilapia,SHT)[4],病原TiLV為近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的病毒,其分類(lèi)地位尚未被確認(rèn)。根據(jù)其生物學(xué)特性,目前TiLV被歸類(lèi)為正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的一種新的病毒。電子顯微鏡顯示病毒粒子為具包膜的二十面體結(jié)構(gòu),大小為55~75nm。病毒對(duì)乙醚和氯仿敏感。

Eyngor等

最先對(duì)以色列羅非魚(yú)湖病毒病的暴發(fā)進(jìn)行了研究,證明病原是一種新的RNA病毒,并參考病原的發(fā)現(xiàn)地點(diǎn)命名為羅非魚(yú)湖病毒。由于TiLV是RNA病毒,容易發(fā)生變異,可能存在多個(gè)不同的地理株。截至目前,美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(Genbank)已收錄了2株TiLV的全基因組序列,分別來(lái)自以色列分離的Til-4-2011毒株和泰國(guó)分離的TV1毒株。

Bacharach等[5]對(duì)以色列分離的Til-4-2011毒株進(jìn)行了深入研究。TiLV為分段、單鏈的負(fù)鏈RNA病毒,由10個(gè)基因片段組成。每一個(gè)片段都有1個(gè)開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼10種蛋白。片段1最大,為1.641KB,片段2~10分別為1.471KB、1.371KB、1.250KB、1.099KB、1.044KB、0.777KB、0.657KB、0.548KB和0.465KB。1病原學(xué)

羅非魚(yú)湖病毒病又稱(chēng)為羅非魚(yú)合胞體肝炎(sync92流行病學(xué)

2.1地理分布羅非魚(yú)為熱帶魚(yú)類(lèi),主要分布于熱帶、亞熱帶的淡水和半咸水水域。至今TiLV已確認(rèn)在哥倫比亞、厄瓜多爾、以色列、埃及和泰國(guó)流行

。羅非魚(yú)國(guó)際貿(mào)易十分頻繁,包括亞洲、非洲、歐洲、北美洲和南美洲在內(nèi)的43個(gè)國(guó)家已確認(rèn)都曾經(jīng)從TiLV感染的國(guó)家引進(jìn)過(guò)羅非魚(yú)。因此,這些國(guó)家的養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)存在較高的TiLV感染風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)際上,很多國(guó)家的養(yǎng)殖羅非魚(yú)常暴發(fā)傳染性疫病,由于多種原因并未對(duì)病原進(jìn)行調(diào)查,無(wú)法排除發(fā)病羅非魚(yú)是否也感染了TiLV,所以該病的實(shí)際地理分布可能要廣泛得多。雖然我國(guó)至今尚無(wú)TiLV感染的確切報(bào)告,但已有海南省羅非魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)樣品的PCR檢測(cè)報(bào)告,結(jié)果表明TiLV感染為陽(yáng)性。2流行病學(xué)

2.1地理分布102.2易感動(dòng)物至今只有羅非魚(yú)被證明易感TiLV,而且?guī)缀跛械牧_非魚(yú)物種均對(duì)TiLV易感。Eyngor等調(diào)查了以色列基內(nèi)雷特湖的27種野生的慈鯛科、鯉科、鼬科和鯛科魚(yú)類(lèi),發(fā)現(xiàn)只有慈鯛科的羅非魚(yú)類(lèi)發(fā)病,并導(dǎo)致數(shù)量銳減,而其他魚(yú)類(lèi)均未出現(xiàn)臨床癥狀和死亡。Surachetpong等

也證明TiLV只感染羅非魚(yú),不會(huì)感染其他水生或陸生動(dòng)物。TiLV主要危害羅非魚(yú)仔稚魚(yú)和幼魚(yú),對(duì)成魚(yú)影響相對(duì)較小,因此幼體階段似乎比成魚(yú)更易感

。由于缺乏其他動(dòng)物易感性的信息,有可能還存在其他易感物種。在以色列暴發(fā)TiLV感染期間的共養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明,烏魚(yú)(Mugilcephalus)和鯉魚(yú)(Cyprinuscarpio)均不會(huì)發(fā)生死亡

。同樣的,在埃及發(fā)病疫區(qū)共養(yǎng)的烏魚(yú)和薄唇烏魚(yú)(Lizaramada)也未發(fā)現(xiàn)感染

。已經(jīng)有證據(jù)表明某些羅非魚(yú)的遺傳品系對(duì)TiLV具有一定抗性。Ferguson等

報(bào)告,一種羅非魚(yú)品系的死亡率為10%~20%,明顯低于其他品系的80%。2.2易感動(dòng)物至今只有羅非魚(yú)被證明易感TiLV,而且?guī)?12.3傳播途徑至今尚不清楚TiLV的最初來(lái)源,野生或養(yǎng)殖的受TiLV感染的魚(yú)群是目前已知的唯一傳染源。病魚(yú)的眼睛、大腦和肝臟常常含有高濃度的病毒,其肌肉組織也可能存在病毒。因此,發(fā)病死亡的羅非魚(yú)可能是重要的病毒污染源。TiLV可以通過(guò)混養(yǎng)進(jìn)行水平傳播。直接水平傳播是其主要傳播途徑,羅非魚(yú)的活體交易和運(yùn)輸最有可能傳播疾病。至今尚無(wú)垂直傳播的證據(jù)。Eyngor等

證明TiLV可以通過(guò)水體途徑傳播。由于TiLV的生物物理學(xué)特性尚不明確,很難評(píng)估通過(guò)污染物間接傳播的意義。鳥(niǎo)類(lèi)可能對(duì)TiLV的傳播發(fā)揮一定的作用。Fathi等

研究表明,因?yàn)榘<芭c以色列接壤,TiLV可能通過(guò)鳥(niǎo)類(lèi)遷徙等多種途徑如從以色列傳入埃及。以色列暴發(fā)TiLV感染以后,埃及的養(yǎng)殖羅非魚(yú)也常常暴發(fā)“夏季死亡癥”。不過(guò),至今尚無(wú)直接證據(jù)能證明鳥(niǎo)類(lèi)可以傳播TiLV。2.3傳播途徑至今尚不清楚TiLV的最初來(lái)源,122.4季節(jié)性

羅非魚(yú)TiLV感染主要在高溫季節(jié)暴發(fā),但在熱帶地區(qū)可能全年均可感染;從2009年夏天開(kāi)始,以色列全境出現(xiàn)羅非魚(yú)大量死亡。通常在5—10月炎熱時(shí)間發(fā)病,發(fā)病水溫為22~32℃;近年來(lái),埃及羅非魚(yú)不明原因死亡癥的發(fā)病季節(jié)通常為6—10月,水溫大于25℃;厄瓜多爾主要在水溫為25~27℃的5—11月;泰國(guó),10月到次年5月之間采集的部分樣品TiLV檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。2.4季節(jié)性

羅非魚(yú)TiLV感染主要在高溫季節(jié)暴發(fā),但在132.5發(fā)病率和死亡率

不同種類(lèi)的羅非魚(yú)或不同生長(zhǎng)階段感染TiLV的發(fā)病率和死亡率差別明顯。Eyngor等[2]報(bào)告,因?yàn)門(mén)iLV感染導(dǎo)致以色列加利略羅非魚(yú)(Sarotherodongalilaeus)年產(chǎn)量從316噸(2005年)分別下降至51噸(2007年)、8噸(2009年)和45噸(2010年),其他野生羅非魚(yú)如普通羅非魚(yú)(Tilapiazilli)和約旦羅非魚(yú)(Oreochromisaureus)等也大幅減產(chǎn)。健康的羅非魚(yú)和病魚(yú)混養(yǎng),幾天內(nèi)死亡率達(dá)80%~100%證明該病傳染性很強(qiáng)。近年來(lái),泰國(guó)養(yǎng)殖羅非魚(yú)TiLV感染大部分發(fā)生在魚(yú)苗轉(zhuǎn)移到水庫(kù)網(wǎng)箱或公共水域后1個(gè)月。大多數(shù)死亡發(fā)生在出現(xiàn)第一條死魚(yú)后的2周內(nèi),死亡率約20%~90%。厄瓜多爾的養(yǎng)殖羅非魚(yú)也發(fā)生了類(lèi)似的傳染病,在轉(zhuǎn)移到養(yǎng)殖池塘后4~7d內(nèi)出現(xiàn)發(fā)病死亡。不同品種羅非魚(yú)的死亡率有較大差異,較低的為10%~20%,較高的可達(dá)80%。埃及37%的羅非魚(yú)漁場(chǎng)受到TiLV感染,平均死亡率為9.2%。從發(fā)生“夏季死亡癥”的7個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)采集組織樣本,其中3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品經(jīng)過(guò)PCR檢測(cè)顯示TiLV為陽(yáng)性

。Dong等

報(bào)道,放養(yǎng)1個(gè)月內(nèi)的紅羅非魚(yú)魚(yú)苗感染TiLV后死亡率可達(dá)90%。Tattiyapong等

在泰國(guó)進(jìn)行了一項(xiàng)腹腔注射攻毒實(shí)驗(yàn),感染4~12d后尼羅羅非魚(yú)和紅羅非魚(yú)的死亡率分別高達(dá)

86%和66%,并表現(xiàn)出與自然感染相似的臨床癥狀和病理變化。Eyngor等[2]發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中羅非魚(yú)群體經(jīng)歷發(fā)病事件后幸存的魚(yú)對(duì)TiLV再次感染具有免疫力。2.5發(fā)病率和死亡率

不同種類(lèi)的羅非魚(yú)或不同生長(zhǎng)階段感染142.6組織病理特征泰國(guó)患病的魚(yú)表現(xiàn)出食欲不振、嗜睡、行為異常、游動(dòng)遲緩、體色蒼白、貧血、眼球突出、腹部腫脹、皮膚充血和糜爛

。埃及的病魚(yú)主要表現(xiàn)為體表出現(xiàn)出血斑、魚(yú)鱗脫落、開(kāi)放性傷口、體色變黑、鰭糜爛等

。肉眼病變主要表現(xiàn)為晶狀體混濁,進(jìn)而發(fā)展到晶狀體破裂。其他病變包括皮膚糜爛、軟腦膜出血、脾充血

。海南省羅非魚(yú)的主要癥狀是鰓蓋內(nèi)緣出血,爛鰓,腹腔有腹水,肝臟和腎臟出血

。不同地理株的組織病變有所差異,以色列毒株的病理變化主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng),而南美洲毒株主要發(fā)生在肝臟

。大腦病變包括軟腦膜水腫和局灶性出血,白質(zhì)和灰質(zhì)皮層的毛細(xì)血管充血,神經(jīng)變性,膠質(zhì)細(xì)胞增生,血管周?chē)馨图?xì)胞浸潤(rùn)等。肝組織病變包括肝細(xì)胞腫脹和脫落,并表現(xiàn)出典型的合胞體肝炎特征

。脾腫大,淋巴細(xì)胞增生,肝臟和脾臟中的黑色素巨噬細(xì)胞中心(MMCs)數(shù)量增加。2.6組織病理特征泰國(guó)患病的魚(yú)表現(xiàn)出食欲不振、嗜睡、行為15EmergenceofTilapiaLakeVirusassociatedwithmortalitiesoffarmedNileTilapiaOreochromisniloticus(Linnaeus1758)inIndiaEstablishmentandcharacterizationofacelllinefromtilapiabrainfordetectionoftilapialakevirusEmergenceofTilapiaLakeViru16羅非魚(yú)病毒病課件17羅非魚(yú)病毒病課件183診斷技術(shù)TiLV是近年來(lái)出現(xiàn)的急性傳染性病原。

國(guó)外已經(jīng)在病毒的細(xì)胞培養(yǎng)、組織病理學(xué)、PCR、原位雜交等檢測(cè)技術(shù)方面進(jìn)行了研究,并建立了相應(yīng)的檢測(cè)方法。因?yàn)榉肿由飳W(xué)方法具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便的特點(diǎn),大多數(shù)國(guó)家都采用PCR技術(shù)對(duì)TiLV進(jìn)行監(jiān)測(cè)和診斷。

原位雜交方法可以定位TiLV感染的靶器官。國(guó)內(nèi)針對(duì)TiLV的研究幾乎是空白。很多羅非魚(yú)疫病的病因未能徹底調(diào)查,無(wú)法明確TiLV在我國(guó)的感染情況。3診斷技術(shù)TiLV是近年來(lái)出現(xiàn)的急性傳染性病原。

193診斷技術(shù)魚(yú)成纖維細(xì)胞E-11被認(rèn)為是最合適的細(xì)胞系。用TiLV接種E-11細(xì)胞,5~10d后出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE),細(xì)胞質(zhì)空泡化,形成空斑,9~10d后出現(xiàn)單層細(xì)胞脫離

。TiLV接種羅非魚(yú)原代腦細(xì)胞細(xì)胞系,接種后10~12d細(xì)胞腫脹、變圓,出現(xiàn)顆粒細(xì)胞,接種14~19d后單層細(xì)胞脫離

。OmB和TmB細(xì)胞對(duì)TiLV的敏感性與E-11細(xì)胞株相似。

3診斷技術(shù)20巢式PCR方法半巢式PCR方法巢式PCR方法21TiLV已經(jīng)對(duì)世界范圍內(nèi)的羅非魚(yú)養(yǎng)殖帶來(lái)巨大威脅。

加強(qiáng)對(duì)該病毒的檢疫和防范。在羅非魚(yú)養(yǎng)殖區(qū)開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查,并實(shí)施TiLV監(jiān)控計(jì)劃??诎秳?dòng)物檢疫部門(mén)更需要盡快建立快速、實(shí)用的檢測(cè)方法,對(duì)進(jìn)境的羅非魚(yú)及其產(chǎn)品進(jìn)行有效的檢疫。加強(qiáng)魚(yú)苗檢疫監(jiān)測(cè),加強(qiáng)魚(yú)場(chǎng)管理和消毒。部分羅非魚(yú)在感染TiLV后能存活下來(lái),說(shuō)明存在針對(duì)病原的免疫應(yīng)答,應(yīng)盡快研制出TiLV疫苗。TiLV已經(jīng)對(duì)世界范圍內(nèi)的羅非魚(yú)養(yǎng)殖帶來(lái)巨大威脅。22羅非魚(yú)病毒病課件23https://a.glgoo.top/scholar?hl=zh-CN&as_sdt=0%2C5&q=&btnG=/video/58596/detection-tilapia-lake-virus-using-conventional-rt-pcr-sybr-green-rtDetectionofTilapiaLakeVirusUsingConventionalRT-PCRandSYBRGreenRT-qPCRPamelaNicholson1,

PattarasudaRawiwan2,

WinSurachetpong21InstituteofVeterinaryBacteriologyVetsuisseFaculty,

UniversityofBern,

2DepartmentofVeterinaryMicrobiologyandImmunologyandCenterforAdvancedStudiesforAgricultureandFood,KasetsartUniversityInstituteforAdvancedStudies,

KasetsartUniversityhttps://a.glgoo.top/scholar?hl24羅非魚(yú)病毒病羅非魚(yú)病毒病25國(guó)內(nèi)羅非魚(yú)養(yǎng)殖一直被--------病困擾,但是真正的大老虎有可能真的要來(lái)了。國(guó)內(nèi)羅非魚(yú)養(yǎng)殖一直被--------病困擾,但是真正的大老虎26從2009年開(kāi)始,以色列、厄瓜多爾、埃及、泰國(guó)等國(guó)家先后暴發(fā)了羅非魚(yú)湖病毒(TilapiaLakeVirus,TiLV)感染引起的傳染病,導(dǎo)致大批野生和養(yǎng)殖羅非魚(yú)死亡,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

糧農(nóng)組織確認(rèn),羅湖病毒(TiLV)現(xiàn)已在三大洲5個(gè)國(guó)家得到確認(rèn):哥倫比亞、厄瓜多爾、埃及、以色列和泰國(guó)。雖然該病原體不會(huì)引起公共衛(wèi)生問(wèn)題,但可以導(dǎo)致受感染種群大量死亡。臺(tái)灣海南省文昌市潭牛鎮(zhèn)一羅非魚(yú)養(yǎng)殖池塘養(yǎng)殖戶(hù)

王老板從2009年開(kāi)始,以色列、厄瓜多爾、埃及、泰國(guó)等國(guó)家先后暴27羅非魚(yú)病毒病課件281羅湖病毒的流行情況和臨診癥狀1.1以色列全國(guó)發(fā)生羅非魚(yú)大量死亡事件2009年夏天,以色列在全國(guó)范圍內(nèi)陸續(xù)發(fā)生養(yǎng)殖場(chǎng)和野生羅非魚(yú)大量死亡事件。以色列基內(nèi)雷特湖(也稱(chēng)為加利利海)的野生羅非魚(yú)和國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)殖羅非魚(yú)突然大量死亡,死亡率高達(dá)70%?;鶅?nèi)雷特湖羅非魚(yú)產(chǎn)量從2005年的316噸,下降到2007年的51噸、2009年的8噸和2010年的45噸。羅非魚(yú)大量死亡事件發(fā)生在天氣炎熱的5—10月期間,其特點(diǎn)主要有以下三點(diǎn):一是病毒擴(kuò)散是從一個(gè)養(yǎng)殖池到另一個(gè)養(yǎng)殖池,波及不同生長(zhǎng)期階段的羅非魚(yú);二是發(fā)病和死亡僅限于尼羅羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)與奧利亞羅非魚(yú)(Oreochromisaureus)雜交產(chǎn)生的羅非魚(yú)品種,與羅非魚(yú)一起養(yǎng)殖的鯉魚(yú)和鯔魚(yú)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與羅非魚(yú)一樣的發(fā)病癥狀;三是一次羅非魚(yú)集中死亡之后,同一魚(yú)池不會(huì)再有大量魚(yú)死亡的事件發(fā)生。

病魚(yú)體色發(fā)黑,體表有潰爛,眼睛有明顯的病變,發(fā)病前期晶狀體渾濁,后期晶狀體破裂發(fā)炎,眼睛內(nèi)容物濃縮,失去正常視覺(jué)功能。羅非魚(yú)大量死亡的原因不明,常規(guī)的寄生蟲(chóng)監(jiān)測(cè)、細(xì)菌監(jiān)測(cè)、病毒監(jiān)測(cè)和毒素監(jiān)測(cè)均未見(jiàn)異常。1羅湖病毒的流行情況和臨診癥狀1.1以色列全國(guó)發(fā)生羅非魚(yú)29病原:Tilapialakevirus,TiLV病原:Tilapialakevirus,TiLV301.2厄瓜多爾養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2011年,厄瓜多爾發(fā)生羅非魚(yú)大量死亡事件。出現(xiàn)羅非魚(yú)大量死亡的養(yǎng)殖場(chǎng)中,本場(chǎng)培育的Chitralada品系羅非魚(yú)苗大量死亡,而從其他養(yǎng)殖場(chǎng)引進(jìn)的尼羅羅非魚(yú)大部分沒(méi)有感染。魚(yú)苗轉(zhuǎn)入育成池4~7d后開(kāi)始出現(xiàn)死亡。被感染的魚(yú)池中,Chitralada品系羅非魚(yú)存活率僅為20%,而尼羅羅非魚(yú)的存活率達(dá)到80%。病魚(yú)一般表現(xiàn)消瘦,體表發(fā)黑,腹部膨脹有積水,魚(yú)鱗突出,眼球突出。1.2厄瓜多爾養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2011年,厄瓜多311.3埃及養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2012—2016年的夏季,埃及當(dāng)?shù)厮疁剡_(dá)到25℃以上,羅非魚(yú)主要產(chǎn)區(qū)的中、大規(guī)格尼羅羅非魚(yú)每年出現(xiàn)不明原因的大量死亡,稱(chēng)為“夏季死魚(yú)事件”,其中2015年損失產(chǎn)量估計(jì)約98000噸(價(jià)值1億美金)。對(duì)埃及羅非魚(yú)主產(chǎn)區(qū)的68個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行調(diào)查表明,37%的養(yǎng)殖場(chǎng)(25個(gè))發(fā)生了“夏季死魚(yú)事件”,平均死亡率為9.2%(死亡率波動(dòng)區(qū)間為5%~15%)。發(fā)病率最高的是放養(yǎng)密度高的養(yǎng)殖場(chǎng)和大型養(yǎng)殖場(chǎng);其次是小型養(yǎng)殖場(chǎng)、鯔魚(yú)和羅非魚(yú)混養(yǎng)場(chǎng)(鯔魚(yú)15%和羅非魚(yú)85%);發(fā)病率最低的是單品種養(yǎng)殖的養(yǎng)殖場(chǎng)。38個(gè)僅養(yǎng)殖羅非魚(yú)的養(yǎng)殖場(chǎng)中,有3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病,而30個(gè)混養(yǎng)的養(yǎng)殖場(chǎng)中,有22個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病。病魚(yú)表現(xiàn)體表淺層出血、發(fā)炎、水腫等癥狀。1.3埃及養(yǎng)殖羅非魚(yú)大量死亡事件2012—2016年的321病原學(xué)

羅非魚(yú)湖病毒病又稱(chēng)為羅非魚(yú)合胞體肝炎(syncyticalhepatitisoftilapia,SHT)[4],病原TiLV為近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的病毒,其分類(lèi)地位尚未被確認(rèn)。根據(jù)其生物學(xué)特性,目前TiLV被歸類(lèi)為正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的一種新的病毒。電子顯微鏡顯示病毒粒子為具包膜的二十面體結(jié)構(gòu),大小為55~75nm。病毒對(duì)乙醚和氯仿敏感。

Eyngor等

最先對(duì)以色列羅非魚(yú)湖病毒病的暴發(fā)進(jìn)行了研究,證明病原是一種新的RNA病毒,并參考病原的發(fā)現(xiàn)地點(diǎn)命名為羅非魚(yú)湖病毒。由于TiLV是RNA病毒,容易發(fā)生變異,可能存在多個(gè)不同的地理株。截至目前,美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(Genbank)已收錄了2株TiLV的全基因組序列,分別來(lái)自以色列分離的Til-4-2011毒株和泰國(guó)分離的TV1毒株。

Bacharach等[5]對(duì)以色列分離的Til-4-2011毒株進(jìn)行了深入研究。TiLV為分段、單鏈的負(fù)鏈RNA病毒,由10個(gè)基因片段組成。每一個(gè)片段都有1個(gè)開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼10種蛋白。片段1最大,為1.641KB,片段2~10分別為1.471KB、1.371KB、1.250KB、1.099KB、1.044KB、0.777KB、0.657KB、0.548KB和0.465KB。1病原學(xué)

羅非魚(yú)湖病毒病又稱(chēng)為羅非魚(yú)合胞體肝炎(sync332流行病學(xué)

2.1地理分布羅非魚(yú)為熱帶魚(yú)類(lèi),主要分布于熱帶、亞熱帶的淡水和半咸水水域。至今TiLV已確認(rèn)在哥倫比亞、厄瓜多爾、以色列、埃及和泰國(guó)流行

。羅非魚(yú)國(guó)際貿(mào)易十分頻繁,包括亞洲、非洲、歐洲、北美洲和南美洲在內(nèi)的43個(gè)國(guó)家已確認(rèn)都曾經(jīng)從TiLV感染的國(guó)家引進(jìn)過(guò)羅非魚(yú)。因此,這些國(guó)家的養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)存在較高的TiLV感染風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)際上,很多國(guó)家的養(yǎng)殖羅非魚(yú)常暴發(fā)傳染性疫病,由于多種原因并未對(duì)病原進(jìn)行調(diào)查,無(wú)法排除發(fā)病羅非魚(yú)是否也感染了TiLV,所以該病的實(shí)際地理分布可能要廣泛得多。雖然我國(guó)至今尚無(wú)TiLV感染的確切報(bào)告,但已有海南省羅非魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)樣品的PCR檢測(cè)報(bào)告,結(jié)果表明TiLV感染為陽(yáng)性。2流行病學(xué)

2.1地理分布342.2易感動(dòng)物至今只有羅非魚(yú)被證明易感TiLV,而且?guī)缀跛械牧_非魚(yú)物種均對(duì)TiLV易感。Eyngor等調(diào)查了以色列基內(nèi)雷特湖的27種野生的慈鯛科、鯉科、鼬科和鯛科魚(yú)類(lèi),發(fā)現(xiàn)只有慈鯛科的羅非魚(yú)類(lèi)發(fā)病,并導(dǎo)致數(shù)量銳減,而其他魚(yú)類(lèi)均未出現(xiàn)臨床癥狀和死亡。Surachetpong等

也證明TiLV只感染羅非魚(yú),不會(huì)感染其他水生或陸生動(dòng)物。TiLV主要危害羅非魚(yú)仔稚魚(yú)和幼魚(yú),對(duì)成魚(yú)影響相對(duì)較小,因此幼體階段似乎比成魚(yú)更易感

。由于缺乏其他動(dòng)物易感性的信息,有可能還存在其他易感物種。在以色列暴發(fā)TiLV感染期間的共養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明,烏魚(yú)(Mugilcephalus)和鯉魚(yú)(Cyprinuscarpio)均不會(huì)發(fā)生死亡

。同樣的,在埃及發(fā)病疫區(qū)共養(yǎng)的烏魚(yú)和薄唇烏魚(yú)(Lizaramada)也未發(fā)現(xiàn)感染

。已經(jīng)有證據(jù)表明某些羅非魚(yú)的遺傳品系對(duì)TiLV具有一定抗性。Ferguson等

報(bào)告,一種羅非魚(yú)品系的死亡率為10%~20%,明顯低于其他品系的80%。2.2易感動(dòng)物至今只有羅非魚(yú)被證明易感TiLV,而且?guī)?52.3傳播途徑至今尚不清楚TiLV的最初來(lái)源,野生或養(yǎng)殖的受TiLV感染的魚(yú)群是目前已知的唯一傳染源。病魚(yú)的眼睛、大腦和肝臟常常含有高濃度的病毒,其肌肉組織也可能存在病毒。因此,發(fā)病死亡的羅非魚(yú)可能是重要的病毒污染源。TiLV可以通過(guò)混養(yǎng)進(jìn)行水平傳播。直接水平傳播是其主要傳播途徑,羅非魚(yú)的活體交易和運(yùn)輸最有可能傳播疾病。至今尚無(wú)垂直傳播的證據(jù)。Eyngor等

證明TiLV可以通過(guò)水體途徑傳播。由于TiLV的生物物理學(xué)特性尚不明確,很難評(píng)估通過(guò)污染物間接傳播的意義。鳥(niǎo)類(lèi)可能對(duì)TiLV的傳播發(fā)揮一定的作用。Fathi等

研究表明,因?yàn)榘<芭c以色列接壤,TiLV可能通過(guò)鳥(niǎo)類(lèi)遷徙等多種途徑如從以色列傳入埃及。以色列暴發(fā)TiLV感染以后,埃及的養(yǎng)殖羅非魚(yú)也常常暴發(fā)“夏季死亡癥”。不過(guò),至今尚無(wú)直接證據(jù)能證明鳥(niǎo)類(lèi)可以傳播TiLV。2.3傳播途徑至今尚不清楚TiLV的最初來(lái)源,362.4季節(jié)性

羅非魚(yú)TiLV感染主要在高溫季節(jié)暴發(fā),但在熱帶地區(qū)可能全年均可感染;從2009年夏天開(kāi)始,以色列全境出現(xiàn)羅非魚(yú)大量死亡。通常在5—10月炎熱時(shí)間發(fā)病,發(fā)病水溫為22~32℃;近年來(lái),埃及羅非魚(yú)不明原因死亡癥的發(fā)病季節(jié)通常為6—10月,水溫大于25℃;厄瓜多爾主要在水溫為25~27℃的5—11月;泰國(guó),10月到次年5月之間采集的部分樣品TiLV檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。2.4季節(jié)性

羅非魚(yú)TiLV感染主要在高溫季節(jié)暴發(fā),但在372.5發(fā)病率和死亡率

不同種類(lèi)的羅非魚(yú)或不同生長(zhǎng)階段感染TiLV的發(fā)病率和死亡率差別明顯。Eyngor等[2]報(bào)告,因?yàn)門(mén)iLV感染導(dǎo)致以色列加利略羅非魚(yú)(Sarotherodongalilaeus)年產(chǎn)量從316噸(2005年)分別下降至51噸(2007年)、8噸(2009年)和45噸(2010年),其他野生羅非魚(yú)如普通羅非魚(yú)(Tilapiazilli)和約旦羅非魚(yú)(Oreochromisaureus)等也大幅減產(chǎn)。健康的羅非魚(yú)和病魚(yú)混養(yǎng),幾天內(nèi)死亡率達(dá)80%~100%證明該病傳染性很強(qiáng)。近年來(lái),泰國(guó)養(yǎng)殖羅非魚(yú)TiLV感染大部分發(fā)生在魚(yú)苗轉(zhuǎn)移到水庫(kù)網(wǎng)箱或公共水域后1個(gè)月。大多數(shù)死亡發(fā)生在出現(xiàn)第一條死魚(yú)后的2周內(nèi),死亡率約20%~90%。厄瓜多爾的養(yǎng)殖羅非魚(yú)也發(fā)生了類(lèi)似的傳染病,在轉(zhuǎn)移到養(yǎng)殖池塘后4~7d內(nèi)出現(xiàn)發(fā)病死亡。不同品種羅非魚(yú)的死亡率有較大差異,較低的為10%~20%,較高的可達(dá)80%。埃及37%的羅非魚(yú)漁場(chǎng)受到TiLV感染,平均死亡率為9.2%。從發(fā)生“夏季死亡癥”的7個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)采集組織樣本,其中3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的樣品經(jīng)過(guò)PCR檢測(cè)顯示TiLV為陽(yáng)性

。Dong等

報(bào)道,放養(yǎng)1個(gè)月內(nèi)的紅羅非魚(yú)魚(yú)苗感染TiLV后死亡率可達(dá)90%。Tattiyapong等

在泰國(guó)進(jìn)行了一項(xiàng)腹腔注射攻毒實(shí)驗(yàn),感染4~12d后尼羅羅非魚(yú)和紅羅非魚(yú)的死亡率分別高達(dá)

86%和66%,并表現(xiàn)出與自然感染相似的臨床癥狀和病理變化。Eyngor等[2]發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中羅非魚(yú)群體經(jīng)歷發(fā)病事件后幸存的魚(yú)對(duì)TiLV再次感染具有免疫力。2.5發(fā)病率和死亡率

不同種類(lèi)的羅非魚(yú)或不同生長(zhǎng)階段感染382.6組織病理特征泰國(guó)患病的魚(yú)表現(xiàn)出食欲不振、嗜睡、行為異常、游動(dòng)遲緩、體色蒼白、貧血、眼球突出、腹部腫脹、皮膚充血和糜爛

。埃及的病魚(yú)主要表現(xiàn)為體表出現(xiàn)出血斑、魚(yú)鱗脫落、開(kāi)放性傷口、體色變黑、鰭糜爛等

。肉眼病變主要表現(xiàn)為晶狀體混濁,進(jìn)而發(fā)展到晶狀體破裂。其他病變包括皮膚糜爛、軟腦膜出血、脾充血

。海南省羅非魚(yú)的主要癥狀是鰓蓋內(nèi)緣出血,爛鰓,腹腔有腹水,肝臟和腎臟出血

。不同地理株的組織病變有所差異,以色列毒株的病理變化主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng),而南美洲毒株主要發(fā)生在肝臟

。大腦病變包括軟腦膜水腫和局灶性出血,白質(zhì)和灰質(zhì)皮層的毛細(xì)血管充血,神經(jīng)變性,膠質(zhì)細(xì)胞增生,血管周?chē)馨图?xì)胞浸潤(rùn)等。肝組織病變包括肝細(xì)胞腫脹和脫落,并表現(xiàn)出典型的合胞體肝炎特征

。脾腫大,淋巴細(xì)胞增生,肝臟和脾臟中的黑色素巨噬細(xì)胞中心(MMCs)數(shù)量增加。2.6組織病理特征泰國(guó)患病的魚(yú)表現(xiàn)出食欲不振、嗜睡、行為39EmergenceofTilapiaLakeVirusassociatedwithmortalitiesoffarmedNileTilapiaOreochromisniloticus(Linnaeus1758)inIndiaEstablishmentandcharacterizationofacelllinefromtilapiabrainfordetectionoftilapialakevirusEmergenceofTilapiaLakeViru40羅非魚(yú)病毒病課件41

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